菘藍的藥理研究及臨床應(yīng)用

1、菘藍的藥理研究及臨床應(yīng)用          菘藍(Isatis tinctoria L.)為十字花科植物，其根和葉均可入藥，干燥根入藥稱板藍根，干燥葉入藥稱為大青葉，板藍根和大青葉的藥性基本相同，有泄火，解毒，涼血等功效，主要分布在華東各省，河南，山西等地1。臨床病例研究證明菘藍可治療流行性腮腺炎、病毒性腸炎、尖銳濕疣、乙型肝炎、甲型流感病毒、扁平疣等病毒性疾病2。還有報道菘藍有調(diào)節(jié)免疫細胞分泌IL-2、TNF- 及提高細胞免疫功能的作用3，還有抗活性氧、抗炎及抗菌作用4,5。因其應(yīng)用廣泛，故有很高的研究

2、價值。現(xiàn)就其化學(xué)成分及藥理作用，作一簡單的概述。   1 化學(xué)成分   菘藍的主要化學(xué)成分有：生物堿類物質(zhì)如靛藍、靛玉紅、靛苷、靛紅、腺苷、芥甙、新芥甙、色胺酮、1硫氰酸2羥基3丁烯、黑芥子苷、4，3(H)-喹唑酮。甾醇類物質(zhì)如谷甾醇、谷甾醇。多種氨基酸如精氨酸、脯氨酸、酪氨酸、纈氨酸、-氨基丁酸。此外，還有文獻報道指出喹唑酮也為菘藍的有效成分6。   2 藥理作用   菘藍作為傳統(tǒng)的清熱解毒中藥，對它藥理的研究發(fā)現(xiàn)，它具有抗菌，抗病毒，解熱，抗炎，抗腫瘤，增強免疫力等多種作用，是一種有著開發(fā)前景的中藥。 

3、;  2.1 抗菌作用 菘藍的水浸液對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草桿菌、八聯(lián)球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、甲型鏈球菌、肺炎雙球菌、流感桿菌、腦膜炎雙球菌均有抑制作用。鄭劍玲用不同的方法提取了菘藍的總浸液、乙醇提取液和正丁醇萃取液，通過對金黃色葡萄球菌、腸炎桿菌和大腸埃希菌的藥物敏感試驗，試驗證實，菘藍的各級提取物均對金黃色葡萄球菌有較強的抑制作用，對腸炎桿菌和大腸埃希菌的抑菌作用隨逐級提取而增強7。   2.2 抗病毒作用 菘藍作為傳統(tǒng)的清熱解毒的中藥，其抗病毒的作用一直以來作為其主要的功效進行研究。（1）流感病毒：劉盛8用12天胚齡的雛雞，采用血凝滴法做抗流感

4、病毒的實驗，證明菘藍根部的水提醇沉液對流感病毒在直接作用、治療作用、預(yù)防作用的有效率分別為100、60、70；而菘藍葉子的水提醇沉液對流感病毒在直接作用、治療作用、預(yù)防作用的有效率分別為87、87、40。胡興昌9將菘藍的根部以丙酮脫脂用Tris-HCL緩沖液提取，用兔紅細胞做凝集實驗，將具有血凝活性的凝集數(shù)樣品用雞胚培養(yǎng)法測定抗流感病毒的效果。結(jié)果表明，凝集素的血凝效價與其抗流感病毒的作用成正比，即血凝效價愈高，抗流感病毒能力愈強。（2）巨細胞病毒：何超蔓10用菘藍根部和葉子提取物制成的注射液，稀釋后采用細胞病變抑制法和MTT法觀察其對巨細胞病毒AD169毒株的抑制作用。實驗結(jié)果表明都對巨細胞

5、病毒有較強的抑制作用，且隨著藥物濃度的增高抑制作用增強。（3）柯薩奇病毒：張寰毫11發(fā)現(xiàn)用菘藍根部的水煎劑有直接滅活柯薩奇B組4型病毒的作用；但對阻止病毒吸附作用不明顯；對已感染了柯薩奇病毒的細胞也有明顯的抑制作用。即菘藍的水煎劑在細胞水平有明顯抑制CB4V的作用。近來研究發(fā)現(xiàn)，CVB4是1型胰島素依賴性糖尿病發(fā)病的重要環(huán)境誘因，故菘藍抗CVB4的作用可能有助于進一步研究對1型胰島素依賴性糖尿病的治療。李小青12通過小鼠的動物實驗發(fā)現(xiàn)菘藍的葉子水煎劑在CVB3感染的早期對小鼠病毒性心肌炎（VMC）的病理改變有顯著影響，可能是通過抑制病毒合成，增強白細胞的吞噬作用，降低毛細血管的通透性等作用改善

6、和保護心肌細胞。（4）腎綜合征出血熱病毒：李聞文13用間接免疫熒光法研究用菘藍根部提取物制作的針劑對腎綜合征出血熱病毒（HFRSV）的作用。結(jié)果表明，對HFRSV是殺滅作用而非抑制作用，1:100有效，1:1000以上濃度的無效。并進一步用酶免疫組化技術(shù)研究菘藍在體外對HFRSV有殺滅作用。   2.3 對內(nèi)毒素作用 菘藍抗內(nèi)毒素的作用是近來研究的一個熱點。劉云海14用被菘藍作用過的類毒素做家兔熱原實驗，在電子顯微鏡下觀察結(jié)構(gòu)形態(tài)變化，證實確有抗大腸桿菌O111B4內(nèi)毒素作用。并在進一步的實驗15中發(fā)現(xiàn)，藥物與內(nèi)毒素之間的凝集反應(yīng)具有高度的特異性、靈敏性，通常試樣中的微量內(nèi)

7、毒素的存在就可以激活鰲試劑中凝固酶使凝固蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槟痰鞍桩a(chǎn)生凝集反應(yīng)，實驗說明了菘藍中確有抗內(nèi)毒素活性的物質(zhì)存在。他還在實驗中16發(fā)現(xiàn)抑制內(nèi)毒素作用是通過對內(nèi)毒素刺激機體防御系統(tǒng)釋放炎癥因子即腫瘤壞死因子（TNF-）及一氧化氮（NO）的抑制，且有劑量的依賴性。湯杰17通過對菘藍根部用乙醇滲漉提取后依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇加熱浸提后得到的提取物，實驗發(fā)現(xiàn)，可顯著降低內(nèi)毒素性DIC家兔血清的血清脂質(zhì)過氧化物（LPO）水平，提高超氧化物歧化酶(SOD)活力，提示提取物具有抗脂質(zhì)過氧化，清除氧自由基的作用，能夠拮抗內(nèi)毒素的生物效應(yīng)，是發(fā)揮抗內(nèi)毒素活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。方建國18通過提取菘藍葉

8、子的有效部位，發(fā)現(xiàn)有能直接中和和降解內(nèi)毒素，顯著降低內(nèi)毒素的致死性和致熱性，具有顯著的體外抗內(nèi)毒素活性的作用。   2.4 對免疫系統(tǒng)的作用 趙紅19通過研究菘藍葉的水煎劑體外對C57小鼠免疫細胞分泌IL-2、TNF-水平的影響，用3H-TdR摻入法測定不同濃度的水煎劑對小鼠脾淋巴細胞和腹腔巨噬細胞的毒性作用，MTT方法分別檢測IL-2、TNF-的生物學(xué)活性。結(jié)果表明，在0.41.6mg/ml濃度時能促進正常小鼠被ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細胞分泌IL-2，未見到對小鼠腹腔分泌TNF-有明顯作用。認為菘藍的水煎劑通過促進淋巴細胞IL-2的分泌，可以在細胞免疫和體液免疫兩個方面上調(diào)

9、小鼠的免疫功能，同時對巨噬細胞分泌TNF致炎效應(yīng)和免疫病理損傷無明顯影響，故提示在免疫增強的同時沒有更多影響白細胞的活動，不造成更嚴重的病理損傷及功能失調(diào)。秦箐20用快速低壓干柱柱層析從菘藍根部中分離出一個低極性流分及一組亞流分，用化學(xué)發(fā)光法檢測對人多形核細胞化學(xué)發(fā)光的影響。結(jié)果表明，菘藍低極性流分具有雙向免疫活性，在低濃度時有激活作用，在高濃度時具有抑制作用；而亞流分的免疫活性并未因為其純度的提高而相應(yīng)提高。故說明了菘藍低極性流分及亞流分含有抗炎成分。   2.5 抗癌作用 菘藍的提取物具有抗癌作用，在許多學(xué)者的研究中被報道。菘藍中的有效成分靛玉紅是抗腫瘤的主要活性物質(zhì)。

10、采用靛玉紅-脂質(zhì)體，通過對大鼠的體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)，它能降低大鼠細胞膜流動性，DNA聚合酶I的活性比治療前降低74。侯華新21從菘藍的根部分離出高級不飽和脂肪組酸，用MTT法測定細胞毒作用，集落形成實驗觀察對肝癌細胞增殖的抑制作用，PCR-ELISA試劑盒測定細胞的端粒酶活性等方法研究體外抗人肝癌BEL-7402細胞活性。實驗結(jié)果表明，分離出的高級不飽和脂肪組酸能抑制BEL-7402細胞的增殖，其IC50為0.6mg/ml，有促使腫瘤細胞向正常細胞逆轉(zhuǎn)的趨勢，可降低端粒酶活性的表達，具有體外抗腫瘤的活性。韋長元22從菘藍的根部分離的板藍根組酸對人耐藥肝癌細胞BEL-7404/ADM進行了體外逆轉(zhuǎn)實驗

11、，發(fā)現(xiàn)無毒劑量的板藍根組酸活性單體-5b能明顯增強化療藥對BEL-7404/ADM細胞的毒作用，且對ADM的耐藥逆轉(zhuǎn)倍數(shù)可達4.82倍，是一種較好的BEL-7404/ADM細胞的多重耐藥的調(diào)節(jié)劑，并推測它的耐藥逆轉(zhuǎn)作用主要是阻滯腫瘤細胞鈣離子通道，減少細胞內(nèi)藥物外流，從而增加了耐藥細胞對化療藥物的敏感性。梁永紅23發(fā)現(xiàn)從菘藍的根部提取脂溶性的提取物板藍根二酮B有體外抑制肝癌BEL-7402細胞和卵巢癌A2780細胞的能力，抑制作用均與濃度呈梯度關(guān)系，且抑制卵巢癌A2780細胞的能力比肝癌BEL-7402細胞強。       

12、     2.6 對單胺氧化酶抑制作用 日本學(xué)者Hamaue24提出在歐洲菘藍中存在的靛紅為單胺氧化酶（MAO）的抑制劑，可增加小鼠尿及腦中的去甲腎上腺素(NE)和5-羥色胺（5-HT）的濃度，喂食靛紅2h后的小鼠紋狀體的乙酰膽堿和多巴胺的水平也顯著增高。靛紅顯著增加Parkinsons病的小鼠紋狀體多巴胺水平。認為靛紅具有廣譜生物活性：抗抑郁，多種酶抑制劑，抗癲癇，苯二氮類受體和ANP受體的抑制劑。   2.7 抗炎作用 衛(wèi)宗玲25首次報道菘藍的醇提取物具有抗炎作用。實驗發(fā)現(xiàn)，菘藍根部70乙醇提取液對二甲苯所致小鼠耳腫脹和角叉菜膠所致的大鼠足

13、部腫脹有明顯的抑制作用，且可抑制大鼠棉球肉芽腫及降低醋酸引起的毛細血管通透性增加。認為菘藍的提取液急慢性非特異性炎癥模型及肉芽腫組織增生的抑制而發(fā)揮抗炎作用。   2.8 抗活性氧作用 龍盛京26采用化學(xué)發(fā)光分析法，利用H2O2-CTMAB魯米諾發(fā)光體系，研究菘藍干燥葉的水煎劑體外抗活性氧的作用。結(jié)果表明，提取物對H2O2有一定的清除作用，且呈量效關(guān)系，揭示它有抗氧化的性能。   菘藍的制劑中靛藍、靛玉紅及多糖的含量極低，因而以它們作為主要活性指標建立質(zhì)控方法顯然不可??；結(jié)合型氨基酸或結(jié)合型糖蛋白有顯著的抗病毒活性，但其組成、類型、結(jié)構(gòu)特點還不清楚；有機

14、酸成分具有抗內(nèi)毒素作用，但其作用是否為菘藍抗病毒作用的關(guān)鍵所在還要進一步探討。故對菘藍及制劑活性指標依然值得進行深入研究，其質(zhì)控方法還需要進一步完善和提高。   綜上所述，目前對菘藍的研究主要是對其藥理活性的研究，為其臨床應(yīng)用奠定了一定的化學(xué)基礎(chǔ)。但對其在臨床上治療機制的研究還不夠深入，對其工藝的提取和質(zhì)量的控制還存在較大的爭議。因此，結(jié)合其有效成分的藥理活性深入臨床研究菘藍對疾病治療的作用，建立更完善的制劑工藝并制定合理的質(zhì)量標準，有著現(xiàn)實和積極的意義。   【參考文獻】   1 國家藥典委員會.中國藥典（一部）.北京：化學(xué)工業(yè)出版

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