肝纖維化病程中Kupffer細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子對(duì)肝星狀細(xì)胞活化增殖_凋亡的調(diào)控

1、中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)ChinesePharmacologicalBulletin2010Jan；26（1）：9139肝纖維化病程中Kupffer細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子對(duì)肝星狀細(xì)胞活化增殖、凋亡的調(diào)控黃艷，黃成，李俊（安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，安徽天然藥物活性研究省級(jí)實(shí)驗(yàn)室，“中藥藥理實(shí)驗(yàn)室”，國(guó)家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥科研三級(jí)實(shí)驗(yàn)室安徽合肥230032）中國(guó)圖書(shū)分類(lèi)號(hào)：R322.47；R329.24；R329.25；R392.12；R575.202.3；R977.6文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：10011978（2010）01000905摘要：肝纖維化是對(duì)慢性肝損傷的愈合反應(yīng)，為一個(gè)可逆的HSC）是肝臟分泌細(xì)過(guò)程。肝星

2、狀細(xì)胞（hepaticstellatecell，ECM）的主要細(xì)胞，胞外基質(zhì)（extracellularmatrixc，在肝纖維化的發(fā)展機(jī)制中占有重要的地位。如何控制HSC的活性并逆轉(zhuǎn)肝纖維化的進(jìn)程是抗肝纖維化研究的重點(diǎn)之一。在肝纖維化病程中，一系列細(xì)胞因子通過(guò)旁分泌和自分泌方式作用于鄰近的HSC，影響其增殖、趨化、代謝及凋亡。鑒于Kupffers細(xì)胞為細(xì)胞因子的主要來(lái)源，其在肝纖維化病程中對(duì)HSC細(xì)胞的活化增殖、凋亡發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。HSC、Kupffers細(xì)胞及細(xì)胞因子與肝纖維化的發(fā)生發(fā)展關(guān)系極為密切，闡明其關(guān)系，有助于以HSC為靶點(diǎn)的肝纖維化方面的研究，現(xiàn)就其關(guān)系綜述如下。關(guān)鍵詞：肝

3、星狀細(xì)胞；枯否細(xì)胞；細(xì)胞因子；肝纖維化；增殖；凋亡肝纖維化是一個(gè)涉及多種細(xì)胞和細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程。細(xì)胞因子與肝內(nèi)細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成一個(gè)龐大的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，調(diào)控著肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展。在正常情況下，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)處于一種平衡狀態(tài)。受各種損傷因素刺激后平衡被打破，體內(nèi)細(xì)胞因子的合成分泌發(fā)生變化，正向調(diào)節(jié)肝纖維化的細(xì)胞因子（致肝纖維化作用因子）就會(huì)發(fā)揮其瀑布式連鎖反應(yīng)，同時(shí)抗肝纖維化作用因子效應(yīng)減弱，最終導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)代謝失衡而過(guò)度沉積，形成肝纖維化。肝臟的損傷、炎癥等因素首先導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷，損傷的肝細(xì)胞和膽汁細(xì)胞釋放炎癥性細(xì)胞因子和可溶性介質(zhì)從而收稿日期：20090802，修回日期：2009102

4、030672475）；安基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No30873081，徽省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No090413134）；高等學(xué)校優(yōu)秀青年人才基金重點(diǎn)資助項(xiàng)目（No2009SQRZ049ZD）；安徽醫(yī)科大學(xué)校博士啟動(dòng)基金資助項(xiàng)目（NoXJ200803）作者簡(jiǎn)介：黃艷（1979），女，博士，副教授，研究方向：抗炎免疫TelE-mail：aydhy中藥藥理學(xué)，藥理學(xué)、；李俊（1960），男，博士，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：TelE-抗炎免疫及臨床藥理學(xué)，通訊作者，mail：lijunKC）。活化的KC細(xì)胞分泌轉(zhuǎn)化激活枯否細(xì)胞（K

5、upffercell，TGF-生長(zhǎng)因子-（transforminggrowthfactor-，）及血小板衍derivedgrowthfactor，PDGF）等一系列細(xì)化生長(zhǎng)因子（platelet-胞因子，通過(guò)旁分泌方式激活肝星狀細(xì)胞（hepaticstellateHSC）。HSC是一種肝臟非實(shí)質(zhì)性細(xì)胞，cell，主要分布于Disse間隙內(nèi)，包繞在肝竇周?chē)?，占非?shí)質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的5%10%，其生理功能與脂肪存儲(chǔ)以及維生素A的代謝有關(guān)。HSC激活后也可分泌TGF-等細(xì)胞因子，通過(guò)自分泌進(jìn)一步維持自身的活化狀態(tài)并激活臨近HSC，活化的HSC增殖，smoothmuscleactin，轉(zhuǎn)變?yōu)楸磉_(dá)-平滑肌肌動(dòng)

6、蛋白（-SMA）的肌成纖維細(xì)胞，大量合成如型膠原、型膠原、纖維連接蛋白等多種細(xì)胞外基質(zhì)成分，導(dǎo)致肝纖維化的發(fā)生。HSC的激活是肝纖維化形成的中心環(huán)節(jié)，因此，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)對(duì)HSC活化起著重要的作用，是調(diào)控肝纖維化的主KC是肝纖維化形成過(guò)程中肝臟炎癥反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)要手段，胞，是肝臟多種細(xì)胞因子的主要來(lái)源，其在慢性肝纖維化病程不同階段對(duì)HSC發(fā)揮著不同的作用。本文就現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)外對(duì)肝纖維化病程中KC分泌的細(xì)胞因子等對(duì)HSC活化增凋亡的研究進(jìn)展做一綜述。殖、1KC的促HSC活化作用HSC的激活分為兩個(gè)階段：?jiǎn)?dòng)階段和持續(xù)激活階段。HSC活化的啟動(dòng)是鄰近細(xì)胞如肝細(xì)胞、KC、肝竇內(nèi)皮細(xì)胞等旁分泌作用的結(jié)果

7、，持續(xù)激活階段是HSC自分泌及旁分泌共同作用的結(jié)果。KC的旁分泌在啟動(dòng)HSC活化中起重要作用?，F(xiàn)就KC促HSC活化相關(guān)的細(xì)胞因子分述如下：1.1TGF-研究證實(shí)，細(xì)胞因子中只有TGF-能刺激1HSC合成膠原纖維，而其他細(xì)胞因子則只刺激HSC增殖。KC通過(guò)自分泌或旁分泌的方式產(chǎn)生肝纖維化形成過(guò)程中，大量的TGF-，其不僅能夠促進(jìn)HSC轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞，促而且能增強(qiáng)ECM的合成，抑制其降解。同進(jìn)HSC的激活，時(shí)TGF-可以增加HSC上PDGF受體的表達(dá)，促進(jìn)HSC自PDGF，、明顯抑制活化HSC的凋亡。PDGF和分泌TGF-TGF-構(gòu)成了活化HSC的自分泌循環(huán)，是HSC的持續(xù)激活的重要機(jī)制。陳小亮

8、等應(yīng)用苦參素作用肝纖維化大鼠，研究發(fā)現(xiàn)2TGF-mRNA的表達(dá)與I型前膠原mRNA、血清型前膠原及組織損傷程度成正比。目前研究已證實(shí)TGF-通過(guò)多種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路MAPK的ERK信誘導(dǎo)HSC膠原生成，其中包括Smad蛋白，的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路號(hào)及ROS信號(hào)傳導(dǎo)通路等。TGF-主要為Smad蛋白信號(hào)傳導(dǎo)通路1.2PDGF3。PDGF在肝臟主要由肝臟KC分泌，是已知最10中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)ChinesePharmacologicalBulletin2010Jan；26（1）中表達(dá)明顯增強(qiáng)，提示IGF及其受體參與肝纖維化的形成。由于IGFBPs與IGFs具有高親和力且能夠調(diào)節(jié)IGFs的生物活性，這些

9、結(jié)合蛋白的誘導(dǎo)產(chǎn)生亦能影響肝纖維化的發(fā)生發(fā)展。然而另有研究表明10B兩條強(qiáng)的促HSC增殖、分化的細(xì)胞因子。PDGF是由A、AB、BB3種形式存在，單鏈結(jié)合構(gòu)成的二聚體，以AA、其靶結(jié)合部位為170180ku的跨膜受體。HSC激活早期的重要標(biāo)志就是PDGF表達(dá)的增加。PDGF與細(xì)胞膜上PDGF受體結(jié)合可引起受體的二聚體化從而激活受體酪氨酸激酶的活性，形成受體信號(hào)蛋白復(fù)合體，引起磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)，進(jìn)而最終導(dǎo)致細(xì)胞的增殖反應(yīng)，激活細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)傳導(dǎo)通路，產(chǎn)生膠原增加，同時(shí)促使HSC遷移，聚集于炎癥受損區(qū)。有研究4IGF-1具有體內(nèi)抗肝纖維化的作用，可抑制HSC的活化，其可能與提高超氧化物歧化酶及過(guò)氧化

10、氫酶的活性，提高肝細(xì)胞清除自由基的能力，減少HSC活化的刺激因素等有關(guān)。IGF與肝纖維化的關(guān)系有待于進(jìn)一步研究證實(shí)。1.5白細(xì)胞介素IL-6可刺激HSC的增殖，并可誘導(dǎo)產(chǎn)生多種急性期蛋白，通過(guò)促進(jìn)基質(zhì)變性或與其粘附受體相互作1可刺激HSC增生，誘導(dǎo)促炎因子用而促使ECM沉積。IL-CSF）的合成，粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-抑制金屬蛋23是新白酶的合成，在多環(huán)節(jié)參與了肝纖維化的過(guò)程。IL-12分子家族，屬于IL-主要近發(fā)現(xiàn)的一種促炎性細(xì)胞因子，來(lái)源于活化的單核/巨噬細(xì)胞和B細(xì)胞。它具有多種生物學(xué)功能，能促進(jìn)T細(xì)胞尤其是CD4T細(xì)胞增殖，促進(jìn)T細(xì)胞、APC產(chǎn)生IFN-12，與IL-具有抗腫瘤和

11、抗轉(zhuǎn)移活性，而且與23和IL-17可能是自身免疫和炎癥反應(yīng)疾病密切相關(guān)。IL-17是目前新發(fā)現(xiàn)中和或阻止炎癥反應(yīng)的一個(gè)有效靶標(biāo)。IL-的主要由CD4記憶T細(xì)胞、單核細(xì)胞等分泌的一種促炎性細(xì)胞因子，具有強(qiáng)大的招募中性粒細(xì)胞、促進(jìn)多種細(xì)胞釋放炎性因子、促進(jìn)細(xì)胞增殖及抑制部分腫瘤生長(zhǎng)等多種生物學(xué)作用，目前發(fā)現(xiàn)其與機(jī)體多種炎癥性疾病關(guān)系密切。如前所TGF-IL-6、IL-1、TNF-述，、等細(xì)胞因子具有重要的促纖維17與這幾種細(xì)胞因子之間存在著密切的化發(fā)生的作用。IL-IL-6可誘導(dǎo)Th17的活化增殖及IL-17生物學(xué)關(guān)系：TGF-、1和TNF-6引發(fā)的的產(chǎn)生；IL-可以增強(qiáng)由TGF-和IL-Th17

12、反應(yīng)；IL-6是Th17細(xì)胞生成主要細(xì)胞因子之一11。在肝纖維化治療中一個(gè)亟待解決的問(wèn)題是能否將活化的HSCIL-10可能為調(diào)控這一過(guò)程的關(guān)鍵性因子。轉(zhuǎn)變?yōu)殪o止?fàn)顟B(tài)，IL-10在肝臟中主要由KC分泌，在活化的HSC中被大量誘通過(guò)自分泌的負(fù)反饋信號(hào)而抑制疤痕組織形成，增導(dǎo)表達(dá)，10與間質(zhì)膠原酶加間質(zhì)膠原酶的活性，抑制炎癥反應(yīng)。IL-表達(dá)呈正相關(guān)，而與型膠原mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。此外，IL-10能抑制HSC中ICAM-1的表達(dá)12。1.6ROS氧化應(yīng)激是肝纖維化進(jìn)程及HSC的激活中一個(gè)重要的致病因素，其在肝纖維化發(fā)病過(guò)程中的重要作用已被廣泛研究證實(shí)。損傷的肝細(xì)胞、活化的KC及浸潤(rùn)的中性粒細(xì)胞釋放的

13、ROS可通過(guò)旁分泌的方式刺激HSC。這種外源性ROS作用于HSC可激活氧化還原敏感性細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路從而促進(jìn)HSC的膠原合成。而HSC本身也是肝纖維化過(guò)程中ROS的主要來(lái)源。在肝硬化新鮮分離培養(yǎng)的HSC中表達(dá)NADPH氧化酶，表明體外激活的HSC也能產(chǎn)生ROS。氧化應(yīng)激尚可參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路從而調(diào)節(jié)多種蛋白的活性及磷酸化水平。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的ROS過(guò)量生成超過(guò)了機(jī)體的抗氧化能力，細(xì)胞的大分子物質(zhì)如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和DNA就會(huì)受到破壞。1.7NF-BNF-B作為炎癥反應(yīng)的最為重要的轉(zhuǎn)錄因子，對(duì)KC分泌上述介質(zhì)進(jìn)行了調(diào)控。在肝纖維化形成過(guò)程BB作用于大鼠應(yīng)用枯否細(xì)胞條件培養(yǎng)基或者PDGF-HSC，B受體

14、磷酸化，發(fā)現(xiàn)PDGF可通過(guò)誘導(dǎo)HSCPDGF-激活細(xì)胞內(nèi)MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路進(jìn)而促進(jìn)HSC膠原的增加。此1（tissue外PDGF還可通過(guò)上調(diào)金屬蛋白酶組織抑制因子-inhibitorofmetalloproteinases-1，TIMP-1），抑制膠原酶，從而減少ECM的降解。1.3TNF-腫瘤壞死因子-（tumornecrosisfactor，）TNF-近年來(lái)，越來(lái)越多的研究表明，參與了肝纖維化的形成。TNF-具有廣譜生理和病理效應(yīng)，主要由單核和巨噬細(xì)胞分泌。Tomita等5對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)8wk低膽堿飲食后，TNF受體基因缺陷型大鼠肝纖維化程度較正常野生型大鼠TNF-減輕，肝實(shí)質(zhì)中活化的

15、KC數(shù)量減少，水平亦明顯降低。TNF-可加強(qiáng)HSC的趨化性，促進(jìn)HSC的增殖。用TNF-24h內(nèi)見(jiàn)膠原含量增加3倍以上，TNF-處理HSC后，對(duì)HSC基質(zhì)合成功能的影響發(fā)生于基因轉(zhuǎn)錄階段有研究顯示76。另TNF-有明顯抑制活化HSC凋亡的作用，表明TNF-的促纖維化作用與其抑制活化的HSC凋亡有關(guān)。研究表明CD95/CD95L途徑可促使活化的HSC產(chǎn)生自發(fā)性凋亡。TGF-及TNF-可抑制自發(fā)性凋亡及CD95L的表2、bax、NF-達(dá)。體外培養(yǎng)的HSC活化細(xì)胞中bcl-B及p53xL及p21WAF1基因表達(dá)受抑。TGF-基因表達(dá)上調(diào)，而bcl-xL及p21WAF1基因及TNF-可誘導(dǎo)NF-B的激

16、活，上調(diào)bcl-表達(dá)，并抑制p53基因表達(dá)，提示TGF-及TNF-可能通過(guò)上調(diào)抗凋亡因子、下調(diào)凋亡因子p53的表達(dá)從而保持HSC的持續(xù)激活狀態(tài)。TNF-除能直接刺激HSC增殖和膠原合成外，還可增強(qiáng)TGF-對(duì)HSC增殖和膠原合成的刺激作用。此外，作為炎癥介質(zhì)TNF-還可刺激KC釋放更多的細(xì)胞因PDGF等，、形成正反饋的放大作用。子如TGF-1.4胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）研究已證實(shí)8，IGFs與肝纖維化、肝硬化的形成發(fā)展有關(guān)。目前已分離出兩種IGFs，1和IGF-2。它們以自分泌、即IGF-旁分泌和內(nèi)分泌的方式1或IGF-2在體液作用于靶器官。幾乎所有內(nèi)分泌的IGF-1ikegrowthfact

17、or中均與胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白（insulin-bindingproteins，IGFBPs）形成相對(duì)分子質(zhì)量為150kb或50kb的復(fù)合物。IGF-1是由70個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈多主要在肝臟合成，是機(jī)體廣泛存在的細(xì)胞有絲分裂和分肽，化成熟的促進(jìn)劑，影響許多器官內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化及代謝1的上述功能是通過(guò)IGF-1受體（IGF-1recep-的調(diào)節(jié)。IGF-tor，IGF-1R）介導(dǎo)的，IGF-1與IGF-1R結(jié)合的有效性受IGFB-Ps的調(diào)節(jié)。劉立新等9研究顯示，胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合6（IGFBP2，IGFBP6）在TGF-T6蛋白2，1誘導(dǎo)活化的HSC-中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)ChinesePh

18、armacologicalBulletin2010Jan；26（1）1122中KC的NF-B激活，由于NF-B對(duì)KC炎性介質(zhì)表達(dá)的上調(diào)作用，使得KC炎性介質(zhì)數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于抑炎介質(zhì)，炎性介質(zhì)大量表達(dá)一方面以自分泌或旁分泌的形式激活未活化KC“炎性瀑布”，中的NF-B，產(chǎn)生更多的炎性介質(zhì)，形成造成肝臟損傷，另一方面可迅速使HSC活化、增殖，最終形成肝纖維化。NF-B不僅參與了HSC早期激活，對(duì)HSC的持續(xù)激活也發(fā)揮了重要作用。當(dāng)處于啟動(dòng)階段的HSC受到細(xì)胞因NF-子、有絲分裂原的刺激后，B的活性迅速增高，促使HSC1、COX2、IL-6及IL-8基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)相應(yīng)的產(chǎn)中的ICAM-TGF-物，觸發(fā)或加

19、劇肝臟炎癥，并通過(guò)自由基、等炎性介進(jìn)一步激活NF-B從而維持HSC活化，最終促成肝臟纖質(zhì)，維化的發(fā)生。Tang等達(dá)。近年研究發(fā)現(xiàn)13等機(jī)制，抑制肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展。有研究表明，脂聯(lián)素生理濃度下可劑量依賴性促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞人組織金屬1mRNA（TIMP-1mRNA）的表達(dá)，蛋白酶抑制因子-并發(fā)現(xiàn)脂10而發(fā)揮刺激TIMP-1表達(dá)的作用。聯(lián)素是通過(guò)IL-1.9其他促HSC活化因子具有血管活性特性的細(xì)胞因子也可以調(diào)節(jié)肝纖維化的形成。血管舒張因子如一氧化氮，松弛肽具有抗纖維化的特性，而血管收縮因子如腎上腺素、血管緊張素則具有相反的作用。Ang-為腎素血管緊張通過(guò)與肝巨噬細(xì)胞上的素的一種血管收縮因子，A

20、ng-AT1受體作用而誘導(dǎo)TGF-和纖連蛋白的mRNA表達(dá)，從促進(jìn)型膠原及TIMPmRNA表達(dá)，與肝纖維化而激活HSC，密切相關(guān)23研究發(fā)現(xiàn)HSC膠原表達(dá)與NF-B。內(nèi)皮素-1（endothelin，ET-1）是一種強(qiáng)有力的有相關(guān)性，抑制NF-B表達(dá)及活性，可明顯抑制膠原的表14血管收縮因子，可通過(guò)與其A型受體相互作用從而促進(jìn)纖1受體，ET-1與受體結(jié)合維化的形成。活化的HSC表達(dá)ET-后可使細(xì)胞內(nèi)的鈣離子含量增加，引起肌球蛋白、肌漿蛋白SMA的表達(dá)，的收縮；同時(shí)還可增加-調(diào)節(jié)HSC的增生。最近的研究24NF-B有抗凋亡作用：一些凋亡刺激可以使NF-B活化；活化的NF-B阻斷了TNF-介導(dǎo)的細(xì)

21、胞凋亡效應(yīng)；證實(shí)NF-B參與調(diào)控HSC的凋亡、增殖反應(yīng)。1.8瘦素及脂聯(lián)素瘦素（leptin）是由ob基因編碼的一種167個(gè)氨基酸組成的分泌型蛋白質(zhì)，主要來(lái)源于體內(nèi)白色脂R）屬于類(lèi)細(xì)胞因子受體家族，有肪組織。瘦素受體（OB-6種亞型，Ra、OB-Rb、OB-Rc、OB-Rd、OB-Re、OB-Rf。即OB-瘦素是一種多靶器官、功能廣泛的蛋白激素，通過(guò)與其受體的結(jié)合，激活相應(yīng)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，使下游激酶發(fā)生磷酸化，而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。最近發(fā)現(xiàn)等16151）明顯增加動(dòng)物模型的顯示注入內(nèi)皮素1（ET-25門(mén)靜脈壓是由KC產(chǎn)生的TXA2介導(dǎo)的。Gaca等研究發(fā)抑制型膠原現(xiàn)基底膜樣基質(zhì)可以誘導(dǎo)活化HSC的

22、失活，SMA的產(chǎn)生。KC可以釋放型膠原，和-通過(guò)改變細(xì)胞基質(zhì)的相互作用，調(diào)節(jié)基底膜的組成從而誘導(dǎo)HSC的激活。2KC細(xì)胞抑制HSC活化促其凋亡、促進(jìn)ECM降解的作用KC在肝纖維化發(fā)病中的作用已被廣泛重視。KC促HSC激活、誘導(dǎo)肝纖維化的形成作用已得到公認(rèn)，然而，其能誘導(dǎo)活化HSC凋亡，促進(jìn)ECM的否促進(jìn)活化的HSC失活，降解，從而抑制肝纖維化的形成？最近國(guó)外學(xué)者Duffield等26瘦素不僅與免疫、腫瘤、生殖等病理過(guò)程有關(guān)，而且與肝纖維化有密切關(guān)系。Honda研究證實(shí)活化的HSC可生成瘦素。一些研究發(fā)現(xiàn)活Rb型及化的HSC，肝枯否細(xì)胞和竇上皮細(xì)胞表達(dá)瘦素OB-OB-Ra型受體，Rb型受體為主，

23、HSC分泌的但以功能性O(shè)B-瘦素通過(guò)作用于自身細(xì)胞及枯否細(xì)胞上的受體，增加炎性因子、促纖維化細(xì)胞因子的表達(dá)，促進(jìn)HSC增殖和分泌膠原產(chǎn)并抑制HSC凋亡，從而在慢性肝損傷所致的肝纖維化中物，發(fā)揮重要作用17通過(guò)轉(zhuǎn)基因鼠研究顯示在肝纖維化進(jìn)展期阻斷KC可使成纖維細(xì)胞及疤痕組織減少，抑制肝纖維化的進(jìn)展；而在肝纖維化恢復(fù)期阻斷KC可抑制ECM的降解，促進(jìn)肝纖維化的形成，然而對(duì)于HSC的活性及數(shù)量無(wú)明顯影響。Fisch-er等27研究報(bào)道KC可通過(guò)Casepase-9途徑誘導(dǎo)活化HSC的凋亡。這與Friedman等28。在對(duì)瘦素受體缺乏大鼠（fa/fa）和瘦素缺18陷小鼠（ob/ob）研究中發(fā)現(xiàn)肝內(nèi)KC

24、功能異常，影響到肝19的研究一致，即在肝纖維化形內(nèi)鄰近細(xì)胞的功能，提示瘦素受體缺陷防治肝纖維化發(fā)展是通過(guò)KC功能異常所致。另有研究發(fā)現(xiàn)，瘦素是誘導(dǎo)TGF-1生成的必需介質(zhì)。瘦素可增加HSCTGF-型受體Li等通表達(dá)并且加強(qiáng)TGF-對(duì)HSC膠原生成作用。最近，過(guò)瘦素（75gL1KC發(fā)揮了雙刃劍的作用。在肝纖維化進(jìn)展成及恢復(fù)階段，期可促進(jìn)HSC的激活，而在肝纖維化恢復(fù)期KC可促進(jìn)活化HSC凋亡，促進(jìn)ECM的降解。目前研究顯示對(duì)HSC凋亡的調(diào)節(jié)因子主要有抑制HSCTGF-IFN-leptin等，ECM如凋亡的生長(zhǎng)因子如TNF-、Collagen1、TIMP-1、Integrins，基因轉(zhuǎn)錄因子NF-

25、B及MAPKIGF-1、IFN、Fas/等；促進(jìn)HSC凋亡因子包括生長(zhǎng)因子NGF、FasL、TRAIL、ROS及苯二氮（PBR）受體、MMP-9、NF-B及MAPK等28。由此可知，多種因子共同參與HSC凋亡的調(diào)節(jié)，同種因子的不同亞型如IFN-和IFN-，同種因子在疾病的不同階段或不同劑量下對(duì)HSC的凋亡可能發(fā)揮相反的作用。HSC的凋亡機(jī)制十分復(fù)雜，調(diào)控活化HSC凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究甚少。目前已知的HSC凋亡信號(hào)途徑主要包括線粒體途徑、死亡受體途徑和非死亡受體途徑。非死亡受Rho/ROCK信號(hào)途徑體途徑如核受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，和Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等30，31）處理原代培養(yǎng)的大鼠HSC，W

26、esternblot-thymidine和EMSA分析顯示型膠原明顯增高，采用H參入法研究了瘦素對(duì)HSC增殖的影響，結(jié)果顯示增殖率達(dá)正常值的3倍，并明顯促進(jìn)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白CyclinD1的ERK1/2，表達(dá)；進(jìn)一步研究表明瘦素引起肝纖維化與p38，PI3K/Akt等通路的活化有關(guān)。3條通路均涉及TIMP-1的表1轉(zhuǎn)錄前、達(dá)，并且參與了TIMP-轉(zhuǎn)錄時(shí)和轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)節(jié)。研究亦表明瘦素可通過(guò)作用于MAPK及PI3K/Akt信號(hào)傳導(dǎo)通路從而增強(qiáng)PDGF誘導(dǎo)的HSC增殖20，21。脂肪因子如脂聯(lián)素在肝纖維化的發(fā)病中發(fā)揮著與瘦素相反的作用。脂聯(lián)素是脂肪細(xì)胞分泌的一種具有抗糖尿病、抗動(dòng)脈粥樣硬化的激素

27、。最近研究發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素與其受體結(jié)合后可能通過(guò)抑制HSC活化增殖，抑制枯否細(xì)胞產(chǎn)生TNF。Friedman等研究發(fā)現(xiàn)，在肝KC及活化的HSC可通過(guò)表達(dá)TNF相關(guān)凋亡纖維化恢復(fù)期，12中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)ChinesePharmacologicalBulletin2010Jan；26（1）？EurJGastroen-betargetedusefullytocombatliverfibrosisJterolHepatol，2004，16：1236.2陳小亮，李俊，鄧子煜，等.苦參素對(duì)肝纖維化大鼠肝臟TGF-J.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2009，25（6）：7614.1的調(diào)節(jié)作用2ChenXL，LiJ，DengZY，

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35、后發(fā)現(xiàn)的第3個(gè)凋亡分子，其與細(xì)胞膜TRAIL受體結(jié)合從而發(fā)揮生物學(xué)作用。目前已發(fā)現(xiàn)5種TRAIL受體，R1（DR4）與TRAIL-R2（DR5）含有其中TRAIL-R3死亡域，與TRAIL結(jié)合可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。TRAIL-（DcR1）、R4（DcR2）及OGP不含死亡域，與TRAIL結(jié)合不能R1、R2誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，反而競(jìng)爭(zhēng)性抑制了TRAIL與TRAIL-的結(jié)合，起凋亡抑制作用。研究發(fā)現(xiàn)DR4和DR5廣泛表達(dá)于多種組織、細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。而DcR1和DcR2多表達(dá)于正常組織，但在腫瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞不表達(dá)或表達(dá)較即僅誘低。這可以部分解釋TRAIL的選擇性細(xì)胞毒作用，導(dǎo)轉(zhuǎn)化細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)

36、胞發(fā)生凋亡，而不誘導(dǎo)大多數(shù)正常組織或細(xì)胞凋亡。由于FasL與TNF誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用無(wú)選擇性，臨床應(yīng)用因其嚴(yán)重毒副作用而受到限制，而TRAIL選擇性殺傷靶細(xì)胞的特性使其在誘導(dǎo)凋亡的治療方面有著誘人的前景。Tang等32應(yīng)用siRNA技術(shù)作用證實(shí)肝纖維化恢復(fù)期KC可通過(guò)分泌于大鼠KC細(xì)胞，TRAIL，作用于HSC，引發(fā)casepase級(jí)聯(lián)反應(yīng)，誘發(fā)HSC凋亡，抑制其增殖。進(jìn)一步應(yīng)用A771726（來(lái)氟米特活性代謝2發(fā)現(xiàn)，A771726可通過(guò)增強(qiáng)TRAIL誘導(dǎo)凋亡物）作用人LX-增加HSC的凋亡。的活性，TRAIL誘導(dǎo)凋亡的途徑還沒(méi)有完全清楚。目前大多認(rèn)為T(mén)RAIL是通過(guò)激活細(xì)胞內(nèi)的Fasasso

37、ciateddeathdomain（FADD）-caspase途徑而引發(fā)細(xì)胞發(fā)生凋亡。有研究表明33，靜止期及轉(zhuǎn)化的HSC對(duì)TRAIL介導(dǎo)的凋亡的敏感性R2增加可能與其對(duì)凋亡的敏不同，活化的HSC表達(dá)TRAIL-但其確感性增強(qiáng)有關(guān)。KC可以調(diào)節(jié)肝內(nèi)其他細(xì)胞的凋亡，切的作用因子及信號(hào)傳導(dǎo)通路未明。KC在肝纖維化恢復(fù)期可能降解ECM，恢復(fù)期的KC細(xì)膠原纖維降解酶的主要來(lái)源。盡管KC分泌胞是間質(zhì)膠原、9）的作用底物是基底膜膠原而不是膠的金屬蛋白酶（MMP-9可能具有更廣泛的底原纖維，但在恢復(fù)期KC分泌的MMP-物譜，從而能夠降解膠原纖維，且此期的KC可釋放其他一些蛋白酶參與ECM的降解。除此之外，恢

38、復(fù)期KC可促進(jìn)HSC凋亡，HSC及抑制HSC中TIMP的表達(dá)，增加KC細(xì)胞、肝臟其他細(xì)胞釋放蛋白酶，促進(jìn)蛋白酶的活化，從而發(fā)揮降解基質(zhì)的作用。KC究竟通過(guò)釋放何種細(xì)胞因子，經(jīng)由何種信號(hào)傳導(dǎo)通路分別介導(dǎo)上述兩種對(duì)HSC相反的作用，目前尚不十分清楚，有待進(jìn)一步研究證實(shí)。探討肝纖維化病程中KC對(duì)HSC的調(diào)控作用有助于進(jìn)一步了解肝纖維化的發(fā)病機(jī)制，為臨床合理用藥、開(kāi)發(fā)治療肝纖維化有效的治療藥物提供可靠的依據(jù)。參考文獻(xiàn)：1ShekFW，BenyonRC.Howcantransforminggrowthfactorbeta中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)ChinesePharmacologicalBulletin2010J

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