小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型

1、CompanyLOGO小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型SS的基礎(chǔ)研究，離不開一個(gè)恰當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型。的基礎(chǔ)研究，離不開一個(gè)恰當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型。SS小鼠模型在研究小鼠模型在研究SS病理、藥效等多病理、藥效等多方面都為一個(gè)強(qiáng)有為的工具。因此在過去的幾十年里，方面都為一個(gè)強(qiáng)有為的工具。因此在過去的幾十年里，SS小鼠模型受到廣泛關(guān)注以小鼠模型受到廣泛關(guān)注以及深入的研究，并取得一定的成果。及深入的研究，并取得一定的成果。小鼠與人的遺傳相似度十分高，并且其很適合做基因克隆與轉(zhuǎn)基因修改，因此可以用小鼠與人的遺傳相似度十分高，并且其很適合做基因克隆與轉(zhuǎn)基因修改，因此可以用小鼠模

2、型闡述人類小鼠模型闡述人類SS等多種疾病發(fā)生機(jī)制。等多種疾病發(fā)生機(jī)制。但是，使用小鼠來模擬人類但是，使用小鼠來模擬人類SS的發(fā)生亦存在許多不足；例如，人與小鼠的居住環(huán)境的發(fā)生亦存在許多不足；例如，人與小鼠的居住環(huán)境差異，進(jìn)化史的不同，人與小鼠的固有免疫和適應(yīng)性免疫間存在差異等。所以在我們差異，進(jìn)化史的不同，人與小鼠的固有免疫和適應(yīng)性免疫間存在差異等。所以在我們使用小鼠模擬人類使用小鼠模擬人類SS發(fā)生時(shí)，須注意發(fā)生時(shí)，須注意SS小鼠僅能反映出小鼠僅能反映出SS的某一些或某一類的特征，的某一些或某一類的特征，而不能表現(xiàn)出其整個(gè)發(fā)病過程的特征。而不能表現(xiàn)出其整個(gè)發(fā)病過程的特征。此外，由此外，由小鼠模

3、型所得出的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)參考各品系小鼠不同的遺傳背景及各自特點(diǎn)進(jìn)小鼠模型所得出的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)參考各品系小鼠不同的遺傳背景及各自特點(diǎn)進(jìn)行綜合分析行綜合分析，這樣得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果才真實(shí)可靠。下面主要從，這樣得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果才真實(shí)可靠。下面主要從SS自發(fā)小鼠模型，基因自發(fā)小鼠模型，基因工程工程SS小鼠模型，實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)型小鼠模型，實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)型SS小鼠模型三方面論述。小鼠模型三方面論述。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：許多許多SS自發(fā)模型小鼠都起源于非爬胖糖尿病小鼠自發(fā)模型小鼠都起源于非爬胖糖尿病小鼠(NOD小鼠小鼠),其中包括其中包括N0D.B10-H26小鼠小鼠，C57BL/6

4、小鼠小鼠，N0D-AeclAec2小鼠小鼠；其他品系的小鼠有其他品系的小鼠有NFS/sld小小鼠鼠，IQI/Jic小鼠小鼠以以及及Aly/aly小鼠。小鼠。 1.1.非肥胖糖尿病小鼠非肥胖糖尿病小鼠(NOD小鼠小鼠)NOD小鼠不僅是小鼠不僅是I型糖尿病自發(fā)模型小鼠型糖尿病自發(fā)模型小鼠，同時(shí)也是同時(shí)也是SS的自發(fā)模型小鼠。的自發(fā)模型小鼠。其自發(fā)其自發(fā)I型糖尿病的主要機(jī)理是型糖尿病的主要機(jī)理是，NOD小鼠小鼠胰胰腺遭到腺遭到淋巴淋巴細(xì)胞的細(xì)胞的浸潤(rùn)浸潤(rùn)而導(dǎo)致而導(dǎo)致胰腺胰腺炎炎引起引起胰腺胰腺細(xì)胞破壞細(xì)胞破壞，最終導(dǎo)致膜島素的分泌不足。最終導(dǎo)致膜島素的分泌不足。此外此外，NOD小鼠具有獨(dú)特的主要組織

5、相容性復(fù)合體小鼠具有獨(dú)特的主要組織相容性復(fù)合體(MHC)II類分子類分子H-2g7而導(dǎo)致而導(dǎo)致NOD小鼠疾病易感性增加。序列位點(diǎn)標(biāo)記分析顯示小鼠疾病易感性增加。序列位點(diǎn)標(biāo)記分析顯示NOD小鼠小鼠I型糖尿病的發(fā)生與型糖尿病的發(fā)生與MHC I-Ag7密切相關(guān)密切相關(guān)，但單個(gè)但單個(gè)MHC I-Ag7不足不足以以引起引起I型糖尿病的發(fā)生型糖尿病的發(fā)生，表明亦有表明亦有其他相關(guān)基因位點(diǎn)與自身免疫性糖尿病的發(fā)生有關(guān)其他相關(guān)基因位點(diǎn)與自身免疫性糖尿病的發(fā)生有關(guān)。從從4周齡開始周齡開始NOD小鼠胰腺中小鼠胰腺中CD4+T與與CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)明顯增加。然而，細(xì)胞浸潤(rùn)明顯增加。然而，NOD小小鼠胰腺破壞明顯，糖

6、尿病癥狀突出則發(fā)生在鼠胰腺破壞明顯，糖尿病癥狀突出則發(fā)生在14周齡左右。周齡左右。30周齡的雌性周齡的雌性NOD小小鼠發(fā)生糖尿病的概率為鼠發(fā)生糖尿病的概率為60-80%,而雄性而雄性NOD小鼠發(fā)生糖尿病的概率為小鼠發(fā)生糖尿病的概率為20-30%。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：1.1.非肥胖糖尿病小鼠非肥胖糖尿病小鼠(NOD小鼠小鼠)除了能夠在除了能夠在NOD小鼠小鼠胰腺胰腺中檢測(cè)到炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)中檢測(cè)到炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)，在外分泌腺中亦可發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)在外分泌腺中亦可發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)而導(dǎo)致淚腺炎與胞的浸潤(rùn)而導(dǎo)致淚腺炎與涎涎腺炎腺炎。淚腺炎與。淚腺炎與涎涎腺炎的發(fā)

7、生大約是在腺炎的發(fā)生大約是在12周齡左右。周齡左右。除了淚腺炎與除了淚腺炎與涎涎腺炎炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的病理與人類所發(fā)生的腺炎炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的病理與人類所發(fā)生的SS表現(xiàn)相似外表現(xiàn)相似外，NOD小鼠小鼠血清中亦能產(chǎn)生多種與血清中亦能產(chǎn)生多種與SS發(fā)生相關(guān)的自身抗體發(fā)生相關(guān)的自身抗體，例如抗核抗體例如抗核抗體(ANA)，抗抗SSA/Ro，抗抗SSB/La，抗抗120KDa-胞襯蛋白抗體胞襯蛋白抗體，抗毒抗毒蕈蕈堿受體堿受體3抗體抗體以及胰島以及胰島細(xì)胞自身抗體細(xì)胞自身抗體等。等。此外此外，據(jù)報(bào)道據(jù)報(bào)道NOD小鼠血清及唾液腺中亦能找到一小鼠血清及唾液腺中亦能找到一些些與與SS發(fā)生相關(guān)的細(xì)胞因子發(fā)生相關(guān)的細(xì)胞

8、因子，例例如如IL-10，INF-，IL-7，MSCF，IL-17，IL-11，IL-5以及以及IL-8。由于由于NOD小鼠小鼠以以上發(fā)上發(fā)病病機(jī)制與人類高度相似機(jī)制與人類高度相似，故其被作為一種主要的模型運(yùn)用于故其被作為一種主要的模型運(yùn)用于SS的研究的研究。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：1.2.N0D.B 10-H2b小鼠小鼠N0D.B 10-H2b小鼠小鼠主要用于原發(fā)性主要用于原發(fā)性SS的研究的研究。N0D.B 10-H2b小鼠小鼠的最大特點(diǎn)便是的最大特點(diǎn)便是不再有不再有I型糖尿病的發(fā)生型糖尿病的發(fā)生，而僅表現(xiàn)出而僅表現(xiàn)出SS。因此因此N0D.B 10

9、-H2b小鼠小鼠SS發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)生發(fā)展過程中將不再受將不再受I型糖尿病的影響。型糖尿病的影響。與人體的與人體的SS的發(fā)生相類似的發(fā)生相類似，N0D.B 10-H2b小鼠小鼠SS的發(fā)生主要表現(xiàn)為的發(fā)生主要表現(xiàn)為B淋巴淋巴細(xì)胞的異細(xì)胞的異常活躍常活躍，刺激刺激B細(xì)胞的異常增殖細(xì)胞的異常增殖，產(chǎn)生過多的自身抗體。產(chǎn)生過多的自身抗體。有學(xué)者通過應(yīng)用中華眼鏡蛇蛇毒因子干預(yù)有學(xué)者通過應(yīng)用中華眼鏡蛇蛇毒因子干預(yù)N0D.B 10-H2b小鼠以小鼠以探究補(bǔ)體在探究補(bǔ)體在N0D.B 10-H2b小鼠小鼠SS的發(fā)生中所起的作用發(fā)現(xiàn)的發(fā)生中所起的作用發(fā)現(xiàn)，中華眼鏡蛇蛇毒因子由于能夠特異性阻斷中華眼鏡蛇蛇毒因子由于

10、能夠特異性阻斷C3分子而降低小鼠外分泌腺腺體淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)分子而降低小鼠外分泌腺腺體淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)以以及結(jié)核抗體及結(jié)核抗體(ANA)的表達(dá)水平。的表達(dá)水平。亦有學(xué)者運(yùn)用亦有學(xué)者運(yùn)用N0D.B 10-H2b小鼠小鼠探究性激素在探究性激素在SS發(fā)病過程中所起作用發(fā)病過程中所起作用，表明卵巢切表明卵巢切除的除的N0D.B 10-H2b小鼠小鼠患患SS的幾率明顯上升且癥狀表現(xiàn)突出的幾率明顯上升且癥狀表現(xiàn)突出，經(jīng)激素替代療法后可經(jīng)激素替代療法后可得到明顯的改善。得到明顯的改善。此外有報(bào)道顯示表沒食子兒茶沒食子酸醋及綠茶提取物皆能改善此外有報(bào)道顯示表沒食子兒茶沒食子酸醋及綠茶提取物皆能改善NOD與與N0D

11、.B 10-H2b小鼠小鼠的的SS。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：1.3.NOD其他衍生雜交小鼠其他衍生雜交小鼠許多其他許多其他NOD衍生雜交小鼠被用來檢測(cè)某些特定的基因與蛋白在原發(fā)性衍生雜交小鼠被用來檢測(cè)某些特定的基因與蛋白在原發(fā)性SS發(fā)病機(jī)制發(fā)病機(jī)制的作用。的作用。NOD.IFN-/-與與NOD.IFN- R-/-小鼠小鼠外分泌腺并沒有外分泌功能的損傷外分泌腺并沒有外分泌功能的損傷，表明表明IFN-是是引發(fā)上皮細(xì)胞損傷的關(guān)鍵因素。引發(fā)上皮細(xì)胞損傷的關(guān)鍵因素。NOD Ig-/-小鼠被用來研究小鼠被用來研究B淋巴淋巴細(xì)胞與自身抗體在引起細(xì)胞與自身抗體在引起

12、SS外分泌腺外分泌功能下降外分泌腺外分泌功能下降的機(jī)理。的機(jī)理。NOD.IL4-/-小鼠被用來探究小鼠被用來探究TH1與與TH2在引起在引起SS唾液腺炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)與唾液腺外分唾液腺炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)與唾液腺外分泌功能降低所起到的作用泌功能降低所起到的作用，結(jié)果表明結(jié)果表明，雖然在雖然在NOD小鼠中可見到明顯的口腔干燥表現(xiàn)小鼠中可見到明顯的口腔干燥表現(xiàn)以以及唾液腺中明顯的及唾液腺中明顯的T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，浸潤(rùn)，但在但在NOD.IL4-/-小鼠并沒有出現(xiàn)口腔干燥的癥狀小鼠并沒有出現(xiàn)口腔干燥的癥狀，表明表明TH1與與TH2在引起在引起SS小鼠小鼠口口腔干燥起到?jīng)Q定作用。腔干燥起到?jīng)Q定作用。小鼠轉(zhuǎn)

13、基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：1.4.NFS/sld 小鼠小鼠基因突變基因突變NFS/sld小鼠具有抑制舌下腺分化的常染色體隱性基因小鼠具有抑制舌下腺分化的常染色體隱性基因，能夠影響腺體中腺能夠影響腺體中腺泡細(xì)胞分化成粘液分泌細(xì)胞。泡細(xì)胞分化成粘液分泌細(xì)胞。NFS/sld小鼠模型小鼠模型-胞襯蛋白的異常水解是引起小鼠唾液腺損傷的最主要原因。胞襯蛋白的異常水解是引起小鼠唾液腺損傷的最主要原因。胸腺胸腺切除的切除的NFS/sld小鼠出現(xiàn)小鼠出現(xiàn)-胞襯蛋白活化胞襯蛋白活化，在出生后在出生后3天即可出現(xiàn)天即可出現(xiàn)SS樣表現(xiàn)樣表現(xiàn)，并且其并且其淋淋巴巴細(xì)胞的浸潤(rùn)僅局限于外

14、分泌腺。細(xì)胞的浸潤(rùn)僅局限于外分泌腺。浸潤(rùn)的淋浸潤(rùn)的淋巴巴細(xì)胞主要為細(xì)胞主要為CD4+T淋淋巴巴細(xì)胞細(xì)胞，而見少而見少量的量的CD8+T淋淋巴細(xì)胞與巴細(xì)胞與B220+B淋淋巴巴細(xì)胞?；罨募?xì)胞?；罨腃D4+T淋淋巴巴細(xì)胞則導(dǎo)致唾液腺中細(xì)胞則導(dǎo)致唾液腺中IFN-，IL-2，IL-10和和IL-12p40 mRNA的表達(dá)升高。的表達(dá)升高。NFS/sld小鼠外分泌腺中亦能檢測(cè)到導(dǎo)管上皮細(xì)胞抗體。小鼠外分泌腺中亦能檢測(cè)到導(dǎo)管上皮細(xì)胞抗體。NFS/sld小鼠體小鼠體內(nèi)內(nèi)檢測(cè)到的檢測(cè)到的120千道爾頓器官特異性的抗原與人體內(nèi)的千道爾頓器官特異性的抗原與人體內(nèi)的-胞襯蛋白序列是相一致的。但是當(dāng)利用胞襯蛋白序

15、列是相一致的。但是當(dāng)利用免疫免疫熒熒光標(biāo)記法檢測(cè)光標(biāo)記法檢測(cè)SS患者血清時(shí)患者血清時(shí)，抗抗-胞襯蛋白自身抗體與抗胞襯蛋白自身抗體與抗SSA/Ro自身抗體和自身抗體和抗抗SSB/La自身抗體相比靈敏度與特異性相差較大。自身抗體相比靈敏度與特異性相差較大。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：1.4.NFS/sld 小鼠小鼠到目前為止基因突變到目前為止基因突變NFS/sld小鼠己被運(yùn)用于多項(xiàng)研究小鼠己被運(yùn)用于多項(xiàng)研究SS發(fā)病機(jī)理的研究中。發(fā)病機(jī)理的研究中。利用常規(guī)劑量的利用常規(guī)劑量的2,3,7,8-四氯二苯并二惡英干預(yù)新生四氯二苯并二惡英干預(yù)新生NFS/sld小鼠小鼠

16、以以探討環(huán)境因素在探討環(huán)境因素在引發(fā)引發(fā)SS過程中所起到的作用過程中所起到的作用，結(jié)果顯示結(jié)果顯示2,3,7,8-四氯二苯并二惡英干預(yù)后的四氯二苯并二惡英干預(yù)后的NFS/sld小鼠唾液腺及其他外分泌腺體中能夠觀察到明顯的淋小鼠唾液腺及其他外分泌腺體中能夠觀察到明顯的淋巴巴細(xì)胞浸潤(rùn)。細(xì)胞浸潤(rùn)?？诜衬けＷo(hù)劑瑞己匹特口服粘膜保護(hù)劑瑞己匹特(a-(4-氯苯甲氯苯甲酰基?；?氨基氨基-1,2-二二氫氫-2-氧代氧代-4-喹啉喹啉丙酸丙酸)能夠能夠抑制抑制CD4+T的活性及的活性及TH1的產(chǎn)生從而降低了自身抗體的產(chǎn)生。的產(chǎn)生從而降低了自身抗體的產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)證實(shí)免疫抑制劑實(shí)驗(yàn)證實(shí)免疫抑制劑環(huán)孢霉素環(huán)孢霉素能

17、夠明顯改善能夠明顯改善NFS/sld小鼠眼干的癥狀。從金線吊烏龜小鼠眼干的癥狀。從金線吊烏龜中生物堿千金藤素能夠抑制中生物堿千金藤素能夠抑制NFS/sld小鼠中性粒細(xì)胞的活性小鼠中性粒細(xì)胞的活性，防止腺泡細(xì)胞損傷。防止腺泡細(xì)胞損傷。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：1.5.IQI/Jic 小鼠小鼠和和NOD小鼠一樣小鼠一樣，IQI/Jic小鼠也是從小鼠也是從ICR小鼠培育而來。小鼠培育而來。6月齡的月齡的IQI/Jic小鼠唾液腺小鼠唾液腺及淚腺中能夠見到明顯的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)灶及淚腺中能夠見到明顯的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)灶，并且在雌性并且在雌性IQI/Jic小鼠胸腺中小鼠胸

18、腺中B細(xì)胞數(shù)量細(xì)胞數(shù)量明明顯顯增多。增多。組織病理學(xué)發(fā)現(xiàn)組織病理學(xué)發(fā)現(xiàn)IQI/Jic小鼠不光在外分泌腺腺體中能見到明小鼠不光在外分泌腺腺體中能見到明顯的淋巴細(xì)胞顯的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)浸潤(rùn)，在在其他非分泌性器官中亦能見到顯著的淋其他非分泌性器官中亦能見到顯著的淋巴巴細(xì)胞浸潤(rùn)細(xì)胞浸潤(rùn)，例如腎臟、例如腎臟、胰腺、胰腺、肺臟等。值得肺臟等。值得注意的是在注意的是在IQI/Jic小鼠血清中僅能檢測(cè)到結(jié)核抗體的表達(dá)水平升高而自身抗小鼠血清中僅能檢測(cè)到結(jié)核抗體的表達(dá)水平升高而自身抗SSA/Ro與與SSB/La并沒有檢測(cè)到異常。并沒有檢測(cè)到異常。涎涎腺炎發(fā)生在雌性腺炎發(fā)生在雌性IQI/Jic小鼠的各年齡段小鼠的各年

19、齡段，且隨著小鼠年齡的增長(zhǎng)且隨著小鼠年齡的增長(zhǎng)涎涎腺炎癥狀逐漸腺炎癥狀逐漸加重加重；而雄性而雄性IQI/Jic小鼠小鼠涎涎腺炎的發(fā)病較輕且與年齡無關(guān)。與人體發(fā)生腺炎的發(fā)病較輕且與年齡無關(guān)。與人體發(fā)生SS特特征相似征相似，CD4+T細(xì)胞所造成的外分泌腺體破壞較輕細(xì)胞所造成的外分泌腺體破壞較輕，而而B220+B則能引起外分泌腺大范圍的炎則能引起外分泌腺大范圍的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。性細(xì)胞浸潤(rùn)。研研究究表明表明IQI/Jic小鼠體內(nèi)小鼠體內(nèi)T淋淋巴巴細(xì)胞活性的增強(qiáng)能夠增加器官內(nèi)細(xì)胞活性的增強(qiáng)能夠增加器官內(nèi)Klk-13(激激肽肽釋放酶釋放酶-13)的產(chǎn)生的產(chǎn)生，因此因此Klk-13的過多產(chǎn)生可能是的過多產(chǎn)生可

20、能是IQI/Jic小鼠出現(xiàn)小鼠出現(xiàn)SS樣表現(xiàn)的重要原因之一。樣表現(xiàn)的重要原因之一。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：1.5.IQI/Jic 小鼠小鼠盡管直到盡管直到8周齡左右雌性周齡左右雌性IQI/Jic小鼠小鼠頜頜下腺與雄性下腺與雄性IQI/Jic小鼠淚腺中才檢測(cè)到明顯的小鼠淚腺中才檢測(cè)到明顯的淋巴淋巴細(xì)胞細(xì)胞浸潤(rùn)，浸潤(rùn)，但大約在小鼠四周但大約在小鼠四周齡齡左右便可在左右便可在頜頜下腺與淚腺中檢測(cè)到下腺與淚腺中檢測(cè)到MHCII型分子型分子，CD11c+與與CD86+樹突狀細(xì)胞的存在樹突狀細(xì)胞的存在，表明樹突狀細(xì)胞與表皮細(xì)胞可能是參與激活表明樹突狀細(xì)胞與表皮細(xì)

21、胞可能是參與激活CD4+T細(xì)胞的關(guān)鍵因素。細(xì)胞的關(guān)鍵因素。胸腺切除的胸腺切除的IQI/Jic小鼠在出生后小鼠在出生后3天天便可便可出現(xiàn)嚴(yán)重的淚腺損傷出現(xiàn)嚴(yán)重的淚腺損傷，其損傷嚴(yán)重度與未進(jìn)其損傷嚴(yán)重度與未進(jìn)行胸腺切除術(shù)行胸腺切除術(shù)16周齡的周齡的IQI/Jic小鼠相仿小鼠相仿，這一結(jié)果表明年輕的這一結(jié)果表明年輕的IQI/Jic小鼠體內(nèi)的免疫小鼠體內(nèi)的免疫調(diào)節(jié)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞可能對(duì)細(xì)胞可能對(duì)IQI/Jic小鼠自身免疫小鼠自身免疫紊亂紊亂起到一定的調(diào)節(jié)作用。起到一定的調(diào)節(jié)作用。最近研最近研究究表明伴隨著表明伴隨著IQI/Jic小鼠小鼠頜頜下腺腺體淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)與功能的下腺腺體淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)與功能的紊亂

22、，紊亂，腺泡細(xì)腺泡細(xì)胞中存在著胞中存在著AQP5的分布異常。的分布異常。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型1.自發(fā)小鼠模型自發(fā)小鼠模型 ：1.6.Aly/aly 小鼠小鼠Aly/aly小鼠主要是由于常染色體純合子隱性基因突變而導(dǎo)致淋小鼠主要是由于常染色體純合子隱性基因突變而導(dǎo)致淋巴巴組織發(fā)育不全組織發(fā)育不全，表表現(xiàn)為系統(tǒng)性淋現(xiàn)為系統(tǒng)性淋巴巴結(jié)與集合淋結(jié)與集合淋巴巴結(jié)的缺失結(jié)的缺失，脾臟與胸腺結(jié)構(gòu)脾臟與胸腺結(jié)構(gòu)紊亂紊亂。Aly/aly小鼠在小鼠在14周周齡時(shí)開始自發(fā)的出現(xiàn)唾液腺齡時(shí)開始自發(fā)的出現(xiàn)唾液腺以以及及涎涎腺炎癥腺炎癥，并隨著年齡的増長(zhǎng)而逐漸加重。并隨著年齡的増長(zhǎng)而逐漸加重。組織病理學(xué)觀

23、察發(fā)現(xiàn)組織病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，其炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)主要其炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)主要以以CD4+T細(xì)胞為主細(xì)胞為主，浸潤(rùn)特征為由導(dǎo)浸潤(rùn)特征為由導(dǎo)管周圍區(qū)域向腺泡小葉逐漸擴(kuò)散。管周圍區(qū)域向腺泡小葉逐漸擴(kuò)散。Aly/aly小鼠的發(fā)病特點(diǎn)是小鼠的發(fā)病特點(diǎn)是淚腺浸潤(rùn)損傷情況淚腺浸潤(rùn)損傷情況比比唾液腺更為嚴(yán)重唾液腺更為嚴(yán)重，唾液腺中唾液腺中淋巴淋巴細(xì)胞細(xì)胞浸潤(rùn)損害較輕浸潤(rùn)損害較輕，有時(shí)甚至無淋有時(shí)甚至無淋巴巴細(xì)胞的浸潤(rùn)。細(xì)胞的浸潤(rùn)。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型2.基因工程模型小鼠：轉(zhuǎn)基因與基因敲除鼠基因工程模型小鼠：轉(zhuǎn)基因與基因敲除鼠 ：2.1.Id3 K0 小小鼠鼠轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Id3能夠抑制堿性螺旋

24、能夠抑制堿性螺旋-環(huán)環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子與螺旋結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子與DNA的結(jié)合從而的結(jié)合從而對(duì)對(duì)免免疫細(xì)胞及非免疫細(xì)胞的增殖及分化起到調(diào)節(jié)作用疫細(xì)胞及非免疫細(xì)胞的增殖及分化起到調(diào)節(jié)作用。Id3同時(shí)也參與同時(shí)也參與T淋己細(xì)胞的選擇與分化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。淋己細(xì)胞的選擇與分化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Id3 K0 小鼠的基本特征為免疫小鼠的基本特征為免疫系統(tǒng)的改變系統(tǒng)的改變，結(jié)外邊緣區(qū)結(jié)外邊緣區(qū)B細(xì)胞的增殖細(xì)胞的增殖，前前B細(xì)胞殘存細(xì)胞殘存以以及出現(xiàn)及出現(xiàn)MHC限制性。并且這限制性。并且這一品系的小鼠將出現(xiàn)與人類相類似的一品系的小鼠將出現(xiàn)與人類相類似的SS。Id3 K0 小鼠在八周齡唾液腺與淚腺導(dǎo)管和小鼠在八周齡唾液腺

25、與淚腺導(dǎo)管和血管周圍將出現(xiàn)血管周圍將出現(xiàn)淋巴淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)細(xì)胞的浸潤(rùn)，并且隨著年齡的增長(zhǎng)浸潤(rùn)情況將加重。并且隨著年齡的增長(zhǎng)浸潤(rùn)情況將加重。6至至12月齡時(shí)淚腺與唾液腺將只表現(xiàn)為月齡時(shí)淚腺與唾液腺將只表現(xiàn)為CD4+T淋巴淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)細(xì)胞的浸潤(rùn)，12月齡左右時(shí)可在血月齡左右時(shí)可在血清中檢測(cè)到抗清中檢測(cè)到抗SSA/Ro與與SSB/La抗體陽性。值得注意的是此系列小鼠抗體陽性。值得注意的是此系列小鼠早在早在6到到18周齡周齡時(shí)便會(huì)出現(xiàn)時(shí)便會(huì)出現(xiàn)SS樣表現(xiàn)樣表現(xiàn)，但此時(shí)小鼠的外分泌腺并未遭到破壞并且此時(shí)小鼠血清檢查但此時(shí)小鼠的外分泌腺并未遭到破壞并且此時(shí)小鼠血清檢查也未發(fā)現(xiàn)異常的自身抗體也未發(fā)現(xiàn)異常的

26、自身抗體，表明表明SS的發(fā)病還有其他因素起作用的發(fā)病還有其他因素起作用。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型2.基因工程模型小鼠：轉(zhuǎn)基因與基因敲除鼠基因工程模型小鼠：轉(zhuǎn)基因與基因敲除鼠 ：2.2.Ar K0 小鼠小鼠通常情況下通常情況下，女性出現(xiàn)自身免疫性疾病的概率與男性相比明顯要高女性出現(xiàn)自身免疫性疾病的概率與男性相比明顯要高，表明雌性激素表明雌性激素在自身免疫性疾病的發(fā)生過程中能起到重要作用。在自身免疫性疾病的發(fā)生過程中能起到重要作用。實(shí)驗(yàn)證明雌性激素替代療法能夠明顯降低卵巢切除小鼠實(shí)驗(yàn)證明雌性激素替代療法能夠明顯降低卵巢切除小鼠SS的發(fā)病?？诜菩约に啬艿陌l(fā)病。口服雌性激素能夠明顯減輕雌

27、激素缺乏小鼠夠明顯減輕雌激素缺乏小鼠T淋淋巴巴細(xì)胞所介導(dǎo)的細(xì)胞所介導(dǎo)的涎涎腺炎腺炎以以及防止及防止涎涎腺細(xì)胞的調(diào)亡。然腺細(xì)胞的調(diào)亡。然而而，尚沒有有關(guān)尚沒有有關(guān)SS小鼠雌性激素受體缺乏的報(bào)道。小鼠雌性激素受體缺乏的報(bào)道。芳香化酶芳香化酶(Ar)基因主要是調(diào)控雌性激素的產(chǎn)生基因主要是調(diào)控雌性激素的產(chǎn)生，芳香化酶基因敲除小鼠在芳香化酶基因敲除小鼠在12周齡時(shí)會(huì)周齡時(shí)會(huì)表現(xiàn)出表現(xiàn)出T淋淋巴巴細(xì)胞的異常增生并且出現(xiàn)細(xì)胞的異常增生并且出現(xiàn)SS相類似的表現(xiàn)相類似的表現(xiàn)。這一類小鼠發(fā)病的特征是這一類小鼠發(fā)病的特征是以以B220+細(xì)胞浸潤(rùn)為主細(xì)胞浸潤(rùn)為主，導(dǎo)致腺泡細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞導(dǎo)致腺泡細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞以以及唾液

28、腺功能的損傷。及唾液腺功能的損傷。Ar K0小鼠血清中抗小鼠血清中抗-胞襯蛋白抗體化及胞襯蛋白抗體化及-胞襯蛋白水解片段與胞襯蛋白水解片段與SS患者組織損傷相類患者組織損傷相類似。似。ArK0小鼠體內(nèi)并不能檢測(cè)到抗核抗體。小鼠體內(nèi)并不能檢測(cè)到抗核抗體。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型2.基因工程模型小鼠：轉(zhuǎn)基因與基因敲除鼠基因工程模型小鼠：轉(zhuǎn)基因與基因敲除鼠 ：2.2.Ar K0 小鼠小鼠在在ArK0小鼠體內(nèi)可發(fā)現(xiàn)輕度的脾腫大小鼠體內(nèi)可發(fā)現(xiàn)輕度的脾腫大，骨髓中見有異常的骨髓中見有異常的B淋淋巴巴細(xì)胞增生。對(duì)雌激細(xì)胞增生。對(duì)雌激素缺乏所引起的素缺乏所引起的SS小鼠發(fā)病機(jī)制的研究表明使用雌激素

29、小鼠發(fā)病機(jī)制的研究表明使用雌激素，大豆大豆異黃酮異黃酮等對(duì)這一類型等對(duì)這一類型的的SS進(jìn)行治療將有可能進(jìn)行治療將有可能有有效。效。Rahimi Darabad R等研究表明等研究表明雌激素缺乏的雌激素缺乏的Ar K0年輕小鼠雖然會(huì)影響其與雌激素年輕小鼠雖然會(huì)影響其與雌激素相關(guān)的淚腺特異性基因的表達(dá)相關(guān)的淚腺特異性基因的表達(dá)，但其并不會(huì)表現(xiàn)出但其并不會(huì)表現(xiàn)出SS相關(guān)表現(xiàn)相關(guān)表現(xiàn)。這。這些些研研究究也許表明也許表明Ar K0小鼠尤其是年輕小鼠淚腺功能與結(jié)構(gòu)的變化除了受雌性激素的不足影響外亦受小鼠尤其是年輕小鼠淚腺功能與結(jié)構(gòu)的變化除了受雌性激素的不足影響外亦受其他因素的影響。其他因素的影響。小鼠轉(zhuǎn)基

30、因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型3.實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)型小鼠模型：實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)型小鼠模型：3.1.Ro抗原免疫誘導(dǎo)抗原免疫誘導(dǎo)反復(fù)對(duì)反復(fù)對(duì)BALB/c小鼠腹腔進(jìn)行小鼠腹腔進(jìn)行60KDa Ro 自身抗原注射能夠引起表位擴(kuò)展自身抗原注射能夠引起表位擴(kuò)展，出現(xiàn)一些出現(xiàn)一些與與SS相類似的臨床表現(xiàn)。相類似的臨床表現(xiàn)。例如出現(xiàn)唾液腺遭到淋例如出現(xiàn)唾液腺遭到淋巴巴細(xì)胞的浸潤(rùn)細(xì)胞的浸潤(rùn)，口腔干燥等表現(xiàn)。其唾液腺中所浸潤(rùn)的淋口腔干燥等表現(xiàn)。其唾液腺中所浸潤(rùn)的淋巴巴細(xì)胞主要包括細(xì)胞主要包括:45%CD4+T細(xì)胞細(xì)胞,18%CD8+T細(xì)胞細(xì)胞,35%CD19+B細(xì)胞等。細(xì)胞等。小鼠小鼠38周齡時(shí)在小鼠體內(nèi)可檢測(cè)到抗周齡時(shí)在小鼠體內(nèi)

31、可檢測(cè)到抗SSA/Ro與抗與抗SSB/La抗體的產(chǎn)生。抗體的產(chǎn)生。到目前為止到目前為止Ro自身抗體引起小鼠自身抗體引起小鼠SS的發(fā)病機(jī)制尚有爭(zhēng)論。的發(fā)病機(jī)制尚有爭(zhēng)論。此類此類SS小鼠模型最大的小鼠模型最大的缺點(diǎn)是缺點(diǎn)是BALB/c小鼠需反復(fù)進(jìn)行腹腔注射小鼠需反復(fù)進(jìn)行腹腔注射Ro自身抗原五個(gè)月上才能成模自身抗原五個(gè)月上才能成模。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型3.實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)型小鼠模型：實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)型小鼠模型：3.1.Ro抗原免疫誘導(dǎo)抗原免疫誘導(dǎo)有有研究顯示使用自身抗原研究顯示使用自身抗原Ro60干預(yù)不同品系的小鼠干預(yù)不同品系的小鼠，所得到的結(jié)果不盡相同。所得到的結(jié)果不盡相同。SJL/J小鼠對(duì)小鼠對(duì)

32、Ro60的刺激并不產(chǎn)生免疫反應(yīng)的刺激并不產(chǎn)生免疫反應(yīng)；C57BL/6小鼠經(jīng)小鼠經(jīng)Ro60刺激后雖有自身刺激后雖有自身抗體的產(chǎn)生但并不能觀察到表位擴(kuò)展現(xiàn)象。抗體的產(chǎn)生但并不能觀察到表位擴(kuò)展現(xiàn)象。并且并且SJL/J，C57BL/6與與PL/J小鼠外分泌腺小鼠外分泌腺均均未出現(xiàn)淋未出現(xiàn)淋巴巴細(xì)胞浸潤(rùn)情況細(xì)胞浸潤(rùn)情況以以及外分泌腺及外分泌腺功能喪失。功能喪失。DBA-2與與BALB/c小鼠外分泌腺均能出現(xiàn)淋小鼠外分泌腺均能出現(xiàn)淋巴巴細(xì)胞的浸潤(rùn)細(xì)胞的浸潤(rùn)，但只有但只有BALB/c小鼠外分小鼠外分泌功能下降。泌功能下降。小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型小鼠轉(zhuǎn)基因干眼模型3.實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)型小鼠模型：實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)型小鼠模型：3.2.毒蕈堿受體毒蕈堿受體3肽肽段免疫誘導(dǎo)段免疫