弓形蟲IgG酶聯(lián)免疫法檢測試劑盒

1、弓形蟲IgG酶聯(lián)免疫法檢測試劑盒（TOXO IgG ELISA TEST SYSTEM）體外診斷試劑 產(chǎn)品編號(hào)：8Z8651G簡 介：宙斯（Zeus）公司的弓形蟲 IgG 酶聯(lián)免疫檢測試劑盒是應(yīng)用酶聯(lián)免疫技術(shù)定性或定量檢測人血清中的弓形蟲IgG 抗體的系統(tǒng)。目的是為弓形蟲的感染提供血清學(xué)證據(jù)，用于體外診斷。本產(chǎn)品FDA沒有明確可以用于檢測血液和獻(xiàn)血者。背 景：剛地弓形蟲是一類分布在世界范圍內(nèi)的細(xì)胞內(nèi)原生動(dòng)物寄生蟲（1，2）。雖然貓科動(dòng)物是其終宿主，但該生物體卻能感染幾乎所有的哺乳動(dòng)物和鳥類。血清學(xué)數(shù)據(jù)表明雖然不同國家的人弓形蟲盛行的種類不同，但大部分的工業(yè)化國家有大約30%的人都會(huì)慢慢受到該原

2、蟲的感染（3）。弓形蟲有三種存在形式：滋養(yǎng)體、包囊和卵囊（1，2）。滋養(yǎng)體（速殖子）在急性感染階段是具有攻擊性的形式。原蟲在宿主細(xì)胞胞質(zhì)中繁殖以后形成組織包囊形式，此時(shí)的包囊可以包含數(shù)千個(gè)生物體（緩殖子）。卵囊只在貓科動(dòng)物的小腸上皮細(xì)胞中發(fā)育，并未在其他宿主中發(fā)現(xiàn)。卵囊隨著貓科動(dòng)物排泄的糞便排出體外，數(shù)天后發(fā)育成熟。人類或其他動(dòng)物攝取了具有包囊的生的、未加工的肉或具有卵囊的被貓的糞便污染了的食物便得到感染。一旦消化，該寄生蟲便從包囊中（緩殖子）被釋放出來，卵囊（孢子體）被消化酶消化并侵染小腸粘膜。寄生蟲就地繁殖然后以包囊的形式轉(zhuǎn)移到其他器官，包囊可以在宿主的生命中長期存在。包囊主要存在于腦、心

3、臟和骨骼肌中。感染剛地弓形蟲的人大多數(shù)（8090%）是無癥狀的（4）。感染急性弓形蟲的成年人大多表現(xiàn)的臨床癥狀為無癥狀的單結(jié)或多結(jié)淋巴結(jié)病癥狀，伴隨淋巴結(jié)病癥狀還有發(fā)熱、身體不適和非典型性淋巴細(xì)胞增多，癥狀與單核細(xì)胞增多癥相同。少數(shù)宿主患者通常會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥，像腦炎、心肌炎或局部急性肺炎等（1）。盡管感染剛地弓形蟲對于一般寄主通常并無疾病影響，但是，對于那些患有免疫缺陷疾病的寄主卻是致命的（5）。免疫缺陷的病人可以發(fā)展成具有嚴(yán)重傳染性的弓形蟲病，或弓形蟲性腦炎，或者同時(shí)患上這兩種病。弓形蟲在艾滋病患者體內(nèi)通常會(huì)侵染患者的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（6）。血清學(xué)證據(jù)表明，弓形蟲性腦炎是艾滋病患者身上的潛在

4、傳染病，大約30%的弓形蟲抗體陽性的艾滋病患者將會(huì)發(fā)展成弓形蟲性腦炎（7）。當(dāng)一名血清學(xué)檢測陰性的婦女在懷孕期間感染了弓形蟲，該生物體便通過胎盤傳送給胎兒（1，8）。胎兒感染的嚴(yán)重性根據(jù)感染的時(shí)期不同而有所不同，前期感染的可以導(dǎo)致孕婦自然性流產(chǎn)，或者順利生產(chǎn)但新生兒有明顯的疾病癥狀。如果在懷孕后期感染，新生兒通常會(huì)沒有癥狀，所以不易識(shí)別（8）。先天性感染弓形蟲病的新生嬰兒大約有75%是無癥狀的。然而，幾乎所有具有潛在弓形蟲病的兒童在他以后的成長過程中其視力或神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育均會(huì)留下后遺癥。大約8085%的兒童發(fā)育成視網(wǎng)膜炎，甚至一些兒童會(huì)失明或者患上精神性運(yùn)動(dòng)或智力障礙。目前，有很多種檢測剛地弓形

5、蟲抗體的血清學(xué)方法作為輔助診斷急性傳染或評價(jià)先前感染弓形蟲的方法。常用的方法包括：Sabin-Feldman 染色法、直接凝集法、間接凝集法、乳膠凝集法、間接免疫熒光法和ELISA法（9）。ELISA法檢測原理：宙斯公司的TOXO IgG ELISA 試劑盒用來檢測人血清中的IgG抗體。通過與抗原的被動(dòng)吸收使檢測變得更靈敏。整個(gè)檢測步驟包括三步溫育過程。1 待測血清經(jīng)過適當(dāng)稀釋后，在包被有抗原的微孔板上溫育。樣本中特異性抗體將與免疫抗原結(jié)合。然后洗去未結(jié)合的抗體和血清中其他的成分。2 結(jié)合有過氧化物酶的羊抗人IgG（g鏈），加到微孔板上溫育。結(jié)合物與第一步中事先連接在板上的抗體雜交。然后洗去未

6、反應(yīng)的結(jié)合物。3 固定在微孔板上的免疫過氧化物酶結(jié)合物與其底物溶液反應(yīng)，底物水解發(fā)生顏色變化。一定時(shí)間后終止反應(yīng)，讀取光吸收值即可。溶液顏色的深淺與原始待測樣本中的抗體濃度有關(guān)。試劑盒提供成份每個(gè)試劑盒內(nèi)包含有足夠數(shù)量的下列組份，以便于能進(jìn)行包裝所示的試驗(yàn)次數(shù)。1 酶標(biāo)板。96孔12條8孔板，用滅活弓形蟲（RH鏈）抗原包被的酶標(biāo)板，酶標(biāo)板放置在酶標(biāo)板框架上并密封在一個(gè)含有干燥劑的包裝袋中。2 結(jié)合劑。辣根過氧化物酶結(jié)合的抗人IgG（g鏈）。直接使用，15ml，一瓶，白色蓋子。內(nèi)加防腐劑。3 ml一支，紅色蓋子。內(nèi)加防腐劑。4 ml一支，藍(lán)色蓋子。內(nèi)加防腐劑。5 ml一支，綠色蓋子。內(nèi)加防腐劑。

7、6 樣品稀釋液。30ml，一瓶（綠色蓋子）。溶液中含有Tween-20、BSA、磷酸鹽緩沖液（0.2）和抗人IgG(鏈)，。紫色溶液，直接使用。注：使用前充分混勻。（產(chǎn)品編號(hào)：005N）。內(nèi)加防腐劑。7 TMB。15ml一瓶，琥珀色瓶子（琥珀色蓋子），含有TMB，直接使用。溶液中含DMSO15%（W）。8 終止液。15ml一瓶，紅色蓋子，溶液中含有1 M H2SO4，0.7M HCl。直接使用。9 濃縮洗板液（10濃度）：1份濃縮洗板液加9份的去離子水或蒸餾水。100ml一瓶(透明蓋子)，含有10濃度磷酸鹽緩沖液（0.2）、Tween-20（藍(lán)色溶液）。內(nèi)加防腐劑。（注：1濃度的溶液PH應(yīng)為。

8、）以下溶液不是每批都有差別的，可以通用于ELISA試劑盒：TMB、終止液、洗板液。注：試劑盒內(nèi)同樣包括有：1 各組分清單和不同批號(hào)特異的資料。2 使用說明書預(yù)先警告：1 用于體外診斷。2 接觸實(shí)驗(yàn)室試劑時(shí)常規(guī)的注意事項(xiàng)。如果接觸到眼睛，立即用大量的水沖洗并到醫(yī)院檢查。穿適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服，戴手套和眼/臉保護(hù)設(shè)備。不要呼吸到蒸汽。處理廢棄物時(shí)遵守相關(guān)法規(guī)。3 ELISA板上沒有活性的有機(jī)物。但應(yīng)將之視為有潛在生物毒性的物質(zhì)并小心處理。4人血清對照品是有潛在生物毒性的物質(zhì)。產(chǎn)品的原材料經(jīng)檢測對HIV-1抗原和HBsAg以及抗HCV、抗HIV抗體是陰性的。但沒有實(shí)驗(yàn)方法可以完全確保無感染因素，因此，這些樣

9、品還是應(yīng)該按照生物安全標(biāo)準(zhǔn)2進(jìn)行處理。根據(jù)疾病控制中心和國家健康控制研究院手冊“微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全”現(xiàn)版本和對血液病原體處理的OSHAs標(biāo)準(zhǔn)推薦的方法，處理任何具有潛在傳染性的人血清或血液制品。5 嚴(yán)格按照說明書中指定的溫育時(shí)間和溫度操作是獲得正確結(jié)果的重要保證。實(shí)驗(yàn)前一定要使所有試劑的溫度回復(fù)至室溫（2025）。沒有用完的試劑應(yīng)立即放回到冰箱。6 不正確的清洗會(huì)導(dǎo)致假陽性或假陰性的結(jié)果。加入結(jié)合試劑和底物溶液之前一定要確保盡量拍干的殘留的洗板液。另外，在溫育過程中要避免微孔干透。7 人血清對照、樣本稀釋液、結(jié)合物和濃縮洗板液都包含有防腐劑（thimerosal,0.04%(w/

10、v)），一旦誤服將引起中毒。8 終止液有毒，如果吸入、接觸到皮膚或誤服將燒壞。如果發(fā)生此類情況立即就醫(yī)。9 TMB溶液將刺激眼睛、呼吸系統(tǒng)和皮膚。10. 濃縮的洗板液將刺激眼睛、呼吸系統(tǒng)和皮膚。11. 擦掉微孔板底部殘留的試劑和手印以免影響OD讀數(shù)。12. 稀釋或摻雜其他試劑會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。13. 不要用其他批號(hào)的試劑或其他廠家的產(chǎn)品來替代試劑盒中的試劑。14. TMB溶液應(yīng)該是無色的。當(dāng)使用時(shí)，顯示很淺的黃色、綠色或蘭色。它與結(jié)合物或其他氧化物的污染會(huì)導(dǎo)致溶液過早地改變顏色。如果底物溶液已經(jīng)變成明顯的藍(lán)色時(shí)切勿使用。15. 切勿用嘴吸移液管。避免試劑和病人樣品與皮膚或粘膜接觸。16. 避免

11、試劑被微生物污染，這將產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果。17. 試劑和樣本的交叉污染會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。18. 重復(fù)使用的玻璃容器應(yīng)清洗，并徹底沖去洗滌劑。19. 避免溶液飛濺或產(chǎn)生氣溶膠。20. 在儲(chǔ)存和溫育過程中，避免把試劑暴露在強(qiáng)光下。21. 先將微孔板回復(fù)至室溫，然后再打開袋子，這樣可以避免孔中成分的凝結(jié)。22. 洗板液應(yīng)該收集在處理盤中，用10%的家用漂白劑（0.5%次氯酸鈉）進(jìn)行消毒。23. 注意：酸性pH的廢液在加漂白劑處理前必須先中和。24. 如果干燥劑上的指示條已經(jīng)從蘭色變成粉紅色，不要再使用ELISA板了。25. 不要讓結(jié)合劑接觸到含有疊氮鈉的溶液，微量的疊氮鈉就會(huì)影響結(jié)合劑的酶活力。26.

12、不要讓任何反應(yīng)試劑接觸到含有漂白劑的溶液。微量的漂白劑（次氯酸鈉）會(huì)影響試劑盒內(nèi)很多試劑的生物活性。自備設(shè)備和材料：1 能在450nm讀數(shù)的酶標(biāo)儀2 能精確吸取10到200ul的移液器3 多通道移液器，能精確吸取50-200 ul4 適用于多通道移液器的貯液槽5 洗瓶或洗板機(jī)6 蒸餾水或去離子水7 1L量筒8 專用于吸血清的移液器9 一次性吸頭10. 紙巾11. 實(shí)驗(yàn)室用的計(jì)時(shí)器以便控制溫育時(shí)間12. 裝有消毒劑的廢液缸（例：10%的家用漂白劑、0.5%的次氯酸鈉）保存條件：1 未開封的試劑盒：保存在2-8C。2 微孔板條：保存在2-8C。已開封未用完的微孔板應(yīng)立即放入原有密封袋中，保存在2-

13、8C。只要干燥劑上的指示條仍為蘭色，密封袋開封后，板條可穩(wěn)定60天。3 結(jié)合劑：保存在2-8C。不得凍存。4 校正品、陽性和陰性對照：保存在2-8C。5 TMB：保存在2-8C。6 濃縮的洗板液（10）：保存在2-25C。稀釋到1濃度后在室溫（20-25C）可穩(wěn)定7天，或在2-8C可穩(wěn)定30天。7 樣本稀釋液：保存在2-8C。8 終止液：保存在2-25C。標(biāo)本采集：1. 建議根據(jù)NCCLS的M29號(hào)文件來采集標(biāo)本（接觸有傳染性疾病的實(shí)驗(yàn)室工作者的防護(hù)）。2. 沒有已知的試驗(yàn)方法可以完全證明人的血液標(biāo)本不會(huì)導(dǎo)致感染，因此，所有的血液都應(yīng)視為有潛在的傳染性。3 本試驗(yàn)選用的標(biāo)本為無菌靜脈穿刺取得的

14、血液，經(jīng)新鮮沉降和冷藏獲得的血清。不得使用抗凝劑和防腐劑。避免使用溶血、脂血和細(xì)菌污染的血清。4 標(biāo)本在室溫保存不得超過8小時(shí)。如果8小時(shí)內(nèi)不進(jìn)行檢測，應(yīng)把血清保存在2-8C最多48小時(shí)。如時(shí)間更久，應(yīng)把標(biāo)本放在-20C或更低。不要反復(fù)凍融標(biāo)本以免造成抗體活力降低并影響最終結(jié)果。操作步驟：1 將試劑盒組分從貯存條件取出，使其恢復(fù)至室溫（20-25）。2 確定試驗(yàn)所需微孔板數(shù)量。每次試驗(yàn)都應(yīng)設(shè)六個(gè)質(zhì)控品/校正品（一個(gè)試劑空白對照、一個(gè)陰性對照、三個(gè)校正品和一個(gè)陽性對照）。每次試驗(yàn)均需設(shè)置試劑空白對照。檢查軟件和酶標(biāo)儀以確認(rèn)質(zhì)控品/校正品的參數(shù)。將剩余的板條仍然放入有干燥劑的密封袋中，保存在2-8

15、。樣本排列12A空白對照標(biāo)本3B陰性對照標(biāo)本4C校正品等等D校正品E校正品F陽性對照G標(biāo)本1H標(biāo)本23 按1：21倍數(shù)稀釋陽性對照、校正品、陰性對照和每個(gè)病人的血清樣品（例如：10ml血清+200ml樣本稀釋液，使用前充分混勻）。4 在每個(gè)孔內(nèi)加入100ml稀釋過的對照、校正品和樣本。保證標(biāo)本充分混勻。不同的樣本使用不同的吸頭。5 加入100ml樣本稀釋液于A1作為試劑空白對照。檢查軟件和酶標(biāo)儀以確認(rèn)試劑空白的參數(shù)。6 板條在室溫（20-25C）溫育255分鐘。7 洗板5次。A 手工洗板步驟：a 甩掉孔中的液體。b 在每個(gè)孔內(nèi)加入洗板液，確保孔中無氣泡。c 重復(fù)a和b步驟，洗板5次。d 甩掉孔

16、中的洗板液，在紙巾上拍干孔中的洗板液。目測微孔中無殘留洗板液。把洗板液收集在廢液缸中，并在每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束用%次氯酸鈉處理。B 自動(dòng)洗板步驟：如果使用自動(dòng)洗板機(jī)，把洗板溶液體積設(shè)置為300-350ml/孔。設(shè)置無間隔循環(huán)清洗五次。最后將微孔板從洗板機(jī)上取下，置于紙巾上拍干。8 每孔中加入100ml結(jié)合劑，按照樣品加入的順序以相同的速率和順序依次加入微孔板中。9 微孔板在室溫（20-25C）溫育255分鐘。10. 按照步驟7進(jìn)行洗板。11. 每孔中加入100ml TMB，按照樣品加入的順序以相同的速率和順序依次加入微孔板中。12. 微孔板在室溫（20-25C）溫育10-15分鐘。13. 每孔加入50

17、ml終止液以終止反應(yīng)，按照TMB底物溶液加入的順序以相同的速率和順序依次加入微孔板中。陽性的標(biāo)本會(huì)從蘭色變?yōu)辄S色。加入終止液后，拍打平板數(shù)次以確保樣品完全混合。14. 將微孔板置于450nm波長下讀取每個(gè)孔的光密度值，以空白試劑作對照。應(yīng)在加入終止液30分鐘內(nèi)讀取數(shù)據(jù)。質(zhì)量控制：1 每次試驗(yàn)中，校正品都要重復(fù)3次。同時(shí)包括一個(gè)試劑空白對照、陰性對照、陽性對照。2 計(jì)算3個(gè)校正品的平均值。如果有一個(gè)值超過平均值的15%，則剔除后計(jì)算另兩個(gè)孔的平均值。3 校正品的平均OD值和陽性對照、陰性對照的值應(yīng)在以下范圍：OD值范圍陰性對照校正品陽性對照A. 陰性對照的OD值除以校正品的平均OD值應(yīng)B. 陽性

18、對照的OD值除以校正品的平均OD值應(yīng)C. 如果不符合上述要求，認(rèn)為本次試驗(yàn)無效應(yīng)重復(fù)試驗(yàn)。4 陽性對照和陰性對照用來監(jiān)控試劑的情況，并不能保證Cutoff值的準(zhǔn)確性。5 根據(jù)要求還可以加入其他對照。6 本質(zhì)量控制參照NCCLS的C24號(hào)文件：定性測試的統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)量控制。結(jié)果判斷：A 計(jì)算：1 校正因子陽性標(biāo)本的cutoff值由生產(chǎn)者確定，并與校正品有關(guān)。校正因子（CF）可以幫助你判斷陽性標(biāo)本的域值，糾正每次實(shí)驗(yàn)中細(xì)微的讀數(shù)變化。校正因子的確定應(yīng)決定于不同批的試劑盒的不同組分，并打印在試劑盒的組分表中。2 Cutoff值用校正因子乘以校正品的平均值即獲得Cutoff值。3參考值或OD比率每個(gè)標(biāo)本都

19、要計(jì)算參考值或OD比率，方法是它們的OD值除以步驟2中得來的cutoff值。例如：校正品的平均OD值校正因子（CF）Cutoff值未知標(biāo)本的OD值標(biāo)本的參考值或OD比率說明：參考值或OD比率按如下判斷：參考值或OD比率陰性樣本可疑樣本陽性樣本1 OD比率0.90表明沒有檢測到弓形蟲抗體。陰性結(jié)果表明近期或以前未感染過弓形蟲。這樣的個(gè)體懷疑為首次感染者，首次感染如果標(biāo)本采集時(shí)間過早，則可能檢測不到IgG抗體。如果懷疑該患者為早期感染者，應(yīng)該在8-14天內(nèi)再次采集該個(gè)體的標(biāo)本，并將新采集的標(biāo)本與前面的標(biāo)本同時(shí)重復(fù)試驗(yàn)以確定是否血清轉(zhuǎn)化。2OD比率IgG抗體陽性。該結(jié)果表明該個(gè)體為感染或近期感染弓形

20、蟲。3 樣本的OD比率如果在以下范圍內(nèi)（0.91-1.09），應(yīng)該重復(fù)試驗(yàn)。如果重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果仍然是可疑的，則應(yīng)用另一種血清學(xué)方法測定如宙斯公司的IFA試劑盒。4 為評價(jià)成對的（急性和預(yù)后的）血清，要同時(shí)對兩個(gè)樣本檢測。如果急性的標(biāo)本是陰性的而預(yù)后的是陽性的，則發(fā)生了血清轉(zhuǎn)化，預(yù)示著首次弓形蟲感染。COD比到IU/ml的轉(zhuǎn)換：OD比轉(zhuǎn)換到IU/ml可以通過用OD比乘以20來計(jì)算，可按如下判斷。IU/ml陰性樣本 18陽性樣本 22可疑樣本對標(biāo)本陽性、陰性和可疑的解釋可參見“”項(xiàng)中。注：本試驗(yàn)結(jié)果是線性的，和WHO 0-35的標(biāo)準(zhǔn)有較好的相關(guān)性。如果標(biāo)本測得的值 35 IU/ml，則報(bào)為“陽性”

21、或“35 IU/ml”。如果需要更精確，那么就需要把標(biāo)本稀釋后再做一次檢測。最終結(jié)果可以用稀釋倍數(shù)乘以IU/ml的值。例如： 初始結(jié)果 OD比 = 2.86 = 57.3 IU/ml 標(biāo)本稀釋1：4后，再按說明書中1：21的稀釋后同法檢測。 再次檢測結(jié)果 OD比 = 1.46 = 29.3 IU/ml 4 = 117.3 IU/ml方法的限制性：單一血清樣本的抗體滴度并不能說明近期是否感染。而應(yīng)該采集急性和預(yù)后的樣本同時(shí)檢測以確定是否發(fā)生血清轉(zhuǎn)化。1 試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床評價(jià)和其他診斷方法結(jié)果進(jìn)行綜合判斷。2 標(biāo)本采集如果時(shí)間過早，可能會(huì)導(dǎo)致檢測不到IgG抗體。在這種情況下，則需在2-7周后再取

22、一次樣本，與第一次的樣本一同進(jìn)行檢驗(yàn)看是否有血清轉(zhuǎn)化。或者檢測IgM抗體如使用宙斯公司的弓形蟲IgM ELISA 診斷試劑盒。3 未足月的嬰兒如檢測出弓形蟲 IgG，在判斷時(shí)應(yīng)該要謹(jǐn)慎，因?yàn)橥ㄟ^母體被動(dòng)獲得的抗體可能會(huì)持續(xù)6個(gè)月。如是陰性結(jié)果則排除了先天性感染的可能（12）。4 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果是定性的，應(yīng)該考慮弓形蟲IgG抗體可能為陽性也可能為陰性。期望值：根據(jù)年齡和地域差別，在美國成年人中大約20-70%會(huì)檢測出弓形蟲抗體（2）。性能特征值：A比較研究：宙斯公司生產(chǎn)的弓形蟲IgG ELISA檢測系統(tǒng)與市售其他公司的用ELISA方法檢測弓形蟲IgG抗體的產(chǎn)品進(jìn)行比較。共201份血清標(biāo)本做了檢測，結(jié)

23、果如下：對照的弓形蟲 IgG ELISA宙斯弓形蟲IgG ELISA陽性陰性陽性456陰性3147靈敏度 = 93.8% （45/48）特異性 = 96.1% （147/153）B用宙斯試劑盒對WHO標(biāo)準(zhǔn)的評價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：結(jié) 果標(biāo)準(zhǔn)（IU/ml）OD比IU/ml說 明500416*陽性250208*陽性125112*陽性6252*陽性3126陽性16可疑8陰性4陰性2陰性*標(biāo)本濃度 35 IU/ml，需要另外稀釋以確定值。C. 重復(fù)性:為了評估intra-assay和 inter-assay，宙斯弓形蟲IgG ELISA測試系統(tǒng)對4個(gè)強(qiáng)陽性、弱陽性、陰性樣本的OD比范圍進(jìn)行檢測。將每個(gè)樣本重

24、復(fù)8份，在3個(gè)連續(xù)工作日中進(jìn)行檢測。計(jì)算每個(gè)樣本的平均OD比和變異系數(shù)（CV）。數(shù)據(jù)顯示如下：Intra-Assay（N=8）Inter-assay（N=3）血清樣本一次檢測 二次檢測 三次檢測平均比CV平均比CV平均比CV平均比CV14.0%4.8%4.1%1.8%25.7%36.5%13.2%7.5%8.2%412.0%10.2%8.3%5.1%簡明步驟：1. 稀釋血清1：212. 每孔加稀釋過的血清100ml3. 溫育20-30分鐘4. 洗板5. 每孔加結(jié)合劑100ml6. 溫育20-30分鐘7. 洗板8. 每孔加TMB 100ml9. 溫育10-15分鐘10. 每孔加終止液50ml11

25、. 讀數(shù)參考文獻(xiàn)1. Krick JA and Remington JS: Toxoplasmosis in the adult-an overview. New Eng. J Med. 298:550-553, 1978.2. Anderson SE and Remington JS: The diagnosis of toxoplasmosis. So. Med. J. 68:1433-1443, 1975.3. Fdeman HA: Toxoplasmosis: An overview. Bull. N. Y. Acad. Med. 50:110-127, 1974.4. Wekch P

26、C, MasurH, Jones TC and Remington JS: Serologic diagnosis of acute lymphadenopathic toxoplasmosis. J. Infect. Dis. 42:256-264, 1980.5. Ruskin J and Remington JS: Toxoplasmosis in the compromised host. Ann. Intern. Med. 84:193-199, 1976.6. Luff BJ and Remington JS:Toxoplasmosis encephalitis. J. Infect. Dis. 157:1-6, 1988.7. McCabe Rand Reminggton JS: Toxoplasmosis: The time has come. New Eng. J. Med. 318:131-135, 1988.8. Wilson CB, Remington JS, Stagno S and Reynolds DW: Development of adverse seqelae in children born with subclinical congenital Toxoplasma in