W1104-4 實(shí)施分光光度法快速檢測(cè)農(nóng)殘操作-微教材

1、農(nóng)產(chǎn)品/食品快速檢測(cè)技術(shù)課程-微教材微課編號(hào)W1104微課名稱實(shí)施分光光度法快速檢測(cè)農(nóng)殘操作所屬模塊殘留物的快速檢測(cè)子模塊有機(jī)磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)關(guān)鍵詞農(nóng)殘；快速檢測(cè)；酶抑制率是否通用通用 農(nóng)產(chǎn)品 食品是否重點(diǎn)建設(shè)是 否微課類型實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)型微課形式實(shí)地拍攝式教學(xué)設(shè)計(jì)模式直觀演示法教學(xué)目標(biāo)熟悉分光光度分快速檢測(cè)農(nóng)殘操作思路；能夠完成分光光度法快速檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留樣品前處理；能夠完成對(duì)照液測(cè)試和樣品檢測(cè)；能夠?qū)z測(cè)結(jié)果進(jìn)行計(jì)算和判讀。教學(xué)內(nèi)容知識(shí)點(diǎn)技能點(diǎn)能夠完成分光光度法快速檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留樣品前處理；能夠完成對(duì)照液測(cè)試和樣品檢測(cè)；能夠?qū)z測(cè)結(jié)

2、果進(jìn)行計(jì)算和判讀。邊學(xué)邊練任務(wù)：分光光度法（酶抑制率法）快速檢測(cè)蔬菜中的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留樣品：小青菜或西葫蘆參考標(biāo)準(zhǔn)：中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)1、列出你完成此任務(wù)的思路要點(diǎn)：物品準(zhǔn)備，設(shè)備調(diào)試，檢測(cè)操作。2、列出物品準(zhǔn)備清單設(shè)備：食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)儀、金屬?。捎盟″佁娲┖吞炱皆噭恨r(nóng)殘緩沖液、膽堿酯酶液、顯色劑、底物，其中緩沖液、顯色劑和底物都需要提前配制。農(nóng)殘緩沖液配制，從試劑盒中取出一袋緩沖液，全部倒入燒杯中，加入蒸餾水，攪拌溶解，轉(zhuǎn)入容量瓶，定容至500mL，轉(zhuǎn)移入試劑瓶中備用。顯色劑配制，從試劑盒中取出一瓶顯色劑，加入25

3、mL緩沖液，振搖溶解，備用。底物配制，從試劑盒中取出一瓶底物，加入12mL蒸餾水，振搖溶解，備用。其它物品：樣品瓶、菜板、剪刀、鑷子、試管架、記號(hào)筆等。3、完成設(shè)備調(diào)試要點(diǎn)：水浴鍋或金屬浴溫度調(diào)至37。打開食品安全快速檢測(cè)儀，進(jìn)入農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法模塊。4、完成對(duì)照溶液測(cè)試要點(diǎn)：先于試管中加入緩沖溶液，再加入酶液、顯色劑，搖勻后于37放置15min以上（每批樣品的控制時(shí)間應(yīng)一致）。加入底物搖勻，此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值A(chǔ)0 。5、完成樣品溶液測(cè)試要點(diǎn)：選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中

4、，加入5mL緩沖溶液，振蕩1 min2min，倒出提取液，靜置3 min5min，待用。于試管中加入.5mL樣品提取液，再加入酶液、顯色劑，搖勻后于37放置15min以上（每批樣品的控制時(shí)間應(yīng)一致）。加入底物搖勻，此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值A(chǔ)t 。6、進(jìn)行結(jié)果計(jì)算和判讀分光光度法（酶抑制率法）測(cè)農(nóng)殘，結(jié)果以酶被抑制的程度，即抑制率表示。抑制率（%）=(A0-At)/ A0×100式中：A0對(duì)照溶液反應(yīng)3min吸光度的變化值；At樣品溶液反應(yīng)3min吸光度的變化值。當(dāng)蔬菜樣品中提取液對(duì)酶的抑制率50%時(shí)，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸