上海中醫(yī)藥大學《實驗中醫(yī)學》教案(7)

1、上海中醫(yī)藥大學實驗中醫(yī)學教案（7）課程名稱 實驗中醫(yī)學（理論部分）總學時數(shù) 36專業(yè) 中醫(yī)基礎(chǔ)和中醫(yī)臨床專業(yè)授課教師 方肇勤內(nèi)容實驗中醫(yī)學常用的實驗研究方法及其在中醫(yī)研究中的應用時數(shù)16本次課目的要求1掌握不同學科實驗研究方法的特點和優(yōu)勢。2掌握如何根據(jù)實驗研究的要求選擇實驗研究方法（包括一種或幾種方法）。3了解各學科的主要實驗研究方法。4了解各學科實驗研究方法在中醫(yī)藥研究中的應用。5了解了解各學科研究中醫(yī)藥學的現(xiàn)狀。本次課的重點難點第一節(jié) 解剖學方法及其在中醫(yī)研究中的應用1大體解剖學的主要方法。2大體解剖學方法研究中醫(yī)的現(xiàn)狀。第二節(jié) 組織學方法及其在中醫(yī)研究中的應用1組織學的主要研究方法。2

2、組織學方法研究中醫(yī)的現(xiàn)狀。第三節(jié) 電鏡技術(shù)及其在中醫(yī)研究中的應用1電子顯微鏡及電子顯微術(shù)概況。2電子顯微術(shù)研究中醫(yī)的現(xiàn)狀。第四節(jié) 生物化學方法及其在中醫(yī)研究中的應用1生物化學的主要方法。2生物化學方法研究中醫(yī)的現(xiàn)狀。第五節(jié) 生理學方法及其在中醫(yī)研究中的應用1生理學的主要方法。2生理學方法研究中醫(yī)的現(xiàn)狀。第六節(jié) 免疫學方法及其在中醫(yī)研究中的應用1免疫學的主要方法。2用免疫學方法研究中醫(yī)的現(xiàn)狀。第七節(jié) 核醫(yī)學方法及其在中醫(yī)研究中的應用1核醫(yī)學的主要研究方法。2用核醫(yī)學方法研究中醫(yī)的現(xiàn)狀。第八節(jié) 分子生物學方法及其在中醫(yī)研究中的應用1分子生物學的主要技術(shù)和方法。2用分子生物學方法研究中醫(yī)的現(xiàn)狀。本次

3、課的應用教具多媒體設(shè)備。第四節(jié) 生物化學方法及其在中醫(yī)研究中的應用（2學時）生物化學是運用化學理論和技術(shù)來研究組成生物體的基本成分及其在生物體內(nèi)所進行的化學變化規(guī)律的一門學科，從而揭示生命現(xiàn)象的化學本質(zhì)。生物化學的發(fā)展可以分為靜態(tài)生化、動態(tài)生化和機能生化三個階段，這三個階段并不是截然分開的，它反映了人們對生命活動認識的深入過程。靜態(tài)生化，推測主要指以分離、制備、純化和檢測某物質(zhì)。動態(tài)生化，推測主要指活體內(nèi)的化學反應，及其動態(tài)平衡。機能生化，推測主要指研究某化學物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。（引言部分比較全面完整地介紹了生化的發(fā)展歷程，及其燦爛的里程碑）“從發(fā)揚中醫(yī)學角度來說，掌握生物化學理論和技術(shù)

4、，不僅能更深刻理解人體的生長、發(fā)育、壯盛、衰老等問題，而且從蛋白質(zhì)、核酸的分子結(jié)構(gòu)變化來探討疾病的診斷、治療和預防，無疑會起到如虎添翼的作用?！?41生物化學的主要方法生物化學技術(shù)是研究生物內(nèi)物質(zhì)的化學組成、結(jié)構(gòu)、功能以及在生命過程中化學物質(zhì)代謝變化規(guī)律，調(diào)節(jié)控制等的實驗方法。常用的生物化學技術(shù)主要有物質(zhì)的分離、提純法，光譜法，層析法，電泳法，離心法以及分子雜交技術(shù)等，現(xiàn)分述如下：6411生物大分子物質(zhì)的分離和提純（介紹書上內(nèi)容，這里介紹整個流程）生物大分子主要指蛋白質(zhì)、核酸、糖類和脂類等物質(zhì)。制備高度純化的生物大分子是研究大分子結(jié)構(gòu)與功能的前提，整個分離提純過程可分為以下幾個階段：1）材料選

5、擇。2）細胞破碎。3）亞細胞器的分離。4）提取。5）分離純化。6）濃縮、干燥及保存。6412離心技術(shù)（四大技術(shù)之一，介紹書上內(nèi)容，分別介紹以下：）1差速離心法。2密度梯度離心法。1）速度區(qū)帶離心法。2）預制梯度等密度離心法。3）自成梯度等密度離心法。3沉降平衡離心法。6413層析技術(shù)（四大技術(shù)之一，介紹書上內(nèi)容，分別介紹以下：）1根據(jù)分離的原理可劃分為：1）吸附層析。2）分配層析。3）離子交換層析。4）凝膠層析。5）親和層析。2根據(jù)兩相物理狀態(tài)可劃分為：1）液相層析。2）氣相層析。3根據(jù)支持物的裝填方式可劃分為：柱層析、薄層層析、紙層析。6414電泳技術(shù)（四大技術(shù)之一，介紹書上內(nèi)容，分別介紹以

6、下：）目前采用的電泳大致有三大類：顯微電泳、自由界面電泳和區(qū)帶電泳。區(qū)帶電泳分類如下：1）按支持物的物理性狀不同可分為：（1）濾紙及其他纖維紙電泳，（2）粉末電泳，（3）凝膠電泳、（4）緣線電泳。2）按支持物的裝置形式不同可分為：（1）平板式電泳，（2）垂直板式電泳，（3）垂直柱式電泳，（4）連續(xù)液動電泳。3）按pH的連續(xù)性不同可分為：（1）連續(xù)pH電泳，（2）非連續(xù)pH電泳。6415光譜技術(shù)（四大技術(shù)之一，介紹書上內(nèi)容，分別介紹以下：）1比色分析法。1）標準對照法。2）標準曲線法。2分光光度法。3熒光光度。4比濁法。以上這些技術(shù)，被稱為生化的四大技術(shù)，很傳統(tǒng)的。大體可以滿足靜態(tài)生化、動態(tài)生化

7、的檢測，而機能生化則首先有賴于對化學物質(zhì)的結(jié)構(gòu)認識，這樣的研究目前十分熱門，自然雜志專門有關(guān)于蛋白質(zhì)三級機構(gòu)圖的專刊，目前積累迅速。而研究則是一條長鏈，有許多環(huán)節(jié)構(gòu)成，投入成本高。6416分子雜交技術(shù)（詳見有關(guān)章節(jié)）642 用生物化學方法研究中醫(yī)的現(xiàn)狀（該章節(jié)引用了大量的國內(nèi)研究進展資料，值得仔細閱讀）6421物質(zhì)代謝介紹了：陰虛、陽虛、心氣虛、肝氣虛、脾虛、肺虛、腎虛、體質(zhì)學說與物質(zhì)代謝（其中毛良、顧文聰（我校教師）6422能量代謝介紹了：心氣虛、肝血虛、脾虛證、體質(zhì)學說與能量代謝（其中匡調(diào)元為我校教師）6423神經(jīng)內(nèi)分泌介紹了：陰虛、陽虛、心氣虛、肝、脾虛、肺虛、腎虛、與神經(jīng)內(nèi)分泌（其中趙偉康、金國琴、為我校教師），（沈自尹、王文健華山醫(yī)院藏象研究室，在腎虛證研究方面全國領(lǐng)先） 643 用生物化學方法研究中醫(yī)藥的范例6431中醫(yī)陰虛火旺證的研究（主要介紹我校的經(jīng)驗）6432補腎益精方藥對老年動物（腎虛衰老）下丘腦-垂體-腎上腺-胸腺軸作用的實驗研究（主要介紹我校的經(jīng)驗）644 展望存在問題：1）絕大多數(shù)研究停留在一般物質(zhì)指標變化的分析上，尤其對于基因水平