CEBPs及其調(diào)節(jié)的基因與大鼠肝再生相關(guān)性分析

1、wcjd 世界華人消化雜志 2007年 7月 18日 ; 15(20: 2186-2193 ISSN 1009-3079 CN 14-1260/R基礎(chǔ)研究 BASIC RESEARCHCEBPs及其調(diào)節(jié)的基因與大鼠肝再生相關(guān)性分析 王 望, 陳曉光, 徐存拴王望, 徐存拴, 河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 河南省新鄉(xiāng)市 453007陳曉光, 河南省科技部共建細(xì)胞分化調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 河南 省新鄉(xiāng)市 453007王望, 河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)在讀碩士研 究生, 主要從事肝再生分子機(jī)制的研究.電話:稿日期: 2007-04-24 接受日期: 2007-05-10

2、 Correlation analysis of CCAAT/ enhancer-binding proteins and their regulated genes with rat liver regenerationWang Wang, Xiao-Guang Chen, Cun-Shuang Xu Wang Wang, Cun-Shuang Xu, Life Science College of Henan Normal University, Xinxiang 453007, Henan Prov-ince, ChinaXiao-Guang Chen, Key Laboratory o

3、f Cell Differentiation and Regulation Co-construction from Science and Technol-ogy Department of Henan Province, Xinxiang 453007, He nan Province, ChinaCorrespondence to: Cun-Shuang Xu, Life Science Col-lege of Henan Normal University, 46 Jianshe East Road, Xinxiang 453007, Henan Province, China. xu

4、cs Received: 2007-04-24 Accepted: 2007-05-10AbstractAIM:To explore the effects on transcription levels of CCAAT/enhancer-binding proteins (CEBP genes and genes regulated in liver regeneration (LR.RESULTS: Twenty-seven genes correlated with LR, 11 of which were up-regulated, 6 down-reg-ulated, and 10

5、 that were up-regulated at certain time points but down-regulated at others. The up-regulated range was 2 to 128 fold of the com-parison group, while the down-regulated range was 2 to 16 fold. The number of genes expressed in the LR initiation 0.5-4 hours after partial hepatectomy (PH, G 0/G1transit

6、ion (4-6 hours after PH, cell proliferation (6-66 hours after PH and cell differentiation and tissue structure reconstruction (72-168 hours after PH stages were 18, 3, 8 and 1, respectively. Total expres-sion times were 18, 11, 25 and 16, respectively, showing that the correlated genes were primar-i

7、ly expressed in the LR initiation stage. Genes were up-regulated 126 fold and down-regulated 76 fold, indicating that more genes were up-regulated than down-regulated in LR.CONCLUSION: CEBPs and their regulated genes are highly correlated with cell prolifera-tion, cell differentiation, cell apoptosi

8、s, inflam-mation, stress response, lipids metabolism and changes in the extracellular matrix.Key Words: Partial hepatectomy; Rat genome 230 2.0 chip; CCAAT/enhancer-binding proteins; Liver regeneration correlated genesWang W, Chen XG, Xu CS. Correlation analysis of CCAAT/enhancer-binding proteins an

9、d their regulated genes with rat hepatic regeneration. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2007;15(20:2186-2193摘要目的: 探討基因轉(zhuǎn)錄水平 CCAAT 增強(qiáng)子結(jié)合 蛋白 (CEBPs及其調(diào)節(jié)基因在肝再生 (LR中的 作用 . ® 背景資料肝臟具有很強(qiáng)的再生能力 , 大鼠部分肝切除模型被廣泛用于研究肝再 生 . 肝 再 生 涉及細(xì)胞激活 、 去分化 、 增殖及調(diào)控 、 再分化和組織結(jié)構(gòu)功能重建等生理生化過(guò)程 ,受到包括轉(zhuǎn)錄因子在內(nèi)的多種因素調(diào)控 .王望, 等. CEBPs及其調(diào)節(jié)的基因與大鼠

10、肝再生相關(guān)性分析 2187CEBPs 家族下游基因 . 然后將人和小鼠基因與 大鼠比對(duì) , 篩選出與大鼠不重復(fù)的人和小鼠基 因 . 再將他們與 Rat Genome 230 2.0芯片的檢 測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)確認(rèn) , 把其中表達(dá)上調(diào)或下調(diào) 2倍以上的基因視為有意義變化的大鼠同源基 因 . 用 Rat Genome 230 2.0 芯片檢測(cè)他們?cè)诖?鼠再生肝中的表達(dá)情況 , 用真 、 假手術(shù)比較方 法確定肝再生相關(guān)基因 .結(jié)果: 27個(gè)基因與肝再生相關(guān) , 其中 11個(gè)基因 表達(dá)上調(diào) , 6個(gè)基因表達(dá)下調(diào) , 10個(gè)基因在有 的時(shí)點(diǎn)表達(dá)上調(diào) , 有的時(shí)點(diǎn)表達(dá)下調(diào) (簡(jiǎn)稱上 /下調(diào)表達(dá) . 他們的上調(diào)

11、范圍為對(duì)照的 2-128倍 , 下調(diào)范圍為對(duì)照的 2-16倍 . 肝再生啟動(dòng) 部 分肝切除 (PH后 0.5-4 h、 G 0/G1過(guò)渡 (PH后 4-6 h 、 細(xì)胞增殖 (PH后 6-66 h 、 細(xì)胞分化和組織 結(jié)構(gòu)功能重建 (PH后 72-168 h 等 4個(gè)階段起始 表達(dá)的基因數(shù)分別為 18, 3, 8和 1; 基因的總表 達(dá)次數(shù)分別為 18, 11, 25和 16. 表明相關(guān)基因主 要在肝再生啟動(dòng)階段起始表達(dá) , 在不同階段發(fā) 揮作用 . 他們共表達(dá)上調(diào) 126次 , 下調(diào) 76次 . 表 明肝再生中表達(dá)上調(diào)基因多于表達(dá)下調(diào)基因 . 結(jié)論: CEBPs 及其調(diào)節(jié)的基因與肝再生中細(xì)

12、胞增殖 、 細(xì)胞分化 、 細(xì)胞凋亡 、 炎癥反應(yīng) 、 應(yīng)激反應(yīng) 、 脂類代謝和細(xì)胞外基質(zhì)變化等密 切相關(guān) .關(guān)鍵詞 : 部分肝切除; 大鼠基因組230 2.0芯片; CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白; 肝再生相關(guān)基因王望, 陳曉光, 徐存拴. CEBPs及其調(diào)節(jié)的基因與大鼠肝再生相 關(guān)性分析. 世界華人消化雜志 2007;15(20:2186-21930 引言部分肝切除 (partial hepatectomy, PH 1或肝損傷 后 , 殘肝細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞增殖 (細(xì)胞數(shù)目增加 和肥 大 (細(xì)胞體積增加 由基本不生長(zhǎng)狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榭?速生長(zhǎng)狀態(tài)以補(bǔ)償丟失、損傷的肝組織 2-3, 這 個(gè)過(guò)程稱為肝再生 (li

13、ver regeneration, LR 2. 同 時(shí) , 機(jī)體可精確感知再生肝的大小 , 適時(shí)停止再 生 4. 通常 , 根據(jù)細(xì)胞的生理活動(dòng)將肝再生分為 啟動(dòng) (PH后 0.5-4 h 、 G 0/G1過(guò)渡 (PH后 4-6 h 、細(xì) 胞增殖 (PH后 6-66 h 、細(xì)胞分化和組織結(jié)構(gòu)功 能重建 (PH后 72-168 h 等 4個(gè)階段 5. 根據(jù)時(shí)間 進(jìn)程分為早期 (PH后 0.5-4 h 、前期 (PH后 6-12 h 、中期 (PH后 16-66 h 、后期 (PH后 72-168 h 等 4個(gè)時(shí)期 6. 涉及細(xì)胞激活、去分化、增殖及 調(diào)控、再分化、組織結(jié)構(gòu)和功能重建等生理生化過(guò)程

14、7, 受到包括轉(zhuǎn)錄因子在內(nèi)的多種因素調(diào) 控 8. 研究表明 , CCAAT 增強(qiáng)子結(jié)合蛋白 (CCAAT/enhancer-binding proteins, CEBPs 家族轉(zhuǎn)錄因子 CEBP , CEBP b, CEBP g, CEBP 和 CEBP 均含 堿性亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域 , 在 C 端有 DNA 結(jié)合元 件和異源或同源亮氨酸拉鏈元件 . CEBP 通過(guò) 調(diào)節(jié) scd1, cd36和 cds19, CEBP b通過(guò)調(diào)節(jié) afp 10, a2m 11, gsta212, cat 13, il6, col1a2和 col2a114, CEBP g通過(guò)調(diào)節(jié) ercc5和 xrcc115,

15、CEBP 通過(guò)調(diào) 節(jié) ccl216, CEBP通過(guò)調(diào)節(jié) il6, ccl2, ccl4, csf1r17, itgam, bcl2l1, bcl2, ccna2, ccnd2, ccne1和 cdk418, 從而在細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡、炎癥 反應(yīng)、應(yīng)激反應(yīng)、脂類代謝和細(xì)胞外基質(zhì)變化 等方面發(fā)揮重要作用 . 為在基因轉(zhuǎn)錄水平 19-20了 解 CEBPs 及其調(diào)節(jié)基因與肝再生的相關(guān)性 , 我 們用含 42個(gè) CEBPs 及其調(diào)節(jié)基因的 Rat Genome 230 2.0芯片 21檢測(cè)了大鼠 2/3肝切除后再生肝基 因表達(dá)情況 , 并初步分析了他們?cè)诟卧偕械?表達(dá)方式與肝再生的相關(guān)性和

16、作用 22. 1 材料和方法1.1 材料 SD 純系大鼠由河南師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 中心提供 , 體質(zhì)量 200-250 g, 將大鼠隨機(jī)分組 , 每組 6只 , 雌雄各半 . 對(duì)照組材料為正常成年大 鼠肝 . 按 Higgins et al1方法切除大鼠肝左葉和中 葉后恢復(fù) 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 18, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 60, 66, 72, 96, 120, 144和 168 h時(shí)再生 肝 . 于相應(yīng)恢復(fù)時(shí)間頸椎脫臼處死動(dòng)物 , 切取再 生肝置 4 PBS 中涮洗 3次 , 從右葉再生肝中部 取 100-200 mg 組織 ,

17、將每組的 6個(gè)樣品混合后放 到一起 (總肝量為 0.1-0.2 g ×6 = 1-2 g, 于 -80 保存?zhèn)溆?. 假手術(shù) (sham-operation, SO 組除不 切除肝葉外 , 其他同部分肝切除組 . 實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格 遵循中國(guó)動(dòng)物保護(hù)法 . 總 RNA 提取按 Invitrogen 公司的 TRIzol 試劑盒操作程序進(jìn)行 23. 總 RNA 純化按 Qiagen 公司的 RNeasy mini 試劑盒操作程 序進(jìn)行 24. 用瓊脂糖凝膠電泳 (180 V, 0.5 h 檢測(cè) 總 RNA 的 28S 和 18S 比例 ; 其亮度約為 2 1; 在 260/280 nm波長(zhǎng)下測(cè)

18、定總 RNA 濃度和純度 25. 1.2 方法 cDNA, cRNA 合成按 Affymetrix 公司 方法進(jìn)行 26. 合成 cDNA 時(shí) , 模板量為 1-8 g 總 RNA. 合成生物素標(biāo)記的 cRNA 時(shí) , 取 12 L 上 述 cDNA 溶液作模板 . cDNA, cRNA 純化按基因 芯片分析樣品純化操作程序進(jìn)行 27. 兩者的濃 度、純度和質(zhì)量檢測(cè)方法同上 25. 1 g/L的 cRNA 15 L, 5×片段化緩沖液 6 L, 無(wú) RNA 酶水 9 L 研發(fā)前沿再生生物學(xué)和再 生醫(yī)學(xué)已成為當(dāng) 今生物學(xué)和醫(yī)學(xué) 的 研 究 熱 點(diǎn) . 其 中 , 肝再生的功能 基因組學(xué)

19、 、 蛋白 質(zhì)組學(xué) 、 細(xì)胞組 學(xué)等研究正在廣 泛深入地進(jìn)行 . 相關(guān)報(bào)道 研究表明 , CEBPs家族轉(zhuǎn)錄因子對(duì) 細(xì)胞增殖和細(xì)胞 分化等相關(guān)基因 有調(diào)控作用 , 肝再 生亦涉及 CEBPs 對(duì)細(xì)胞增殖和細(xì) 胞分化等相關(guān)基 因的調(diào)節(jié) . 混勻 , 94溫浴 35 min, 得到長(zhǎng)度為 35-200 bp 的cRNA 片段 . 按 Affymetrix 公司提供的配方配制雜交液 , 然后將雜交液加至經(jīng)預(yù)雜交處理的 RatGenome 230 2.0芯片中 , 于 45 60 r/min雜交 16h, 吸去雜交液 , 用 GeneChip 全自動(dòng)洗滌工作站450(Affymetrix公司 , US

20、A 洗滌和染色芯片 . 用高分辨芯片掃描儀 3000(Affymetrix公司 , USA掃描芯片 , 獲得基因表達(dá)信號(hào)值 21. 用 GCOS1.2軟件讀取、處理信號(hào)值數(shù)據(jù) , 獲得歸一化后的信號(hào)值、信號(hào)檢出 (P, A, M 以及實(shí)驗(yàn)和對(duì)照組的比值 21. 為減少芯片分析誤差 , 用 Rat Genome230 2.0芯片對(duì)每個(gè)時(shí)點(diǎn)再生肝重復(fù)檢測(cè) 3次 . 把3次檢測(cè)中總比值最大的那次結(jié)果視為最接近真實(shí) (R m , 同時(shí) , 也將 3次檢測(cè)中 3個(gè)持家基因(b-actin, hexokinase和 glyseraldehyde-3-phosphatedehydrogenase 平均值最接

21、近 1的那次結(jié)果視作最接近真實(shí) (R h . 將前者比后者 , 得到矯正系數(shù) ,用矯正系數(shù)乘以后者每個(gè)時(shí)點(diǎn)每個(gè)基因?qū)?yīng)的比值 , 得到用于分析基因表達(dá)模式和作用的基因相對(duì)表達(dá)豐度 . 為克服芯片分析誤差導(dǎo)致的基因不合常規(guī)和 /或不合邏輯的表達(dá)變化 , 又根據(jù)肝再生中肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)程 , 用合理化分析軟件 (RAP整理部分肝切除后 0-4 h,6-12 h, 12-24 h 的基因表達(dá)變化值使之更具科學(xué)性 . 然后用 GeneMath, GeneSpring, MicrosoftExcel 等分析軟件對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和聚類分析 21,27-28.將查出的與肝再生相關(guān)的 C E B P

22、s 家族轉(zhuǎn)關(guān)的文獻(xiàn) , 從中得出大鼠、小鼠和人的 CEBPs家族下游基因 . 然后將人和小鼠基因與大鼠比對(duì) , 篩選出與大鼠不重復(fù)的人和小鼠基因 . 再將他們與 Rat Genome 230 2.0芯片的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)確認(rèn) , 把其中表達(dá)上調(diào)或下調(diào) 2倍以上的基因視為有意義變化 28的大鼠同源基因 . 用上述芯片對(duì)再生肝進(jìn)行檢測(cè) , 將 3次檢驗(yàn)結(jié)果相同或相似 , 至少在部分肝切除后一個(gè)時(shí)點(diǎn)表達(dá)上調(diào)或下調(diào) 2倍以上 , 部分肝切除組與假手術(shù)組差異顯著 (P <0.05或極顯著 (P 0.01 的基因視為肝再生相關(guān)基因 .2 結(jié)果2.1 肝再生中 C E B P s 及其調(diào)節(jié)基因的表達(dá)

23、查NCBI, RGD網(wǎng)站資料表明 , 46個(gè)基因受 CEBPs 調(diào)節(jié) ; 查 Rat Genome 230 2.0芯片資料表明 , 該芯片含上述 42個(gè)基因 , 其中 27個(gè)基因至少在部分肝 切除 (partial hepatectomy, PH后一個(gè)時(shí)點(diǎn)發(fā)生了 有意義表達(dá)變化 , 部分肝切除組與 SO 組有顯著 或極顯著差異 , 3次 Rat Genome 230 2.0芯片檢測(cè) 結(jié)果具有可重復(fù)性 . 因此 , 初步確認(rèn)這些基因與 LR 相關(guān) . 其中 , 11個(gè)基因表達(dá)上調(diào) , 6個(gè)基因表達(dá) 下調(diào) , 10個(gè)基因在有的時(shí)點(diǎn)表達(dá)上調(diào) , 有的時(shí)點(diǎn) 表達(dá)下調(diào) (簡(jiǎn)稱上 /下調(diào)表達(dá) . 他們的上

24、調(diào)范圍為 對(duì)照的 2-128倍 , 下調(diào)范圍為對(duì)照的 2-16倍 (表 1. 分析表明 , 肝再生各時(shí)點(diǎn)起始上調(diào)和下調(diào) 及總表達(dá)的基因數(shù)為 : 0.5 h 時(shí)均為 6和 3; 1 h 時(shí) 3和 1, 7和 2; 2 h時(shí) 2和 0, 7和 1; 4 h時(shí) 1和 2, 6和 3; 6 h時(shí) 0和 0, 7和 4; 8 h時(shí) 0和 1, 5和 5; 12 h時(shí) 0和 0, 4和 5; 16 h時(shí) 1和 0, 6和 5; 18 h時(shí) 0和 2, 7和 7; 24 h時(shí) 1和 0, 6和 6; 30 h時(shí) 1和 0, 4和 2; 36 h時(shí) 0和 0, 5和 5; 42 h時(shí) 1和 0, 5和 1;

25、48 h時(shí) 0和 0, 8和 5; 54 h時(shí) 0和 0, 7和 4; 60 h時(shí) 0和 1, 7和 5; 66 h時(shí) 0和 0, 7和 2; 72 h 時(shí) 1和 0, 7和 4; 96 h時(shí) 0和 0, 4和 3; 120 h時(shí) 0和 0, 6和 1; 144 h時(shí) 0和 0, 1和 2; 168 h時(shí) 0和 0, 3和 1. 肝 再生中基因起始表達(dá)的總體情況是 : 17個(gè)基因 起始上調(diào) , 10個(gè)基因起始下調(diào) . 其中 , 在啟動(dòng)階 段 (PH后 0.5-4 h12個(gè)基因起始上調(diào) , 6個(gè)基因起 始下調(diào) ; G 0/G1過(guò)渡階段 (PH后 4-6 h1個(gè)基因起 始上調(diào) , 2個(gè)基因起始下調(diào)

26、 ; 細(xì)胞增殖階段 (PH后 6-66 h4個(gè)基因起始上調(diào) , 4個(gè)基因起始下調(diào) ; 細(xì) 胞再分化和組織結(jié)構(gòu)功能重建階段 (PH后 72-168 h1個(gè)基因起始上調(diào) . 肝再生中基因表達(dá)的總體 情況是 : 共表達(dá)上調(diào) 126次 , 下調(diào) 76次 . 其中 , 肝 再生啟動(dòng)階段 (PH后 0.5-4 h基因上調(diào) 26次 , 下調(diào) 9次 ; G 0/G1過(guò)渡階段 (PH后 4-6 h 基因上調(diào) 13次 , 下調(diào) 7次 ; 細(xì)胞增殖階段 (PH后 6-66 h 基因上調(diào) 79次 , 下調(diào) 56次 ; 細(xì)胞再分化和組織結(jié)構(gòu)功能重 建階段 (PH后 72-168 h 基因上調(diào) 21次 , 下調(diào) 11次

27、(圖 1.2.2 CEBPs 及其調(diào)節(jié)的基因與肝再生相關(guān)性 根 據(jù)功能和表達(dá)變化將 CEBPs 及其調(diào)節(jié)的 22個(gè)基 因分為 7組 : (1細(xì)胞增殖相關(guān)基因 . 其中 , cebp 在 4-66 h 表達(dá)下調(diào) , 其調(diào)節(jié)的 scd1在 1-6 h 表達(dá)上 調(diào) , 48和 66 h表達(dá)下調(diào) . cebpb在 0.5-8 h表達(dá)上調(diào) , 他調(diào)節(jié)的 a2m 在 0.5-24 h表達(dá)上調(diào) , afp在 6-12 h表 達(dá)下調(diào) , 54-72 h表達(dá)上調(diào) . cebp在 16-120 h表達(dá) 下調(diào) , 其調(diào)節(jié)的 ccna2在 18-72 h 表達(dá)上調(diào) , ccnd2在 42 h 表達(dá)上調(diào) , ccne1

28、在 8-72 h 表達(dá)上調(diào) , cdk4在 24和 66 h表達(dá)上調(diào) (圖 2A; (2細(xì)胞分化相關(guān)基 因 . 其中 , cebp及其調(diào)節(jié)的 scd1表達(dá)同上 . cebp調(diào)節(jié)的 il6在 2-8, 18, 48, 60, 96 h 表達(dá)上調(diào) , 在 36 創(chuàng)新盤(pán)點(diǎn)用 高 通 量 R a t Genome 230 2.0基因表達(dá)譜芯片 分析了大鼠 2/3肝 切除后 CEBPs 及 其調(diào)節(jié)的基因在 肝再生中表達(dá)情 況 , 發(fā)現(xiàn)上述基因 中有 27個(gè)基因與 肝再生相關(guān) .表 1 CEBPs及其調(diào)節(jié)的22個(gè)基因在肝再生中表達(dá)豐度 黑體字: 轉(zhuǎn)錄因子; 非黑體字: 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)的基因. 應(yīng)用要點(diǎn)根據(jù)結(jié)

29、果進(jìn)一步 研究 CEBPs 及其 調(diào)控的基因在肝 再生中的作用和 機(jī)制 .和 72 h 表達(dá)下調(diào) , itgam 在 72和 120 h 表達(dá)上調(diào) (圖 2B; (3細(xì)胞凋亡相關(guān)基因 . 其中 , cebp 及其調(diào) 節(jié)的 scd1表達(dá)同上 . cebpb調(diào)節(jié)的 gsta2在 8-24 h表 達(dá)下調(diào) , 在 30, 42, 96 h表達(dá)上調(diào) . cebpg在 60 h表 達(dá)下調(diào) , 其調(diào)節(jié)的 ercc5在 30 h表達(dá)上調(diào) . cebp在 1-72 h表達(dá)上調(diào) , 其調(diào)節(jié)的 ccl2在 12-120 h表達(dá)上 調(diào) . cebp 調(diào)節(jié)的 bcl2在 18-72 h 表達(dá)下調(diào) , bcl2l1在 0

30、.5 h 表達(dá)下調(diào) , 在 6 h 表達(dá)上調(diào) (圖 2C; (4炎 癥反應(yīng)相關(guān)基因 . 其中 , cebp b及其調(diào)節(jié)的 a2m, cebp 及其調(diào)節(jié)的 ccl2, cebp 及其調(diào)節(jié)的 ccl2和 itgam 表達(dá)同上 . cebp調(diào)節(jié)的 ccl4在 18, 54, 96 h表 達(dá)下調(diào) , csf1r在 16, 30, 42, 96 h表達(dá)上調(diào) (圖 2D; (5應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因 . cebp b及其調(diào)節(jié)的 gsta2和 il6表達(dá)同上 , cat在 0.5 h表達(dá)上調(diào) . cebpg及其調(diào)節(jié) 的 ercc5表達(dá)同上 , xrcc1在 36, 48, 60 h 表達(dá)上調(diào) , 在 1和 144

31、-168 h 表達(dá)下調(diào) (圖 2E; (6脂類代謝相 關(guān)基因 . cebp 及其調(diào)節(jié)的 scd1表達(dá)同上 , cd36在 0.5-72 h 表達(dá)下調(diào) , cds1在 4-18 h 表達(dá)下調(diào) (圖 2F; (7細(xì)胞外基質(zhì)變化相關(guān)基因 . cebp b調(diào)節(jié)的 col1a2在 16-24 h 和 66-168 h 表達(dá)上調(diào) , col2a1在 2和 54 h表達(dá)上調(diào) , 在 24 h表達(dá)下調(diào) (圖 2G. 3 討論我們研究了 CEBP 家族轉(zhuǎn)錄因子 CEBP , CEBPb, CEBP g, CEBP 和 CEBP 及其調(diào)節(jié)的基因與肝 再生相關(guān)性 . 其中 , cebp 通過(guò)促進(jìn) cds1, cd36和 scd1轉(zhuǎn)錄促進(jìn)脂類合成9,29. cds1在肝再生的 4-18h, cd36在 0.5-72 h、 scd1在 48和 66 h表達(dá)下調(diào) , 可 能受 cebp 在 4-66 h 表達(dá)下調(diào)影響 , 并推測(cè)肝再 生早期、前期和中期的脂類合成受抑制 . 此外 , scd1還能通過(guò)改變細(xì)胞膜流動(dòng)性和影響信號(hào)轉(zhuǎn) 導(dǎo)抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞分 化 30. cebp在 4-66 h及 scd1在 48和 66 h表達(dá)下調(diào)可能與肝再生中期的細(xì)胞增殖和分化減弱、細(xì) 胞凋亡起始有