菖龍丹對(duì)老年小鼠腦組織氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)和鋅含量的影響

1、    菖龍丹對(duì)老年小鼠腦組織氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)和鋅含量的影響        摘要：為了研究菖龍丹(CLD)對(duì)衰老小鼠腦內(nèi)氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)和鋅的影響，闡明CLD抗老年性癡呆作用與氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的關(guān)系。以老年小鼠(13月齡)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，灌胃給予CLD和吡拉西坦(Pir)，連續(xù)81 d。采用高效液相色譜法測(cè)定腦組織中谷氨基(Glu)、天冬酸(Asp)和r-氨基丁酸(GABA)含量，以原子吸收分光光度法測(cè)定腦組織Zn含量。結(jié)果：老年小鼠腦組織Glu、Asp、GABA的含量均顯著降低

2、(P0.01)，CLD和Pir可提高老年小鼠腦組織Glu、GABA含量(P0.05和P0.01)，CLD和Pir二者相比差異無顯著性意義(P0.05)。CLD還可使腦組織中Zn含量明顯升高(P0.05)。結(jié)論：CLD可升高衰老小鼠腦內(nèi)Glu、GABA、Zn含量，其改善記憶功能與其對(duì)腦內(nèi)氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)作用等有關(guān)。關(guān)鍵詞：菖龍丹；腦化學(xué)；谷氨酸；天冬氨酸；r-氨基丁酸；鋅；衰老；小鼠中分類號(hào)：R285.0文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1000-5633(2000)03-0011-03 The Effects of Changlong Dan(CLD) on Amino AcidMediators

3、 and Znic in the Brain of Aging MiceZHOU Xiaoqing，NING Xiaoran，LIU Jianxin(Hunan University of TCM, Changsha 410007)Abstract:To study the effect of CLD on amino acid mediators and Znic in the brain of aging mice and to explain the relationship between the effect of CLD on senile Demention and amino

4、acid mediators. Methods: The change of Glu, Asp and GABA in the brain were studied with HPLC measurement, the changes of Znic with AAS measurement. Results: The Glu, Asp and GABA decreased obviously (P0.01), CLD and Pir increased the Glu and GABA in the brain (P0.05 and P0.01), and there was no sign

5、ificant difference between them (P0.05). Furthermore, Glu could also increase Znic in the brain (P0.05). Conclusion: CLD can improve Glu, GABA and Znic in the brain of aging mice and its effect on improving memory has relationship with the regulation on amino acid mediators in the brain.Key words:腦內(nèi)

6、存在著興奮性氨基酸和抑制性氨基酸，它們發(fā)揮神經(jīng)遞質(zhì)的作用，在學(xué)習(xí)記憶過程中具有重要的意義1。菖龍丹為治療老年性癡呆的有效組方，能明顯改善老年性癡呆患者的認(rèn)知功能，提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力2，并能減少沙土鼠腦缺血再灌注自由基的產(chǎn)生，抑制腦組織脂質(zhì)過氧化反應(yīng)3。為進(jìn)一步揭示該方的作用機(jī)理，本文從腦內(nèi)氨基酸等成分進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)告如下。1材料與方法2結(jié)果2.1對(duì)老年小鼠氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響老年小鼠氨基酸類遞質(zhì)Asp、Glu、GABA含量明顯降低，與青年對(duì)照組比較差異有非常顯著性意義(P0.01)，CLD3個(gè)劑量組及Pir組老年小鼠Asp、Glu、GABA含量均有顯著提高，與老年對(duì)照組比較差異有

7、非常顯著性意義(P0.01)，與青年對(duì)照組比較差異無顯著性意義(P0.05)。說明CLD和Pir可提高老年小鼠ASP、Glu、GABA含量，見表1。組別n劑量(g/kg)氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)(mol/g)AspGluGABA青年對(duì)照組84.110±0.97314.658±3.9252.166±0.539老年對(duì)照組81.835±0.3567.324±1.3031.072±0.187老年CLD組87.83.343±0.80113.008±3.4222.107±0.457老年CLD組815.64.009±

8、1.26114.307±4.3272.331±0.480老年CLD組831.23.445±1.18712.850±3.5882.027±0.539老年P(guān)ir組80.53.326±1.11613.095±3.2242.573±0.631     注：與老年對(duì)照組比P0.05，P0.01；與青年對(duì)照組比P0.05，P0.01。2.2對(duì)老年小鼠腦內(nèi)微量元素Zn含量的影響結(jié)果表明，老年對(duì)照組小鼠腦內(nèi)Zn含量有降低趨勢(shì)，但與青年對(duì)照比較，差異無顯著性意義(P0.05)。Pir組Zn含量

9、較青年對(duì)照組和老年對(duì)照組均有降低趨勢(shì)，但差異無顯著性意義(P0.05)。CLD組Zn含量與Pir比較，差異有顯著性意義(P0.05)，CLD組Zn含量顯著升高，與青年對(duì)照組、老年對(duì)照組及Pir組比較，均有顯著性意義(P0.05或P0.01)，見表2。組別n劑量(g/kg)Zn(g/g)青年對(duì)照組1019.10±3.96老年對(duì)照組1118.71±3.40老年CLD97.822.81±5.05老年CLD715.619.59±2.79老年CLD831.224.62±4.89老年P(guān)ir90.517.23±3.39  

10、60;  注：與老年對(duì)照組比P0.05，P0.01；與青年對(duì)照組比P0.05，P0.01；與Pir組比P0.05，P0.01。 3討論近年來，神經(jīng)生化學(xué)揭示氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)與學(xué)習(xí)和記憶密切相關(guān)，Glu是錐體神經(jīng)元的主要興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，在學(xué)習(xí)和記憶、發(fā)育中的突觸可塑性、神經(jīng)元生存及樹突的生長(zhǎng)與退化方面具有重要作用。它的作用通過N-甲基門冬氨酸(NMDA)受體調(diào)節(jié)。長(zhǎng)時(shí)程突觸增強(qiáng)(Long-trem potentiation，LTP)現(xiàn)象被認(rèn)為是腦內(nèi)信息貯存和記憶形成的一種生理學(xué)機(jī)制模式，NMDA受體由于存在LTP現(xiàn)象被認(rèn)為與學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān)。Glu與LTP的關(guān)系可簡(jiǎn)單歸納為：刺激突觸前

11、釋放Glu突觸后NMDA受體激活，通道開放Ca2+內(nèi)流細(xì)胞膜去極化LTP4。老年性癡呆患者腦內(nèi)某些神經(jīng)遞質(zhì)如Glu、GABA等及神經(jīng)肽出現(xiàn)不同程度障礙5、6。有實(shí)驗(yàn)表明老齡小鼠大腦皮層NMDA受體數(shù)量及海馬CA1區(qū)LTP明顯低于青年小鼠7。本實(shí)驗(yàn)表明衰老小鼠腦內(nèi)氨基酸類遞質(zhì)(ASP、Glu、GABA)含量均下降，而Pir具有選擇性影響NMDA受體的作用9，Pir和CLD均對(duì)衰老小鼠降低的氨基酸類遞質(zhì)有上調(diào)作用，因而，CLD對(duì)衰老小鼠學(xué)習(xí)和記憶功能的促進(jìn)作用有可能通過NMDA受體，增強(qiáng)LTP這一機(jī)制，有待進(jìn)一步研究。鋅是人體重要微量元素，在體內(nèi)參與80多種酶的結(jié)構(gòu)和功能，對(duì)機(jī)體正常生長(zhǎng)發(fā)育、新陳

12、代謝、提高免疫力、保護(hù)生物膜及清除自由基等多方面起著十分重要的調(diào)節(jié)作用，與學(xué)習(xí)和記憶關(guān)系十分密切。缺鋅可導(dǎo)致兒童發(fā)育遲緩、智力低下。研究表明，老年人鋅含量下降9。中醫(yī)理論認(rèn)為腎主藏精，其生理功能涉及生長(zhǎng)、發(fā)育、生殖、內(nèi)分泌及體液代謝等方面。腎所藏及五臟六腑之精氣，是人體活動(dòng)必需的物質(zhì)基礎(chǔ)。朱梅年10等提出腎的主要物質(zhì)基礎(chǔ)可能是微量元素鋅、錳。有人認(rèn)為11微量元素是水谷之氣的一部分，可能是氣的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，本實(shí)驗(yàn)表明CLD能提高老年小鼠腦內(nèi)鋅含量，說明CLD可能通過鋅提高免疫系統(tǒng)功能及清除自由基等功能起作用，與中醫(yī)補(bǔ)腎益精作用吻合?；痦?xiàng)目：國(guó)家教委資助項(xiàng)目(94)99作者簡(jiǎn)介：周小青(1957

13、-)，男，湖南瀏陽(yáng)人，博士、教授，主要從事中醫(yī)計(jì)量診斷研究。周小青（湖南中醫(yī)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007）寧曉然（湖南中醫(yī)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007）劉建新（湖南中醫(yī)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007）鄧常青（湖南中醫(yī)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007）張秋雁（湖南中醫(yī)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007）參考文獻(xiàn)：1GrilliM, et al. interleukin-1 beta and glutamata activate the NF-kappa b/Rel binding site from the regulatory region of the amyloid percursor pr

14、otein gene in primary neuronal cultures J.J Biol chem, 1996，271(25):15002.2周小青，張秋雁.菖龍丹治療老年性癡呆35例J.湖南中醫(yī)雜志，1999，15(5)：26.3周小青，張秋雁，蘇劍鋒，等.菖龍丹對(duì)沙土鼠腦缺血再灌注腦組織丙二醛等的影響J.湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2000，20(1)：10.4韓濟(jì)生.神經(jīng)科學(xué)綱要M.北京：北京醫(yī)大北京協(xié)和醫(yī)大聯(lián)合出版社，1993.723.5宋前流.谷氨酸與阿茨海默病J.國(guó)外醫(yī)學(xué)*老年醫(yī)學(xué)分冊(cè)，1993，14(6)：259.6Strolin-Benedetti M, et al. Effect of aging on tissue levele of amino aeids involved in the nitric oxide pathway in rat brain J.J Neural Transm Ge sect, 1993,94(1)：21.7米增慧.生物健對(duì)老年小鼠大腦皮質(zhì)NMDA受體及海馬CA1區(qū)LTP變化的影響J.中藥材，1993，16(8)：38.8Berning B, et al. Interaction of pirace