腸易激綜合征患者腸道微生態(tài)對(duì)照研究

1、 短篇論著腸易激綜合征患者腸道微生態(tài)對(duì)照研究余穎聰姒健敏樊宇靖陳淑潔作者單位:310016杭州,浙江大學(xué)邵逸夫臨床醫(yī)學(xué)研究所胃腸疾病研究室(第一作者現(xiàn)在溫州市第三人民醫(yī)院消化科325000近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),腸易激綜合征(IBS 的發(fā)生率在腸道感染后顯著增加,使用抗生素后相關(guān)腸道癥狀常見,這些情況使人們開始考慮IBS 等功能性胃腸道疾病可能與腸道菌群失調(diào)有關(guān)。本試驗(yàn)采用微生態(tài)檢測(cè)方法了解IBS 患者腸道微生態(tài)情況。一、對(duì)象和方法1.研究對(duì)象:按羅馬診斷標(biāo)準(zhǔn)1從門診選擇25例I BS患者,其中男8例,女17例,平均年齡45.4歲。入選前2周內(nèi)未使用過(guò)抗生素或微生態(tài)制劑,并排除其他器質(zhì)性疾病。由于不同

2、年齡和性別者腸道菌群可能有差異2,我們特采用與患者年齡、性別相匹配的健康志愿者進(jìn)行比較(25例。2.方法:采樣:無(wú)菌條件下獲取自然排出的新鮮糞便10g ,迅速置入?yún)捬豕迌?nèi),立即送檢。目的菌群及實(shí)驗(yàn)器材:乳酸桿菌培養(yǎng)基LBs 、雙歧桿菌培養(yǎng)基Bs 、類桿菌培養(yǎng)基NB GT 、腸球菌培養(yǎng)基Ec 及腸桿菌培養(yǎng)基EMB 均由浙江大學(xué)傳染病研究所配置提供,產(chǎn)氣莢膜梭菌培養(yǎng)基TSN 購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司,并對(duì)相應(yīng)菌群進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)計(jì)算雙歧桿菌和腸桿菌的比值(B/E 值來(lái)代表腸道定植抗力(CR 3。檢測(cè)方法:采用光岡法3,4,并通過(guò)細(xì)菌三級(jí)鑒定法將細(xì)菌鑒定到屬的水平,檢測(cè)的下限為2×102CFU

3、/g 濕便。所有菌落結(jié)果數(shù)據(jù)均取其對(duì)數(shù)L gN (CFU/g 。3.統(tǒng)計(jì)分析:采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析。計(jì)量資料以 x ±s 表示,計(jì)數(shù)資料(檢出率以百分?jǐn)?shù)表示。根據(jù)不同情況采用不同t 和2檢驗(yàn)。二、結(jié)果與正常對(duì)照組相比,IBS 組雙歧桿菌數(shù)量明顯減少,腸桿菌數(shù)量顯著增多(P 值均<0.05。IBS 患者腸道CR 均值小于1,與對(duì)照組CR 均值大于1比較,差異有顯著性(P <0.01。乳酸桿菌、類桿菌和腸球菌兩組間差異無(wú)顯著性。但對(duì)照組產(chǎn)氣莢膜梭菌檢出率較IBS 組明顯增高(P <0.01。見表1。討論IBS 的癥狀常由飲食誘發(fā)或加重,國(guó)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)IB

4、S 患者結(jié)腸產(chǎn)氣明顯增多或存在乳糖呼氣試驗(yàn)異常,考慮可能存在腸道細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)或腸桿菌數(shù)量增多。我們的研究發(fā)現(xiàn),IBS 患者確實(shí)存在腸道菌群失調(diào),表現(xiàn)為雙歧桿菌減少,腸桿菌增加,并伴有CR 明顯下降。表1兩組腸道菌群值及B/E 值( x ±s ,LgN/g 濕便菌種IBS 患者正常對(duì)照組乳酸桿菌6.79±1.73(92% 6.79±1.94(84%雙歧桿菌8.14±2.14(96%39.32±1.22(100%類桿菌10.49±0.56(100%10.62±0.79(100%產(chǎn)氣莢膜梭菌7.32±2.12(40%6.

5、66±1.68(80%腸球菌7.96±1.53(100%7.49±1.29(100%腸桿菌9.02±1.04(100%38.44±0.95(100%B/E 值0.91±0.27(96%31.12±0.23(100%注:括號(hào)內(nèi)數(shù)據(jù)表示細(xì)菌檢出率;與對(duì)照組菌群數(shù)量比較,3P <雙歧桿菌是體內(nèi)的益生菌,能快速酵解乳糖,產(chǎn)生乳酸和短鏈脂肪酸,輔助消化吸收,并通過(guò)菌膜屏障及產(chǎn)生雙歧桿菌素等,直接抑制多種病原菌。而腸桿菌能產(chǎn)生NH 3、H 2S 等物質(zhì),也是內(nèi)毒素的主要來(lái)源。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),內(nèi)毒素能短暫阻礙空腸對(duì)水、電解質(zhì)、葡萄糖以

6、及氨基酸的吸收;靜脈注射脂多糖可引起腸道轉(zhuǎn)運(yùn)加速,出現(xiàn)腹瀉。CR 是腸道內(nèi)專性厭氧菌(主要為雙歧桿菌形成的屏障,能對(duì)抗外來(lái)菌的入侵。一旦屏障受到破壞,宿主就易發(fā)生感染或菌群失調(diào)5。臨床應(yīng)用微生態(tài)調(diào)節(jié)制劑對(duì)緩解IBS 腸道癥狀有良好的療效,也說(shuō)明腸道微生態(tài)與IBS 癥狀密切相關(guān)。在我們的研究中發(fā)現(xiàn),產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢出率在正常對(duì)照組反而高于IBS 組,推測(cè)可能是存在不同類型低毒力的菌群或是由于IBS 腸道菌群失調(diào)后相對(duì)檢出率低、正常組相對(duì)增高所致。致謝:浙江大學(xué)傳染病研究所李蘭娟教授、俞云松主任等對(duì)本工作的大力支持和幫助參考文獻(xiàn)bowel disorders and functional abdo

7、minal pain.Gut ,1999,45(suppl 2:43247.2冉陸,陳稚峰,付萍,等.北京地區(qū)184例健康人腸道菌群值的調(diào)查.中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,1999,11:10212.3吳仲文,李蘭娟,馬偉杭,等.腸道微生物定植抗力的新指標(biāo)B/E 值.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2000,12:425.4Ohkusa T ,Ozaki Y ,Sato C ,et al.Long 2term ingestion of lactosu 2crose increases Bifidobacterium sp.In human fecal flora.Digestion ,1995,56:4152420.5van der Waaij D.History of recognition and measurement of colo 2nization resistance of the digestive tract as an in