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1、第六章 微生物的生長(zhǎng)及其控制1、名詞解釋:生長(zhǎng)產(chǎn)量常數(shù)(Y),最適生長(zhǎng)溫度,巴氏消毒法,抗生素,抗代謝藥物,選擇毒力,生長(zhǎng)限制因子。 生長(zhǎng)產(chǎn)量常數(shù)(Y):指菌體產(chǎn)量與限制性營(yíng)養(yǎng)物消耗的比例關(guān)系。 最適生長(zhǎng)溫度:某菌分裂代時(shí)最短或生長(zhǎng)速率最高時(shí)的培養(yǎng)溫度。 巴氏消毒法:用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品,殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營(yíng)養(yǎng)
2、與風(fēng)味的消毒方法。 抗生素:抗生素是生物在其生命活動(dòng)中產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物或其人工衍生物,能對(duì)他種生物的生命活動(dòng)產(chǎn)生抑制作用或致死作用。 抗代謝藥物:又稱代謝拮抗物、代謝類似物,是指在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物相似,可以與正常代謝途徑中特定的酶發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性反應(yīng),從而阻礙酶的功能、干擾代謝的正常進(jìn)行的物質(zhì)。 選擇毒力:抗生素對(duì)人體及動(dòng)、植物組織的
3、毒力,一般遠(yuǎn)小于它對(duì)致病毒的毒力,這稱為抗生素的選擇毒力。 生長(zhǎng)限制因子:凡是處于較低濃度范圍內(nèi),可影響生長(zhǎng)速率和菌體產(chǎn)量的營(yíng)養(yǎng)物,就稱生長(zhǎng)限制因子。 MIC:最小抑菌濃度,表示某藥物對(duì)某菌的最小抑菌濃度,常以g/ml或/ml來表示。2、什么是典型生長(zhǎng)曲線?它可分幾期?劃分的依據(jù)是什么?各期特點(diǎn)如何? 典型生長(zhǎng)曲線:將少量純種單細(xì)胞微生物接種到
4、恒容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在適宜條件下,其群體就會(huì)有規(guī)律地生長(zhǎng),定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞含量,以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值作縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間作橫坐標(biāo),就可以畫出一條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的典型生長(zhǎng)曲線。 劃分的依據(jù):?jiǎn)渭?xì)胞微生物。 特點(diǎn): (1)延滯期(停滯期、調(diào)整期):a.生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大;c.細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍;e.對(duì)外界不良條件的反應(yīng)敏感
5、。 (2)對(duì)數(shù)期:菌體細(xì)胞生長(zhǎng)的速率常數(shù)R最大,分裂快,代時(shí)短,細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng),菌體內(nèi)酶系活躍,代謝旺盛,菌體數(shù)目以幾何級(jí)數(shù)增加,群體的形態(tài)與生理特征最一致,抗不良環(huán)境的能力強(qiáng)。 穩(wěn)定期:a.生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達(dá)到最高;c.活菌數(shù)相對(duì)穩(wěn)定;d.細(xì)胞開始貯存貯藏物;e.芽孢在這個(gè)時(shí)期形成;f.有些微生物在此時(shí)形成次生代謝產(chǎn)物。 衰亡期:a.細(xì)胞形態(tài)多樣;b.出現(xiàn)細(xì)胞自溶現(xiàn)象;c.有次生代謝產(chǎn)物的形成;d.芽孢在此時(shí)釋
6、放。3、如何縮短延滯期? a.以對(duì)數(shù)期的菌體作種子菌;b.適當(dāng)增大接種量:一般采用3%8%的接種量,根據(jù)生產(chǎn)上的具體情況而定,最高不超過1/10;c.培養(yǎng)基的成分:種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基 。 4、處于指數(shù)期的微生物有何應(yīng)用? 指數(shù)期的微生物是研究生理、代謝等的良好材料;是增殖噬菌體的最適菌齡;是發(fā)酵生產(chǎn)中用做種子的最佳種齡,通過補(bǔ)加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)延長(zhǎng)指數(shù)期。5、穩(wěn)定期為何會(huì)到來?有何特點(diǎn)?原因:a.營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的耗盡;b.營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào);c.有害代謝產(chǎn)物的積累;d.物化條件的變化。 特
7、點(diǎn):a.生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達(dá)到最高;c.活菌數(shù)相對(duì)穩(wěn)定;d.細(xì)胞開始貯存貯藏物;e.芽孢在這個(gè)時(shí)期形成;f.有些微生物在此時(shí)形成次生代謝產(chǎn)物。6、什么叫連續(xù)培養(yǎng)?有何優(yōu)點(diǎn)?為何連續(xù)時(shí)間是有限的? 連續(xù)培養(yǎng):指微生物接種到培養(yǎng)基里以后的整個(gè)生長(zhǎng)期間,微生物能持續(xù)地以比較恒定的生長(zhǎng)速率常數(shù)進(jìn)行生長(zhǎng),從而導(dǎo)致微生物的生長(zhǎng)過程能“不斷”地進(jìn)行下去的一種培養(yǎng)方法。 優(yōu)點(diǎn):高效、低耗、利于自控、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。
8、0; 原因:菌種易于退化;容易污染;營(yíng)養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。因此連續(xù)時(shí)間是有限的。7、微生物培養(yǎng)過程中pH變化的規(guī)律如何?如何調(diào)整? 微生物的生命活動(dòng)過程中會(huì)自動(dòng)地改變外界環(huán)境的pH,其中發(fā)生pH改變有變酸和變堿兩種過程,在一般微生物的培養(yǎng)中往往以變酸占優(yōu)勢(shì),因此,隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),培養(yǎng)基的pH會(huì)逐漸下降。pH的變化還與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系,碳氮比高的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后pH會(huì)明顯下降;碳氮比低的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后pH常會(huì)明顯上升。 措施:分為“治標(biāo)”和“
9、治本”兩大類,前者指根據(jù)表面現(xiàn)象而進(jìn)行直接、及時(shí)、快速但不持久的表面化調(diào)節(jié),后者指根據(jù)內(nèi)在機(jī)制而采用的間接、緩效但可發(fā)揮持久作用的調(diào)節(jié)。8、比較滅菌、消毒、防腐和化療的異同,并舉例。 比較項(xiàng)目 滅菌 消毒
10、 防腐 化療 處理因素 強(qiáng)理化因素 理化因素 理
11、化因素 化學(xué)治療劑 處理對(duì)象 任何物體內(nèi)外 酒、乳 有機(jī)質(zhì)物體內(nèi)外 宿主體內(nèi)微生物類型 一切微生物 有關(guān)病原菌 一切微生物 有關(guān)病原菌對(duì)微生物作用
12、; 徹底殺滅 殺死或抑制 抑制或殺死 抑制或殺死 實(shí)例 加壓蒸氣滅菌 巴氏消毒法 冷藏、糖漬 抗生素、磺胺藥9、試述微生物生長(zhǎng)繁殖的測(cè)定方法。 一、測(cè)生長(zhǎng)量(一)直接法1、測(cè)體積2
13、、測(cè)干重(二)間接法1、比濁法2、生理指標(biāo)法 二、計(jì)繁殖數(shù)1、直接計(jì)數(shù)法(全數(shù))血球計(jì)數(shù)板法 2、間接計(jì)數(shù)法(活菌數(shù))稀釋平板菌落計(jì)數(shù)法10、試述高溫滅菌的方法。 1、干熱滅菌法:原理:干熱可使破壞細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥,并可使各種細(xì)胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。 應(yīng)用范圍:1)烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法
14、(150170,12hr):金屬器械、洗凈的玻璃器皿。 2)火焰灼燒法:接種環(huán)、接種針等。2、濕熱滅菌: 以100以上的加壓蒸氣進(jìn)行滅菌。 (1)相同溫度及相同作用時(shí)間下,濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效:濕熱空氣穿透力強(qiáng),能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性的氫鍵,能加速其變性。 (2)種類:
15、 1)常壓法: a.巴氏消毒法:用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品,殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營(yíng)養(yǎng)與風(fēng)味的消毒方法。低溫維持法(LTH):要求62.8保持30min;高溫瞬時(shí)法(HTST):要求71.7維持至少15s;
16、0; b.煮沸消毒法:適用范圍:一般用于飲用水的消毒。條件:100下數(shù)分鐘。 c.間隙滅菌法:又稱丁達(dá)爾滅菌法或分段滅菌法。適用范圍:適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。條件:8
17、0-100下蒸煮15-60分鐘,三天。 2)加壓法: a.常規(guī)加壓法:適用范圍:適合于一切微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)或發(fā)酵工廠中對(duì)培養(yǎng)基及多種器材、物料的滅菌。條件:121(壓力為lkgcm2),時(shí)間維持15-20
18、分鐘,也可采用在較低的溫度(115,即0.7kgcm2下維持35分鐘的方法。 b.連續(xù)加壓滅菌法:在發(fā)酵行業(yè)里也稱“連消法”。適用范圍:在大規(guī)模的發(fā)酵工廠中作。培養(yǎng)基滅菌用。主要操作是將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進(jìn)行加熱、維持和冷卻,然后才進(jìn)入發(fā)酵罐。條件:在135-140下處理5-l 5秒鐘11、請(qǐng)說明營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度變化對(duì)微生物生長(zhǎng)速度和最終菌體
19、產(chǎn)量的影響。 微生物生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),只有在濃度適當(dāng)?shù)臈l件下才能表現(xiàn)出良好的作用。濃度太低,不能滿足微生物生長(zhǎng)的需要;濃度太高反而會(huì)抑制微生物的生長(zhǎng),最終導(dǎo)致菌體產(chǎn)量。12、按照微生物與氧氣的關(guān)系可分為哪些類型?好氧、微好氧、耐氧型、兼性厭氧和專性厭氧五種類型13、為什么缺乏SOD的微生物只能進(jìn)行專性厭氧生活?好氧生物因?yàn)橛辛薙OD,巨毒的O2-就被歧化成毒性稍低的H2O2,在過氧化氫酶的作用下,H2O2又進(jìn)一步變成無毒的H2O。厭氧菌因不能合成SOD,所以根本無法使O2-歧化成H2O2,因此當(dāng)有氧存在時(shí),細(xì)胞內(nèi)形成的O2-。就使自身受到毒害。15、什么
20、是菌種衰退?菌種衰退的原因是什么?菌種衰退:生產(chǎn)菌株生產(chǎn)性狀的劣化或遺傳研究菌株遺傳標(biāo)記的丟失稱為菌種衰退。 原因:1、自發(fā)突變:菌種退化的主要原因是有關(guān)基因的負(fù)突變。 2、通過誘變獲得的高產(chǎn)菌株本身不純:高產(chǎn)突變只發(fā)生在一個(gè)核上,隨著核的分離,原來未變異的低產(chǎn)性狀逐漸恢復(fù)。單核微生物由于高產(chǎn)突變只發(fā)生在一條DNA鏈上,也往往發(fā)生分離回復(fù)的現(xiàn)象。
21、 3、培養(yǎng)、保藏條件:可以通過對(duì)自發(fā)突變率的影響來表現(xiàn),也可在不改變基因現(xiàn)的情況下表現(xiàn)。第五章 微生物的新陳代謝1、名詞解釋:新陳代謝,生物氧化,呼吸,無氧呼吸,發(fā)酵,氧化磷酸化,光合磷酸化,底物水平磷酸化,Stickland反應(yīng)。 新陳代謝:發(fā)生在活細(xì)胞中的各種分解代謝與合成代謝的總和。其中,分解代謝是指復(fù)雜的有機(jī)物分子通過分解代謝酶系的催化,產(chǎn)生簡(jiǎn)單分子、腺苷三磷酸(ATP)形式的能量或還原力(或稱還原當(dāng)量,以H
22、表示)的作用;合成代謝則與分解代謝相反,是指在合成代謝酶系的催化下,由簡(jiǎn)單小分子、ATP形式的能量與H形式的還原力一起合成大分子的過程。 生物氧化:發(fā)生在活細(xì)胞中的一系列產(chǎn)能性氧化反應(yīng)的總稱。 呼吸:底物按常規(guī)方式脫氫后,經(jīng)完整的呼吸鏈遞氫,最終由分子氧接受氫并產(chǎn)生水和釋放能量(ATP)的生物氧化方式。呼吸必須在有氧條件下進(jìn)行,因此又叫有氧呼吸。 無氧呼吸:又稱厭氧呼吸,是一類呼吸鏈末端的氫
23、受體為外源無機(jī)氧化物(少數(shù)為有機(jī)氧化物)的生物氧化。 發(fā)酵:無氧條件下,底物脫氫后產(chǎn)生的還原力不經(jīng)呼吸鏈而直接傳遞給某一中間代謝物的低效產(chǎn)能反應(yīng)。 氧化磷酸化:電子傳遞磷酸化,是指呼吸鏈的遞氫(或電子)和受氫過程與磷酸化反應(yīng)相偶聯(lián)并產(chǎn)生ATP的作用。 光合磷酸化:由光照引起的電子傳遞與磷酸化作用相偶聯(lián)而生成ATP的過程成為光合磷酸化。
24、 底物水平磷酸化:是指在生物氧化過程中產(chǎn)生一些含有高能磷酸鍵的化合物,并且這些高能磷酸化合物的高能磷酸鍵鍵能可以直接偶聯(lián)ATP合成。 Stickland反應(yīng):以一種氨基酸作氫供體和以另一種氨基酸作氫受體而實(shí)現(xiàn)生物氧化產(chǎn)能的獨(dú)特發(fā)酵類型。2、試述生物氧化的形式、過程、功能及類型。 形式:某物質(zhì)與氧結(jié)合、脫氫或失去電子 過程:一般包括三個(gè)環(huán)節(jié):
25、60; 底物脫氫(或脫電子)作用(該底物稱作電子供體或供氫體) 氫(或電子)的傳遞(需中間傳遞體,如NAD、FAD等) 最后氫受體接受氫(或電子)(最終電子受體或最終氫受體) 功能:產(chǎn)能(ATP)、產(chǎn)還原力H和產(chǎn)小分子中間還原產(chǎn)物。 類型:呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵3、在化能異養(yǎng)微生物的生物氧化中,其基質(zhì)脫氫和產(chǎn)能的途徑主要有哪
26、幾條?試比較各途徑的主要特點(diǎn)。 脫氫和產(chǎn)能的途徑:EMP、HMP、ED、TCA 特點(diǎn): EMP:當(dāng)葡萄糖轉(zhuǎn)化成1.6-二磷酸果糖后,在果糖二磷酸醛縮酶作用下,裂解為兩個(gè)3化合物,再由此轉(zhuǎn)化為2分子丙酮酸。 HMP:當(dāng)葡萄糖經(jīng)一次磷酸化脫氫生成6-磷酸葡萄糖酸后,在6-磷酸葡萄糖酸脫酶作用下,再次脫氫降解為1分子CO2和1分子磷酸戊糖。
27、 ED:是少數(shù)EMP途徑不完整的細(xì)菌所特有的利用葡萄糖的替代途徑。一分子葡萄糖經(jīng)ED途徑可生成兩個(gè)丙酮酸并凈生成一個(gè)ATP、一個(gè)NADH+H+和一個(gè)NADPH+H+。 TCA:(1)氧雖不直接參與其中反應(yīng),但必須在有氧條件下運(yùn)轉(zhuǎn); (2)丙酮酸在進(jìn)入三羧酸循環(huán)之前要脫羧生成乙酰CoA,再和草酰乙酸縮合成檸檬酸再進(jìn)入三羧酸循環(huán)。 (3)循環(huán)的結(jié)果是乙酰CoA被徹底氧化成CO2和H2O,每氧化1分
28、子的乙酰CoA可產(chǎn)生12分子的ATP,草酰乙酸參與反應(yīng)而本身并不消耗。 (4)產(chǎn)能效率極高; (5)TCA位于一切分解代謝和合成代謝中的樞紐地位。4、試述EMP途徑在微生物生命活動(dòng)中的重要性。 供應(yīng)ATP形式的能量和NADH2形式的還原力;
29、 是連接其它幾個(gè)重要代謝途徑的橋梁; 為生物合成提供多種中間代謝物; 通過逆向反應(yīng)可進(jìn)行多糖合成。5、試述HMP途徑在微生物生命活動(dòng)中的重要性。 供應(yīng)合成原料;產(chǎn)還原力;作為固定CO2的中介;擴(kuò)大碳源的利用范圍;連接EMP途徑。6、試述TCA循環(huán)在微生物產(chǎn)能和發(fā)酵生產(chǎn)中的重要性。 TCA位于一切分解代謝和合成代謝中的樞紐地位,產(chǎn)能效率
30、極高,不僅可為微生物的生物合成提供各種碳架原料,而且還與人類的發(fā)酵生產(chǎn)緊密相關(guān)。7、在微生物能量代謝中ATP的產(chǎn)生途徑有哪幾條?EMP、HMP、ED、TCA、呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵8、試比較呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵的異同點(diǎn)。產(chǎn)能方式 呼吸 無氧呼吸 發(fā)酵環(huán)境條件 有氧 &
31、#160; 無氧 無氧終電子受體 分子氧 無機(jī)化合物 代謝中間物 來源 環(huán)境 環(huán)境
32、 胞內(nèi) 性質(zhì) 外源性 外源性 內(nèi)源性9、細(xì)菌的酒精發(fā)酵途徑如何?它與酵母菌的酒精發(fā)酵有何不同?細(xì)菌的酒精發(fā)酵有何優(yōu)缺點(diǎn)? 酒精發(fā)酵途徑ED,酵母菌酒精發(fā)酵EMP 細(xì)菌酒
33、精發(fā)酵優(yōu)缺點(diǎn): a.優(yōu)點(diǎn):代謝速率高;產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率高;菌體生成少;代謝副產(chǎn)物少;發(fā)酵溫度高;不必定期供氧;細(xì)菌為原核生物,易于用基因工程改造菌種;厭氧發(fā)酵,設(shè)備簡(jiǎn)單。 b.缺點(diǎn):生長(zhǎng)pH為5,較易染菌;細(xì)菌耐乙醇力較酵母菌為低(細(xì)菌7%乙醇,酵母菌耐8-10%乙醇);底物范圍窄(葡萄糖、果糖)。11、青霉素為何只能抑制代謝旺盛的細(xì)菌?其制菌機(jī)制如何?
34、; 原因:青霉素抑制肽聚糖的合成過程,形成破裂的細(xì)胞壁,代謝旺盛的細(xì)菌才存在肽聚糖的合成,因此此時(shí)有青霉素作用時(shí)細(xì)胞易死亡。 作用機(jī)制:青霉素破壞肽聚糖合成過程中肽尾與肽橋間的轉(zhuǎn)肽作用。12、如何運(yùn)用代謝調(diào)控理論使微生物合成比自身需求量更多的有用代謝產(chǎn)物?舉例說明。 應(yīng)用營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株解除正常的反饋調(diào)節(jié),如賴氨酸發(fā)酵、肌苷酸的生產(chǎn); 應(yīng)用抗反饋調(diào)節(jié)的突變株解除反饋調(diào)節(jié),l0CiZ0l/WaT如
35、黃色短桿菌的抗氨基羥基戊酸菌株能累積蘇氨酸; 控制細(xì)胞膜的滲透性,如在谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)中只有把生物素濃度控制在亞適量的情況下才能分泌出谷氨酸。第四章 微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基1、名詞解釋:自養(yǎng)微生物,異養(yǎng)微生物,營(yíng)養(yǎng),營(yíng)養(yǎng)物,C/N,氨基酸自養(yǎng)型生物,氨基酸異養(yǎng)型生物,生長(zhǎng)因子,大量元素,微量元素,培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物:以二氧化碳作為主要或唯一的碳源,以無機(jī)氮化物作為氮源,通過細(xì)菌光合作用或化能合成作用獲得的能量的微生物。異養(yǎng)微生物:以有機(jī)物為碳源,光或有機(jī)物分解為能源的微生物。營(yíng)養(yǎng):指生物體從外部環(huán)境攝取其生命活動(dòng)所
36、必須的能量和物質(zhì),以滿足其生長(zhǎng)和繁殖需要的一種生理功能。 營(yíng)養(yǎng)物:能為機(jī)體生命活動(dòng)提供結(jié)構(gòu)物質(zhì)、能量、代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)和良好的生理環(huán)境的物質(zhì)稱為營(yíng)養(yǎng)物。 C/N比:在微生物培養(yǎng)基中所含的碳源中碳原子的摩爾數(shù)與氮源中氮原子的摩爾數(shù)之比。 氨基酸自養(yǎng)型生物:不需要氨基酸作為氮源的,它們能把非氨基酸類的簡(jiǎn)單氮源自行合成所需要的一切氨基酸。
37、60; 氨基酸異養(yǎng)型生物:需要從外界吸收現(xiàn)成的氨基酸作氮源。 生長(zhǎng)因子:一類對(duì)微生物正常代謝必不可少且又不能從簡(jiǎn)單的碳、氮源自行合成的所需極微量的有機(jī)物。 大量元素:凡是生長(zhǎng)所需濃度在10-310-4mol/L范圍內(nèi)的元素,可稱為大量元素,包括P、S、K、Mg、Ca、Na和Fe等。微量元素:凡是生長(zhǎng)所需濃度在10-610-8mol/L范圍內(nèi)的元素,則稱為微量元素,包括Cu、Zn、Mn、Mo、和Co等。培養(yǎng)基:是一種人
38、工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合養(yǎng)料,它具備微生物所需的六大營(yíng)養(yǎng)元素,且其間比例合適。2、指出四大類微生物的最適生長(zhǎng)pH范圍及常用的培養(yǎng)基名稱。 細(xì)菌(PH7.47.6)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;真菌(自然PH)馬鈴薯培養(yǎng)基;霉菌(PH7.07.2)察氏培養(yǎng)基;放線菌(PH7.47.6)高氏一號(hào)培養(yǎng)基。3、指出微生物的六大營(yíng)養(yǎng)要素。 碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、水4、試比較細(xì)胞膜運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的四種方式。比較項(xiàng)目
39、 單純擴(kuò)散 促進(jìn)擴(kuò)散 主動(dòng)運(yùn)輸 基因移位特異載體蛋白 無
40、160; 有 有
41、0; 無運(yùn)送速度 慢 快
42、 快 快 溶質(zhì)運(yùn)送方向 &
43、#160; 由濃至稀 由濃至稀 由稀至濃 由稀至濃 平衡時(shí)內(nèi)外濃度 內(nèi)外相等 內(nèi)外相等 內(nèi)部濃度高得多
44、60; 內(nèi)部濃度高得多 運(yùn)送分子 無特異性 特異性 特異性 &
45、#160; 特異性 能量消耗 不需要 不需要 需要
46、; 需要運(yùn)送前后溶質(zhì)分子 不變 不變
47、 不變 改變 載體飽和效應(yīng) 無
48、60; 有 有
49、; 有 與溶質(zhì)類似物 無競(jìng)爭(zhēng)性 有競(jìng)爭(zhēng)性 有競(jìng)爭(zhēng)性 有競(jìng)爭(zhēng)性
50、 運(yùn)送抑制劑 無 有
51、160; 有 有 運(yùn)送對(duì)象舉例:H2O、CO2、O2 SO42+、PO43+、糖,氨基酸、糖類、無機(jī)離子,葡萄糖、核苷、脂肪酸5、什么是鑒別性培養(yǎng)基?試以EMB培養(yǎng)基為例,分析其鑒別作用的原理。
52、; 鑒別性培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中加入能于某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。 EMB作用原理:%o1v3I-U5l,Bb5其中的伊紅和美藍(lán)兩種苯胺染料可抑制革蘭氏陽性細(xì)菌和一些難培養(yǎng)的革蘭氏陰性細(xì)菌。在低酸度時(shí),這兩種染料結(jié)合形成沉淀,起著產(chǎn)酸指示劑的作用。因此試樣中的多種腸道細(xì)菌會(huì)在EMB培養(yǎng)基上產(chǎn)生相互易區(qū)分的特征菌落,因而易于辨認(rèn)。尤其是大腸桿菌,因其強(qiáng)烈分解乳搪而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+故
53、可染上酸性染料伊紅,又因伊紅與美藍(lán)結(jié)合,所以菌落染上深紫色,從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光。6、什么是單功能營(yíng)養(yǎng)物、雙功能營(yíng)養(yǎng)物、多功能營(yíng)養(yǎng)物? 單功能營(yíng)養(yǎng)物:一種營(yíng)養(yǎng)物有一種營(yíng)養(yǎng)要素功能,該營(yíng)養(yǎng)物稱為單功能營(yíng)養(yǎng)物。 雙功能營(yíng)養(yǎng)物:一種營(yíng)養(yǎng)物有兩種營(yíng)養(yǎng)要素功能,該營(yíng)養(yǎng)物稱為雙功能營(yíng)養(yǎng)物。 多功能營(yíng)養(yǎng)物:一種營(yíng)養(yǎng)物常有兩種以上營(yíng)養(yǎng)要素功能,該營(yíng)養(yǎng)物稱為多功能營(yíng)養(yǎng)物。7、試述培養(yǎng)基的種類。
54、; 按對(duì)培養(yǎng)基成分的了解來分:天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基 按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)來分:固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、脫水培養(yǎng)基 按培養(yǎng)基的功能來分:種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基第三章 病毒和亞病毒1、名詞解釋:病毒,真病毒,亞病毒,噬菌斑,烈性噬菌體,溫和噬菌體,溶原菌,溶原性。病毒:是超顯微的,無細(xì)胞結(jié)構(gòu),專性活細(xì)胞內(nèi)寄生,在活細(xì)胞外具一般化學(xué)大分子特征,一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞又具有生命特征。
55、160; 真病毒:至少含有核酸和蛋白質(zhì)兩種組分的病毒。 亞病毒:凡在核酸和蛋白質(zhì)兩種成分中,只含其中之一的分子病原體稱為亞病毒。 噬菌斑:當(dāng)一個(gè)噬菌體感染一個(gè)敏感細(xì)胞后,隔不久即釋放出一群子代噬菌體,在固體培養(yǎng)基中,它們通過瓊脂層的擴(kuò)散又侵染周圍的宿主細(xì)胞,并引起它們的裂解,如此經(jīng)過多次重復(fù),就出現(xiàn)了一個(gè)由無數(shù)噬菌體粒子構(gòu)成的群體噬菌斑,它是透亮不長(zhǎng)菌的小圓斑,每一個(gè)噬菌斑是由一個(gè)噬菌體粒子形成的。
56、60; 烈性噬菌體:凡在短時(shí)間內(nèi)能連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解這五個(gè)階段而實(shí)現(xiàn)其繁殖的噬菌體。 溫和性噬菌體:噬菌體侵染宿主后,并不增殖,裂解,而與宿主DNA結(jié)合,隨宿主DNA復(fù)制而復(fù)制,此時(shí)細(xì)胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體,這種噬菌體稱為溫和性噬菌體或溶源噬菌體。 溶原菌:含有溫和性噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌。 溶源性:噬菌體附著或整合在宿主染色體上,一道復(fù)制。2、病毒粒
57、有哪幾種對(duì)稱體制?每種對(duì)稱又有幾類特殊外形?螺旋對(duì)稱型TMV 呈直桿狀,中空 二十面體對(duì)稱腺病毒 外形呈典型的二十面體復(fù)合對(duì)稱T偶數(shù)噬菌體,呈蝌蚪狀3、簡(jiǎn)述烈性噬菌體裂解性生活史。吸附 噬菌體尾絲散開,固著于特異性受點(diǎn)上。侵入 尾鞘收縮,尾管推出并插入到細(xì)胞壁和膜中,頭部的核酸注入到宿主細(xì)胞中,而蛋白質(zhì)衣殼留在細(xì)胞壁外。增殖 增殖過程包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的生物合成。注入細(xì)胞的核酸操縱宿主細(xì)胞代謝機(jī)構(gòu),以寄主個(gè)體及細(xì)胞降解物和培養(yǎng)基介質(zhì)為原料,大量復(fù)制噬菌體核酸,并合成蛋白質(zhì)外殼。成熟(裝配)寄主細(xì)胞合成噬菌體殼體(T4噬菌體包括頭部、尾部),并
58、組裝成完整的噬菌體粒子。裂解(釋放)子代噬菌體成熟后,脂肪酶和溶菌酶促進(jìn)宿主細(xì)胞裂解,從而釋放出大量子代噬菌體。4、什么是一步生長(zhǎng)曲線?它可分幾期?各期有何特點(diǎn)?一步生長(zhǎng)曲線:定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線稱作一步生長(zhǎng)曲線或一級(jí)生長(zhǎng)曲線。 潛伏期:從噬菌體吸附細(xì)菌細(xì)胞至細(xì)菌細(xì)胞釋放出新的噬菌體的最短時(shí)間。又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期。裂解期:從被感染的第一個(gè)細(xì)胞裂解至最后一個(gè)細(xì)胞裂解完畢所經(jīng)歷的時(shí)間。平穩(wěn)期:指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌體數(shù)達(dá)到最高點(diǎn)后的時(shí)期。裂解量:每個(gè)被感染的細(xì)菌釋放新的噬菌體的
59、平均數(shù)。第二章 真核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能1、名詞解釋:真核微生物,酵母菌,生活史,霉菌,無性孢子,有性孢子,子實(shí)體, 真核微生物:是指一大類有完整細(xì)胞核、結(jié)構(gòu)精巧的染色體和多種細(xì)胞器的微生物。 酵母菌:非分類名詞,一群能發(fā)酵糖類的單細(xì)胞微生物,屬真菌類。 生活史:個(gè)體經(jīng)一系列生長(zhǎng)、發(fā)育階段后而產(chǎn)生下一代個(gè)體的全部過程,就稱為該生物的生活史或生命周期。
60、160; 霉菌:(非分類名詞)絲狀真菌統(tǒng)稱,通常指菌絲體發(fā)達(dá)而又不產(chǎn)生大型子實(shí)體的真菌。 無性孢子:不經(jīng)過兩性細(xì)胞結(jié)合而直接由菌絲分化形成的繁殖性小體。 有性孢子:指經(jīng)過兩性細(xì)胞結(jié)合,經(jīng)質(zhì)配、核配、減數(shù)分裂形成的繁殖小體。 子實(shí)體:是由真菌的營(yíng)養(yǎng)菌絲和生殖菌絲纏結(jié)而成的具有一定形狀的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。2、簡(jiǎn)述真菌的特點(diǎn)。
61、; 不能進(jìn)行光合作用; 以產(chǎn)生大量孢子進(jìn)行繁殖; 一般具有發(fā)達(dá)的菌絲體; 細(xì)胞壁多數(shù)含幾丁質(zhì); 營(yíng)養(yǎng)方式為異養(yǎng)吸收型; 陸生性較強(qiáng)。3、簡(jiǎn)述酵母菌的特點(diǎn)。(1)生活史中,個(gè)體主要以單細(xì)胞狀態(tài)存在;(2)多數(shù)營(yíng)出芽繁殖,也有的裂殖;(3)能發(fā)酵糖類產(chǎn)能;(4)細(xì)胞壁常含甘露聚糖;(5)喜在含糖量較高、酸度較大的水生環(huán)境中生長(zhǎng)。4、指出酵母菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)特點(diǎn): (1)化學(xué)組成:三明治狀的“酵母纖維素”:分三層,外層為甘露糖,內(nèi)層為葡聚糖,其間夾有一層蛋白質(zhì)分子。芽痕周圍有少
62、許幾丁質(zhì)。 (2)原生質(zhì)體的制備:用蝸牛消化酶水解細(xì)胞壁。5、簡(jiǎn)述酵母菌的繁殖方式,圖示釀酒酵母的生活史 并說明各階段的特點(diǎn)。繁殖方式:無性繁殖:芽殖 裂殖 產(chǎn)生擲孢子等無性孢子; 有性繁殖產(chǎn)生子囊及子囊孢子各階段的特點(diǎn):子囊孢子發(fā)芽產(chǎn)生單倍體營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞;單倍體營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞出芽繁殖;異性營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞接合,質(zhì)配核配,形成二倍體細(xì)胞;二倍體營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞不進(jìn)行核分裂,出芽繁殖;二倍體細(xì)胞變成子囊,減數(shù)分裂,形成4子囊孢子;子囊破壁后釋放出單倍體子囊孢子6、霉菌
63、的有性和無性孢子主要有哪些? 無性孢子有:厚垣孢子、節(jié)孢子、分生孢子、孢囊孢子、游動(dòng)孢子、芽孢子、擲孢子。 有性孢子有:卵孢子、接合孢子、子囊孢子、擔(dān)孢子。7、細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌四大類微生物的菌落有何不同?為什么? 菌落
64、 細(xì)菌 酵母菌
65、; 放線菌 霉菌 含水形態(tài)
66、; 很濕或較濕 較濕 干燥或較干燥 &
67、#160; 干燥 外觀形態(tài) 小而突起或大而平坦 大而突起 小
68、而緊密 大而疏松或大而致密 菌落透明度 透明或稍透明 稍透明
69、 不透明 不透明菌落與培養(yǎng)基結(jié)合程度 不結(jié)合
70、160; 不結(jié)合 牢固結(jié)合 較牢固結(jié)合 菌落顏色
71、 多樣 單調(diào)
72、 十分多樣 十分多樣菌落正反面顏色的差別 相同 &
73、#160; 相同 一般不同 一般不同
74、 菌落邊緣 一般看不到細(xì)胞 球狀卵圓狀假絲狀 細(xì)絲狀 粗絲狀
75、 氣味 一般有臭味 多帶
76、酒香味 帶有泥腥味 往往有霉味 原因:細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌的形態(tài)和生理類型不盡相同,在其菌落形態(tài),構(gòu)造等特征上也有各自的特點(diǎn)。8、試比較細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌細(xì)胞壁成分的 異同。 細(xì)菌分為G+和G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量較高,而G
77、-不含磷壁酸;G+類脂質(zhì)一般無,而G-含量較高;G+不含蛋白質(zhì),G-含量較高。 放線菌為G-,其細(xì)胞壁具有G-所具有的特點(diǎn)。 酵母菌和霉菌為真菌,酵母菌的細(xì)胞壁外層為甘露聚糖,內(nèi)層為葡聚糖;而霉菌的細(xì)胞壁成分為幾丁質(zhì)、蛋白質(zhì)、葡聚糖。9、什么叫鎖狀聯(lián)合?其生理意義如何? 鎖狀聯(lián)合:擔(dān)子菌亞門中多數(shù)擔(dān)子菌的雙核菌絲,在進(jìn)行細(xì)胞分裂時(shí),于菌絲的分隔處
78、形成的一個(gè)側(cè)生的喙?fàn)罱Y(jié)構(gòu)稱鎖狀聯(lián)合。 生理意義:保證了雙核菌絲在進(jìn)行細(xì)胞分裂時(shí),每節(jié)(每個(gè)細(xì)胞)都能含有兩個(gè)異質(zhì)(遺傳型不同)的核,為進(jìn)行有性生殖,通過核配形成擔(dān)子打下基礎(chǔ)。鎖狀聯(lián)合是雙核菌絲的鑒定標(biāo)準(zhǔn),凡是產(chǎn)生鎖狀聯(lián)合的菌絲均可斷定為雙核。鎖狀聯(lián)合也是擔(dān)子菌亞門的明顯特征之一。10、霉菌的營(yíng)養(yǎng)菌絲和氣生菌絲各有何特點(diǎn)?它們分別可分化出哪些特化結(jié)構(gòu)? 營(yíng)養(yǎng)菌絲體:伸入培養(yǎng)基吸收營(yíng)養(yǎng);氣生菌絲體:向空中生成,形成繁殖器官。
79、0; 營(yíng)養(yǎng)菌絲的特化結(jié)構(gòu):1假根2吸器3附著枝4附著胞5菌核6菌索7匍匐菌絲8菌環(huán)和菌網(wǎng) 氣生菌絲的特化結(jié)構(gòu):子實(shí)體第一章 原核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能1、名詞解釋:原核生物,細(xì)菌,缼壁細(xì)菌,原生質(zhì)體,芽孢,伴孢晶體,放線菌. 原核生物:即廣義的細(xì)菌,指一大類細(xì)胞核無核膜包裹,只存在稱作核區(qū)的裸露DNA的原始單細(xì)胞生物,包括真細(xì)菌和古生菌兩大類群。 細(xì)菌:是一類細(xì)胞細(xì)短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、胞壁堅(jiān)韌、多以二分裂方式
80、繁殖和水生性較強(qiáng)的原核生物。 缼壁細(xì)菌:指細(xì)胞壁缺乏或缺損的細(xì)菌。包括原生質(zhì)體、球狀體、 L型細(xì)菌和支原體。 原生質(zhì)體:人工條件下用溶菌酶除去細(xì)胞壁或用青霉素抑制細(xì)胞壁合成后,所留下的僅由一層細(xì)胞膜包裹的圓球狀細(xì)胞。一般由G+形成。 芽孢:某些細(xì)菌在生長(zhǎng)發(fā)育后期,可在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形的抗逆性休眠體,稱為芽孢(又稱內(nèi)生孢子)。 伴孢晶體:少數(shù)芽孢桿菌在形成芽孢的同時(shí),會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形、方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體,稱為伴孢晶體(即ð內(nèi)毒素)。 放線菌:是一類呈絲狀生長(zhǎng)、菌落呈放射狀、以孢子繁殖的陸生性較強(qiáng)的革蘭氏陽性菌。2、細(xì)菌的基本有哪些?
81、60; 細(xì)胞壁,細(xì)胞膜 ,間體 ,核區(qū) ,核糖體 ,細(xì)胞質(zhì)及其內(nèi)含物3、試比較G+和G-細(xì)菌細(xì)胞壁的異同。成分 革蘭氏陽性細(xì)菌 革蘭氏陰性細(xì)菌肽聚糖 高 低磷壁酸 高 無類脂質(zhì) 一般無 高 蛋白質(zhì) 一般無 高4、簡(jiǎn)述革蘭氏染色法的機(jī)制并說明此法的重要性。 革蘭氏染色機(jī)制: 結(jié)晶紫液初染和碘液媒染:在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。 乙醇脫色: G細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密且不含類脂 ,把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合
82、物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色; G-細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和文聯(lián)度差,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,細(xì)胞退成無色。 復(fù)染:G-細(xì)菌呈現(xiàn)紅色,而G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色。 重要性:革蘭氏染色有著十分重要的理論與實(shí)踐意義。通過這一染色,幾乎可把所有的細(xì)菌分成革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌兩個(gè)大類,因此它是分類鑒定菌種時(shí)的重要指標(biāo)。又由于這兩大類細(xì)菌在細(xì)胞結(jié)構(gòu)、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面都呈現(xiàn)出明顯的差異,因此任何細(xì)菌只要通過簡(jiǎn)單的革蘭氏染色,就可提供不少其他重要的生物學(xué)特性方
83、面的信息。5、滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說是如何解釋芽孢的耐熱機(jī)制的? 芽孢的耐熱在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽離子和水分的滲透很差以及皮層的離子強(qiáng)度很高,這就使皮層產(chǎn)生了極高的滲透壓去奪取芽孢核欣中的水分,其結(jié)果造成皮層的充分膨脹和核心的高度失水,正是這種失水的核心才賦予了芽孢極強(qiáng)的耐熱性。6、簡(jiǎn)述鏈霉菌形態(tài)構(gòu)造特點(diǎn)。 1、基內(nèi)菌絲:又稱營(yíng)養(yǎng)菌絲,是緊貼固體培養(yǎng)基表面并向培養(yǎng)基里面生長(zhǎng)的菌絲。色淺、較細(xì),其主要功能是吸收營(yíng)養(yǎng)物和排泄代謝產(chǎn)物,一般沒有隔膜。有的產(chǎn)生色素。 2、氣生菌絲:營(yíng)養(yǎng)菌絲發(fā)育到一定階
84、段,伸向空間形成氣生菌絲,色較深、直徑較粗,直形或彎曲狀而分枝,有的產(chǎn)生色素。緒論1、名詞解釋:微生物,微生物學(xué),種,菌株、品系、克隆,菌落,菌苔。 微生物:微生物是形體微小、單細(xì)胞或個(gè)體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的多細(xì)胞、甚或無細(xì)胞結(jié)構(gòu),用肉眼看不見或看不清的低等生物的總稱。 微生物學(xué):微生物學(xué)是一門在細(xì)胞、分子或群體水平上研究微生物的形態(tài)構(gòu)造、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布和分類進(jìn)化等生命活動(dòng)基本規(guī)律,并將其應(yīng)用于工業(yè)發(fā)酵、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程和環(huán)境保護(hù)等實(shí)踐領(lǐng)域的科學(xué),其根本任務(wù)是發(fā)掘、利用、改善和保護(hù)有益微生物,控制、消滅或改造有害微生物,為人類社會(huì)的進(jìn)步服務(wù)。 種:種是最基本的分類單位,它是一大群表型特征高度相似,親緣關(guān)系極其相近,與同屬內(nèi)其它種有著明顯差異的菌株的總稱。菌株(品系):表示任何由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞繁殖而成的純種群體極其一切后代;實(shí)際上是一個(gè)微生物達(dá)到遺傳性純的標(biāo)志??寺。喝艟涫怯梢粋€(gè)單細(xì)胞發(fā)展而來的,則它就是一個(gè)純種細(xì)胞群或克隆。菌落:在適宜的培養(yǎng)條件下,微生物在固體培養(yǎng)基表面(有時(shí)為內(nèi)部)生長(zhǎng)繁殖,形成以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見的、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán),這就是菌落。菌苔:如果將某一純種的大量細(xì)胞密集
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