臨床醫(yī)學(xué)檢驗主管技師考試輔導(dǎo)135

1、最新修正版0.25(1 m。細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查法考點顯微鏡的種類及應(yīng)用不染色細(xì)菌標(biāo)本檢查法細(xì)菌染色標(biāo)本檢查法【內(nèi)容講解】細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查：不染色標(biāo)本檢查法染色標(biāo)本檢查法顯微鏡是觀察細(xì)菌形態(tài)所必備的基本工具。形態(tài)學(xué)檢查（鏡檢）的意義：可以迅速了解標(biāo)本中有無細(xì)菌及大致的菌量；根據(jù)細(xì)菌形態(tài)、結(jié)構(gòu)和染色性有助于對病原菌的初步識別和分類，為進(jìn)一步作生化反應(yīng)、血清學(xué)鑒定 提供依據(jù)?？傻玫匠醪皆\斷，對臨床早期診斷和治療疾病有一定的參考意義。一、顯微鏡普通光學(xué)顯微鏡暗視野顯微鏡相差顯微鏡熒光顯微鏡電子顯微鏡普通光學(xué)顯微鏡以自然光或燈光為光源，顯微鏡的最大分辨率為波長的一半，即暗視野顯微鏡多用于檢查不染色的活細(xì)菌和

2、螺旋體的形態(tài)及運動觀察。LightSpKrrwiiPhis*叭 r J iUflhtOb*ctiv*Dark-feti stop相差顯微鏡利用相差板的光柵作用，將光相的差異轉(zhuǎn)換成光的強度的差異，使細(xì)菌中的某部分結(jié)構(gòu)比其他部分深 暗，襯托出鮮明的對比。本法主要用于檢查不染色活細(xì)菌的形態(tài)及某些內(nèi)部結(jié)構(gòu)。Pbas« Ccntratt Light Path way ftC«nd*n««rArinuUr f i尺噸UQht蠢化 Figuife 1熒光顯微鏡以高壓汞燈產(chǎn)生的紫外光或藍(lán)紫光為光源細(xì)菌經(jīng)熒光素染色后，置于熒光顯微鏡下，即可激發(fā)熒光, 在暗色的背景下可以看

3、到發(fā)射熒光的細(xì)菌。用于細(xì)菌、病毒等的診斷或鑒別 。I;電子顯微鏡以電子流代替光源能分辨1nm的物體，細(xì)菌的表面形態(tài)和內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)均能清楚地顯現(xiàn)。 掃描電子顯微鏡：適于對細(xì)菌表面結(jié)構(gòu)及附件的觀察。透射電子顯微鏡：適于觀察細(xì)菌內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)。二、不染色細(xì)菌標(biāo)本的檢查主要用于檢查生活狀態(tài)下細(xì)菌的動力及運動狀況。壓滴法懸滴法毛細(xì)管法：厭氧菌動力觀察動力判斷：細(xì)菌如有動力，有明顯的方向性位移；細(xì)菌如無動力，受水分子撞擊細(xì)菌呈現(xiàn)布朗運動，只在原地顫動而無位置的改變。三、細(xì)菌染色標(biāo)本的檢查在普通光學(xué)顯微鏡下可以觀察細(xì)菌的形態(tài)、大小、排列、染色性、特殊結(jié)構(gòu)（芽胞、莢膜、鞭毛）、 異染顆粒等。常用染料： 堿性染

4、料（basic dye ）帶正電染料。其陽離子部分為發(fā)色基團(tuán)，可與細(xì)胞中帶負(fù)電的組分結(jié)合。 如堿性復(fù)紅、結(jié)晶紫、美藍(lán) 等。 酸性染料（Acid dye ）帶負(fù)電染料。其陰離子部分為發(fā)色基團(tuán)，可與細(xì)胞中帶正電的組分結(jié)合。 如伊紅、剛果紅等。 復(fù)合染料一堿性染料和酸性染料的復(fù)合物。等。如瑞氏染料（伊紅美藍(lán)）、姬姆薩染料（伊紅天青）細(xì)菌染色法H單染色注彭喋色法S胞渠色ft莢膜染6注 細(xì)胞壁染色祛1I抗彎妙I(lǐng)革細(xì)菌染色的基本程序：涂片7干燥7固定7染色(初染7媒染7脫色7復(fù)染)單染色法用一種染料將細(xì)菌和周圍物體染成同一種顏色。細(xì)菌經(jīng)單染色法處理后，可觀察其形態(tài)、排列、大小 及簡單的結(jié)構(gòu)，但不能顯示各種

5、細(xì)菌染色性的差異。復(fù)染色法用兩種或兩種以上染料染色的方法，稱為復(fù)染色法或鑒別染色法。常用的有革蘭染色法和抗酸染色法。革蘭染色法(Gram Stain )由丹麥醫(yī)生Ha ns Christian Gram 于1884年創(chuàng)立。是細(xì)菌學(xué)中最經(jīng)典、最常用的染色方法。 方法：結(jié)晶紫一一碘液一一95%酉精一一稀釋石炭酸復(fù)紅革蘭染色法(Gram Stain )臨床意義：鑒別細(xì)菌：將所有細(xì)菌分為 G菌和G菌兩大類，可初步識別細(xì)菌，縮小范圍，有助于進(jìn)一步鑒定。選擇藥物參考與細(xì)菌致病性有關(guān)：大多G菌的致病物質(zhì)是外毒素，而G菌大多能產(chǎn)生內(nèi)毒素，兩種致病作用不同。抗酸染色將細(xì)菌分為兩大類：即抗酸性細(xì)菌和非抗酸性細(xì)菌。

6、臨床上主要用于結(jié)核病、麻風(fēng)病等的細(xì)菌檢查。疑似結(jié)核分枝桿菌感染的標(biāo)本，經(jīng)抗酸染色后，若查見紅色抗酸桿菌，可報告為“找到抗酸分枝桿菌”，即可作出初步鑒定。對臨床疾病的診斷和治療具有重要參考價值。【例題】用于觀察細(xì)菌超微結(jié)構(gòu)的顯微鏡是A普通光學(xué)顯微鏡 B暗視野顯微鏡C相差顯微鏡D熒光顯微鏡E、電子顯微鏡答疑編號 502389070101【正確答案】E【例題】不屬于細(xì)菌形態(tài)學(xué)觀察的是 平板分區(qū)劃線觀察單個菌落 革蘭染色觀察細(xì)菌染色性 鞭毛染色觀察細(xì)菌的動力 光鏡觀察細(xì)菌形態(tài) 暗視野顯微鏡觀察細(xì)菌動力E、：答疑編號 502389070102【正確答案】A【例題】不染色標(biāo)本在普通光學(xué)顯微鏡下主要用于檢查細(xì)菌的形態(tài)動力結(jié)構(gòu)大小排列方式答疑編號 502389070103E、【正確答案】B【例題】不染色標(biāo)本在普通光學(xué)顯微鏡下主要用于檢查細(xì)菌的動力。常用方法有 玻片法試管法壓滴法劃線法懸滴法E、答疑編號 502389070104【正確答案】CE【例題】結(jié)核分枝桿菌常用的染色法是 姬姆薩染色法抗酸染色革蘭染色鍍銀染色法墨汁染色法E、答疑編號 502389070105【正確答案】BE、【例題】革蘭染色所用染液的順序是 稀釋復(fù)紅7碘液7酒精7結(jié)晶紫 結(jié)晶紫7酒精7碘液7稀釋復(fù)紅 稀釋復(fù)紅7結(jié)晶紫7碘