水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量控制

1、. . . . 水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量控制探討天驥提綱一、 前言二、 水產(chǎn)飼料原料標準體系制定三、 水產(chǎn)飼料原料合格供應廠商評估與篩選四、 水產(chǎn)飼料原料檢化驗控制五、 水產(chǎn)飼料原料的接收六、 水產(chǎn)飼料原料的貯存七、 常用水產(chǎn)飼料原料的質(zhì)量控制一、前言隨著飼料工業(yè)的快速發(fā)展，規(guī)模飼料生產(chǎn)企業(yè)在飼料配方技術(shù)、加工設(shè)備與工藝上的差距越來越小，飼料產(chǎn)品同質(zhì)化趨勢越來越強，但企業(yè)經(jīng)營與產(chǎn)品質(zhì)量差異始終存在。據(jù)統(tǒng)計分析表明，飼料原料占飼料總成本的80%以上，飼料產(chǎn)品質(zhì)量差異40%70%來自原料質(zhì)量的差異。因此，某種意義上來說，經(jīng)營飼料就是經(jīng)營飼料原料。因水產(chǎn)動物對蛋白需求比畜禽高，蛋白原料為水產(chǎn)飼料主要原料，而

2、在08年的“三聚氰胺”風波中，飼料原料的摻雜使假現(xiàn)象已有暴露。能量原料中的油脂質(zhì)量也難控制，水產(chǎn)飼料主要使用不飽和脂肪酸高的油脂，如魚油和植物油，高不飽和脂肪酸易氧化。動物蛋白原料高蛋白、高脂肪（如魚粉、蠶蛹等）質(zhì)量也難以控制，水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量控制克不容緩。水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量保證重在標準體系的建立與制度的落實上。包括水產(chǎn)飼料原料標準體系建立、合格供應廠商評估與篩選、原料接收、檢化驗方案、原料儲存與合理使用等一系列質(zhì)量控制措施。二、水產(chǎn)飼料原料標準體系制定水產(chǎn)飼料原料標準體系包括：采樣標準、原料標準、檢化驗標準、貯存標準等。標準是企業(yè)技術(shù)性法規(guī)，標準制定應參照國家標準或行業(yè)標準，結(jié)合企業(yè)實際與標準

3、制定工作流程認真對待，標準一旦制定必須嚴格執(zhí)行。1原料的采購、驗收標準標準的制定必須具有科學性且符合本企業(yè)要求，它需要很強的技巧，太嚴買不到所需的原料，無謂地增加質(zhì)量成本，太松又會失去品控的意義，控制不了原料質(zhì)量。具體可參照每年農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的飼料原料營養(yǎng)價值成分表或國家標準、行業(yè)標準、企業(yè)標準，因地制宜。采購員必須掌握和了解水產(chǎn)飼料原料的質(zhì)量性能和質(zhì)量標準，必要時到原料產(chǎn)地或生產(chǎn)廠家了解原料特性、加工工藝等行情。而標準的制定者必須通曉飼料原料與水產(chǎn)動物營養(yǎng)學知識。從三個方面來考慮：感觀指標、衛(wèi)生指標和營養(yǎng)指標。衛(wèi)生指標必須執(zhí)行國家或行業(yè)強制標準，而營養(yǎng)指標中哪些項目具有彈性可以讓步接收，讓步接收

4、的標準是什么？誰有權(quán)力決定讓步接收？哪些無任何余地；哪些成分必須檢測，每一關(guān)都至關(guān)重要，標準制定應明確（合格、不合格、讓步接收、拒收）。標準制定后還必須保持標準的嚴肅性，不能隨意更改。標準的修訂根據(jù)企業(yè)實際采購執(zhí)行情況（檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計）、行業(yè)新標準或生產(chǎn)要求進行。2采樣標準必須學習國際國的先進采樣方法，而且還要因材取法。應注意五點：一是明確規(guī)定是品管工作人員采樣。二是固體飼料原料采用對角線法采樣，顆粒狀飼料應采用隨機采樣法，抽樣時按每個堆積立面“X”或“W”形抽樣，抽樣總袋數(shù)不少于20袋。液體原料經(jīng)攪拌混勻后采上中下綜合樣，采樣量一般為1000g，每一樣品和檢測結(jié)果代表的單批數(shù)量不超過120噸。

5、三是感觀性質(zhì)相差較大的原料不允許混合采樣，應分檔次進行；不同廠家，不同批號，不同等級產(chǎn)品不可以混合采樣。四是所采樣要四分法分為兩份（一份檢化驗，一份備存），貯存于干燥、避光條件下的貯存室，貯存期為保質(zhì)期后兩個月。五是所有樣品都要有標簽標示：原料名稱、供應廠商、產(chǎn)地、進貨日期、數(shù)量等。3必要的制度與相關(guān)表格檢化驗制度、崗位責任制度、產(chǎn)品留樣觀察制度與原料貯存、使用情況檢查表、檢化驗操作規(guī)程等等，都是很有效的控制質(zhì)量辦法。參與質(zhì)量管理的各個部門與生產(chǎn)線，應具備所需檢驗器具、記錄簿、樣簽等采樣工具等。三、水產(chǎn)飼料原料合格供應廠商評估與篩選水產(chǎn)飼料原料質(zhì)量與供應要穩(wěn)定，合格供應廠商應穩(wěn)定。飼料企業(yè)應建

6、立合格供應廠商制度。先了解原料供應廠商的規(guī)模、信譽、質(zhì)量管理、加工工藝等，通過對供應廠商既往供貨質(zhì)量記錄、價格、供貨與時性、實力等因素進行評審，由采購部和品管部共同提出合格供應廠商，與產(chǎn)品線經(jīng)理與總經(jīng)理共同評審。合格供應廠商每年都要評審，質(zhì)量每次都合格且供貨與時、信譽好的可建立長期戰(zhàn)略合作伙伴，而對于供貨多次不合格或規(guī)模小、質(zhì)量不穩(wěn)定的供應廠商應淘汰，集團化企業(yè)也可建立黑制度，即對惡意摻假的供應商列入黑，本公司與集團所有公司永不與其發(fā)生供應關(guān)系。四、水產(chǎn)飼料原料檢化驗控制1強化品控意識：強化化驗人員的品控意識，建立相關(guān)的檢化驗制度，學習國際國最新的快速、準確的檢化驗方法。 2常用的鑒定方法(1

7、)感官鑒定法色形純正程度、均勻度、味道（非化學物質(zhì)的口感）、氣味、觸感等。感官指標嚴重不合格沒必要進行化學分析，直接拒收。(2)物理學鑒定方法篩選法、容重測定法、比重測定法、水淘汰法。(3)化學鑒定法定性分析、定量分析。(4)物理化學分析鑒定法近紅外分析法。(5)微生物學鑒定法(6)動物實驗法飼養(yǎng)試驗、生長試驗、消化、代試驗、適口性試驗等。3.檢化驗應注意的事項：檢化驗工作不僅是提供判斷原料合格與否的理化指標，同時也為原料采購中合格供應商評估提供依據(jù)，更為重要的是為配方設(shè)計提供實際營養(yǎng)數(shù)據(jù)庫。對重要營養(yǎng)指標提供動態(tài)分析圖表，以便原料的合理使用。五、水產(chǎn)飼料原料的接收1、強化采購員素質(zhì)采購員應掌

8、握原料質(zhì)量判斷標準與感官檢驗方法，同時掌握原料信息渠道，確保穩(wěn)定的貨源，在保證質(zhì)量的前提下，盡量選用成本低、運輸和儲存費用相對較少的原料，且要了解原料的庫存，倉儲和用量情況，防止造成積壓和產(chǎn)、供、銷脫節(jié)或停產(chǎn)，杜絕假冒偽劣原料。2、控制采購渠道采購渠道不宜多變，一旦確定合格供應廠商，不宜經(jīng)常更換廠商，以便使原料質(zhì)量穩(wěn)定，篩選信譽好、質(zhì)量優(yōu)的大型企業(yè)，建立長期業(yè)務往來，可通過合同的方式約束雙方行為，以確保飼料原料的質(zhì)量。3、原料的接收程序感官指標合格，進行理化指標檢測，達到標準的接收，未能達到標準的雖判定為不合格，但有兩種處理：讓步接收與拒收。讓步接收的原則：A 檢測指標在拒收標準圍，對產(chǎn)品質(zhì)量

9、影響不明顯，且生產(chǎn)又急需。B 不超過庫存量的1/3。C 價格合理，有價值采購優(yōu)勢，且有搭配使用方案。感觀不合格的產(chǎn)品不需經(jīng)過檢測拒收，衛(wèi)生指標達不到標準的一律拒收，摻雜使假的一律拒收并列入采購黑，理化指標為拒收標準的拒收。4、簽定質(zhì)量保證協(xié)議包括原料名稱、產(chǎn)地、規(guī)格、等級、運輸方式、運輸過程中的質(zhì)量保證手段、原料質(zhì)量的檢測方式與檢測結(jié)果的認可標準、質(zhì)量事故的處理規(guī)定等。必要時簽訂質(zhì)量承諾書。六、水產(chǎn)飼料原料的貯存原料應貯存在干燥、陰涼、通風的地方，保持良好的溫、濕度。原料庫要專職管理，專人負責。做好衛(wèi)生消毒工作。勤打掃、勤翻料，防鼠、昆蟲、鳥害。禁止與腐蝕性易潮濕的物品放在一起，避光防止脂肪酸

10、的氧化與對脂溶性維生素的破壞、變性。 1油脂貯存器一定要密閉并與早加入抗氧化劑。 2嚴格執(zhí)行先進先出的原則，米糠、蠶蛹、魚粉等高脂類原料庫存時間不宜太長。 3定期消毒。定期打掃飼料加工設(shè)備、儲存?zhèn)}，嚴格執(zhí)行消毒計劃。4原料入庫要分類垛放，下有墊板，各垛間應留有間隙。并做好原料標簽，包括品名、時間、進貨數(shù)量、來源、并按順序垛放。    5霉菌的檢測與控制原料中的霉菌毒素主要有黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、鐮刀霉毒素。霉菌毒素可通過高壓液相色譜和薄層層析法進行定量分析。但多數(shù)飼料廠作不了這種分析，一種較為適用的方法是利用紫外線法測定原料是否被黃曲霉毒素等毒素污染（定性），該

11、方法簡單易操作、不用投入大量的資金。常用的脫毒方法有物理分離、熱處理、微生物降解、輻射、生物酶技術(shù)等。應注意水產(chǎn)飼料原料在貯存過程質(zhì)量的變化：營養(yǎng)指標的變化，如水分、脂肪氧化、新鮮度（VBN、組胺等）。衛(wèi)生指標的變化，主要是毒素的累積變化。七、常用水產(chǎn)飼料原料的質(zhì)量控制（一） 魚粉魚粉因原料的來源、加工方法的不同而在質(zhì)量上存在很大的差異。市場上摻假物的存在、以劣充好也影響了魚粉的質(zhì)量。因此，除常規(guī)成份分析外，選用適宜指標判定魚粉質(zhì)量具有重要的意義。1. 蛋白質(zhì)新鮮度指標組胺和揮發(fā)性鹽基氮組胺是魚粉中組氨酸經(jīng)微生物脫羧反應轉(zhuǎn)變而成的一種胺類物質(zhì)。魚粉中組胺含量越高，表明受微生物污染越嚴重。揮發(fā)性

12、鹽基氮VBN是指魚粉由于細菌的作用，在腐敗的過程中，使蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生氨與胺類含氮物質(zhì)。魚粉中組胺與揮發(fā)性鹽基氮含量之間有相應的對應關(guān)系：即組胺含量越高，則揮發(fā)性鹽基氮的含量就越高；反之組胺含量越低，揮發(fā)性鹽基氮的含量就越低。我國GB/T191642003魚粉國家標準規(guī)定特級魚粉組胺含量300mg/kg，揮發(fā)性鹽基氮含量110mg/100g；一級魚粉組胺含量500mg/kg；揮發(fā)性鹽基氮含量130mg/100g。魚粉在加熱過程中，游離組胺酸或組胺和酪蛋白結(jié)合形成組胺酸的酪蛋白混合物（肌胃糜爛素），造成雞的肌胃糜爛或潰瘍。對有胃魚也易造成胃糜爛與體色變化。2. 脂肪新鮮度指標酸價酸價是評價魚粉脂肪

13、新鮮度的重要指標之一。魚粉的水分、脂肪含量高與保存條件差等因素都將加快脂肪氧化酸敗，導致產(chǎn)生不良氣味，酸價升高，影響魚粉質(zhì)量。酸價越高，表明魚粉脂肪水解程度越嚴重。我國GB/T191642003魚粉國家標準規(guī)定特級魚粉酸價3mg/g，一級魚粉酸價5mg/g。3. 胃蛋白酶消化率胃蛋白酶消化率是評價魚粉質(zhì)量的重要指標，它表示可被胃蛋白酶分解的蛋白質(zhì)與粗蛋白的比例。測定這項指標能鑒別魚粉中是否摻入其他高蛋白而不容易被動物吸收的原料如羽毛粉、皮革粉等。摻入這些原料的魚粉，其粗蛋白質(zhì)、真蛋白質(zhì)含量比較高，但胃蛋白酶的消化率往往較低。我國GB/T191642003魚粉國家標準規(guī)定特級魚粉胃蛋白酶消化率8

14、8%90%，一級魚粉為86%88%；秘魯魚粉標準中規(guī)定優(yōu)質(zhì)魚粉的胃蛋白酶消化率應為94%95%。4. 氨基酸含量在實際生產(chǎn)中，由于摻假物的存在，粗蛋白質(zhì)含量高的魚粉品質(zhì)不一定好。使用氨基酸分析儀可以準確分析魚粉各種氨基酸含量，從而判定其質(zhì)量。優(yōu)質(zhì)魚粉氨基酸總量在60%68%，所含的11種必需氨基酸占總氨基酸(17種)的51%55%，且氨基酸組成相對穩(wěn)定。摻入水解羽毛粉，絲氨酸含量明顯提高，可由正常的1.6%提高到3%，而蛋氨酸和賴氨酸的含量明顯降低；摻入皮革粉，甘氨酸、精氨酸、脯氨酸含量明顯增加；摻入血粉后，變化最明顯的是亮氨酸，其次為組氨酸。（二） 豆粕大豆中的抗營養(yǎng)因子較多，有熱敏性的胰蛋

15、白酶抑制因子、尿酶與大豆凝集素，也有熱穩(wěn)定性的抗原蛋白、植酸、寡糖等。豆粕經(jīng)高溫（膨化）、溶劑浸提能消除部份抗營養(yǎng)因子。因此，豆粕不僅要檢測蛋白質(zhì)、氨基酸、水分等指標，其他如尿酶的活性、蛋白質(zhì)溶解度等也需檢測。1尿酶活性通常以尿酶活性來表示豆粕中胰蛋白酶抑制因子等抗營養(yǎng)因子的破壞程度。尿酶活性高，說明豆粕中的抗營養(yǎng)因子沒有得到有效的破壞；尿酶活性太低，說明豆粕受熱過度，豆粕中的賴氨酸、精氨酸、胱氨酸等因受熱過度而遭到破壞，營養(yǎng)價值降低。尿酶活性定義為在30和pH為7的條件下，每分鐘每克豆粕制品分解尿素后，所釋放的氨態(tài)氮的毫升數(shù)。美國飼料工業(yè)協(xié)會建議豆粕尿酶值為0.050.2，巴西為0.010.

16、3；我國GB/T195412004飼用大豆粕標準規(guī)定，尿素酶活性0.3?？貥藴蕿?.05-0.3。2蛋白質(zhì)溶解度蛋白質(zhì)溶解度是指大豆粕樣品在規(guī)定的條件下，可溶于0.2%氫氧化鉀溶液中的粗蛋白質(zhì)含量占樣品中總粗蛋白質(zhì)量的質(zhì)量百分數(shù)，這是評估大豆加工過度或不足的有效方法。高溫能使豆粕中的氨基酸與還原性化合物發(fā)生美拉德發(fā)應，從而降低了蛋白質(zhì)的溶解度。我國GB/T195412004飼用大豆粕的國家標準規(guī)定0.2%氫氧化鉀蛋白質(zhì)溶解度70%?？貥藴蕿?0%-85%。另外，粗纖維也是質(zhì)量控制指標，如果不控制粗纖維指標，豆粕加工廠就會加入豆皮。衛(wèi)生指標中控制霉菌5×104。（三） 蠶蛹蠶蛹(sil

17、kworm chrysalis)系桑蠶從幼蟲向成蟲過渡階段的蟲體。蠶蛹中含有一半以上的粗蛋白質(zhì)和14以上的粗脂肪(表1)，既可用作蛋白質(zhì)補充料，又可補充畜禽飼料能量之不足。但蠶蛹中含不飽和脂肪酸較多，蠶蛹油屬半干性油，含亞油酸(1inoleic acid)3649、亞麻酸(1inolenic acid)2135，堿價190194，碘價130132，酸價8.17.2，過夏舊后呈白色或褐色，不便貯存。蠶蛹中含有幾丁質(zhì)(chitin，又名甲殼質(zhì))，是構(gòu)成成蟲與甲殼類動物外殼的主要成分，不易消化，在化驗時作為“粗纖維”測值表現(xiàn)出來，但純凈的蠶蛹不應含有大量粗纖維，凡粗纖維含量過多者多系混雜有異物。蠶蛹

18、中富含各種限制性氨基酸，可與魚粉媲美，不僅富含賴氨酸，而含硫氨基酸，色氨酸含量也比魚粉約高出1倍。必需氨基酸總量占總氨基酸的42.2%，必需氨基酸與非必需氨基酸的比例為0.73，不脫脂蠶蛹的有效能值與魚粉的有效能值近似，是一種高能量、高蛋白質(zhì)飼料。表1.蠶蛹（全脂）營養(yǎng)成分：粗蛋白%粗脂肪%水分%鈣%總磷%53.922.36.30.250.58粗灰分%賴氨酸%蛋氨酸%胱氨酸%色氨酸%2.93.061.301.441.25碳水化合物氨酸%組氨酸%亮氨酸%異亮氨酸%7.8%1.650.963.02，23蠶蛹因品種、加工或儲存的差異，因此，質(zhì)量差異也較大，粗蛋白從50%到60%，氨基酸含量也有差異。

19、采購時應以新鮮、水分低、蛹完全且無僵蠶的優(yōu)質(zhì)蠶蛹。感觀指標：呈黃褐色蛹粒狀，有少量碎片，色澤一致，無發(fā)酵霉變、結(jié)塊、哈味。理化指標：CP50%，水分10%，粗纖維4%，粗灰分4%。衛(wèi)生指標：細菌總數(shù)2×106個/克，霉菌2×104個/克。（四） 棉粕棉粕粗蛋白質(zhì)高，CP在40%左右甚至更高，但氨基酸組成不平衡，精氨酸含量高而賴氨酸與蛋氨酸含量均較低。棉絨與棉殼多則粗纖維高而蛋白低。主要質(zhì)量控制指標：粗蛋白、粗纖維、水分等營養(yǎng)指標；游離棉酚、黃曲霉毒素、霉菌總數(shù)為衛(wèi)生指標。根據(jù)GB/T21264-2007飼料用棉籽粕標準粗蛋白分為五級，而游離棉酚分為三級：低棉酚300mg/k

20、g，中棉酚300-750mg/kg，高棉酚750-1200mg/kg。同時關(guān)注加工質(zhì)量指標：蛋白溶解度，45%PS70%衛(wèi)生指標中黃曲霉B150ppb，霉菌5×104。新加工工藝的脫酚棉籽蛋白：經(jīng)過分步萃取脫酚浸提技術(shù)處理的脫酚棉籽蛋白粗蛋白與氨基酸均較高。表2.棉籽蛋白、棉籽粕與大豆粕的氨基酸組成%氨基酸組成棉籽蛋白a棉籽粕b大豆粕c賴氨酸2.331.592.45蛋氨酸0.76 0.450.64胱氨酸1.080.82 0.66氨酸1.681.311.88亮氨酸3.102.353.20異亮氨酸1.821.301.76苯丙氨酸2.86精氨酸6.124.303.12組

21、氨酸1.621.061.07纈氨酸2.401.741.95脯氨酸1.872.18 2.18酪氨酸 1.481.191.53注：a.國家飼料質(zhì)量監(jiān)督體驗中心檢測的數(shù)據(jù)結(jié)果； b、c.參照中國飼料成分營養(yǎng)價值表（2000 年第11 版）（五） 菜粕菜粕依菜籽品種與加工工藝而營養(yǎng)價值差異較大，依品種分有雙低與普通菜籽之分，依加工工藝分有壓榨、浸提、預壓浸提之分。根據(jù)NY/T417-2000飼料用低硫苷菜粕標準，粗蛋白分為三級，衛(wèi)生指標中要求異硫氰酸酯（ITC）+惡唑烷硫酮（OZT）均小于4000mg/kg，霉菌總數(shù)小于5×104。在采購過程中控制的營養(yǎng)指標仍為粗蛋白、粗

22、纖維（灰分）、水分，加工質(zhì)量關(guān)注蛋白溶解度，200型：35%PS55%，混合型：17%PS35%.不同加工工藝對賴氨酸水平影響大。（六） 花生粕花生粕適口性好、粗蛋白高、精氨酸含量高，但賴氨酸較低。注意控制黃曲霉毒素B1，粗蛋白要求45%，黃曲霉B1小于50ppb。（七） 玉米酒糟(DDGS)DDGS是玉米等谷物生產(chǎn)酒精中的一種副產(chǎn)物。根據(jù)干燥濃縮蒸餾廢液的不同可分為干酒精糟(DDG)、可溶干酒精糟(DDS)和干酒精糟液(DDGS)。DDGS質(zhì)量受酒精的生產(chǎn)工藝流程、谷物的發(fā)酵方法與副產(chǎn)品干燥方法等因素的影響。DDGS的顏色有金黃色和暗褐色，金黃色最好，不應含黑色小顆粒，應有發(fā)酵的氣味，嘗之微

23、酸。DDGS顏色和氣味與其營養(yǎng)成分密切相關(guān)，深顏色的DDGS營養(yǎng)價值低于淺顏色的DDGS，深顏色的DDGS通常伴有糊焦味或者煙熏味，會影響飼料的適口性。DDGS在烘干過程中往往會造成加熱過度，加熱過度容易發(fā)生美拉德發(fā)應，降低賴氨酸的利用率，呂明斌等研究表明，加熱過度，賴氨酸含量由烘干前的0.82%降低到0.3%左右，發(fā)現(xiàn)中性洗滌纖維NDF與賴氨酸有很好的相關(guān)性。因此，NDF可以作為飼料廠日常檢測DDGS熱過度的指標。一般要求NDF32%為合格，NDF35%為最低質(zhì)量要求。DDGS應關(guān)注衛(wèi)生指標（霉菌毒素），發(fā)酵過程并不能破壞霉菌毒素，因加工酒精過程中，一噸玉米等谷物產(chǎn)生30%左右的DDGS，因

24、此霉菌毒素反而使其得到“濃縮”，DDGS中霉菌毒素的含量是谷物中的三倍左右。表3.DDGS 霉菌毒素檢測結(jié)果(郭福存)種類樣品平均值(g/kg)樣品最大值(g/kg)黃曲霉毒素1326.3T2毒素6994.7玉米赤霉烯酮744.51423.1赭曲霉毒素82.5162.8煙曲霉毒素19307380嘔吐毒素368016750衛(wèi)生指標控制：黃曲霉毒素B1100ppb，嘔吐毒素2.0mg/kg。（八） 魚油魚油中富含高不飽和脂肪酸，為水產(chǎn)飼料必需脂肪酸的主要來源，因海水魚油資源緊缺，且高不飽和脂肪酸易氧化，魚油的質(zhì)量控制按行業(yè)標準SC/T3502-2000的要求為水分、酸價、過氧化值、不皂化物、碘價等

25、。水分：揮發(fā)物與雜質(zhì)的存在，不利于魚油貯存，魚油易氧化變質(zhì)。酸價（AV）與過氧化值（POV）的質(zhì)量是評定魚油質(zhì)量的重要指標 ，酸價是評定魚油酸敗的程度，但如果在魚油中摻入一定量的KOH溶液，酸價指標就會較低且穩(wěn)定。過氧化值（POV），是反映魚油氧化狀況的一項重要指標，氫過氧化物（POV）是油脂氧化的第一個中間產(chǎn)物，稱為初級氧化產(chǎn)物，是反映氧化初期狀況的一項重要指標,其測定有多種方法，習慣上采用碘量法。碘量法易受樣品顏色和空氣中氧氣干擾，測定時應注意。當氧化到一定程度，特別是過度氧化后（20meq/kg）此值反而下降。羰基化合物（TBARS）由初級氧化產(chǎn)物分解而來，稱為次級氧化產(chǎn)物，其與硫代巴比

26、妥酸(TBA)產(chǎn)生顏色反應，可在532nm測吸光值計算出羰基化合物含量。習慣上稱之為硫代巴比妥酸反應物值(TBARS)，要求TBA值5ppm。以丙二醛為代表的醛類羰基化合物會繼續(xù)氧化成酸，分析其影響時應注意。不皂化物指油脂皂化時，與堿不起作用，不溶于水的物質(zhì)，包括甾醇、脂溶性維生素和色素等。碘價（I.V）主要反映脂肪酸的不飽和狀況。碘價越高，說明不飽程度越高,魚油是高度不飽和的，檢驗它的碘值是衡量原料較為方便的，適宜的指標。鑒于單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸碘價的差異不大。如果摻入大豆油（碘價120-140）或菜籽油（碘價110-126）等植物油，則碘價的參考值失去判定的方向。表4.魚油質(zhì)量標

27、準指 標精制魚油（中國）粗魚油（中國）日本標準英國標準標準一級二級一級二級水分與揮發(fā)物（%）0.10.20.30.50.1酸價/（mgKOH/g油）1.02.0815282過氧化值/（mmol/kg）5.06.06105610不皂化物%1.03.0-雜質(zhì)（%）0.10.10.30.5碘價/（克碘/100g油）160100基于以上原因，魚油檢測還應分析其脂肪酸組成才能進一步鑒定是否摻假。利用GB/T17376-1998和GB/T17377-1998氣相色譜法檢測魚油脂肪酸含量。魚油的脂肪酸組成中高不飽和脂肪酸（HUFA）較高，判斷是否為海水魚油的三個標準：二十碳五烯酸（EPA）+二十二碳六烯酸（

28、DHA）的總量要求23-30%；DHA/EPA=1/1-1.8，DHA10%.表5.秘魯魚油脂肪酸組成脂肪酸名稱含量(%)脂肪酸名稱含量(%)肉豆蔻酸C14:07.46亞麻酸C18：30.45棕櫚酸C16:015.12Y-亞麻酸Y-C18:30.32棕櫚油酸C16:18.56二十碳烯酸C20：11.05硬脂酸C18:03.08花生四烯酸C20：41.30油酸C18:16.78EPA C20:518.53亞油酸C18:20.87DHA C22:611.28 儀器名稱:Aglilent4890D氣相色譜儀 表6.美國魚油脂肪酸組成脂肪酸名稱含量(%)脂肪酸名稱含量(%)肉豆蔻酸C14:0

29、9.47亞麻酸C18：31.20棕櫚酸C16:017.40Y-亞麻酸Y-C18:30.46棕櫚油酸C16:111.34二十碳烯酸C20：10.70硬脂酸C18:01.88花生四烯酸C20：41.30油酸C18:14.79EPA C20:514.53亞油酸C18:20.08DHA C22:610.73 儀器名稱:Aglilent4890D氣相色譜儀 引文：略酵母培養(yǎng)物XP對團頭魴（Megalobrama amblycephala）腸道粘膜絨毛的影響高鋒 收稿日期：作者簡介：李高鋒（1983-），男，漢，XX省XX縣人，XX市澳洋實業(yè)，碩士，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料學方面的研究。E-m

30、ail:lgf1983126 作者簡介：葉元土（1964-），男，漢，XXXX人，XX大學基礎(chǔ)醫(yī)學與生物科學學院，教授，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料學方面的研究。E-mail：yeyuant *通訊 葉元土，E-mail：yeyuant，2 葉元土1* 俊1 蔡春芳1 婧1 諸燕1 甑玉國31.大學基礎(chǔ)醫(yī)學與生物科學學院， 215123；2.市澳洋實業(yè)， 5105453；3.達農(nóng)威生物發(fā)酵工程技術(shù)， 518038動物的腸道不僅僅是動物的營養(yǎng)器官，而是集分泌、免疫、屏障和營養(yǎng)等為一體的功能復雜的重要器官。一旦腸功能衰竭，一方面，環(huán)境平衡破壞，營養(yǎng)代障礙；另一方面，腸粘膜屏障受損，引起腸原性感染和毒

31、素血癥。對于無胃的鯉科魚類，腸粘膜不但在對食物的消化、吸收上至關(guān)重要，而且在免疫防御作用、代方面具有非常重要的作用，在魚類生長和發(fā)育的過程中發(fā)揮著極其重要的作用。飼料營養(yǎng)物質(zhì)、飼料中特定的成分如抗生素、多糖等對魚類腸道粘膜的生長、發(fā)育產(chǎn)生重要的影響。馬力等1989年和玉和等1992年對淡水硬骨魚類消化道進行了掃描電鏡觀察和報道，葉元土106、107、108、109等已經(jīng)對草魚、長吻鮠、南方大口鯰、黃鱔等魚類的腸道進行了詳細的掃描電鏡觀察和研究，但關(guān)于團頭魴腸道上皮組織的超微結(jié)構(gòu)特征研究尚未見報道。本試驗是在團頭魴攝食含有酵母培養(yǎng)物XP的飼料100天后，對其前腸、中腸粘膜表面形態(tài)結(jié)構(gòu)進行掃描電鏡

32、觀察，以探討酵母培養(yǎng)物XP對團頭魴腸道粘膜生長、發(fā)育的影響。1 材料與方法1.1 試驗魚與分組團頭魴（Megalobrama amblycephala）購于市新時代特種養(yǎng)殖場，為池塘培育的當年魚種。試驗魚初始體重為9.20±0.2g。按體重接近的原則隨機分為8組，每組設(shè)3個平行，共24個養(yǎng)殖桶，每桶放魚15尾。1.2 試驗飼料使用實用飼料原料組成試驗配方，粗蛋白質(zhì)含量均為28%，見表1。主要原料為進口魚粉、豆粕、棉粕、菜粕、麥麩、面粉、混合油（豆油菜油1：1）、預混料等。飼料原料經(jīng)粉碎過40目篩，混合均勻后用小型顆粒飼料機加工成直徑1.5的顆粒飼料備用,飼料加工過程中溫度保持在657

33、0,持續(xù)時間約40秒，飼料-4冰柜保存?zhèn)溆?。酵母培養(yǎng)物XP共設(shè)0mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg、1500mg/kg、2000mg/kg、2500mg/kg的劑量梯度組，同時，設(shè)計含酵母培養(yǎng)物XP 1000mg/kg、2000mg/kg兩個間斷投喂組，共計8個試驗組，每個試驗組設(shè)3個平行，合計24個養(yǎng)殖桶。酵母培養(yǎng)物在配方中增加時，相應減少面粉的用量，以保持配方總量的平衡。每個養(yǎng)殖桶與試驗飼料的對應采用隨機方法，以避免養(yǎng)殖桶位置不同帶來的養(yǎng)殖效果的差異。表1 基礎(chǔ)飼料配方（風干基礎(chǔ),）和營養(yǎng)成分(風干基礎(chǔ),%)Table 1 Formulation and compositio

34、n of experimental diet (air-dry basis,，%)原料Ingredient0mg/kggroup500mg/kggroup1000mg/kggroup1500mg/kggroup2000mg/kggroup2500mg/kggroup麩皮wheat bran100100100100100100面粉wheat middling135134.5134133.5133132.5細米糠rice bran100100100100100100豆粕soybean meal46%606060606060菜粕rapeseed meal235235235235235235棉粕cot

35、tonseed meal235235235235235235魚粉fish meal303030303030肉骨粉meat and bone meal202020202020磷酸二氫鈣Ca(H2PO4)2202020202020沸石粉Zeolite flour151515151515膨潤土Bentonite151515151515混合油mixed oil252525252525預混料Premix101010101010酵母培養(yǎng)物XPyeast culture XP00.511.522.5合計Total(kg)100010001000100010001000成本cost(yuan/T,RMB)19

36、1619151914191419131912粗蛋白crude protein28.428.3928.3828.3728.3728.36可消化能digestible energy(MJ/Kg)2.632.632.632.632.632.63磷phosphorus1.451.451.451.451.451.45粗灰份crude ash11.2711.2711.2711.2711.2711.27粗纖維crude fiber7.267.267.267.267.267.25粗脂肪crude fat5.375.375.375.375.365.36The digestible energy is calcu

37、lated value. Other nutrient levels are measured values;The premix provides following for per kg diet：Cu：5 mg·kg-1、Fe：180 mg·kg-1、Mn：35 mg·kg-1、Zn：120 mg·kg-1、I：0.65 mg·kg-1、Se：0.5 mg·kg-1、Co：0.07 mg·kg-1、Mg：300 mg·kg-1、K：80 mg·kg-1、VA：10 mg·kg-1、VB1：

38、8 mg·kg-1、VB2：8 mg·kg-1、VB6：20 mg·kg-1、VB12：0.1 mg·kg-1、VC：250 mg·kg-1、VB3：20 mg·kg-1、VB5：25 mg·kg-1、VD3：4 mg·kg-1、VK3：6 mg·kg-1、葉酸(foloc acid)：5 mg·kg-1、肌醇(inositol)：100 mg·kg-1；1.3 飼養(yǎng)管理養(yǎng)殖試驗在室循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)進行，每桶水體0.33 m3圓形養(yǎng)殖桶中養(yǎng)殖。以曝氣的自來水為水源，每天換水量為總水量的1/

39、3，以減少殘余飼料與糞便對水體的影響，養(yǎng)殖水經(jīng)過濾、沉淀后流回蓄水池，經(jīng)過增氧由水泵抽回各養(yǎng)殖桶。在試驗的后期（10月以后到試驗結(jié)束）由于氣溫下降，采用電加熱的方法控制水溫。具體方法是用潛水式加熱棒在水處理池進行加熱，加熱后的水進行各養(yǎng)殖桶，各養(yǎng)殖桶流出的水再匯集到水處理池進行過濾、加氧和加熱，如此反復循環(huán)。飼養(yǎng)期間的水質(zhì)條件為：水溫26.5±3.0，DO>6.0 mg·L-1，pH7.2±0.2，NH4+-N 0.25±0.05 mg·L-1，NO2N 0.04±0.01 mg·L-1，硫化物<0.05 mg&

40、#183;L-1。試驗魚經(jīng)過食鹽水浴消毒，暫養(yǎng)一周后開始正式試驗，正式試驗時間為2007年8月13日至11月30日，共100天。1.4 飼料投喂情況試驗期間飼料每天投喂量為魚體重的2.0%3.0%，分3次投喂（8:00、12:30、17:00），根據(jù)攝食情況適當調(diào)整。間斷組投喂具體操作方法為：投喂對照組飼料3周后，分別投喂含酵母培養(yǎng)物XP 1000 mg/kg、2000 mg/kg試驗飼料3周；之后又投喂對照組飼料3周，再分別投喂含酵母培養(yǎng)物1000 mg/kg、2000 mg/kg試驗飼料3周；如此反復，直到試驗結(jié)束。1.5小腸絨毛形態(tài)的觀察1.5.1 樣品采集活體常規(guī)解剖腹部，取出腸道，按

41、前、中、后腸分段。前腸為腸道第一個折點之前的部分，中腸為第一個折點和最后一個折點之間的部分，后腸為最后一個折點之后的部分。取前腸、中腸，取材部位均在每段中央部位，取12cm左右的腸管12塊，縱向剖開并暴露腸粘膜的部分，用0.1mol/l(pH7.3)的磷酸緩沖液沖洗34次，然后，立即將其投入4的3戊二醛溶液（pH7.4）中固定2448h。取出洗滌，經(jīng)適當修剪后，放入1的鋨酸鐘后固定1小時，取出后緩沖液洗三次。乙醇系列梯度脫水，醋酸異戊酯置換，臨界點干燥，鍍膜(用常規(guī)掃描電鏡制備方法制備)，經(jīng)掃描電鏡觀察并攝影。2 試驗結(jié)果2.1常規(guī)解剖觀察 前腸為第一個折點之前的部分，腸壁厚，腸管粗大，且硬度

42、大，容物多；中腸為第一個折點至第二個折點之間的部分，腸壁較前腸為薄，腸管變小，容物較多；后腸為最后一個折點之后的部分，腸管較細，容物少，偶有充氣現(xiàn)象，沖氣時腸管呈微白色，中腸的長度明顯長于前腸和后腸，中腸是團頭魴消化、吸收食物的主要部位。解剖觀察到試驗用團頭魴腸道在腹腔中回旋盤轉(zhuǎn)，排列復雜，從前腸到后腸，腸管直徑逐漸變細，腸壁逐漸變薄。投喂酵母培養(yǎng)物XP的各試驗組的常規(guī)解剖觀察結(jié)果沒有顯著性的差異。2.2腸粘膜掃描電鏡觀察 2.2.1腸粘膜褶皺各試驗組團頭魴前腸粘膜褶皺掃描電鏡結(jié)果見圖版，前腸褶皺呈S或Z型,排列較為緊密。由圖可見，從XP 1500mg/kg組開始，隨著酵母培養(yǎng)物XP添加量的增

43、加, 前腸褶皺排列更加逐漸緊密；褶皺表面粘附的食糜顆粒在XP1000mg/kg組有明顯的增加，在2000mg/kg和2500mg/kg組更為明顯；一樣XP使用的連續(xù)與間斷組相比較，間斷組褶皺表面食糜顆粒明顯少于對應連續(xù)試驗組。各試驗組團頭魴中腸粘膜褶皺掃描電鏡結(jié)果見圖版。對照組粘膜褶皺表面粘附的食糜顆粒較多，隨著酵母培養(yǎng)物XP添加量的增加, 粘膜褶皺排列更加逐漸緊密，尤其是在XP 2000mg/kg組中腸褶皺排列更為緊密；各組表面附著顆粒也明顯比前腸減少；一樣XP使用的連續(xù)與間斷組相比較，間斷組褶皺形狀逐漸變直，粘膜褶皺排列更加緊密。上述結(jié)果表明，在飼料中添加酵母培養(yǎng)物XP后，前腸、中腸的粘膜

44、褶皺排列有更為緊密的趨勢，在XP 1500mg/kg組和2000mg/kg組最為明顯，而在低劑量組（如500mg/kg組）和高劑量組（如2500mg/kg組）不明顯；間斷投喂組與連續(xù)投喂組相比較，在中腸的粘膜褶皺排列有更為緊密的趨勢。2.2.2腸道粘膜絨毛密度各試驗組的前腸粘膜掃描電鏡結(jié)果見圖版。根據(jù)各組電子顯微鏡照片，選取適宜的區(qū)域統(tǒng)計絨毛的數(shù)量，并計算絨毛的密度，結(jié)果見圖表2。表2 團頭魴腸道微絨毛密度（個um2）Tab.2 the density of intestinal villus of Megalobrama amblycephala組別group前腸密度 個um2vi

45、llus density of foregut 中腸密度 個um2villus density of mid-gut 前、中腸平均密度 個um2average villus density 0 mg/kgthe control group78.279.078.6500 mg/kgthe series group66.492.979.61000 mg/kgthe series group73.488.781.11500 mg/kgthe series group123.3139.8131.52000 mg/kgthe series group95.983.589.72500 mg/kgthe s

46、eries group80.793.587.11000 mg/kg間斷組the disconnected group65.0 94.579.82000 mg/kg間斷組the disconnected group103.0100.5101.8結(jié)合圖和表2結(jié)果，前腸對照組的絨毛密度較低少，其它各試驗組粘膜絨毛的密度隨酵母培養(yǎng)物XP的增加而有明顯的變化，其中酵母培養(yǎng)物XP1500 mg/kg連續(xù)組粘膜絨毛密度比對照組提高57.61%，為最高；酵母培養(yǎng)物XP 2000 mg/kg連續(xù)組和2000 mg/kg間斷組粘膜絨毛密度比對照組分別提高了22.62%和31.77%，而其它各組均無明顯提高；一樣X

47、P使用的連續(xù)與間斷組相比較，酵母培養(yǎng)物XP 1000 mg/kg間斷組與相應的連續(xù)組相比降低了11.51%，而2000 mg/kg間斷組與相應的連續(xù)組相比則提高了7.46%。各試驗組的中腸粘膜掃描電鏡結(jié)果見圖版。中腸對照組的絨毛排列也較為均勻，表面附著食糜顆粒較少，其它各試驗組絨毛的密度均比對照組有所提高，其中連續(xù)組1500的絨毛密度最大，比對照組提高了76.96%，其它各組與對照組相比提高幅度在5.65%27.27%之間；間斷組1000與2000組與相應的連續(xù)組相比則分別提高了6.62%和20.47%。從前、中腸綜合考慮來說，團頭魴腸道微絨毛呈規(guī)則的六邊形簇狀分布，前、中腸微絨毛密度基本一樣

48、。添加酵母培養(yǎng)物XP后，各試驗組與對照組相比，絨毛密度有不同程度的提高，其中以連續(xù)組1500的效果最好，絨毛密度比對照組提高了67.33%，其中間斷使用效果與連續(xù)使用相比并無顯著差異。在攝食添加酵母培養(yǎng)物XP的飼料后，前腸、中腸粘摸粘膜絨毛密度均有不同程度的增加；前腸和中腸相比較，中腸粘摸粘膜絨毛密度變化較前腸的結(jié)果更顯著；連續(xù)投喂組與間斷投喂組相比較，在前腸XP 1000 mg/kg間斷組與相應的連續(xù)組相比降低了11.51%，而2000 mg/kg間斷組與相應的連續(xù)組相比則提高了7.46%，而在中腸間斷組1000與2000組與相應的連續(xù)組相比則分別提高了6.62%和20.47%。2.2.3腸

49、道粘膜絨毛高度各試驗組的前腸、中腸粘膜斷面掃描電鏡結(jié)果見圖版、。根據(jù)電子顯微鏡照片，選取適宜的區(qū)域統(tǒng)計絨毛的高度，結(jié)果見圖表3。表2 團頭魴腸道粘膜絨毛高度（um）Tab.2 The height of the intestinal villus ofMegalobrama amblycephala組別group前腸絨毛高度 umheight of foregut villus中腸絨毛高度 umheight of mid-gut villus前、中腸平均高度 umaverage height of villus0 mg/kgcontrol group1.141.321.231000

50、mg/kgthe series group0.901.271.092000 mg/kgthe series group1.461.351.402500 mg/kgthe series group0.771.481.121000 mg/kg間斷組the disconnected group1.220.961.092000 mg/kg間斷組 the disconnected group1.041.221.13從表3中我們可以看出，前腸微絨毛高度的變化受酵母培養(yǎng)物的增加而具有顯著的變化，其中連續(xù)組2000mg/kg和間斷組1000mg/kg微絨毛高度分別比對照組提高了28.26%和7.61%，其它各

51、組則出現(xiàn)了不同程度的下降。而間斷組1000mg/kg、2000mg/kg組與相應的連續(xù)組相比則分別提高了35.62%和降低了28.81%。 中腸呈現(xiàn)同樣的變化趨勢，其中連續(xù)組2000mg/kg和2500mg/kg高度分別比對照組提高了1.87%和12.15%，其它各組也出現(xiàn)了不同程度的下降，間斷組1000mg/kg與2000mg/kg組與相應的連續(xù)組相比則分別降低了24.27%和降低了9.17%。前、中腸綜合考慮來說，團頭魴腸絨毛高度的順序為中腸>前腸，這與聶國興1等（2007）在小麥基礎(chǔ)飼料添加木聚糖（xylan）酶后對尼羅羅非魚腸道絨毛的影響得出的結(jié)論相似：腸絨毛高度的順序為中腸&g

52、t;前腸>后腸。添加了酵母培養(yǎng)物，腸道粘膜絨毛高度發(fā)生顯著性的變化，連續(xù)組2000mg/kg比對照組提高了14.07%外，其它各組均出現(xiàn)了高度降低的現(xiàn)象，但差異并不明顯。間斷組絨毛高度與相應連續(xù)組相比出現(xiàn)明顯的降低趨勢，表明間斷使用效果不如連續(xù)使用。3 討論腸道是機體與外界環(huán)境接觸表面積最大的器官，也是營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收的主要場所，同時腸粘膜屏障系統(tǒng)具有阻礙腸腔細菌入侵和毒素吸收的功能，因此腸粘膜形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的正常對動物機體來說是十分重要的。腸道粘膜屏障主要由腸道粘膜機械屏障、免疫屏障、化學屏障和生物屏障四部分組成，這些功能分別有相應的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，如機械屏障由腸道粘膜上皮細胞、細胞間緊密

53、連接等構(gòu)成，能有效阻止細菌穿透粘膜進入深部組織。腸道粘膜上皮的完整性與正常的再生能力是腸粘膜屏障的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。腸道粘膜絨毛的發(fā)育主要取決于養(yǎng)殖動物的生理狀況和飼料營養(yǎng)條件，此外，腸道環(huán)境也是影響絨毛發(fā)育的主要因素。許多研究表明酵母培養(yǎng)物對動物腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)具有改善作用。運濤等(2000)對蛋用仔雞在大腸桿菌攻毒條件下，酵母培養(yǎng)物對小腸粘膜的保護作用進行了研究，掃描電鏡觀察表明，對照組小腸絨毛變形、微絨毛脫落，而試驗組小腸絨毛和微絨毛生長發(fā)育正常。Garyl(1998)飼喂酵母培養(yǎng)物后公雞回腸絨毛杯狀細胞減少、腺窩深度減小，并認為這是由于飼喂酵母培養(yǎng)物飼料后腸道細菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì)減少的結(jié)果。 觀忠等

54、（2005）研究發(fā)現(xiàn)添加酵母培養(yǎng)物對蛋雛雞小腸絨毛長度的影響不顯著,但具有增加絨毛長度的趨勢。酵母培養(yǎng)物XP的主要構(gòu)成物質(zhì)包括：酵母菌體物質(zhì)，酵母細胞外的代產(chǎn)物如括肽、有機酸、寡糖、氨基酸、核苷酸、維生素、芳香物質(zhì)、“未知生長因子”等，活酵母細胞，殘余的培養(yǎng)基等。XP主要有效活性物質(zhì)是酵母次級代產(chǎn)物，這類物質(zhì)的主要作用對象是腸道微生物，能夠促進益生菌的生長而抑制有害菌的生長。同時，酵母培養(yǎng)物XP能夠促進腸道粘膜的生長發(fā)育和再生能力，這寫作用可以使養(yǎng)殖魚類在不良的、外環(huán)境下也能夠維持正常的生理機能，并獲得良好的生產(chǎn)性能。本試驗中，團頭魴在攝食以酵母培養(yǎng)物XP作為變量因素的飼料100天后，腸道粘膜

55、絨毛的高度、密度變化非常顯著。添加酵母培養(yǎng)物XP后，各試驗組與對照組相比，絨毛密度有不同程度的提高，其中以連續(xù)組1500mg/kg的效果最好，前腸和中腸腸粘膜絨毛密度分別比對照組提高了57.61%和76.96%，前腸和中腸粘膜絨毛平均密度比對照組提高了67.33%，而間斷使用效果與連續(xù)使用相比并無顯著差異。在一樣試驗組中，腸絨毛密度變化的順序為中腸>前腸。添加了酵母培養(yǎng)物XP，腸道粘膜絨毛高度發(fā)生顯著性的變化，前腸連續(xù)組2000mg/kg絨毛高度比對照組提高了28.26%，中腸連續(xù)組2500mg/kg絨毛高度比對照組提高了12.15%，其它各組均出現(xiàn)了高度變化現(xiàn)象，但差異并不明顯。間斷組絨毛高度與相應連續(xù)組相比出現(xiàn)明顯的降低趨勢，表明間斷使用效果不如連續(xù)使用。綜上所述，在團頭魴基礎(chǔ)飼料中添加酵母培養(yǎng)物XP可以顯著改善腸道粘膜結(jié)構(gòu)的發(fā)育，適宜的添加量可以顯著促進腸道粘膜絨毛的生長，對維持腸道粘膜的完整性和再生能力具有非常重要的作用和意義。主要表現(xiàn)為腸道粘膜褶皺的排列更為緊密，前腸、中腸粘膜絨毛密度排列更為緊密，前腸、中腸粘膜絨毛高度有顯著的提高。在飼料中添加酵母培養(yǎng)物XP對團頭