梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷-張國強(qiáng)

1、湖南省疾病預(yù)防控制中心湖南省疾病預(yù)防控制中心地址：長沙市芙蓉中路一段450號1201室（410005）電話南省疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病防治科湖南省疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病防治科張國強(qiáng)張國強(qiáng)梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒的臨床分期 一期梅毒一期梅毒 早期梅毒早期梅毒 二期梅毒二期梅毒 后天梅毒后天梅毒 （病期在（病期在2 2年以內(nèi)）年以內(nèi)） 早期潛伏梅毒早期潛伏梅毒 晚期梅毒晚期梅毒 心血管和神經(jīng)梅毒、心血管和神經(jīng)梅毒、 （病期在（病期在2 2年以上）年以上） 晚期潛伏梅毒等晚期潛伏梅毒等梅毒梅毒 先天梅毒先天梅毒 早期胎傳梅毒（出生后早期胎傳梅毒（出生后2

2、2年以內(nèi)發(fā)?。┠暌詢?nèi)發(fā)?。?晚期胎傳梅毒（出生后晚期胎傳梅毒（出生后2 2年以后發(fā)病）年以后發(fā)?。?一期梅毒一期梅毒實(shí)驗(yàn)室檢查：實(shí)驗(yàn)室檢查： 1 1 暗視野顯微鏡檢查：皮膚黏膜損害或淋巴結(jié)穿刺液可暗視野顯微鏡檢查：皮膚黏膜損害或淋巴結(jié)穿刺液可查見梅毒螺旋體。查見梅毒螺旋體。 2 2 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。如感染不足非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。如感染不足2 23 3周，該試驗(yàn)可為陰性，應(yīng)于感染周，該試驗(yàn)可為陰性，應(yīng)于感染4 4周后復(fù)查。周后復(fù)查。 3 3 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷標(biāo)準(zhǔn) 疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表

3、現(xiàn)和疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和2 2項(xiàng)。項(xiàng)。 確診病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和確診病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和1 1、3 3中的任一項(xiàng)。中的任一項(xiàng)。二期梅毒二期梅毒實(shí)驗(yàn)室檢查：實(shí)驗(yàn)室檢查： 1 1 暗視野顯微鏡檢查：二期皮損尤其扁平濕疣、暗視野顯微鏡檢查：二期皮損尤其扁平濕疣、濕丘疹及黏膜斑，易查見梅毒螺旋體。濕丘疹及黏膜斑，易查見梅毒螺旋體。 2 2 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。 3 3 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷標(biāo)準(zhǔn) 疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、

4、臨床表疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和現(xiàn)和2 2項(xiàng)。項(xiàng)。 確診病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表確診病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和現(xiàn)和1 1、3 3中的任一項(xiàng)。中的任一項(xiàng)。三期梅毒（晚期梅毒）三期梅毒（晚期梅毒）實(shí)驗(yàn)室檢查：實(shí)驗(yàn)室檢查：1 1 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。2 2 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。3 3 腦脊液檢查：白細(xì)胞計(jì)數(shù)腦脊液檢查：白細(xì)胞計(jì)數(shù)1010106/L106/L，蛋白量，蛋白量500mg/L500mg/L，且無其他引起這些異常的原因。腦脊液，且無其他引起這些異常的原

5、因。腦脊液VDRLVDRL試試驗(yàn)（存在假陰性）或驗(yàn)（存在假陰性）或FTA-ABSFTA-ABS試驗(yàn)（存在假陽性）陽性。試驗(yàn)（存在假陽性）陽性。4 4 組織病理檢查：有三期梅毒的組織病理變化。組織病理檢查：有三期梅毒的組織病理變化。 診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷標(biāo)準(zhǔn) 疑似病例：流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)中的任一項(xiàng)和疑似病例：流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)中的任一項(xiàng)和1 1項(xiàng)。項(xiàng)。 確診病例：應(yīng)同時(shí)符合疑似病例的要求和確診病例：應(yīng)同時(shí)符合疑似病例的要求和2 2、3 3、4 4中的任中的任一項(xiàng)。一項(xiàng)。隱性梅毒（潛伏梅毒）隱性梅毒（潛伏梅毒）實(shí)驗(yàn)室檢查：實(shí)驗(yàn)室檢查： 1 1 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：對于無既往梅毒史者，非梅毒螺旋

6、體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：對于無既往梅毒史者，非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)陽性（滴度一般在非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)陽性（滴度一般在1 1：8 8以上）。對于以上）。對于有既往梅毒治療史者，與前次非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)結(jié)果相有既往梅毒治療史者，與前次非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)結(jié)果相比，本次試驗(yàn)結(jié)果陽轉(zhuǎn)或其滴度升高比，本次試驗(yàn)結(jié)果陽轉(zhuǎn)或其滴度升高4 4倍或更高。倍或更高。 2 2 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。 3 3 腦脊液檢查：無異常發(fā)現(xiàn)。腦脊液檢查：無異常發(fā)現(xiàn)。 診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷標(biāo)準(zhǔn) 疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和1 1項(xiàng)。項(xiàng)。

7、 確診病例：應(yīng)同時(shí)符合疑似病例的要求和確診病例：應(yīng)同時(shí)符合疑似病例的要求和2 2、3 3項(xiàng)。項(xiàng)。 胎傳梅毒（先天梅毒）胎傳梅毒（先天梅毒）實(shí)驗(yàn)室檢查：實(shí)驗(yàn)室檢查： 1 1 暗視野顯微鏡檢查：在早期胎傳梅毒兒的皮膚黏膜損暗視野顯微鏡檢查：在早期胎傳梅毒兒的皮膚黏膜損害或胎盤中可查到梅毒螺旋體。害或胎盤中可查到梅毒螺旋體。 2 2 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。 2.1 2.1 血清抗體滴度持續(xù)上升。血清抗體滴度持續(xù)上升。2.2 2.2 定量試驗(yàn)結(jié)果比母定量試驗(yàn)結(jié)果比母親高四倍（低于或等于并不排除）親高四倍（低于或等于并不排除） 3 3 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試

8、驗(yàn)：陽性?；純簷z出梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。患兒檢出19S19SIgMIgM抗體?？贵w。 診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷標(biāo)準(zhǔn) 疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和2 2項(xiàng)。項(xiàng)。 確診病例：應(yīng)同時(shí)符合疑似病例的要求和確診病例：應(yīng)同時(shí)符合疑似病例的要求和1 1、3 3中的任一中的任一項(xiàng)。項(xiàng)。 梅毒的傳播途徑：梅毒的傳播途徑： 性接觸是主要的傳染途徑性接觸是主要的傳染途徑 母嬰傳播母嬰傳播 血源性傳血源性傳播播 間接接觸傳間接接觸傳播播梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測方法梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測方法 病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查 血清學(xué)檢測血清學(xué)檢測病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 一期

9、、二期梅毒時(shí)，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損一期、二期梅毒時(shí)，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液；部位組織液或淋結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液； 在暗視野顯微鏡下光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅在暗視野顯微鏡下光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式進(jìn)行檢測；進(jìn)行檢測； 梅毒螺旋體的親銀特性；梅毒螺旋體的親銀特性； 運(yùn)用特異性的抗梅毒螺旋體與梅毒螺旋體發(fā)生抗原抗體反運(yùn)用特異性的抗梅毒螺旋體與梅毒螺旋體發(fā)生抗原抗體反應(yīng)的原理，將已經(jīng)經(jīng)過應(yīng)的原理，將已經(jīng)經(jīng)過ReiterReite

10、r株非致病螺旋體制成的吸收株非致病螺旋體制成的吸收劑吸收過標(biāo)記有異硫氰酸鹽熒光素（劑吸收過標(biāo)記有異硫氰酸鹽熒光素（FITCFITC）的抗梅毒螺旋）的抗梅毒螺旋體或單克隆抗體加到載有標(biāo)本的玻片上，如標(biāo)本上有梅毒體或單克隆抗體加到載有標(biāo)本的玻片上，如標(biāo)本上有梅毒螺旋體，則會出現(xiàn)抗原抗體反應(yīng)，熒光顯微鏡下可查到翠螺旋體，則會出現(xiàn)抗原抗體反應(yīng)，熒光顯微鏡下可查到翠綠色熒光標(biāo)記的螺旋體。綠色熒光標(biāo)記的螺旋體。病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查試驗(yàn)方法試驗(yàn)方法 病原學(xué)檢查的主要方法有暗視顯微鏡檢查、病原學(xué)檢查的主要方法有暗視顯微鏡檢查、鍍銀染色法和直接熒光法。鍍銀染色法和直接熒光法。病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查取材取材 皮膚黏

11、膜損害取材皮膚黏膜損害取材 用棉拭子或紗布取無菌鹽水輕輕擦去皮損上的污物，用棉拭子或紗布取無菌鹽水輕輕擦去皮損上的污物，如皮損上有痂皮，可用鈍刀小心除去，再用鈍刀輕輕地刮如皮損上有痂皮，可用鈍刀小心除去，再用鈍刀輕輕地刮數(shù)次（避免出血）；并擠壓至產(chǎn)生血清滲出物。用薄刮片數(shù)次（避免出血）；并擠壓至產(chǎn)生血清滲出物。用薄刮片或接種環(huán)刮取滲出液，直接置于載玻片上，或直接用載?；蚪臃N環(huán)刮取滲出液，直接置于載玻片上，或直接用載玻片沾取滲出液。片沾取滲出液。 淋巴結(jié)取材淋巴結(jié)取材 消毒淋巴結(jié)表面皮膚，用無菌干棉球擦干。用消毒淋巴結(jié)表面皮膚，用無菌干棉球擦干。用1mL1mL無無菌注射器配菌注射器配1212號針

12、頭，吸取無菌等滲鹽水號針頭，吸取無菌等滲鹽水0.25 mL0.25 mL0.5mL0.5mL，以無菌操作穿刺淋巴結(jié)并注入鹽水，再吸入注射器內(nèi)，反以無菌操作穿刺淋巴結(jié)并注入鹽水，再吸入注射器內(nèi)，反復(fù)復(fù)2 23 3次后，取少量淋巴液于載玻片上。次后，取少量淋巴液于載玻片上。病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查結(jié)果結(jié)果 暗視野顯微鏡下，典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光暗視野顯微鏡下，典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光, , 其螺旋較密而均勻，運(yùn)動(dòng)規(guī)律，運(yùn)動(dòng)性較強(qiáng)。其螺旋較密而均勻，運(yùn)動(dòng)規(guī)律，運(yùn)動(dòng)性較強(qiáng)。 梅毒螺旋體具有親銀性，鍍銀染色后顯微鏡下可梅毒螺旋體具有親銀性，鍍銀染色后顯微鏡下可見到染成棕色的梅毒螺旋體。見到染成棕色的梅

13、毒螺旋體。 直接熒光染色后，直接熒光染色后，在熒光顯微鏡下可見到發(fā)蘋果在熒光顯微鏡下可見到發(fā)蘋果綠色的梅毒螺旋體。臨床意義與暗視野顯微鏡檢綠色的梅毒螺旋體。臨床意義與暗視野顯微鏡檢測相同。但測相同。但DFADFA的特異性及敏感性均大于暗視野顯的特異性及敏感性均大于暗視野顯微鏡檢測。微鏡檢測。病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查臨床意義臨床意義 病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可確診梅毒，且具有快速、簡便、直接的特點(diǎn)。確診梅毒，且具有快速、簡便、直接的特點(diǎn)。 螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最佳方法螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最佳方法( (一一期、二期梅毒皮損或淋巴

14、結(jié)節(jié)、孕婦羊膜穿刺期、二期梅毒皮損或淋巴結(jié)節(jié)、孕婦羊膜穿刺) ) ，對于患者的早期診斷、及時(shí)治療、預(yù)后和盡早切對于患者的早期診斷、及時(shí)治療、預(yù)后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。斷傳染源都有十分重要的意義。 如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性，取材部位不正確、螺旋體數(shù)量不足、患者已性，取材部位不正確、螺旋體數(shù)量不足、患者已接受抗生素治療、損害接近自然消退和實(shí)驗(yàn)室工接受抗生素治療、損害接近自然消退和實(shí)驗(yàn)室工作人員缺乏經(jīng)驗(yàn)等均會影響結(jié)果的判斷。作人員缺乏經(jīng)驗(yàn)等均會影響結(jié)果的判斷。梅毒血清學(xué)檢測梅毒血清學(xué)檢測 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性

15、梅非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性梅毒抗體）毒抗體） 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）體）非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理原理 梅毒螺旋體一旦感染人體，經(jīng)過一段時(shí)間，宿梅毒螺旋體一旦感染人體，經(jīng)過一段時(shí)間，宿主迅速對螺旋體表面的脂質(zhì)作出免應(yīng)答，在主迅速對螺旋體表面的脂質(zhì)作出免應(yīng)答，在3 3周周-4-4周產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體（非特異性反應(yīng)素），周產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體（非特異性反應(yīng)素），主要是主要是IgMIgM和和IgGIgG混合抗體?；旌峡贵w。 未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長期存未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長

16、期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。陰性。 所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原基本成所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原基本成分都是一樣分都是一樣。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理原理 非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)是使用心磷脂、卵磷脂及膽固醇作非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)是使用心磷脂、卵磷脂及膽固醇作為抗原的絮狀凝集試驗(yàn)。反應(yīng)素與心磷脂形成抗原抗體反為抗原的絮狀凝集試驗(yàn)。反應(yīng)素與心磷脂形成抗原抗體反應(yīng)，卵磷脂可加強(qiáng)心磷脂的抗原性，膽固醇可增強(qiáng)抗原的應(yīng)，卵磷脂可加強(qiáng)心磷脂的抗原性，膽固醇可增強(qiáng)抗原的敏感性。心磷脂、卵磷脂遇水形成膠體

17、溶液，膽固醇遇水敏感性。心磷脂、卵磷脂遇水形成膠體溶液，膽固醇遇水形成結(jié)晶。當(dāng)抗原與抗體（反應(yīng)素）混合發(fā)生反應(yīng)時(shí)，后形成結(jié)晶。當(dāng)抗原與抗體（反應(yīng)素）混合發(fā)生反應(yīng)時(shí)，后者即粘附膠體微粒的周圍，形成疏水性薄膜。由于搖動(dòng)、者即粘附膠體微粒的周圍，形成疏水性薄膜。由于搖動(dòng)、碰撞，使顆粒與顆粒互相粘附而形成肉眼可見的顆粒凝集碰撞，使顆粒與顆?；ハ嗾掣蕉纬扇庋劭梢姷念w粒凝集和沉淀，即為陽性反應(yīng)。如遇到非梅毒血清，因體液中的和沉淀，即為陽性反應(yīng)。如遇到非梅毒血清，因體液中的白蛋白多于球蛋白，而白蛋白對膠體顆粒有保護(hù)作用，形白蛋白多于球蛋白，而白蛋白對膠體顆粒有保護(hù)作用，形成親水性薄膜，即使同樣搖動(dòng)、碰撞，

18、由于抗原顆粒周圍成親水性薄膜，即使同樣搖動(dòng)、碰撞，由于抗原顆粒周圍沒有粘附免疫球蛋白的作用，不能形成較大顆粒，無肉眼沒有粘附免疫球蛋白的作用，不能形成較大顆粒，無肉眼可見的凝集和沉淀，因此為陰性反應(yīng)?？梢姷哪统恋恚虼藶殛幮苑磻?yīng)。常見的常見的非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)： 1 1、性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)、性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(venereal disease (venereal disease research laboratory testresearch laboratory test，VDRL)VDRL) 2 2、不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（、不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（un

19、heated serum unheated serum reaginreagin test test，USRUSR） 3 3、快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)、快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(rapid plasma (rapid plasma reaginreagin circle card test circle card test，RPR)RPR) 4 4、甲苯胺紅試驗(yàn)、甲苯胺紅試驗(yàn)(tolulized(tolulized red unheated red unheated serum testserum test，TRUST)TRUST)性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（VDRL)VDRL

20、)特點(diǎn)特點(diǎn) 抗原需新鮮配制，不能長時(shí)間保存抗原需新鮮配制，不能長時(shí)間保存 血清標(biāo)本需血清標(biāo)本需5656滅活滅活 目前主要用于腦脊液標(biāo)本檢查目前主要用于腦脊液標(biāo)本檢查 顯微鏡觀察結(jié)果顯微鏡觀察結(jié)果 主要用于神經(jīng)梅毒的主要用于神經(jīng)梅毒的腦脊液檢查腦脊液檢查, , 特異性高，但特異性高，但敏感性低敏感性低不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（USRUSR）特特 點(diǎn)點(diǎn) 是是VDRLVDRL試驗(yàn)的改良試驗(yàn)的改良 抗原同抗原同VDRLVDRL，但抗原可長期保存，能維持一，但抗原可長期保存，能維持一年年 血清樣本不必加熱滅活血清樣本不必加熱滅活 制成試劑盒，使用方便制成試劑盒，使用方便快速血漿反應(yīng)素環(huán)

21、狀卡片試驗(yàn)（快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（ RPR RPR ）特特 點(diǎn)點(diǎn) 在在USR試劑成分的基礎(chǔ)上加入了黑色碳顆粒，作為沉淀的試劑成分的基礎(chǔ)上加入了黑色碳顆粒，作為沉淀的指示物，所不需要顯微鏡觀察結(jié)果，可用肉眼直接觀察指示物，所不需要顯微鏡觀察結(jié)果，可用肉眼直接觀察 特制的白色紙卡替代了玻片特制的白色紙卡替代了玻片 血清不需滅活血清不需滅活 可作定量試驗(yàn)可作定量試驗(yàn) 有現(xiàn)成的試劑盒，攜帶方便有現(xiàn)成的試劑盒，攜帶方便 操作簡單操作簡單 價(jià)格便宜價(jià)格便宜梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀RPR質(zhì)控卡質(zhì)控卡RPR試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果甲苯胺紅試驗(yàn)（甲苯胺紅試驗(yàn)（TRUST)TRUST

22、)特特 點(diǎn)點(diǎn) TRUSTTRUST試驗(yàn)原理與試驗(yàn)原理與RPRRPR試驗(yàn)原理相同。試驗(yàn)原理相同。 唯唯TRUSTTRUST試驗(yàn)的抗原中加入甲苯胺紅顆粒代試驗(yàn)的抗原中加入甲苯胺紅顆粒代替活性炭顆粒指示物，使陽性結(jié)果出現(xiàn)紅色替活性炭顆粒指示物，使陽性結(jié)果出現(xiàn)紅色絮狀現(xiàn)象，陰性結(jié)果見紅色顆粒集于中央或絮狀現(xiàn)象，陰性結(jié)果見紅色顆粒集于中央或均勻分散。均勻分散。 TRUST試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果TRUST試驗(yàn)與試驗(yàn)與RPR試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義臨床意義 早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后治療后3 3個(gè)月，個(gè)月，

23、VDRLVDRL試驗(yàn)抗體滴度下降試驗(yàn)抗體滴度下降2 2個(gè)稀個(gè)稀釋度，釋度，6 6個(gè)月下降個(gè)月下降4 4個(gè)稀釋度個(gè)稀釋度 一期梅毒一期梅毒1 1年后轉(zhuǎn)陰年后轉(zhuǎn)陰 二期梅毒二期梅毒2 2年后轉(zhuǎn)陰年后轉(zhuǎn)陰 晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2 2年后年后約約50%50%病人血清反應(yīng)仍然陽性病人血清反應(yīng)仍然陽性非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義臨床意義 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)方法簡單、快速、非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)方法簡單、快速、敏感性和特異性較好，適合于大量人群的篩敏感性和特異性較好，適合于大量人群的篩查、查、產(chǎn)前檢查及健康體檢等產(chǎn)前檢查及健

24、康體檢等 早期梅毒硬下疳出現(xiàn)早期梅毒硬下疳出現(xiàn)12周后，血清可呈周后，血清可呈現(xiàn)陽性現(xiàn)陽性 治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)假陽性假陽性 技術(shù)性假陽性反應(yīng)技術(shù)性假陽性反應(yīng) 由于標(biāo)本保存不當(dāng)（如由于標(biāo)本保存不當(dāng)（如細(xì)菌污染或溶血）細(xì)菌污染或溶血） 、試劑質(zhì)量差或過期、試劑質(zhì)量差或過期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成 生物學(xué)假陽性生物學(xué)假陽性 反應(yīng)反應(yīng) 是由于患者有其他疾病是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清學(xué)試

25、驗(yàn)出或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清學(xué)試驗(yàn)出現(xiàn)陽性現(xiàn)陽性 梅毒假陽性的處理梅毒假陽性的處理 由操作錯(cuò)誤引起的技術(shù)性假陽性反應(yīng)，經(jīng)過由操作錯(cuò)誤引起的技術(shù)性假陽性反應(yīng)，經(jīng)過重復(fù)試驗(yàn)即可排除。重復(fù)試驗(yàn)即可排除。 對于急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)，應(yīng)做對于急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)，應(yīng)做TPPA/TPHATPPA/TPHA等試驗(yàn)進(jìn)行排除等試驗(yàn)進(jìn)行排除 前帶現(xiàn)象前帶現(xiàn)象 指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽性、不典中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又象二期梅型或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又象二期梅毒，此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)

26、行試驗(yàn)，出現(xiàn)了毒，此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，出現(xiàn)了陽性的結(jié)果，該現(xiàn)象稱為前帶現(xiàn)象陽性的結(jié)果，該現(xiàn)象稱為前帶現(xiàn)象 耐血清性（血清固定）耐血清性（血清固定） 指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不轉(zhuǎn)陰。早期耐血清性常試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不轉(zhuǎn)陰。早期耐血清性常與治療不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或與治療不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)影響定量試驗(yàn)穩(wěn)定性的因素影響定量試驗(yàn)穩(wěn)定性的因素 移液器、水平旋轉(zhuǎn)儀、試劑滴管等要校準(zhǔn)移液器、水平旋轉(zhuǎn)儀、試劑滴管等要校準(zhǔn) 反應(yīng)孔大小要標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)孔大小要標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)本稀釋前

27、生理鹽水不涂開，稀釋好的標(biāo)本要求標(biāo)本稀釋前生理鹽水不涂開，稀釋好的標(biāo)本要求涂滿整個(gè)反應(yīng)板圓圈；涂布從稀釋最高倍數(shù)開始，涂滿整個(gè)反應(yīng)板圓圈；涂布從稀釋最高倍數(shù)開始，依次到原倍。依次到原倍。 旋轉(zhuǎn)速度、時(shí)間要準(zhǔn)確，結(jié)果觀察要及時(shí)。旋轉(zhuǎn)速度、時(shí)間要準(zhǔn)確，結(jié)果觀察要及時(shí)。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)方法比較非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)方法比較VDRLVDRLUSRUSRRPRRPRTRUSTTRUST抗原成分抗原成分心磷脂、卵磷脂、心磷脂、卵磷脂、 膽膽固醇固醇同前同前+EDTA+EDTA+氯化膽堿氯化膽堿同前同前+EDTA+EDTA+氯化膽堿氯化膽堿+ +活性炭活性炭同前同前+EDTA+EDTA+氯化膽堿氯

28、化膽堿+ +甲苯胺紅甲苯胺紅抗原穩(wěn)定性抗原穩(wěn)定性不穩(wěn)定不穩(wěn)定,1,1天天穩(wěn)定穩(wěn)定4 4 8 8 保存保存1212個(gè)月個(gè)月穩(wěn)定穩(wěn)定4 4 8 8 保存保存1212個(gè)月個(gè)月穩(wěn)定穩(wěn)定4 4 8 8 保存保存1212個(gè)月個(gè)月血清試驗(yàn)前處理血清試驗(yàn)前處理需滅活需滅活不需滅活不需滅活不需滅活不需滅活不需滅活不需滅活反應(yīng)板反應(yīng)板直徑直徑14mm14mm漆圈玻片漆圈玻片直徑直徑14mm14mm圓圈的一次圓圈的一次性塑料（玻璃）性塑料（玻璃）直徑為直徑為18mm18mm圓圈的特圓圈的特制白色反應(yīng)卡片制白色反應(yīng)卡片直徑為直徑為18mm18mm圓圈的特圓圈的特制白色反應(yīng)卡片制白色反應(yīng)卡片針頭針頭60601 1滴滴/

29、mL/mL45451 1滴滴/ml/ml60601 1滴滴/mL/mL60601 1滴滴/mL/mL轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)速1801805 5次次/min/min1801805 5轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/min/min1001005 5轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/min/min1001005 5轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/min/min轉(zhuǎn)時(shí)轉(zhuǎn)時(shí)4 min4 min4min4min8 min8 min8 min8 min顯微鏡顯微鏡10101010倍顯微鏡下觀倍顯微鏡下觀察察肉眼或肉眼或100100倍顯微鏡倍顯微鏡肉眼肉眼肉眼肉眼梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn) 采用梅毒螺旋體特異蛋白作抗原，檢測血清采用梅毒螺旋體特異蛋白作抗原，檢測血清中抗梅毒螺旋體中抗

30、梅毒螺旋體IgGIgG或或IgMIgM抗體（為特異性抗抗體（為特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體），其敏感性和特異梅毒螺旋體抗原的抗體），其敏感性和特異性均較高。性均較高。 感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)呈陽性，則患者終身陽性。驗(yàn)呈陽性，則患者終身陽性。常見的常見的梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)： 1 1 梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（treponema pallidum treponema pallidum haemagglutination assay,TPHAhaemagglutination assay,TP

31、HA） 2 2 梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（treponema pallidumtreponema pallidum particle assayparticle assay，TPPATPPA） 3 3 熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（fiuorescent treponemalfiuorescent treponemal antibody absorption testantibody absorption test，F(xiàn)TA-ABSFTA-ABS） 4 4 梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISATP-ELISA）

32、5 5梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（TP-WBTP-WB） 6 6 梅毒免疫層析法梅毒快速檢測（梅毒免疫層析法梅毒快速檢測（RTRT） 7 7 測定螺旋體測定螺旋體IgMIgM抗體的血清學(xué)試驗(yàn)抗體的血清學(xué)試驗(yàn) 8 8化學(xué)發(fā)光免疫分析法（化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIACLIA）TPPA/TPHATPPA/TPHA試驗(yàn)試驗(yàn)報(bào)告方法報(bào)告方法 a. a. 陽性報(bào)告：定性試驗(yàn)，血清在陽性報(bào)告：定性試驗(yàn)，血清在1:801:80以上稀釋度與致敏顆粒發(fā)生凝集反應(yīng)（以上稀釋度與致敏顆粒發(fā)生凝集反應(yīng)（1+1+或或更強(qiáng)），與未致敏顆粒（第更強(qiáng)），與未致敏顆粒（第3 3孔）不發(fā)生凝孔）不發(fā)生凝集反應(yīng)。

33、定量試驗(yàn)則應(yīng)報(bào)告發(fā)生陽性反應(yīng)的集反應(yīng)。定量試驗(yàn)則應(yīng)報(bào)告發(fā)生陽性反應(yīng)的血清最高稀釋度，為血清滴度。血清最高稀釋度，為血清滴度。 b. b. 陰性報(bào)告：血清與致敏顆粒和未致陰性報(bào)告：血清與致敏顆粒和未致敏顆粒均不發(fā)生凝集反應(yīng)。敏顆粒均不發(fā)生凝集反應(yīng)。TPPA結(jié)果結(jié)果TPPA/TPHATPPA/TPHA試驗(yàn)試驗(yàn)注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) a. a. 微量反應(yīng)板要清潔干凈，孔內(nèi)無異物。微量反應(yīng)板要清潔干凈，孔內(nèi)無異物。b. b. 加入血清后，使用微量板振蕩器振蕩反應(yīng)加入血清后，使用微量板振蕩器振蕩反應(yīng)板，而不可使用水平旋轉(zhuǎn)儀。板，而不可使用水平旋轉(zhuǎn)儀。c. c. 試劑盒不可置于試劑盒不可置于00以下，防止凍結(jié)。

34、不以下，防止凍結(jié)。不同批號試劑不可混合使用。同批號試劑不可混合使用。 d. d. 有些血清標(biāo)本在血清低稀釋度時(shí)可出現(xiàn)前有些血清標(biāo)本在血清低稀釋度時(shí)可出現(xiàn)前帶現(xiàn)象，此時(shí)可作定量試驗(yàn)；帶現(xiàn)象，此時(shí)可作定量試驗(yàn)；e. e. 如未致敏顆粒出現(xiàn)凝集反應(yīng)，應(yīng)將血清進(jìn)如未致敏顆粒出現(xiàn)凝集反應(yīng)，應(yīng)將血清進(jìn)行吸收處理后再進(jìn)行試驗(yàn)，或改用其他試驗(yàn)方法。行吸收處理后再進(jìn)行試驗(yàn)，或改用其他試驗(yàn)方法。 TPPATPPA試驗(yàn)試驗(yàn)TPPA/TPHATPPA/TPHA試驗(yàn)試驗(yàn)血清吸收處理血清吸收處理 a. a. 取取0.95 mL0.95 mL已恢復(fù)體積的未致敏顆粒加入清潔的小已恢復(fù)體積的未致敏顆粒加入清潔的小試管內(nèi)。試管內(nèi)

35、。b. b. 試管內(nèi)加入試管內(nèi)加入50 L50 L血清標(biāo)本并充分混勻，置血清標(biāo)本并充分混勻，置151525 20 min25 20 min或更長時(shí)間。或更長時(shí)間。c. c. 離心離心2000 rpm2000 rpm，5 min5 min，取，取25L25L上清液（血清標(biāo)本上清液（血清標(biāo)本稀釋稀釋1 1：2020）置第）置第3 3孔，注意不要混入顆粒?？祝⒁獠灰烊腩w粒。d. d. 自第自第4 4孔第孔第1010孔各加孔各加25 mL25 mL B B液。液。e. e. 自第自第3 3孔孔 吸吸25 mL25 mL至第至第4 4孔，混勻后吸孔，混勻后吸25mL25mL至第至第5 5孔孔如此稀釋

36、至第如此稀釋至第1010孔，棄去孔，棄去25mL25mL。f. f. 按定量試驗(yàn)法加入按定量試驗(yàn)法加入D D液和液和C C液，將反應(yīng)板置微量板振液，將反應(yīng)板置微量板振蕩器上振蕩蕩器上振蕩3030秒鐘，置濕盒內(nèi)，秒鐘，置濕盒內(nèi)，15152525孵育孵育2 2小時(shí)觀察結(jié)小時(shí)觀察結(jié)果。果。熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA-ABS)(FTA-ABS)原理原理 FTA-ABSFTA-ABS試驗(yàn)以完整形態(tài)的試驗(yàn)以完整形態(tài)的NicholNichol梅毒梅毒螺旋體作為抗原，加上經(jīng)吸收劑（用螺旋體作為抗原，加上經(jīng)吸收劑（用ReiterReiter株螺旋體制備而成）處理過的患者血清形成

37、株螺旋體制備而成）處理過的患者血清形成抗原抗體復(fù)合物，再加入熒光素（抗原抗體復(fù)合物，再加入熒光素（FITCFITC）標(biāo)）標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，與血清梅毒螺旋體抗記的抗人免疫球蛋白，與血清梅毒螺旋體抗體結(jié)合。在熒光顯微鏡下，螺旋體顯示蘋果體結(jié)合。在熒光顯微鏡下，螺旋體顯示蘋果綠色的熒光，即為陽性反應(yīng)。綠色的熒光，即為陽性反應(yīng)。FTA-ABSFTA-ABS材料材料 a. a. 梅毒螺旋體抗原玻片，有直徑梅毒螺旋體抗原玻片，有直徑0.5 cm0.5 cm涂布梅毒螺旋涂布梅毒螺旋體的圓圈，在高倍鏡下每視野不少于體的圓圈，在高倍鏡下每視野不少于3030條螺旋體，丙酮固條螺旋體，丙酮固定。定。b. b.

38、吸收劑（吸收劑（5 ml5 ml冷凍干燥品），由體外培養(yǎng)的冷凍干燥品），由體外培養(yǎng)的ReiterReiter株螺旋體制備而成。使用前用無菌蒸餾水恢復(fù)原體積。株螺旋體制備而成。使用前用無菌蒸餾水恢復(fù)原體積。c. c. 熒光抗體，用熒光素標(biāo)記羊或鼠抗人免疫球蛋白。熒光抗體，用熒光素標(biāo)記羊或鼠抗人免疫球蛋白。d. d. 血清稀釋板。血清稀釋板。FTA-ABSFTA-ABS方法方法 a. a. 將血清標(biāo)本于將血清標(biāo)本于5656滅活滅活30 min30 min，備用；，備用；b. b. 吸收劑加入吸收劑加入5 mL5 mL無菌蒸餾水，用作血清的稀釋；無菌蒸餾水，用作血清的稀釋；c. c. 血清標(biāo)本和吸收

39、劑按血清標(biāo)本和吸收劑按1:51:51:201:20稀釋，混勻后置有稀釋，混勻后置有蓋濕盒內(nèi)于蓋濕盒內(nèi)于35353737孵育孵育30 min30 min；d. d. 將系列稀釋的血清分別加到抗原片上（每孔不少將系列稀釋的血清分別加到抗原片上（每孔不少于于30L30L），放入有蓋濕盒內(nèi)，置），放入有蓋濕盒內(nèi)，置35353737孵育孵育30 min30 min；e. e. 用用0.01mol/L0.01mol/L的的PBSPBS沖洗抗原片，用磁力攪拌器低沖洗抗原片，用磁力攪拌器低速以速以0.01mol/L PBS0.01mol/L PBS溶液洗滌抗原片，每溶液洗滌抗原片，每5 min5 min更換更

40、換PBSPBS液液1 1次，共次，共3 3次。最后一次用蒸餾水沖洗一遍，冷風(fēng)吹干備用；次。最后一次用蒸餾水沖洗一遍，冷風(fēng)吹干備用；FTA-ABSFTA-ABS方法方法 f. f. 抗原片每個(gè)圈內(nèi)加抗原片每個(gè)圈內(nèi)加30L30L熒光抗體（熒光抗體稀釋為工熒光抗體（熒光抗體稀釋為工作液），放濕盒作液），放濕盒35353737孵育孵育30 min30 min。重復(fù)步驟。重復(fù)步驟e e的洗滌的洗滌和吹干；和吹干；g. g. 抗原片加固封劑（甘油緩沖液）抗原片加固封劑（甘油緩沖液）1 1滴，覆以蓋玻片。滴，覆以蓋玻片。在熒光顯微鏡下觀察。在熒光顯微鏡下觀察。h. h. 試驗(yàn)對照：每批次試驗(yàn)包括下列對照。試

41、驗(yàn)對照：每批次試驗(yàn)包括下列對照。 4+ 4+陽性血清和陽性血清和1+1+陽性血清對照，血清用陽性血清對照，血清用PBSPBS液和液和吸收劑分別按吸收劑分別按1:51:51:201:20稀釋。稀釋。 非特異血清對照。非特異血清對照。 染色對照：用染色對照：用0.01 mol/L PBS0.01 mol/L PBS和吸收劑分別替和吸收劑分別替代熒光抗體。代熒光抗體。FTA-ABSFTA-ABS結(jié)果結(jié)果梅毒螺旋體均勻地發(fā)出中等或高強(qiáng)度的蘋果綠色熒光梅毒螺旋體均勻地發(fā)出中等或高強(qiáng)度的蘋果綠色熒光 陽性陽性梅毒螺旋體均勻地發(fā)出弱蘋果綠色熒光梅毒螺旋體均勻地發(fā)出弱蘋果綠色熒光 弱陽性弱陽性梅毒螺旋體呈微弱

42、黃色光或觀察不到熒光梅毒螺旋體呈微弱黃色光或觀察不到熒光 陰性陰性梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP- ELISA)(TP- ELISA) 原理原理該試驗(yàn)是用經(jīng)純化及超聲裂解處理的梅該試驗(yàn)是用經(jīng)純化及超聲裂解處理的梅毒螺旋體為抗原包被固相板條，加上梅毒血毒螺旋體為抗原包被固相板條，加上梅毒血清和辣根過氧化酶標(biāo)記的抗人清和辣根過氧化酶標(biāo)記的抗人IgGIgG抗體，利抗體，利用酶免疫法檢測患者血清中的抗梅毒螺旋體用酶免疫法檢測患者血清中的抗梅毒螺旋體特異性抗體。采用特異的梅毒螺旋體重組蛋特異性抗體。采用特異的梅毒螺旋體重組蛋白作為抗原，使試驗(yàn)更加敏感、特異。白作為抗原，使試驗(yàn)

43、更加敏感、特異。TP- ELISATP- ELISA 材料材料 a. ELISAa. ELISA試劑盒：含包被梅毒螺旋體抗試劑盒：含包被梅毒螺旋體抗原的反應(yīng)板（原的反應(yīng)板（9696孔）；標(biāo)本稀釋液；洗滌液，孔）；標(biāo)本稀釋液；洗滌液，使用前按說明書要求稀釋；酶結(jié)合物；底物使用前按說明書要求稀釋；酶結(jié)合物；底物液（液（A A液和液和B B液）；反應(yīng)終止液；陽性對照血液）；反應(yīng)終止液；陽性對照血清；陰性對照血清。清；陰性對照血清。b. b. 其他：酶標(biāo)檢測儀；洗扳機(jī)。其他：酶標(biāo)檢測儀；洗扳機(jī)。 TP- ELISATP- ELISA 方法方法a. a. 取標(biāo)本稀釋液取標(biāo)本稀釋液100 L100 L加到

44、反應(yīng)板孔內(nèi)，再加入待加到反應(yīng)板孔內(nèi)，再加入待檢血清檢血清10 L10 L，同時(shí)作陽性和陰性對照，置，同時(shí)作陽性和陰性對照，置3737孵育孵育30 30 minmin。b. b. 洗滌液洗板洗滌液洗板5 5次，拍干；次，拍干；c. c. 每孔加酶結(jié)合物每孔加酶結(jié)合物100 L100 L，置，置3737孵育孵育15 min15 min；d. d. 洗滌液洗板洗滌液洗板5 5次，拍干；次，拍干；e. e. 每孔加底物液每孔加底物液A A液、液、B B液各液各1 1滴（各滴（各50 L50 L），），3737避光孵育避光孵育15 min15 min；f. f. 每孔加終止液每孔加終止液1 1滴（滴（5

45、0 L50 L）終止反應(yīng)；）終止反應(yīng)； g. g. 置酶標(biāo)檢測儀置酶標(biāo)檢測儀450 nm450 nm波長測定光密度（波長測定光密度（ODOD值）。值）。TP- ELISATP- ELISA 結(jié)果判定結(jié)果判定臨界值（臨界值（cut offcut off）0.10 + 0.10 + 陰性對照平均陰性對照平均ODOD值（陰值（陰性對照性對照ODOD值值0.050.05時(shí)按時(shí)按0.050.05計(jì)算）。標(biāo)本計(jì)算）。標(biāo)本ODOD值值 臨界值時(shí)，臨界值時(shí)，結(jié)果為陰性。標(biāo)本結(jié)果為陰性。標(biāo)本 臨界值，結(jié)果為陽性（或按各診斷臨界值，結(jié)果為陽性（或按各診斷試劑要求判定結(jié)果）。試劑要求判定結(jié)果）。 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)a

46、. a. 試劑盒置試劑盒置4 488保存；保存；b. b. 不同批號試劑不能混用；不同批號試劑不能混用；c. c. 嚴(yán)格按試劑盒說明書要求操作；嚴(yán)格按試劑盒說明書要求操作；d. d. 反應(yīng)的溫度和時(shí)間必須嚴(yán)格控制。反應(yīng)的溫度和時(shí)間必須嚴(yán)格控制。梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（TP-WBTP-WB） 原理原理 用超聲粉碎的梅毒螺旋體或梅毒螺旋體用超聲粉碎的梅毒螺旋體或梅毒螺旋體重組的不同抗原，印跡至硝酸纖維膜條上。重組的不同抗原，印跡至硝酸纖維膜條上。通過酶聯(lián)反應(yīng)，可檢測梅毒血清中多種特異通過酶聯(lián)反應(yīng)，可檢測梅毒血清中多種特異抗原成分的抗體?？乖煞值目贵w。 梅毒免疫層析法梅毒快

47、速檢測（梅毒免疫層析法梅毒快速檢測（RTRT） 原理原理 利用免疫色譜原理，采用吸附有顯色利用免疫色譜原理，采用吸附有顯色標(biāo)記的梅毒螺旋體抗原的濾紙條，快速檢測標(biāo)記的梅毒螺旋體抗原的濾紙條，快速檢測標(biāo)本中的梅毒螺旋體抗體。標(biāo)本中的梅毒螺旋體抗體。梅毒免疫層析快速檢測方法梅毒免疫層析快速檢測方法測定螺旋體測定螺旋體IgMIgM抗體的血清學(xué)試驗(yàn)抗體的血清學(xué)試驗(yàn) 梅毒中特異性的梅毒中特異性的IgMIgM抗體是梅毒感染最早其產(chǎn)生的抗體是梅毒感染最早其產(chǎn)生的抗體。在潛伏期以及晚期患者可發(fā)現(xiàn)抗體。在潛伏期以及晚期患者可發(fā)現(xiàn)IgMIgM水平在自水平在自愈的患者中下降的速度比經(jīng)過治療痊愈的患者慢。愈的患者中下

48、降的速度比經(jīng)過治療痊愈的患者慢。IgMIgM分子量較大不能通過胎盤屏障。因此在新生兒分子量較大不能通過胎盤屏障。因此在新生兒血中檢測到血中檢測到IgMIgM抗體表明有先天感染。如在患者的抗體表明有先天感染。如在患者的腦脊液檢測到腦脊液檢測到IgMIgM抗體表明有活動(dòng)性神經(jīng)梅毒。血抗體表明有活動(dòng)性神經(jīng)梅毒。血液中或腦脊液中出現(xiàn)抗梅毒液中或腦脊液中出現(xiàn)抗梅毒IgMIgM抗體均表示需要治抗體均表示需要治療。療。 檢測檢測IgmIgm的的FTA-ABSFTA-ABS試驗(yàn)試驗(yàn) 檢測檢測19S-IgM19S-IgM組分的組分的FTA-ABSFTA-ABS試驗(yàn)試驗(yàn) IgMIgM固相層血球吸附試驗(yàn)固相層血球吸

49、附試驗(yàn)(SPHA)(SPHA) IgMIgM捕獲捕獲ELISAELISA 免疫印跡試驗(yàn)免疫印跡試驗(yàn) 推薦使用推薦使用19S-IgM-TPHA19S-IgM-TPHA試驗(yàn)來診斷先試驗(yàn)來診斷先天梅毒。天梅毒。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義臨床意義 梅毒螺旋體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)，它梅毒螺旋體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)，它們可以幫助確定非梅毒螺旋體試驗(yàn)陽性反應(yīng)們可以幫助確定非梅毒螺旋體試驗(yàn)陽性反應(yīng)是真陽性還是假陽性。是真陽性還是假陽性。 一旦這些試驗(yàn)呈陽性，則患者終身陽性。一旦這些試驗(yàn)呈陽性，則患者終身陽性。 試驗(yàn)特異性強(qiáng)，很少出現(xiàn)假陽性。據(jù)統(tǒng)計(jì)，試驗(yàn)特異性強(qiáng)，很少出現(xiàn)假陽性。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在普通人群中，有在普通人群中，有1%1%的生物學(xué)假陽性發(fā)生。的生物學(xué)假陽性發(fā)生。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義臨床意義 如系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清可使如系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清可使FTAABSFTAABS試試驗(yàn)呈假陽驗(yàn)呈假陽 ，但大多數(shù)病例中螺旋體呈串株，但大多數(shù)病例中螺旋體呈串株?duì)顭晒?。狀熒光?傳染性單核細(xì)胞增多癥，可能由于嗜異性抗傳染性單核細(xì)胞增多癥，可能由于嗜異性抗體所致，可使體所致，可使TPHATPHA呈假陽性。呈假陽性。 麻風(fēng)患者也可使特異試驗(yàn)呈陽性。麻風(fēng)患者也可使特異試驗(yàn)呈陽性。 作為非梅毒