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1、 微生物學(xué)緒論:1. 微生物的定義:指一般肉眼看不見(jiàn)或者看不清的微小生物的總成2. 分類:原核:細(xì)菌,放射菌,藍(lán)菌,支原體,立克次氏體和衣原體真核:真菌(酵母菌、霉菌、蕈菌),原生動(dòng)物,顯微藻類 非細(xì)胞類:病毒和亞病毒(類病毒,擬病毒,朊病毒)3. 微生物的特點(diǎn):小(體積微小)微米級(jí):光學(xué)鏡 納米級(jí):電子鏡 簡(jiǎn)(結(jié)構(gòu))單細(xì)胞,簡(jiǎn)單多細(xì)胞,非細(xì)胞 低(進(jìn)化地位低)原核,真核,非細(xì)胞類病毒、亞病毒4. 發(fā)展史:史前期(朦朧階段) 發(fā)展期(形態(tài)描述階段) 初創(chuàng)期(生理研究階段) 奠基期(生化研究階段) 發(fā)展期(分子生物學(xué)階段)5. 微生物與人的關(guān)系:醫(yī)療保健、工業(yè)、農(nóng)業(yè)、生產(chǎn)、環(huán)保與工業(yè)的關(guān)系:a.
2、食物罐藏防腐 b.釀造工作 c.純種厭氧發(fā)酵的建立d.液體的深層通氣攪拌大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的創(chuàng)建 f.代謝調(diào)控發(fā)酵技術(shù)與農(nóng)業(yè)大作用:a.以菌治害蟲(chóng)和以菌治植病的生物防治技術(shù) b.以菌增肥效和以菌促長(zhǎng)的微生物增產(chǎn)技術(shù) c.以菌作飼料和以菌當(dāng)蔬菜的單細(xì)胞蛋白和食用菌生產(chǎn)技術(shù) d.以菌產(chǎn)沼氣等生物能源技術(shù)與環(huán)保的關(guān)系:a.促進(jìn)許多重大問(wèn)題的突破 b.促分子生物學(xué)的三大來(lái)源和技術(shù)之一 c.刺進(jìn)經(jīng)典遺傳學(xué)發(fā)展為分子遺傳學(xué) d.微生物與基因工程6. 微生物的五大共性:體積小,面積大 吸收多,轉(zhuǎn)化快 生長(zhǎng)快,繁殖快 適應(yīng)強(qiáng),易變異 分布廣,種類多第一章1. 細(xì)菌:是一類細(xì)胞細(xì)短,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,胞壁堅(jiān)韌,多以二分裂方
3、式繁殖和水生性較強(qiáng)的原核生物2. 細(xì)胞的形態(tài)可分為三類:球狀,桿狀,螺旋狀3. 細(xì)菌的鑒別染色法革蘭氏染色法步驟:涂片固定結(jié)晶紫初染1min碘液媒染1min95%乙醇脫色0.5min番紅復(fù)染1min 陽(yáng)性菌(G+)紫色 陰性菌(G-)紅色4. 細(xì)菌細(xì)胞壁的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu):肽聚糖單體、網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);5. 革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁:由肽聚糖和磷壁酸組成6. 磷壁酸:占40%革蘭氏陽(yáng)性菌所特有成分七主鏈由數(shù)十個(gè)磷壁酸苷油或磷壁酸核糖醇組成有的還有D-Ala和還原糖所組成的側(cè)鏈7. 磷壁酸的特點(diǎn):通過(guò)分子上的大量負(fù)電荷濃縮細(xì)胞周圍的Mg2+,以提高細(xì)胞膜上一些合成酶的活力 儲(chǔ)藏元素 調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)自溶素的活力,借
4、以防止細(xì)胞因自溶而死亡,作為噬菌體的特異性吸附受體 賦予G+細(xì)菌特異的表面抗原,因而可用于菌種鑒定 增強(qiáng)某些致病菌對(duì)宿主細(xì)胞的粘連,避免被白細(xì)胞吞噬,并有抗補(bǔ)體(一種酶)的作用8. 外壁層:位于肽聚糖層的外部,包括脂多糖,外膜蛋白,磷脂9. 脂多糖(Lps)的功能:革蘭氏陰性菌的致病物質(zhì)-內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ)與磷壁酸相似,吸附二階陽(yáng)離子以提高這些離子在細(xì)胞表面濃度由于Lps的多樣決定革蘭氏陰性菌表面抗原決定簇的多樣性噬菌體吸附位點(diǎn)10. 古生菌(古細(xì)菌或谷菌):細(xì)胞壁含假肽聚糖11. 革蘭氏染色的原理:革蘭氏陽(yáng)性菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透明性障,當(dāng)乙醇脫色時(shí),肽聚糖脫水而孔障縮小,放保
5、留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上,呈紫色革蘭氏陰性菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)疏松乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)放縮,其脂含量高,乙醇醬脂溶解,縫隙大,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,呈紅色12. 缺壁細(xì)菌:L型細(xì)菌和支原體可遺傳13. 聚-羥丁酸顆粒(PHB):概念:為碳源儲(chǔ)存物 功能:儲(chǔ)存能量,碳源,可降低滲透壓 功用:具有無(wú)毒,可塑和易降解等特點(diǎn),可用于造醫(yī)用塑料,克服白色污染14. 質(zhì)粒特點(diǎn):可自我復(fù)制,穩(wěn)定遺傳,對(duì)生存不是必要的,復(fù)制與染色體分開(kāi)但同步進(jìn)行 不同質(zhì)粒攜帶不同遺傳信息 無(wú)質(zhì)粒細(xì)菌可通過(guò)結(jié)合,轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)導(dǎo)方式獲得,不能自發(fā)產(chǎn)生15. 細(xì)菌DNA:放射自顯影下2-4m長(zhǎng)的E.coli其DNA長(zhǎng)1-1.
6、4m無(wú)組蛋白與精氨亞精氨結(jié)合,故有穩(wěn)定性和柔軟性16. 細(xì)菌細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu):糖被:a.包被與某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度補(bǔ)丁的透明膠狀物質(zhì) b.種類:微莢膜:0.2m,與細(xì)胞表面牢固結(jié)合 莢膜:0.2m,與菌表面結(jié)合松弛振蕩離心可得 粘液層:與菌表面結(jié)構(gòu)松弛,可向菌的周圍擴(kuò)散,增大粘性 菌膠團(tuán):多個(gè)細(xì)菌共有一個(gè)莢膜 c.莢膜的觀察:光鏡,復(fù)染色,特殊染色 d.莢膜的組成:糖被的成分一般是多糖,少數(shù)是蛋白質(zhì)或多肽也有多太多糖復(fù)合型17. 鞭毛:生長(zhǎng)在某些細(xì)菌表面的長(zhǎng)絲狀,波曲的蛋白質(zhì)附屬物18. 鞭毛的結(jié)構(gòu):由鞭毛絲,鉤狀鞘基本組成19. 鞭毛的活動(dòng):靠鞭毛絲旋轉(zhuǎn)而動(dòng)動(dòng)力為原質(zhì)子的力,與膜內(nèi)外質(zhì)子
7、濃度差和電勢(shì)決定20. “栓菌”實(shí)驗(yàn):即設(shè)法把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢固“栓”在載玻片上然后再光鏡下觀察細(xì)胞行為,結(jié)果該菌只能不斷打轉(zhuǎn)而未作伸縮運(yùn)動(dòng),故旋轉(zhuǎn)輪正確21. 性菌毛:性狀介于菌毛和鞭毛之間,傳遞遺傳信息22. 芽孢:某些細(xì)菌長(zhǎng)到一定階段以后,細(xì)胞內(nèi)形成的圓或卵圓形的內(nèi)生孢子,是對(duì)不良環(huán)境有較強(qiáng)抵抗力的休眠體23. 芽孢特性:多層膜結(jié)構(gòu)通透性很差 組分:水分小(5%),DPA,富含疏水性角蛋白 抗性強(qiáng):熱,酶解,輻射,藥物 休眠體新陳代謝幾乎停止,一個(gè)芽孢產(chǎn)生一個(gè)個(gè)體24. 芽孢意義:鑒定價(jià)值:不同芽孢的大小,位置,形狀不同 作為無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)25. 伴胞晶體:少數(shù)芽孢桿菌在形成芽孢
8、的同時(shí)會(huì)在孢子旁形成一顆菱形,方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體。功用:環(huán)保生物農(nóng)藥26. 細(xì)胞的繁殖方式:裂殖a.二分裂 b.三分裂 c.復(fù)分裂 芽殖27. 放線菌:是一類主要呈菌絲狀生長(zhǎng)和以孢子繁殖的陸生性較強(qiáng)的原核生物28. 放線菌的形態(tài)構(gòu)造:菌體為絲狀單細(xì)胞,其大小,粗細(xì)與細(xì)菌相同有多核體,為擬核,與細(xì)菌相同 細(xì)胞壁組分為肽聚糖,對(duì)溶解酶敏感29. 放線菌的繁殖:細(xì)胞膜內(nèi)陷,再由外向內(nèi)逐漸收縮最后形成完整的橫膈膜,從而把孢子絲分割成許多分生孢子 細(xì)胞壁和膜同時(shí)內(nèi)陷在逐步向內(nèi)溢縮,最終將孢子絲溢裂成一串分生孢子30. 藍(lán)細(xì)菌:舊名藍(lán)藻或藍(lán)綠藻,是一類進(jìn)化歷史悠久的細(xì)菌,革蘭氏陰性菌,無(wú)鞭毛
9、含葉綠素a,能進(jìn)行產(chǎn)氧性光合作用的大型原核生物31. 藍(lán)細(xì)菌的特點(diǎn):營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn):藍(lán)細(xì)菌含葉綠素能像植物一樣進(jìn)行產(chǎn)氧的光合作用,利用日光作為能源同化CO2為細(xì)胞有機(jī)物 運(yùn)動(dòng)特點(diǎn):藍(lán)藻無(wú)鞭毛,不能運(yùn)動(dòng)但能滑行 繁殖特點(diǎn):?jiǎn)渭?xì)胞藍(lán)藻以二分分裂方式繁殖,絲狀體的藍(lán)細(xì)菌斷裂成藻殖段進(jìn)行裂殖。全部是無(wú)性生殖32. 支原體:是一類無(wú)細(xì)胞壁,介于獨(dú)立生活和細(xì)胞內(nèi)寄生生活的最小原核生物33. 支原體特點(diǎn):細(xì)胞微小,多數(shù)為250nm左右,故光鏡下勉強(qiáng)可見(jiàn)細(xì)胞膜含甾醇,較其他原核生物的膜更堅(jiān)韌 無(wú)細(xì)胞壁,革蘭氏陰性菌且形態(tài)易變,對(duì)滲透壓較敏感 菌落?。ㄖ睆?.1-1.0nm)在固體培養(yǎng)基上形“油煎蛋”形 以二分裂或出
10、芽等方式繁殖 能再含血清,酵母膏和甾醇等營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 多數(shù)能以糖類作為能源,能再有氧或無(wú)氧條件下進(jìn)行氧化或發(fā)酵形代謝 基因組很小,0.6-1.1mb左右 能對(duì)抑制蛋白質(zhì)生成的抗生素(四環(huán)素,紅霉素)和破壞含甾體的細(xì)胞膜抗生素(兩性霉素)都很敏感34. 立克次氏體:(斑疹傷寒)是一種專性寄生于真核細(xì)胞的革蘭氏陰性菌原核生物35. 衣原體:是一類真核細(xì)胞內(nèi)專性能量寄生的小型革蘭氏陰性菌原核生物36. 衣原體分類:鸚鵡熱衣原體 沙眼衣原體 肺炎衣原體原菌第二章1. 真核微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁:真菌細(xì)胞壁的主要成分是多糖,低等真菌是纖維素為主,酵母菌是葡聚糖為主,高等陸生真菌是幾丁質(zhì)為主,
11、藻類是纖維素 鞭毛與纖毛:鞭毛:形態(tài)較長(zhǎng),數(shù)量較少 纖毛:形態(tài)較短,數(shù)量較多 細(xì)胞膜:釀酒酵母中含有固醇類(甾醇),VitD的前體-麥角固醇,在原核生物罕見(jiàn)2. 真核微生物:是一大類細(xì)胞核具有核膜,能進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞質(zhì)中存在線粒體或同時(shí)存在葉綠體等多種細(xì)胞器的生物,包括真菌,顯微藻類,原生動(dòng)物3. 微體:?jiǎn)螌幽ぐ募?xì)胞器含過(guò)氧化氫酶和氧化酶(又稱過(guò)氧化物酶體)4. 酵母菌的主要繁殖方式:無(wú)性繁殖(芽殖、裂殖、無(wú)性孢子)營(yíng)養(yǎng)體只能以二倍體形式存在5. 酵母菌菌落:典型的酵母菌都是單細(xì)胞真核微生物,細(xì)胞間沒(méi)分化 在固體培養(yǎng)基表面,其菌落一般呈現(xiàn)較濕潤(rùn),較透明,表面較光滑,容易挑起,菌落質(zhì)地均勻
12、正反面以及周邊與中央部分顏色較一致的特點(diǎn)6. 菌落固體培養(yǎng)基特征:大,圓形,光滑潤(rùn)濕,粘性,顏色單調(diào)7. 霉菌:是絲狀真菌(菌絲的特化形式)的一個(gè)俗稱,氣生菌絲特化成子實(shí)體8. 子實(shí)體的類型:簡(jiǎn)單子實(shí)體:產(chǎn)生無(wú)性孢子的子實(shí)體類型 分生孢子頭(青霉) 孢子囊(曲霉)產(chǎn)生無(wú)性孢子的子實(shí)體類型,如擔(dān)子菌的擔(dān)子 復(fù)雜子實(shí)體:產(chǎn)生無(wú)性孢子的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的子實(shí)體有份生孢子器,分生孢子座,分生孢子盤等結(jié)構(gòu),能產(chǎn)有性孢子的,結(jié)構(gòu)復(fù)雜的子實(shí)體9. 真菌的孢子:真菌的繁殖:無(wú)性或者有性孢子來(lái)完成。特點(diǎn):小,輕,干,多,以及形態(tài)色澤各異,休眠性強(qiáng)和有較強(qiáng)的抗逆性10. 霉菌的菌落特點(diǎn):形態(tài)較大,質(zhì)地疏松,外形干燥,不透
13、明,呈現(xiàn)或松或緊的蛛網(wǎng)狀,絨毛狀,棉絮狀或氈狀11. 蕈菌:常指能形成大型肉質(zhì)子實(shí)體的真菌蕈菌菌絲的分化分成五個(gè)階段:形成一級(jí)菌絲 形成二級(jí)菌絲(鎖狀聯(lián)合) 形成三級(jí)菌絲 形成子實(shí)體 產(chǎn)生擔(dān)子孢子12. 鎖狀聯(lián)合:即形成喙形突起兒聯(lián)合兩個(gè)細(xì)胞的方式不斷是雙核細(xì)胞分裂,從而使菌絲間斷不斷向前延伸第三章1. 病毒的特性有:體型極其微小 無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu) 每種病毒只含有一種核酸 既無(wú)產(chǎn)能酶系,也無(wú)蛋白質(zhì)和核酸合成酶系 以核酸蛋白質(zhì)等“元件”的裝配實(shí)現(xiàn)其大量繁殖 離體條件下,能以無(wú)生命的生物大分子狀態(tài)存在,并能長(zhǎng)期保持其侵染性 對(duì)一般抗生素不敏感,但對(duì)干擾素敏感 有絲病毒的核酸還能整合到宿主的基因組中并能誘
14、發(fā)潛伏性感染2. 最大病毒:牛痘苗病毒 最小病毒:口蹄疫病毒3. 病毒粒(基本成分是核酸和蛋白質(zhì))的對(duì)稱體制:螺旋對(duì)稱 A.無(wú)包膜 a.桿狀(煙草花葉病毒) b.絲狀(大腸桿菌噬菌體) B.有包膜 a.卷曲狀(流感病毒) b.彈狀(狂犬病毒)二十面體對(duì)稱 A.無(wú)包膜B.有包膜復(fù)合對(duì)稱A.無(wú)包膜(T偶數(shù)噬菌體) B.有包膜(痘病毒)4. 病毒的群體形態(tài):病毒粒大量聚集并使宿主細(xì)胞發(fā)生病變時(shí),就形成了具有一定形態(tài),機(jī)構(gòu)并能用光鏡進(jìn)行觀察的特殊群體 動(dòng)植物病毒細(xì)胞中的包涵體,有的還可以用肉眼觀察,顧氏小體,天花病毒包涵體內(nèi)基氏小體,狂犬病毒包涵體,X-體,TMV包涵體。動(dòng)植物-包涵體,噬菌體-噬菌斑
15、,動(dòng)物病毒-空斑,植物病毒-枯斑、病斑5. 三類典型形態(tài)的病毒及其代表: 螺旋對(duì)稱代表-煙草花葉病毒a.模式植物病毒 b.螺旋代表的典型 二十面體對(duì)稱的代表-腺病毒a.腺病毒是一類動(dòng)物病毒,已發(fā)現(xiàn)有100余種b.侵染哺乳動(dòng)物或禽類動(dòng)物復(fù)合對(duì)稱的代表-T偶數(shù)噬菌體a.E.coli的T偶數(shù)噬菌體共有三種,即T2,T4,T6b.病毒學(xué)和分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)理論研究中的極好材料6. 噬菌體的繁殖:五個(gè)階段即吸附,入侵,增殖,成熟和裂解 凡在短時(shí)間內(nèi)能連續(xù)完成以上五個(gè)階段而實(shí)現(xiàn)其繁殖的噬菌體,成為烈性噬菌體 烈性噬菌體所經(jīng)歷的繁殖過(guò)程,成為裂解性周期7. 效價(jià):標(biāo)示每毫升試樣中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù),
16、又稱噬菌斑形成單位數(shù)或感染中心數(shù)。常用雙層平板法測(cè)定8. 噬菌體效價(jià)測(cè)定一步生成曲線實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)依據(jù):一個(gè)菌體被一個(gè)噬菌體感染,避免二次吸附 細(xì)菌群體被噬菌體同步感染9. 一步生成曲線三階段:潛伏期,裂解期,平穩(wěn)期10. 感染復(fù)數(shù):每一個(gè)敏感細(xì)胞所能吸附的相應(yīng)噬菌體的數(shù)量11. 自然裂解:敏感細(xì)胞因超感染復(fù)數(shù)的病毒的吸附引起的不產(chǎn)生子代病毒的裂解12. 溶源性:溫和噬菌體的侵入并不引起宿主細(xì)胞裂解,凡能引起溶源性的噬菌體稱溫和噬菌體,而其宿主即溶源菌13. 溫和噬菌體的三種存在形式:游離態(tài) 整合態(tài) 營(yíng)養(yǎng)態(tài)14. 植物病毒:大多數(shù)ssRNA病毒基本形態(tài)為桿狀,絲狀和球狀,一般無(wú)包膜15. 昆蟲(chóng)病毒的
17、種類:核型多角體病毒,質(zhì)型多角體病毒,顆粒體病毒16. 亞病毒分為:類病毒:是一類只含RNA一種成分轉(zhuǎn)型寄生在活細(xì)胞內(nèi)的分子病原體,目前只在植物體中發(fā)現(xiàn) 擬病毒:又稱類類病毒,殼內(nèi)類病毒或病毒衛(wèi)星,是一直一類包裹在真病毒粒中的有缺陷的類病毒 朊病毒(瘋牛?。菏且活惒缓怂岬膫魅拘缘鞍踪|(zhì)分子第四章1. 碳源:一切能滿足微生物生長(zhǎng)繁殖所需的碳元素的營(yíng)養(yǎng)物,分為有機(jī)碳和無(wú)機(jī)碳2. 六類營(yíng)養(yǎng)要素:碳源,氮源,能源,生長(zhǎng)因子,無(wú)機(jī)鹽,水3. 氨基酸自養(yǎng)型生物:不需要利用氨基酸做氮源的微生物,所有的綠色植物的不少微生物4. 氨基酸異養(yǎng)型生物:凡需要從外界吸收現(xiàn)成氨基酸做氮源的微生物,所有動(dòng)物和大量異養(yǎng)微
18、生物5. 營(yíng)養(yǎng)物進(jìn)入微生物細(xì)胞的方式:?jiǎn)渭償U(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動(dòng)運(yùn)輸、基因移位6. 選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則:目的明確、營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)、理化適宜、經(jīng)濟(jì)節(jié)約7. 水活度:即aw表示在天然或人為環(huán)境中,微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水的含量aw=P/Po=ERH/100第五章1. 生物氧化的三種形式:某物質(zhì)與氧結(jié)合,脫氧,失去電子2. 生物氧化過(guò)程的三個(gè)階段:脫氫(或電子),遞氫(或電子),受氫(或電子)3. 生物氧化的三種功能:產(chǎn)能(ATP),產(chǎn)還原力【H】,產(chǎn)小分子中間代謝產(chǎn)物4. 生物氧化的三種類型:呼吸,無(wú)氧呼吸,發(fā)酵5. TCR循環(huán)(產(chǎn)能效率最高):即三羧酸循環(huán),又稱Krebs循環(huán)或檸檬酸循環(huán),是
19、指由丙酮酸經(jīng)一些列循環(huán)反應(yīng)而徹底氧化、脫羧,形成CO2,水和NADH26. 呼吸的特點(diǎn):底物按常規(guī)方法脫氫后脫下的氫經(jīng)完整的呼吸鏈傳遞最終被外源分子氧接受,產(chǎn)生了水并放出ATP形式的能量7. V.P實(shí)驗(yàn)原理:利用產(chǎn)氣腸桿菌能產(chǎn)生3-羥基丁酮的原理,因?yàn)樗趬A性條件下可悲氧化成二乙酰,若擁有胍基的精氨酸與二乙酰反應(yīng),就可產(chǎn)生特征性的紅色反應(yīng)(即v.p.陽(yáng)性)而與產(chǎn)氣腸桿菌近緣的E.coli呈V.P.陰性較易區(qū)別兩菌8. 乙醛酸循環(huán)(2丙酮酸琥珀酸+2CO2)是微生物所特有的,兩個(gè)關(guān)鍵的酶:異檸檬酸裂合酶,蘋果酸合酶9. 微生物獨(dú)特合成代謝途徑:Calvin循環(huán)(羧化反應(yīng)-還原反應(yīng)-CO2受體的再
20、生) 厭氧乙酰-CoA途徑 逆向TCA循環(huán) 羥基丙酸途徑1. 生物固氮反應(yīng)的六要素:ATP的供應(yīng) 還原力【H】以及傳遞載體固氮酶 還原底物-N2 鎂離子 嚴(yán)格的厭氧微環(huán)境4.測(cè)定固氮酶活力的乙炔還原法:優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,設(shè)別較簡(jiǎn)單,成本低廉和操作方便N2+8【H】+18-24ATP2NH3+H2+18-24ADP+18-24Pi5. 好氧菌固氮酶避氧害機(jī)制:好氧型自生固氮菌的抗氧保護(hù)機(jī)制a.呼吸保護(hù) b.構(gòu)象保護(hù) 藍(lán)細(xì)菌固氮酶的抗氧保護(hù)機(jī)制a.分化出特殊的還原性異形胞b.非異形胞藍(lán)細(xì)菌固氮酶的保護(hù) 豆科植物根瘤菌固氮酶的抗氧保護(hù)機(jī)制第六章1. 計(jì)繁殖數(shù):測(cè)定繁殖一定要一一計(jì)算各個(gè)體的數(shù)目。計(jì)繁殖
21、數(shù)只適宜于測(cè)定處于單細(xì)胞狀態(tài)的細(xì)菌和酵母菌,而對(duì)放線菌和霉菌等絲狀生長(zhǎng)的微生物而言,則只能計(jì)算其孢子數(shù)。有直接法,間接法兩種方法2.微生物的個(gè)體生長(zhǎng)和同步生長(zhǎng):使用同步生長(zhǎng)技術(shù):即設(shè)法使某一群體中的所有個(gè)體盡可能都處于同樣細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂周期中,然后通過(guò)分析此群體在各階段的生物化學(xué)特性變化,來(lái)間接了解單個(gè)細(xì)胞相應(yīng)變化規(guī)律同步生長(zhǎng):這種通過(guò)同步培養(yǎng)手段使細(xì)胞群體中各個(gè)體處于分裂步調(diào)一致的生長(zhǎng)狀態(tài)3. 獲得微生物同步生長(zhǎng)的方法主要有兩類:環(huán)境各種誘導(dǎo)法:用氯霉素抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)生成 機(jī)械篩選法:利用處于同一生長(zhǎng)階段細(xì)胞的體積,大小相同性,用過(guò)濾法,密度梯度離心法4. 單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線:定量描
22、述液體培養(yǎng)基中微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線,稱為生長(zhǎng)曲線。以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值作縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間作橫坐標(biāo),就可畫出一條由延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期4個(gè)階段組成的曲線5. 延滯期的特點(diǎn)為:生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng),許多桿菌可長(zhǎng)成絲狀.; 細(xì)胞內(nèi)的RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性; 合成代謝十分活躍,核糖體、酶類和ATP的合成加速,易產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶; 對(duì)外界不良條件如NaCl溶液濃度、溫度和抗生素等理、化因素反應(yīng)敏感。6. 影響延滯期長(zhǎng)短的因素很多除菌種外主要有3種:(1)接種齡指接種物或種子的生長(zhǎng)年齡 (2)接種接種量的大小明顯影響延滯期的長(zhǎng)短。 (3)培養(yǎng)基成分7.
23、 指數(shù)期:又稱對(duì)數(shù)期,指在生長(zhǎng)曲線中,緊接著延滯期的一段細(xì)胞數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)的時(shí)期。8. 指數(shù)期的特點(diǎn)是:生長(zhǎng)速率常數(shù)R最大,因而細(xì)胞每分裂一次所需的時(shí)間代時(shí) 細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng), 酶系活躍,代謝旺盛。影響因素: 菌種 營(yíng)養(yǎng)成分 營(yíng)養(yǎng)物濃度 培養(yǎng)溫度9. 穩(wěn)定期又稱恒定期或最高生長(zhǎng)期。特點(diǎn):生長(zhǎng)速率常數(shù)R等于零,即處于新繁殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡的細(xì)胞數(shù)相等,或正生長(zhǎng)與負(fù)生長(zhǎng)相等的動(dòng)態(tài)平衡之中。10. 在衰亡期中,微生物的個(gè)體死亡速度超過(guò)新生速度,整個(gè)群體呈現(xiàn)負(fù)生長(zhǎng)狀態(tài)(R為負(fù)值)。 特點(diǎn):細(xì)胞形態(tài)發(fā)生多形化,例如會(huì)發(fā)生退化形態(tài);發(fā)生自溶合成或釋放次生代謝物;芽孢桿菌中釋放芽孢.11. 連續(xù)培養(yǎng)的實(shí)現(xiàn):
24、當(dāng)微生物以單批培養(yǎng)的方式培養(yǎng)到指數(shù)期的后期時(shí),一方面以一定速度連續(xù)流入新鮮培養(yǎng)基和通人無(wú)菌空氣,并立即攪拌均勻;另一方面,利用溢流的方式,以同樣的流速不斷流出培養(yǎng)物。容器內(nèi)的培養(yǎng)物達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,其中的微生物可長(zhǎng)期保持在指數(shù)期的平衡生長(zhǎng)狀態(tài)和衡定的生長(zhǎng)速率上,形成了連續(xù)生長(zhǎng)。12. 微生物的高密度培養(yǎng):也稱高密度發(fā)酵,一般是指微生物在液體培養(yǎng)中細(xì)胞群體密度超過(guò)常規(guī)培養(yǎng)10倍以上時(shí)的生長(zhǎng)狀態(tài)或培養(yǎng)技術(shù)。培養(yǎng)方法:選取最佳培養(yǎng)基成分和各成分含量補(bǔ)料 提高溶解氧的濃度 防止有害代謝產(chǎn)物的生成13. 影響微生物的主要因素:溫度:最適合生長(zhǎng)溫度經(jīng)常簡(jiǎn)述“最是溫度”,其含義為其菌分裂代謝分裂時(shí)最短生長(zhǎng)速率高
25、時(shí)的培養(yǎng)起 氧氣:a.專性好氧菌b.兼性厭氧菌c.微好氧菌d.耐氧菌f.厭氧菌pH:雖然生物外環(huán)境的PH變化很大,單細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中的PH相當(dāng)穩(wěn)定,一般都在接近中性14. 一個(gè)良好的微生物培養(yǎng)裝置的基本條件是:按微生物的生長(zhǎng)規(guī)律進(jìn)行,科學(xué)的設(shè)計(jì),豐富而均勻營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),適宜的溫度和良好的通氣條件,適宜的物理化學(xué)條件和嚴(yán)防雜菌的污染等。15. 發(fā)酵罐:培養(yǎng)基配制系統(tǒng),蒸氣滅菌系統(tǒng),空氣壓縮和過(guò)濾系統(tǒng),營(yíng)養(yǎng)物流加系統(tǒng),傳感器和自動(dòng)記錄、調(diào)控系統(tǒng),發(fā)酵產(chǎn)物的后處理系統(tǒng)16. 有害微生物的控制措施:17. 滅菌:采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施,稱為滅菌,例如高溫滅菌
26、、輻射滅菌等18. 消毒:是一種采用較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體或動(dòng)、植物有害的病原菌,而對(duì)被消毒的對(duì)象基本無(wú)害的措施19. 防腐方法:低溫 缺氧 干燥 高滲 高酸度 高酵度 加防腐劑20. 化療:即化學(xué)治療,用化學(xué)物質(zhì)抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長(zhǎng)繁殖,借以達(dá)到治療該宿主傳染病的一種措施21. 物理滅菌因素-高溫:原理:高溫的致死作用,主要是它可引起蛋白質(zhì),核酸和脂類生物高分子發(fā)生降解或改變其空間結(jié)構(gòu),從而變性或破壞22. 干熱滅菌:吧合金器械洗凈的玻璃皿放在電熱烤箱內(nèi),在150-170下維持1-2h后,可達(dá)到徹底滅菌目的23. 溫?zé)釡缇ǎ菏侵赣?00以上的家呀蒸汽進(jìn)行
27、滅菌24. 影響加壓蒸汽滅菌效果的因素:滅菌物的體含菌量 滅菌鍋內(nèi)空氣排出程度 滅菌對(duì)象的PH 滅菌對(duì)象體積 加熱與散熱速度25. 抗代謝藥物的代表-磺胺類藥物:又稱代謝拮抗物或代謝類似物,是指一類在化學(xué)結(jié)構(gòu)上與細(xì)胞內(nèi)必要代謝物的結(jié)構(gòu)相似,并可干擾正常代謝活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)26. 磺胺的作用抑制:磺胺會(huì)抑制2氨4-羥7,8二氫蝶啶酰焦磷酸與PABA的縮合反應(yīng)。這是因?yàn)榛前窞镻ABA的結(jié)構(gòu)類似物,兩者發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用,即二氫蝶酸合成酶會(huì)錯(cuò)把磺胺作底物,結(jié)果合成了無(wú)功能的“假二氫葉酸”2氨4羥-7,8二氫蝶酸的類似物細(xì)菌無(wú)法合成葉酸,受到了抑制27. 效價(jià):抗生素的活力稱為效價(jià),其計(jì)量一般用“單位”
28、 表示。 28. 抗菌譜:各種抗生素有其不同的制菌范圍,此即抗菌譜。青霉素和紅霉素主要抗G細(xì)菌; 鏈霉素和新霉素以抗G細(xì)菌為主,也抗結(jié)核分枝桿菌; 慶大霉素、萬(wàn)古霉素和頭孢霉素兼抗G和G細(xì)菌; 氯霉素、四環(huán)素、金霉素和土霉素等因能同時(shí)抗G、G細(xì)菌以及立克次氏體和衣原體,故稱廣譜型抗生素;放線菌酮、兩性霉素B、灰黃霉素和制霉素對(duì)真菌有抑制作用;第七章1. 三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn):經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 噬菌體感染實(shí)驗(yàn) 植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)2. 原核生物的質(zhì)粒特點(diǎn):(1)可自我復(fù)制,穩(wěn)定遺傳。對(duì)生存不是必要的。復(fù)制與染色體分開(kāi) (2)不同質(zhì)粒攜帶不同遺傳信息 (3)無(wú)質(zhì)粒細(xì)菌可通過(guò)接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)等方式獲得,不能自發(fā)產(chǎn)
29、生3. 質(zhì)粒種類:F質(zhì)粒 R質(zhì)粒 Col質(zhì)粒 Ti質(zhì)粒即誘瘤質(zhì)?;蚬诎`質(zhì)粒 Ri質(zhì)粒 mega質(zhì)粒 降解性質(zhì)粒4. 基因突變的特點(diǎn):自發(fā)性 不對(duì)應(yīng)性 稀有性 獨(dú)立性 可誘變性穩(wěn)定性 可逆性5. 突變機(jī)制:誘發(fā)突變:簡(jiǎn)稱誘變,指通過(guò)人為的方法,利用物理、化學(xué)或生物因素顯著提高基因自發(fā)突變頻率的手段。凡具有誘變效應(yīng)的任何因素,都稱誘變劑 自發(fā)突變:指生物體在無(wú)人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變6. 艾姆氏實(shí)驗(yàn)原理:鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型(his-)菌株在基本培養(yǎng)基-的平板上不能生長(zhǎng),如發(fā)生回復(fù)突變變成原養(yǎng)型(his)后則能生長(zhǎng)7. 與營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變有關(guān)的3類遺傳型個(gè)體:野生型:指從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生人為營(yíng)養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株?duì)I養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后,由于發(fā)生了喪失某酶合成能力
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