W1104-4 實施分光光度法快速檢測農(nóng)殘操作-微教材

1、農(nóng)產(chǎn)品/食品快速檢測技術(shù)課程-微教材微課編號W1104微課名稱實施分光光度法快速檢測農(nóng)殘操作所屬模塊殘留物的快速檢測子模塊有機磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測關(guān)鍵詞農(nóng)殘；快速檢測；酶抑制率是否通用通用 農(nóng)產(chǎn)品 食品是否重點建設(shè)是 否微課類型實驗實訓(xùn)型微課形式實地拍攝式教學(xué)設(shè)計模式直觀演示法教學(xué)目標(biāo)熟悉分光光度分快速檢測農(nóng)殘操作思路；能夠完成分光光度法快速檢測蔬菜中有機磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留樣品前處理；能夠完成對照液測試和樣品檢測；能夠?qū)z測結(jié)果進行計算和判讀。教學(xué)內(nèi)容知識點技能點能夠完成分光光度法快速檢測蔬菜中有機磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留樣品前處理；能夠完成對照液測試和樣品檢測；能夠?qū)z測結(jié)

2、果進行計算和判讀。邊學(xué)邊練任務(wù)：分光光度法（酶抑制率法）快速檢測蔬菜中的有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留樣品：小青菜或西葫蘆參考標(biāo)準(zhǔn)：中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的快速檢測1、列出你完成此任務(wù)的思路要點：物品準(zhǔn)備，設(shè)備調(diào)試，檢測操作。2、列出物品準(zhǔn)備清單設(shè)備：食品安全現(xiàn)場快速檢測儀、金屬?。捎盟″佁娲┖吞炱皆噭恨r(nóng)殘緩沖液、膽堿酯酶液、顯色劑、底物，其中緩沖液、顯色劑和底物都需要提前配制。農(nóng)殘緩沖液配制，從試劑盒中取出一袋緩沖液，全部倒入燒杯中，加入蒸餾水，攪拌溶解，轉(zhuǎn)入容量瓶，定容至500mL，轉(zhuǎn)移入試劑瓶中備用。顯色劑配制，從試劑盒中取出一瓶顯色劑，加入25

3、mL緩沖液，振搖溶解，備用。底物配制，從試劑盒中取出一瓶底物，加入12mL蒸餾水，振搖溶解，備用。其它物品：樣品瓶、菜板、剪刀、鑷子、試管架、記號筆等。3、完成設(shè)備調(diào)試要點：水浴鍋或金屬浴溫度調(diào)至37。打開食品安全快速檢測儀，進入農(nóng)藥殘留檢測方法模塊。4、完成對照溶液測試要點：先于試管中加入緩沖溶液，再加入酶液、顯色劑，搖勻后于37放置15min以上（每批樣品的控制時間應(yīng)一致）。加入底物搖勻，此時檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值A(chǔ)0 。5、完成樣品溶液測試要點：選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中

4、，加入5mL緩沖溶液，振蕩1 min2min，倒出提取液，靜置3 min5min，待用。于試管中加入.5mL樣品提取液，再加入酶液、顯色劑，搖勻后于37放置15min以上（每批樣品的控制時間應(yīng)一致）。加入底物搖勻，此時檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值A(chǔ)t 。6、進行結(jié)果計算和判讀分光光度法（酶抑制率法）測農(nóng)殘，結(jié)果以酶被抑制的程度，即抑制率表示。抑制率（%）=(A0-At)/ A0×100式中：A0對照溶液反應(yīng)3min吸光度的變化值；At樣品溶液反應(yīng)3min吸光度的變化值。當(dāng)蔬菜樣品中提取液對酶的抑制率50%時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸