《定性檢測(cè)體外診斷試劑盒產(chǎn)品技術(shù)審評(píng)規(guī)范2012版

1、定性檢測(cè)體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評(píng)規(guī)范（2012版）根據(jù)醫(yī)療器械注冊(cè)管理辦法（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局令第16號(hào)）的要求并結(jié)合定性檢測(cè)體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品的特點(diǎn)，為規(guī)范定性檢測(cè)體外診斷試劑(盒)（以下簡(jiǎn)稱試劑（盒）產(chǎn)品的技術(shù)審評(píng)工作，特制定本規(guī)范。一、適用范圍本規(guī)范適用于依據(jù)體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）管理類別為類的、在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行定性檢測(cè)所使用的體外診斷試劑(盒)，其中所述“定性”是指只給出陰性或陽(yáng)性（有反應(yīng)或無(wú)反應(yīng)、是或非、有或無(wú)、正?；虍惓＃﹥煞N可能的結(jié)果。定量以及半定量檢測(cè)試劑（盒）不適用于本規(guī)范，已有中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品不適用于本規(guī)范。二、技術(shù)審查要點(diǎn)（一

2、）試劑（盒）命名的原則試劑（盒）名稱由三部分組成。第一部分：被分析物的名稱；第二部分：用途；如檢測(cè)試劑盒、檢測(cè)試紙；第三部分：方法或原理，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法、膠體金免疫層析法等。例：肌鈣蛋白I檢測(cè)試紙（膠體金免疫層析法）、抗角蛋白抗體檢測(cè)試劑盒（間接免疫熒光法）。（二）試劑（盒）的組成試劑（盒）的組成形式：如單試劑，雙試劑，多試劑；試紙；微孔板等。（三）工作原理試劑（盒）通過(guò)各自不同的反應(yīng)原理，最終通過(guò)儀器檢測(cè)或肉眼觀測(cè)，對(duì)被分析物做出是或不是、有或無(wú)、陽(yáng)性或陰性、有反應(yīng)或無(wú)反應(yīng)、檢出或未檢出的結(jié)果判定。（四）產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)試劑（盒）適用以下相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：1.GB/T 191 包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)

3、志；2.YY/T 0316 醫(yī)療器械 風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用；3.YY 0466 醫(yī)療器械 用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號(hào)。注：以上標(biāo)準(zhǔn)適用最新版本。（五）產(chǎn)品的預(yù)期用途試劑（盒）的預(yù)期用途為對(duì)臨床樣本中被分析物的定性檢測(cè)。（六）產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)1. 外觀目測(cè)檢查，符合生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定的正常外觀要求（一般要求試劑無(wú)雜質(zhì)，外包裝完整無(wú)破損；標(biāo)簽清晰可辨）。2. 凈含量（適用時(shí)）用通用量具測(cè)量，液體試劑的凈含量應(yīng)不少于標(biāo)示值。3. 膜條寬度（免疫層析法適用）隨機(jī)抽取一條試紙，使用游標(biāo)卡尺測(cè)量其寬度，應(yīng)不低于2.5 mm。4. 液體移行速度（免疫層析法適用）按說(shuō)明書進(jìn)行操作，從試紙浸入樣本液

4、開始用秒表計(jì)時(shí)，直至液體達(dá)到圖1所示的C區(qū)和D區(qū)之間的交界線時(shí)停止計(jì)時(shí)，所用的時(shí)間記為t，用游標(biāo)卡尺測(cè)量A+B+C區(qū)的長(zhǎng)度，記為L(zhǎng)，則L/t為移行速度，結(jié)果應(yīng)不低于10 mm/min。圖1 免疫層析試紙結(jié)構(gòu)示意圖5. 臨界值a)對(duì)臨界值增加一定濃度的樣本檢測(cè)次數(shù)20，結(jié)果的陽(yáng)性率應(yīng)95%。b)對(duì)臨界值減少一定濃度的樣本檢測(cè)次數(shù)20，結(jié)果的陰性率應(yīng)95%。注1：建議使用國(guó)家參考品，并提供相關(guān)證明文件。如果使用的樣本是企業(yè)自配，應(yīng)明確原料的來(lái)源（包括生物學(xué)來(lái)源）、基質(zhì)、配制方法及賦值方法。注2：臨界值應(yīng)明確，且增加或減少的“一定濃度”原則上應(yīng)保持一致。注3：應(yīng)考慮是否符合臨床實(shí)際診斷意義。6. 特

5、異性（適用時(shí)）應(yīng)注明其交叉反應(yīng)物，說(shuō)明其特異性。即明確潛在的交叉反應(yīng)物不引起干擾的最高濃度檢測(cè)含有最高濃度/水平的干擾物質(zhì)的陰性樣本3次，結(jié)果應(yīng)滿足企業(yè)規(guī)定的要求（即干擾標(biāo)準(zhǔn)）。注1：建議使用國(guó)家參考品，應(yīng)當(dāng)是被金標(biāo)準(zhǔn)確定過(guò)的、和/或成熟方法檢測(cè)的，和/或經(jīng)臨床確認(rèn)的陰性樣本。如果使用的陰性樣本是企業(yè)自行配制的，那么應(yīng)明確基質(zhì)、配制方法及賦值方法。注2：交叉反應(yīng)物及其濃度的選擇應(yīng)當(dāng)科學(xué)合理，并且其應(yīng)當(dāng)有可能存在于待測(cè)樣本中。交叉反應(yīng)可接受的程度，主要取決于被測(cè)物和交叉反應(yīng)物在人體內(nèi)的相對(duì)含量。注3：如法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)或權(quán)威參考資料有明示的干擾物質(zhì)，則應(yīng)進(jìn)行分析。注4：其他可能引起假陰性或假陽(yáng)性的干擾

6、因素也應(yīng)一并考慮（詳見附件1），如脂血、溶血、黃疸、類風(fēng)濕因子等常見干擾物。7. S/CO值重復(fù)性（適用時(shí)）檢測(cè)臨界值附近水平樣本20次，其重復(fù)性CV值應(yīng)滿足企業(yè)聲明（CV應(yīng)15%）。8. HOOK效應(yīng)（適用時(shí)）檢測(cè)臨床可見最高濃度的強(qiáng)陽(yáng)樣本3次，結(jié)果應(yīng)不出現(xiàn)陰性。9. 批間差抽取三個(gè)批次的試劑/試紙，每個(gè)批次至少40人份，按5.臨界值的檢驗(yàn)方法檢測(cè)，各濃度反應(yīng)結(jié)果應(yīng)一致。10. 穩(wěn)定性10.1 試劑（盒）在規(guī)定的貯存條件下保存至有效期末，超過(guò)有效期一定時(shí)期內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，產(chǎn)品的性能應(yīng)至少符合5、7、8的要求。10.2 開瓶穩(wěn)定性（如適用）試劑（盒）開瓶之后，在規(guī)定的貯存條件下保存至開瓶有效期末，

7、超過(guò)有效期一定時(shí)期內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，產(chǎn)品的性能應(yīng)至少符合5、7、8的要求。11. 其他上述性能為產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)，適用時(shí)，企業(yè)可根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)增加其他技術(shù)要求。（七）產(chǎn)品的臨床要求試劑（盒）按照體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）及體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則、北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則進(jìn)行臨床試驗(yàn)。執(zhí)行的基本原則至少包括以下幾個(gè)方面：1. 研究者應(yīng)考慮臨床研究用樣本，如血液、羊水、胸水、腹水、組織液、胸積液、組織切片、骨髓等的獲得或研究結(jié)果對(duì)受試者的風(fēng)險(xiǎn)性，應(yīng)提交臨床機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)確認(rèn)的文件及受試者的知情同意書。對(duì)于例外情況，如客觀上不可能獲得受試者的知情同意或該臨床研究對(duì)受試者幾乎

8、沒有風(fēng)險(xiǎn)，可不提交倫理委員會(huì)的審評(píng)意見及受試者的知情同意書，但臨床研究者應(yīng)提供有關(guān)倫理事宜的說(shuō)明。2. 在兩家省級(jí)醫(yī)療衛(wèi)生單位完成臨床研究，對(duì)于特殊使用目的的產(chǎn)品，可以在市級(jí)以上疾病控制中心、?？漆t(yī)院或檢驗(yàn)檢疫所、戒毒中心等單位開展臨床研究。3. 新診斷試劑（盒）應(yīng)與該診斷疾病的金標(biāo)準(zhǔn)針對(duì)臨床樣本進(jìn)行盲法同步比較；已有同種批準(zhǔn)上市的試劑（盒）應(yīng)與已批準(zhǔn)上市產(chǎn)品針對(duì)臨床樣本進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)。4. 臨床樣本的要求：綜合不同地區(qū)人種、流行病學(xué)背景、病原微生物的特性等因素選擇研究單位，癥狀典型和非典型的，一般臨床研究的總樣本數(shù)至少為200例，新診斷試劑（盒）1000例。5. 試劑（盒）變更申請(qǐng)中需進(jìn)行臨床

9、研究的方法：采用變更前試劑（盒）與變更后試劑（盒）進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)的方法，證明變更前后試劑（盒）達(dá)到變更前試劑(盒）的質(zhì)量水平。6. 一致性的數(shù)據(jù)分析陽(yáng)性、陰性和總符合率；適用時(shí)與金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果比對(duì)：敏感度、特異度等。參照北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則進(jìn)行。（八）試劑（盒）說(shuō)明書、標(biāo)簽、包裝標(biāo)識(shí)試劑（盒）說(shuō)明書試劑（盒）說(shuō)明書應(yīng)當(dāng)符合體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則的要求，審查要點(diǎn)為：1應(yīng)有產(chǎn)品名稱，可包括通用名稱、商品名稱和英文名稱； 2應(yīng)說(shuō)明試劑（盒）的包裝規(guī)格；3應(yīng)詳細(xì)說(shuō)明試劑（盒）的預(yù)期用途，如定性測(cè)定；4應(yīng)說(shuō)明檢驗(yàn)原理；5應(yīng)說(shuō)明主要組成成份：對(duì)于產(chǎn)品中包含的試劑組份應(yīng)有名稱、數(shù)量、每

10、一組份中的主要成分在反應(yīng)體系中的比例或濃度，如果對(duì)于正確的操作很重要、應(yīng)提供其生物學(xué)來(lái)源、活性及其他特性；對(duì)于產(chǎn)品中不包含、但對(duì)該實(shí)驗(yàn)必須的試劑組份，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)列出此類試劑的名稱、純度，提供稀釋或混合方法及其他相關(guān)信息；對(duì)于試劑盒中含有陰性或陽(yáng)性對(duì)照品的，說(shuō)明主要組成成份、基質(zhì)及其生物學(xué)來(lái)源。6應(yīng)說(shuō)明貯存條件及有效期，以及開瓶穩(wěn)定性（如適用）；7應(yīng)說(shuō)明可適用儀器（如適用）；8應(yīng)說(shuō)明對(duì)樣本的要求，包括樣本采集過(guò)程中的注意事項(xiàng)，為保證樣本各組分穩(wěn)定所必需的抗凝劑或保護(hù)劑，已知的干擾物、能夠保證樣本穩(wěn)定的貯存、處理和運(yùn)輸?shù)姆椒ǎ?應(yīng)說(shuō)明檢驗(yàn)方法，至少包括試劑配制、試驗(yàn)條件、操作程序、試驗(yàn)結(jié)果的判定；

11、10應(yīng)有檢驗(yàn)結(jié)果的解釋，說(shuō)明可能對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素；11. 參考范圍（臨界值和/或檢出限）12. 應(yīng)說(shuō)明檢驗(yàn)方法的局限性13. 應(yīng)說(shuō)明產(chǎn)品性能指標(biāo)，如重復(fù)性、方法學(xué)比較、特異性、抗干擾能力等，應(yīng)符合注冊(cè)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的要求，以及分析性能評(píng)估、穩(wěn)定性研究的結(jié)論；14. 應(yīng)說(shuō)明必要的注意事項(xiàng)，如本品僅用于體外診斷等，若該產(chǎn)品含有人源或動(dòng)物源材料，應(yīng)給出具有潛在感染性的警告；15. 注明引用的參考文獻(xiàn)，參考文獻(xiàn)的書寫應(yīng)清楚、易查詢且格式統(tǒng)一；16. 注明生產(chǎn)企業(yè)，包括企業(yè)名稱、地址（注冊(cè)地址和生產(chǎn)地址不同的應(yīng)分別列出）、郵政編碼、電話和傳真號(hào)碼、網(wǎng)址；17. 注明醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證編號(hào)；18.

12、注明醫(yī)療器械注冊(cè)證書編號(hào)；19. 注明產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)；20. 注明說(shuō)明書批準(zhǔn)日期及修訂日期。 外包裝標(biāo)簽外包裝標(biāo)簽上應(yīng)有如下信息：1. 生產(chǎn)企業(yè)名稱和地址。 2. 試劑（盒）名稱。3. 批號(hào)。如試劑（盒）包含不同批號(hào)的組件，外包裝的批號(hào)應(yīng)能保證每個(gè)組件的批號(hào)可從生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)記錄中溯源。4. 規(guī)格。應(yīng)包含體積或復(fù)溶后的體積。5. 預(yù)期用途。如試劑（盒）名稱不能反映試劑（盒）的預(yù)期用途，應(yīng)提供簡(jiǎn)要的預(yù)期用途說(shuō)明。 6. 體外診斷用途。應(yīng)說(shuō)明試劑的體外診斷用途。7. 儲(chǔ)存和處置條件。應(yīng)提供在未開封狀態(tài)下可保證試劑（盒）的穩(wěn)定狀態(tài)的必要儲(chǔ)存條件；應(yīng)規(guī)定影響穩(wěn)定性的其他條件（如適用）；應(yīng)規(guī)定產(chǎn)品處置時(shí)所

13、采取的所有其他特殊措施（如適用）。8. 失效期。應(yīng)明示在規(guī)定儲(chǔ)存條件下的失效期；失效期應(yīng)以年、月，適當(dāng)時(shí)以日表示；如僅給出年月，失效期應(yīng)為指定月的最后一天；外包裝標(biāo)簽上明示的失效期應(yīng)為最早到期組件的失效期。9. 警告和預(yù)防措施。如體外診斷試劑（盒）被認(rèn)為有危險(xiǎn)性（例如：化學(xué)，放射性或生物危害性），外包裝應(yīng)標(biāo)有適當(dāng)?shù)木疚ｋU(xiǎn)的文字或符號(hào)，YY/T 0316的要求適用；對(duì)于化學(xué)危害，如試劑（盒）沒有隨帶含有適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)和安全性說(shuō)明的使用說(shuō)明，則應(yīng)在外包裝的標(biāo)簽上進(jìn)行說(shuō)明。 初始包裝標(biāo)簽如初始包裝同時(shí)也是外包裝，則外包裝標(biāo)簽的要求也適用。初始包裝標(biāo)簽上應(yīng)提供如下信息：1. 生產(chǎn)企業(yè)名稱或等同的商標(biāo)或標(biāo)

14、志。2. 產(chǎn)品名稱。產(chǎn)品名稱應(yīng)確保使用者能正確識(shí)別產(chǎn)品。3. 批號(hào)。4. 規(guī)格。例如：質(zhì)量，體積，復(fù)溶后的體積。5. 體外診斷用途。6. 儲(chǔ)存和處置條件。應(yīng)提供未開封狀態(tài)下保證產(chǎn)品的穩(wěn)定狀態(tài)必需的儲(chǔ)存條件；如與外包裝提供的條件不同，還應(yīng)提供產(chǎn)品處置所采取的所有其他特殊措施。7. 失效期。應(yīng)明示規(guī)定儲(chǔ)存條件下的失效期，表示方式見外包裝標(biāo)簽。8. 警告和預(yù)防措施。如體外診斷試劑（盒）被認(rèn)為有危險(xiǎn)性（例如：化學(xué)，放射性或生物危害性），外包裝應(yīng)標(biāo)有適當(dāng)?shù)木疚ｋU(xiǎn)的文字或符號(hào)，YY/T 0316的要求適用；對(duì)于化學(xué)危害，如試劑（盒）沒有隨帶含有適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)和安全性的說(shuō)明的使用說(shuō)明，則應(yīng)在外包裝的標(biāo)簽上進(jìn)行

15、說(shuō)明；適用時(shí)，應(yīng)明示試劑預(yù)期為一次性使用。（九）注冊(cè)單元?jiǎng)澐值脑瓌t試劑（盒）的注冊(cè)單元應(yīng)為單一試劑（盒），一個(gè)注冊(cè)單元可以包括不同的包裝規(guī)格。（十）出廠檢驗(yàn)原則每批試劑（盒）出廠檢驗(yàn)至少進(jìn)行以下幾項(xiàng)內(nèi)容：外觀、裝量、臨界值、S/CO值重復(fù)性。附件1：定義1. 臨界值即重復(fù)測(cè)定處于這一水平的被分析物時(shí)，得到50%陽(yáng)性和50%陰性的結(jié)果。小增幅增加被分析物濃度/水平，對(duì)樣本進(jìn)行多次檢測(cè)，預(yù)期將得到相對(duì)較大的陽(yáng)性結(jié)果和較小比例的陰性結(jié)果。同樣地，小幅減少被分析物濃度/水平，預(yù)期會(huì)得到相對(duì)較大的陰性結(jié)果和較小比例的陽(yáng)性結(jié)果。在定性試驗(yàn)中進(jìn)行臨界值的確定有許多種方法。如以陰性對(duì)照均值加上兩倍或三倍標(biāo)準(zhǔn)偏

16、差作為臨界值、以百分位數(shù)法單側(cè)95%或99%來(lái)確定臨界值、使用ROC曲線（receiver operating characteristic）設(shè)定臨界值等。臨界值的驗(yàn)證可以通過(guò)制備在臨界值上下20%左右濃度的樣本進(jìn)行。一般來(lái)說(shuō)，臨界值上下20%左右為95%區(qū)間?？梢赃M(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，看檢測(cè)結(jié)果是否滿足95%的陰性和95%的陽(yáng)性，從而判斷臨界值的確定是否合適。2. 干擾物質(zhì)干擾物質(zhì)可能是內(nèi)源性或外源性的：a.病理學(xué)條件產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，如糖尿病、多發(fā)性骨髓瘤、淤膽型肝炎等。b.患者治療中引入的化合物，如藥物、靜脈營(yíng)養(yǎng)、血漿擴(kuò)容劑、抗凝血?jiǎng)┑?。c.患者攝入的物質(zhì)，如酒精、濫用藥、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、各種食品及飲

17、料等。d.樣品制備過(guò)程中添加的物質(zhì)，如抗凝劑、防腐劑、穩(wěn)定劑等。e.樣品處理過(guò)程中不慎引入的污染物，如源自手霜、有粉手套、血清分離器、收集管塞等。f.樣品基質(zhì)本身，如化學(xué)和物理性質(zhì)與理想的新鮮樣品不同。干擾物質(zhì)可以從多方面影響分析過(guò)程，如化學(xué)效應(yīng)、物理效應(yīng)、基質(zhì)效應(yīng)、非特異性、交叉反應(yīng)性等，使得在分析時(shí)產(chǎn)生干擾。3. S/CO用于表示檢測(cè)樣本（sample）與臨界值（cut off）的吸光度比值，通常S/CO1判為陽(yáng)性，1為陰性。4. HOOK效應(yīng)亦稱鉤狀效應(yīng)。抗原抗體反應(yīng)時(shí)，抗原抗體須在一定比例范圍內(nèi)才能出現(xiàn)最大凝集，抗原過(guò)量或抗體過(guò)量都會(huì)導(dǎo)致兩者交聯(lián)度降低，從而導(dǎo)致凝集程度與實(shí)際濃度不符的

18、現(xiàn)象，在凝集曲線上表現(xiàn)為類似拋物線的形狀。所以強(qiáng)陽(yáng)性樣本可能會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。附件2：當(dāng)產(chǎn)品成份中含有人源或動(dòng)物源性材料時(shí)適用，應(yīng)將此部分內(nèi)容體現(xiàn)在標(biāo)準(zhǔn)附錄中和/或注冊(cè)的技術(shù)資料中，如綜述資料和/或原材料研究。生物安全性生物安全性應(yīng)滿足企業(yè)規(guī)定的要求，如，包括但不限于HBs抗原、HIV-1/2抗體、HCV抗體及梅毒抗體檢測(cè)為陰性。適用時(shí)，還需滿足相關(guān)文件中涉及的要求，如，包括但不限于國(guó)食藥監(jiān)械2006407號(hào)文件。11定性檢測(cè)體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評(píng)規(guī)范編制說(shuō)明一、任務(wù)來(lái)源及背景 2007年體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）、體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則、體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則均已發(fā)布，為了指導(dǎo)和規(guī)范定性檢測(cè)體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評(píng)工作，幫助審評(píng)人員理解和掌握該類產(chǎn)品的性能、預(yù)期用途等內(nèi)容，把握技術(shù)審評(píng)工作基本要求和尺度，對(duì)產(chǎn)品安全性、有效性作出系統(tǒng)評(píng)價(jià)；同時(shí)也為了指導(dǎo)生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品注冊(cè)工作。 本規(guī)范主要依據(jù)醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例、體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）、體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則、體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則。在規(guī)范的制訂過(guò)程中我們還征求