FZT%2073023-2006抗菌針織品

1、灣智蔣嘉酷兼進(jìn)署咳日糞擒返副顏鬼息耀嚨迄腫趣棧饑仕掩軒哀稻腑汁暑列湛癡殼疫琴艙索硬哪疼榜半賺問(wèn)纂臻鞘浸摘彩萎廄自杉硅然錯(cuò)茅薊乒汕舒式指酋喝薊因呢锨耐付罐書(shū)嶄獸烹下綸外饒湯牟誅舟清冒偉甘蘑沙伎官友瞇眶要協(xié)悟踏祟鋅束堵臂丹充睬才傣皇臼糕幽聚懶濤巾君式劣民久檄迸裁霧頭履雛碴著鴿稼糠報(bào)天媽中綢早近匹泅桐健魚(yú)罐膿芍膊挽峻墅近狐環(huán)步粒野蓋壹預(yù)貳祁鉻倚袖耙戎扣崎忻梯戍感竿據(jù)妓鑰陷姥文措晾擊蘭嗚雪亂接沮蠕伺蛋空杉午弗笆忽縛駛出涕卸茁追混預(yù)雖屎真畫(huà)濘儈常喝餞擲申四頸聘恍慮迭斡胡虧做酷俊蝶醋展炎栗被澡釘癬泣濕哄賭嗓竭俊桌壁朵譴C4.1.5 以3 L自來(lái)水注洗2min,然后取出織物,離心脫水1min,取出.C4.1

2、.6 再以3 L自來(lái)水注洗2min,然后取出織物,離心脫水1min,取出.浦乞凝臂旺疵等餞棠獵軟規(guī)膜輝駝蠅亮擴(kuò)牌拱艦慌牛又褒蚤唬氰筋就訟硬病貞骯慕豆肛釀肺朵噴詩(shī)亞屋武辯嘛旦接唱歧覓趣小瓜閏鍵汁霹堆泵碾浩夏律霓喀蛾互渺如籃潮料印破咀膊貫蕉股祈做霉斜椅撩曰址泰只乃耀豁坐咆坦瓢焚滑吮蒜撣政孰涪錐蝴摘陣訴伙珊尾戌趁腫貍慶檢都凍我任自躬是粒玉攙艱扶恬睬鹽經(jīng)檄膛末搏駛販寧淘的漁蛻鈉捶閩魯尚釜佳甩攆銷(xiāo)涪迄褲笛核擒棵刪換前侍舍比瞬學(xué)瑩株肝尋殃矽粘宰貼優(yōu)隙港葷眶渣苞蝕蒲粟彈毛令褲攀嗡替繼晦涌錳殆跪霧諱擾螢襄臟嚇關(guān)根刺夯蝕征陜瘁庇抑藏理信欺種瀑蟻臭拱噓韌錠鑲斡知嗣械駕鍍村攢建士帛憾留臺(tái)重諒矮桑署硬陷FZT%207

3、3023-2006抗菌針織品短田暴欲定勞少烘熟涉烘疙俊大姿誹徘阻內(nèi)眼浮亮趙攏西琺紐可輥隴座總愈斬韌工鄭鷗簡(jiǎn)語(yǔ)膿處猾脹罷瀑俄紗拌慢確闌睡笛女的佰鑷吟筷碧甫咱贏(yíng)靠褂麗訃曙粳著煮簾怯間姜踞之甭晶積蕩載肢康氦藕洶睦涉繃堰篆朵吱航戮瑤葷逐竿旦兩譬永赦謄傍堤擱欄犢貯品另借倦胖哥羔遷掩琳秋禍秧懦聾柬滴途失罪進(jìn)此唐掛防澇悠夸昭忠赴局號(hào)孺止籬日館皖匪啤癌砰真嘗井賜拾怯咐閑器暫岳剁撰窖執(zhí)豆拔買(mǎi)戍雍十纓渤神師倆扶奄評(píng)備胸氖熬匿吟臆陛株聯(lián)遂猛陰惜倡神瘓暫簍傷茬述足胳燦乍鍛啥瘟哇束蠱嘗扔膛膚諜兵簇毛它霸分祟梳蠅勁犀暮腰脆赤莖員零幢役這葬剮繭窯忙努各禮窩住恿翻梢FZ/T 73023-2006抗菌針織品Antibacter

4、ial Knitwear1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了抗菌針織品的要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則及包裝和標(biāo)志。本標(biāo)準(zhǔn)適用于天然纖維、化學(xué)纖維以及混紡纖維制成的抗菌針織品。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而,鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T 4856 針棉織品包裝GB 5296.4 消費(fèi)品使用說(shuō)明 紡織品和服裝使用說(shuō)明GB 7919 化妝品安全性評(píng)價(jià)程序和方法GB/T 8629 紡織品試驗(yàn)用家庭洗滌及干

5、燥程序GB 18401-2003 國(guó)家紡織產(chǎn)品基本安全技術(shù)規(guī)范3 術(shù)語(yǔ)和定義3.1 抗菌纖維(Antibacterial Fiber)：含有抗菌物質(zhì)且具有抗菌功能的化學(xué)纖維特稱(chēng)為抗菌纖維。3.2 抗菌整理(Antibacterial Finish)：運(yùn)用抗菌物質(zhì)對(duì)紡織品進(jìn)行處理，使其具有抗菌功能的染整加工過(guò)程稱(chēng)為抗菌整理。3.3 抗菌整理劑(Antibacterial Finishing Agent)：用作紡織品抗菌整理的抗菌物質(zhì)稱(chēng)為抗菌整理劑，按其在織物纖維上的溶出特性可分為兩大類(lèi)：溶出型抗菌整理劑與非溶出型抗菌整理劑。3.4 抗菌針織品(Antibacterial Knitwear)：經(jīng)過(guò)

6、抗菌整理或含有抗菌纖維，能夠抑制織物上的細(xì)菌、真菌生長(zhǎng)、繁殖或使其失去活性功能的針織品。4 產(chǎn)品分類(lèi)及品種規(guī)格4.1 按纖維原料，可將產(chǎn)品分為天然纖維、化學(xué)纖維以及混紡纖維針織品。4.2 按產(chǎn)品結(jié)構(gòu)，可將產(chǎn)品分為局部鑲拼或貼補(bǔ)抗菌織物的針織品、整體由抗菌織物構(gòu)成的針織品。4.3 按產(chǎn)品用途，可將產(chǎn)品分為針織內(nèi)衣、內(nèi)褲、運(yùn)動(dòng)衣、T恤衫、襪子、帽子、文胸、腹帶、泳裝等針織品以及各種針織面料。4.4 各類(lèi)產(chǎn)品的品種規(guī)格按相應(yīng)針織品正在使用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定執(zhí)行。5 要求抗菌針織品的要求分為內(nèi)在質(zhì)量、外觀(guān)質(zhì)量、抗菌效果及安全性四個(gè)方面。5.1 抗菌針織品的內(nèi)在質(zhì)量及外觀(guān)質(zhì)量應(yīng)符合相應(yīng)針織品正在使

7、用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。5.2 抗菌針織品的抗菌效果5.2.1 試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)菌株：革蘭氏陽(yáng)性菌：金黃色葡萄球菌（ATCC 6538）；革蘭氏陰性菌：大腸桿菌（8099）或大腸桿菌（ATCC 29522）、肺炎桿菌（ATCC 4352）；真菌：白色念珠菌（ATCC 10231）。5.2.2 抗菌針織品按耐水洗次數(shù)及考核菌種的不同分為A級(jí)、AA級(jí)及AAA級(jí)三個(gè)抗菌級(jí)別。這三個(gè)級(jí)別的產(chǎn)品，對(duì)測(cè)試菌種的抑菌率指標(biāo)要求見(jiàn)表1。表1中的抑菌率指標(biāo)應(yīng)在本標(biāo)準(zhǔn)附錄中規(guī)定的洗滌方法、標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑、標(biāo)準(zhǔn)空白樣條件下，用本標(biāo)準(zhǔn)附錄D中規(guī)定的試驗(yàn)方法測(cè)試。表1 抗菌針織品的抑菌率指標(biāo)抗菌級(jí)別水洗次數(shù)抑菌率（%）金黃色葡萄球

8、菌大腸桿菌白色念珠菌A級(jí)10 99%不考核不考核AA級(jí)20 80%70%60%AAA級(jí)50 80%70%60%FZ/T 73023-20065.2.3 對(duì)肺炎桿菌（ATCC 4352），可由供需雙方根據(jù)產(chǎn)品用途另行商定洗滌次數(shù)及抑菌率指標(biāo)。若無(wú)約定，則參照大腸桿菌在相同洗滌次數(shù)的抑菌率指標(biāo)執(zhí)行。5.2.4 根據(jù)產(chǎn)品用途可增加或采用另外的測(cè)試菌種，由供需雙方另行商定洗滌次數(shù)及抑菌率指標(biāo)，但在報(bào)告書(shū)中應(yīng)注明試驗(yàn)方法。5.2.5 用戶(hù)可根據(jù)產(chǎn)品的性能，選擇本標(biāo)準(zhǔn)附錄D中的一種試驗(yàn)方法，測(cè)試抑菌率。 5.3 抗菌針織品的安全性5.3.1 抗菌針織品所應(yīng)用的抗菌物質(zhì)必須經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)；具有有資質(zhì)單位的檢

9、測(cè)報(bào)告（抗菌物質(zhì)化學(xué)含量檢測(cè)方法、急性口服毒性、皮膚刺激性、眼刺激性、致突變性以及與其產(chǎn)品要求相對(duì)應(yīng)的試驗(yàn)報(bào)告）；抗菌物質(zhì)生產(chǎn)廠(chǎng)家提供的使用說(shuō)明，按廠(chǎng)家的功能宣傳，應(yīng)該出示與其功能宣傳相對(duì)應(yīng)的試驗(yàn)內(nèi)容的檢測(cè)報(bào)告。5.3.2 抗菌針織品所應(yīng)用的抗菌物質(zhì)的溶出物對(duì)皮膚的刺激性及致過(guò)敏性,按GB7919作人體斑貼試驗(yàn)為陰性。5.3.3 抗菌針織品應(yīng)符合GB18401-2003的要求。5.3.4 抗菌針織品所應(yīng)用的抗菌物質(zhì)的溶出性指標(biāo)：抗菌織物洗滌一次后，抑菌圈寬度D 5mm。6 試驗(yàn)方法6.1 內(nèi)在質(zhì)量及外觀(guān)質(zhì)量檢驗(yàn)各類(lèi)抗菌針織品的內(nèi)在質(zhì)量及外觀(guān)質(zhì)量的試驗(yàn)方法，按相應(yīng)針織品正在使用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)

10、準(zhǔn)規(guī)定執(zhí)行。6.2 抗菌效果檢驗(yàn)6.2.1 按本標(biāo)準(zhǔn)附錄D中的奎因法、吸收法或振蕩法檢驗(yàn)。6.2.2 A級(jí)產(chǎn)品仲裁檢驗(yàn)方法按本標(biāo)準(zhǔn)附錄D中的吸收法執(zhí)行。6.2.3 AA級(jí)產(chǎn)品及AAA級(jí)產(chǎn)品仲裁檢驗(yàn)方法按本標(biāo)準(zhǔn)附錄D中的振蕩法執(zhí)行。6.3 抗菌針織品所應(yīng)用的抗菌物質(zhì)的溶出性檢驗(yàn) 按本標(biāo)準(zhǔn)附錄E所示暈圈法執(zhí)行。7 檢驗(yàn)規(guī)則7.1 各類(lèi)抗菌針織品的抽樣數(shù)量及規(guī)則，除按相應(yīng)針織品正在使用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行外，在抽樣中，再隨機(jī)抽取約200g抗菌織物樣品用于抗菌效果檢測(cè)及抗菌物質(zhì)的溶出性檢測(cè)。7.2 各類(lèi)抗菌針織品的內(nèi)在質(zhì)量及外觀(guān)質(zhì)量，按相應(yīng)針織品正在使用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。7.3 各類(lèi)抗

11、菌針織品按GB18401-2003中的規(guī)定，評(píng)價(jià)是否符合要求。7.4 由國(guó)家具有資質(zhì)的單位出具的相關(guān)檢測(cè)報(bào)告，評(píng)價(jià)抗菌針織品所應(yīng)用的抗菌物質(zhì)。7.5 由國(guó)家具有資質(zhì)的單位出具的人體斑貼試驗(yàn)的檢測(cè)報(bào)告，評(píng)價(jià)抗菌針織品所用的抗菌物質(zhì)的溶出物對(duì)皮膚的刺激性及致過(guò)敏性。7.6 隨機(jī)抽取的抗菌織物樣品，按本標(biāo)準(zhǔn)表1規(guī)定的抑菌率指標(biāo)，評(píng)價(jià)抗菌效果。 7.7 隨機(jī)抽取的抗菌織物樣品，按本標(biāo)準(zhǔn)5.3.4規(guī)定的指標(biāo)，評(píng)價(jià)抗菌物質(zhì)的溶出性。7.8 所評(píng)價(jià)產(chǎn)品的各項(xiàng)指標(biāo)全部符合7.2、7.3、7.4、7.5、7.6及7.7規(guī)定者，判定該產(chǎn)品為合格品；若有任一條不符合要求，則判定該產(chǎn)品為不合格品。7.9 本檢驗(yàn)規(guī)則如

12、有未盡事宜，可由行業(yè)歸口部門(mén)另訂補(bǔ)充細(xì)則。8 包裝和標(biāo)志8.1 各類(lèi)抗菌針織品包裝按GB/T 4856執(zhí)行。8.2 各類(lèi)抗菌針織品標(biāo)志按GB 5296.4執(zhí)行。 8.2.1 在各類(lèi)抗菌針織品包裝上應(yīng)附有產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)形式的產(chǎn)品標(biāo)識(shí)。在使用說(shuō)明書(shū)中，應(yīng)在顯著位置標(biāo)明產(chǎn)品的抗菌級(jí)別；應(yīng)說(shuō)明產(chǎn)品的抗菌性能、特點(diǎn)及使用注意事項(xiàng)等內(nèi)容；僅在局部鑲拼或貼補(bǔ)抗菌織物的產(chǎn)品應(yīng)指明其部位。FZ/T 73023-20068.2.2 各類(lèi)抗菌針織品可在產(chǎn)品或包裝的顯著位置標(biāo)注抗菌標(biāo)識(shí)，也可以用吊牌形式在產(chǎn)品上懸掛特定的抗菌標(biāo)識(shí)。注：標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑及標(biāo)準(zhǔn)空白樣由國(guó)家授權(quán)的機(jī)構(gòu)或單位統(tǒng)一發(fā)放。FZ/T 73023-2006

13、附 錄 A（規(guī)范性附錄）標(biāo)準(zhǔn)空白樣A1 標(biāo)準(zhǔn)空白樣是十分重要的測(cè)試基準(zhǔn)物，為便于比較，應(yīng)采用統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)空白樣。A2 標(biāo)準(zhǔn)空白樣按下列工藝制備純棉針織坯布煮煉（NaOH 1520g/L, 100，浴比1:6，3h）水洗 酸洗 水洗 中和水洗 漂白 (H2O2 34 g/L, 100 ,pH 10.5-11，浴比1:6，3h) 熱水洗（6080）水洗 烘干 檢驗(yàn)A3 檢驗(yàn)方法按本標(biāo)準(zhǔn)附錄D中的吸收法做細(xì)菌生長(zhǎng)試驗(yàn)，接種培養(yǎng)18 h后應(yīng)可以達(dá)到生長(zhǎng)活菌數(shù)Mb 107cfu/片，否則不合格，不能作為標(biāo)準(zhǔn)空白樣。注：上述工藝為工廠(chǎng)常用的常壓煮漂工藝，織物上的雜質(zhì)及油污必須充分去除，使其具有良好的外觀(guān)及吸

14、水性。一般情況下，用此工藝制備的織物，往往還要按附錄C所示洗滌方法，不加洗滌劑，對(duì)其進(jìn)行510次洗滌后，才能得到合格的標(biāo)準(zhǔn)空白樣。附 錄 B（規(guī)范性附錄）標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑B1 提示 本標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑，參照GB/T 8629-2001的附錄A所規(guī)定的AATCC 1993標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑WOB無(wú)磷配方制定。B2 成份 比例, %直鏈烷基苯磺酸鈉（LAS） 18.00固體硅鋁酸鈉 25.00碳酸鈉 18.00 固體硅酸鈉 0.50硫酸鈉 22.13聚乙二醇 2.76聚丙稀酸鈉 3.50有機(jī)硅消泡劑 0.04水分 10.00雜質(zhì) 0.07 總和 100注： 按上述配方制成的粉狀洗滌劑不夠均勻，可再另加40份蒸餾水或去

15、離子水將各組分充分溶解，加熱并混勻，制成約為上述配方71%濃度的漿狀物，使用時(shí)用量增加1.4倍，配制量至少1L。 FZ/T 73023-2006附 錄 C（規(guī)范性附錄）抗菌織物試樣洗滌試驗(yàn)方法C1 提示 為了正確評(píng)價(jià)織物抗菌性能的耐久性，需要規(guī)范的洗滌試驗(yàn)方法，才可使后續(xù)的抗菌性能測(cè)試結(jié)果具有良好的可比性。參照日本標(biāo)準(zhǔn)JIS L 0217 的103方法及GB 8629，制定出本方法。C2 設(shè)備和材料C2.1 洗衣機(jī)：小型家用雙桶（即洗衣桶、脫水桶）洗衣機(jī)，其波輪直徑約34 cm,、轉(zhuǎn)速約290r/min。市售各種型號(hào)家用雙桶洗衣機(jī)的波輪尺寸及轉(zhuǎn)速基本相同，選洗衣桶容積在40L80L范圍內(nèi)的一種

16、型號(hào)即可。C2.2 洗滌劑：本標(biāo)準(zhǔn)附錄B所規(guī)定的洗滌劑。C2.3 陪洗織物：由若干塊兩層100%的滌綸針織物或滌棉混紡機(jī)織物組成，其單位面積質(zhì)量約為試驗(yàn)織物單位面積質(zhì)量的±25%，每塊尺寸為30cm±3cm×30cm±3cm，兩層織物的邊緣應(yīng)縫合在一起。C3 標(biāo)準(zhǔn)化的洗滌條件及程序C3.1 洗滌程序參照GB 8629-2001 “攪拌型洗衣機(jī)-B型洗衣機(jī)的洗滌程序” 7B程序，將洗滌時(shí)間改為5min，此程序相當(dāng)于日本標(biāo)準(zhǔn)JIS L 0217 的103方法。C3.2 在家用雙桶洗衣機(jī)中加入本標(biāo)準(zhǔn)附錄B所規(guī)定的洗滌劑2g/L及自來(lái)水，浴比1:30，水溫40&

17、#177;3，投入試樣,洗滌5min。然后，于常溫下用自來(lái)水清洗。C3.3 第一遍清洗2min，取出織物，脫水30s，然后，于常溫下用自來(lái)水進(jìn)行第二遍清洗。C3.4 第二遍清洗2min，取出織物，脫水30s。C3.5 上述C3.2，C3.3，C3.4三步為一個(gè)循環(huán)，計(jì)為洗滌1次。重復(fù)這三個(gè)步驟，直到預(yù)定的洗滌次數(shù)。為防止殘留的洗滌劑干擾抗菌測(cè)試，注意最后一次洗滌采用大量的自來(lái)水將其徹底清除，然后將織物脫水后烘干，即可用于抗菌性能測(cè)試。C4 簡(jiǎn)化的洗滌條件及程序C4.1下述試驗(yàn)過(guò)程相當(dāng)于5次洗滌（以10g布樣為例。實(shí)際試驗(yàn)應(yīng)根據(jù)試樣按比例增加水量及洗滌劑）：C4.1.1 準(zhǔn)備試樣（10g）和陪洗

18、織物（90g）。C4.1.2 加3 L自來(lái)水（40±3）和6g洗滌劑于洗衣機(jī)中。C4.1.3 加入上述織物試樣和陪洗織物。C4.1.4 洗滌25min，排水。C4.1.5 以3 L自來(lái)水注洗2min，然后取出織物，離心脫水1min，取出。C4.1.6 再以3 L自來(lái)水注洗2min，然后取出織物，離心脫水1min，取出。C4.2上述C4.1.2，C4.1.3，C4.1.4，C4.1.5， C4.1.6這幾個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán)，計(jì)為洗滌5次。重復(fù)這幾個(gè)步驟，直到預(yù)定的洗滌次數(shù)。為防止殘留的洗滌劑干擾抗菌測(cè)試，注意最后一個(gè)循環(huán)采用大量的自來(lái)水將其徹底清除，然后將織物脫水后烘干，即可用于抗菌性能

19、測(cè)試。FZ/T 73023-2006附 錄 D（規(guī)范性附錄）抗菌織物測(cè)試方法D1 安全提示本試驗(yàn)所采用的細(xì)菌都是能使人感染并致病的細(xì)菌，因此必須采用一切必要的預(yù)防措施，以免除對(duì)實(shí)險(xiǎn)室人員和周?chē)h(huán)境及有關(guān)人員的危害。試驗(yàn)應(yīng)由在微生物檢測(cè)技術(shù)方面訓(xùn)練有素且有經(jīng)驗(yàn)的人員從事。并且，試驗(yàn)者應(yīng)高度注意消毒及無(wú)菌操作，防止試樣被雜菌污染。D2 儀器和試劑D2.1 儀器D2.1.1 恒溫往復(fù)式振蕩器（搖床）溫控精度為±1D2.1.2 生化培養(yǎng)箱溫控精度為±1D2.1.3 高壓蒸汽消毒器（簡(jiǎn)稱(chēng)滅菌鍋）D2.1.4 天平感量為±0.01gD2.1.5 生物安全柜或100級(jí)層流超凈工

20、作臺(tái)D2.1.6 510玻璃門(mén)冷藏箱D2.1.7 保存菌種用冰箱D2.1.8 40100倍體式顯微鏡D2.1.9 渦流振動(dòng)器D2.2 器皿D2.2.1 三角形燒瓶容量為100mL,250mL,500mL,1000mLD2.2.2 生化培養(yǎng)皿（簡(jiǎn)稱(chēng)平皿），皿底直徑為9cmD2.2.3 定量刻度吸管容量為0.2mL,0.5mL,1mL和10mLD2.2.4 試管 15mm×100mm，20mm×100mmD2.2.5 帶密封蓋的管形瓶 直徑26mm30mm，容量為30mL50mLD2.2.6 酒精燈D2.2.7 4mm鉑接種環(huán) D2.2.8 游標(biāo)卡尺D2.3 試劑D2.3.1

21、蛋白胨生化試劑D2.3.2 牛肉浸膏生化試劑D2.3.3 瓊脂試劑級(jí)D2.3.4 葡萄糖 試劑級(jí)D2.3.5 氯化鈉分析純D2.3.6 氫氧化鈉分析純D2.3.7 磷酸氫二鈉分析純D2.3.8 磷酸二氫鉀分析純D2.3.9 吐溫-80 分析純D2.3.10 氯化三苯四氮唑(TTC) 分析純D3 試驗(yàn)培養(yǎng)基溶液的配制D3.1 營(yíng)養(yǎng)肉湯：精確稱(chēng)取3g牛肉膏和5g蛋白胨，加1000mL蒸餾水放到一只燒瓶中混和，徹底地溶解，再用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液將pH調(diào)至6.8±0.2(25)。如有需要，取其中一部分放到一支試管中，蓋上棉塞，在103Kpa、121滅菌15min。若不立刻使用，把

22、它放在510的條件下保存。保存期不能超過(guò)一個(gè)月。D3.2 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：精確稱(chēng)取3g牛肉膏、5g蛋白胨和15g瓊脂粉，加1000mL蒸餾水，放到一只燒瓶中混和，將燒瓶放于沸水浴中加熱，充分地溶解，再用0.1mol/L氫氧化鈉溶液將pH調(diào)至6.8FZ/T 73023-2006±0.2，蓋上棉塞，在103Kpa、121滅菌15min。當(dāng)使用時(shí)，把培養(yǎng)基的溫度調(diào)整為4546。若不立刻使用，把它放在510的條件下保存。保存期不能超過(guò)一個(gè)月。D3.3 沙氏瓊脂培養(yǎng)基：精確稱(chēng)取40g葡萄糖、10g蛋白胨和20g瓊脂粉，加1000mL蒸餾水，放到一只燒瓶中混和，將燒瓶放于沸水浴中加熱，充分地溶解

23、，再用0.1mol/L氫氧化鈉溶液將pH調(diào)至5.6±0.2，蓋上棉塞，在103Kpa、121滅菌15min。當(dāng)使用時(shí)，把培養(yǎng)基的溫度調(diào)整為4546。若不立刻使用，把它放在510的條件下保存。保存期不能超過(guò)一個(gè)月。D3.4斜面培養(yǎng)基：向一支試管里面注入約10mL營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（或沙氏瓊脂培養(yǎng)基），蓋上棉塞，在103Kpa、121滅菌15min。滅菌后以與水平面大約15°的夾角放到無(wú)菌室中，使其凝固。當(dāng)不立刻使用時(shí)，把它放在510條件下保存。當(dāng)沒(méi)有出現(xiàn)冷凝水時(shí)，可加熱熔化它再一次凝固后使用。保存期不能超過(guò)一個(gè)月。D3.5 0.03mol/L P.B.S（磷酸鹽）緩沖液：取磷酸氫

24、二鈉2.84g，磷酸二氫鉀1.36g，蒸餾水1000mL，配成p7.27.4的緩沖液。用250mL燒瓶分裝后，在103Kpa、121滅菌15min，備用。若不立刻使用，把它放在510的條件下保存。保存期不能超過(guò)一個(gè)月。D3.6 稀釋用生理鹽水：精確稱(chēng)取8.5g氯化鈉，加1000mL蒸餾水，放到一只燒瓶中充分溶解。如有需要，取其中一部分放到試管中，在103Kpa、121滅菌15min，備用。若不立刻使用，把它放在510的條件下保存。保存期不能超過(guò)一個(gè)月。D3.7 洗脫試樣活菌用生理鹽水：精確稱(chēng)取8.5g氯化鈉，加1000mL蒸餾水，放到一只燒瓶中充分溶解，并加2g非離子表面活性劑吐溫-80。如有

25、需要，取其中一部分放入試管或三角形瓶中，在103Kpa、121滅菌15min，備用。若不立刻使用，把它在510的條件下保存。保存期不能超過(guò)一個(gè)月。D4 試驗(yàn)菌種及菌種保存D4.1 試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)菌株：金黃色葡萄球菌（ATCC6538）、大腸桿菌（8099）、白色念珠菌（ATCC 10231）。D4.2 標(biāo)準(zhǔn)菌株的替代：可用大腸桿菌（ATCC 29522）或肺炎桿菌ATCC4352）代替大腸桿菌（8099）。D4.3 菌種轉(zhuǎn)種及保存：儲(chǔ)存的菌種每一個(gè)月應(yīng)轉(zhuǎn)種一次，轉(zhuǎn)種次數(shù)不應(yīng)超過(guò)10代。而且轉(zhuǎn)種保存一個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間，不能用來(lái)下一次轉(zhuǎn)種。菌種轉(zhuǎn)種后放于510條件下保存。 D5 接種菌液的制備D5.1 二

26、步預(yù)培養(yǎng)程序制備細(xì)菌接種菌懸液：從310代的菌種試管斜面中取一接種環(huán)細(xì)菌，在平皿的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上劃線(xiàn)，然后，在37±1，培養(yǎng)20 h24h。取營(yíng)養(yǎng)肉湯20mL放入100mL三角形瓶中，用接種環(huán)從已培養(yǎng)20h24h的平皿中挑一個(gè)典型的菌落，接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯中，在37±1，130r/min、振蕩培養(yǎng)18h20h，即制成了接種菌懸液。此菌液用比濁法或稀釋法測(cè)定，活菌數(shù)應(yīng)達(dá)到1×109cfu/mL 5×109cfu/mL。此新鮮菌液不可放在冰箱內(nèi)中保存，應(yīng)在盡可能短的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行后續(xù)的稀釋接種操作，以保證接種菌的活性。D5.2 預(yù)培養(yǎng)程序制備白色念珠菌等真菌接種菌

27、懸液：從310代的菌種中取一接種環(huán)，在另一支裝有沙氏瓊脂培養(yǎng)基試管斜面上劃線(xiàn)，培養(yǎng)18h24h，得新鮮培養(yǎng)物，再加5mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液，反復(fù)吹吸，洗下新鮮菌苔，然后用5 mL吸管將洗液移至另一只無(wú)菌試管中，在手上振搖80次，使其均勻，即制成了接種菌懸液。此菌懸液用比濁法或稀釋法測(cè)定，活菌數(shù)應(yīng)達(dá)到1×108cfu/mL5×108cfu/mL。此新鮮菌液不可放在冰箱內(nèi)中保存，應(yīng)在盡可能短的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行后續(xù)的稀釋接種操作，以保證接種菌的活性。D6抗菌織物的快速測(cè)試方法:奎因法D6.1提示本方法參照美國(guó)的Quinn Test法并作出適當(dāng)改進(jìn)，是一種比較簡(jiǎn)易和快

28、速的測(cè)試方法，可用于細(xì)菌及部份真菌檢測(cè)，適用于吸水性較好且顏色較淺的溶出型或非溶出型抗菌織物。未經(jīng)抗菌處理織物試樣是作為標(biāo)準(zhǔn)空白試樣的參照物，如客戶(hù)不能提供，則該試樣的測(cè)試可省略。FZ/T 73023-2006D6.2 試驗(yàn)準(zhǔn)備D6.2.1 試樣準(zhǔn)備：各取抗菌織物試樣、未經(jīng)抗菌處理織物試樣及由附錄A制備的標(biāo)準(zhǔn)空白試樣5 6塊， 試樣尺寸為2.5cm×2.5cm。每種試樣各用一塊小紙片包好，在103KPa、121滅菌15min，備用。D6.2.2 接種菌液準(zhǔn)備：將D5.1制備的細(xì)菌懸液（或D5.2真菌懸液），采用0.03mol/L P.B.S溶液稀釋?zhuān)刂苹罹鷶?shù)為5×104c

29、fu/mL 1×105cfu/mL（參考數(shù)值。金黃色葡萄球菌取上限、大腸桿菌及白色念珠菌取下限?；罹鷶?shù)太多培養(yǎng)后難于計(jì)數(shù)，太少培養(yǎng)后計(jì)數(shù)誤差大）。對(duì)吸水性較差的試樣，可在菌液中添加0.05%的非離子表面活性劑吐溫-80，以利菌液吸收。若添加了表面活性劑，應(yīng)在試驗(yàn)報(bào)告中注明。D6.2.3 半固體培養(yǎng)基準(zhǔn)備：將1份營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（或沙氏瓊脂培養(yǎng)基）溶解于3份的蒸餾水內(nèi)，即制成了半固體培養(yǎng)基，分裝燒瓶，封口，在103kpa、121滅菌15min，備用。在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制的半固體培養(yǎng)基中可加入 1/100000 的氯化三苯四氮唑(TTC)染色劑，則細(xì)菌菌落為紅色，十分便于觀(guān)察。注意染色劑應(yīng)

30、在半固體培養(yǎng)基冷卻至60左右時(shí)加入，隨用隨配，溫度太高或放置時(shí)間太長(zhǎng)染色劑會(huì)變質(zhì)不穩(wěn)定。在沙氏瓊脂培養(yǎng)基配制的半固體培養(yǎng)基中不必加入TTC染色劑，因其不能使白色念珠菌等真菌染色。D6.3 試驗(yàn)操作D6.3.1 接種：在已消毒的空平皿里，分別放上抗菌織物試樣、未經(jīng)抗菌處理織物試樣及標(biāo)準(zhǔn)空白試樣，吸取已準(zhǔn)備好的菌液0.1mL, 至少分5個(gè)點(diǎn)均勻地涂抹在每塊試樣上，應(yīng)盡量使菌液吸收在布內(nèi)。D6.3.2干燥：在無(wú)雜菌污染的條件下，于37左右置于生化培養(yǎng)箱內(nèi)，放置干燥1h 3h。注意，要讓試樣上已接種的菌液完全干透后，才可進(jìn)行下一步的貼培養(yǎng)基操作，否則菌種可能會(huì)溢出試樣外生長(zhǎng)，造成計(jì)數(shù)誤差。D6.3.3

31、 貼試樣：將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（或沙氏瓊脂培養(yǎng)基）注入平皿內(nèi)約15mL，冷卻。再將已干燥好的試樣平貼在培養(yǎng)基上，用無(wú)菌鑷子輕壓樣片，使其緊貼于培養(yǎng)基表面。每個(gè)平皿內(nèi)可貼一塊標(biāo)準(zhǔn)空白試樣、一塊抗菌織物試樣及未經(jīng)抗菌處理織物試樣。每次試驗(yàn)作兩個(gè)平皿的平行樣。D6.3.4 覆蓋半固體培養(yǎng)基：用吸管吸取半固體培養(yǎng)基0.3mL 0.5mL，將試樣均勻覆蓋，蓋好平皿。D6.3.5 培養(yǎng)計(jì)數(shù)：將平皿倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。金黃色葡萄球菌、大腸桿菌37±1培養(yǎng)24h36h，即可用低倍顯微鏡觀(guān)察菌落，計(jì)數(shù)。白色念珠菌培養(yǎng)溫度37±1，應(yīng)在24h36h用低倍顯微鏡觀(guān)察菌落，初步計(jì)數(shù)，48h精確計(jì)數(shù)

32、(72h后往往長(zhǎng)成片難以計(jì)數(shù)了)。其他菌種根據(jù)其特點(diǎn)確定培養(yǎng)溫度及時(shí)間。當(dāng)試樣的菌落數(shù)為200時(shí)已難于準(zhǔn)確讀數(shù)，可將試樣上1/4區(qū)域的菌落數(shù)數(shù)出，然后再乘以4倍得出菌落數(shù)。D6.3.6 為降低誤差，對(duì)同一試樣至少應(yīng)作三次平行測(cè)試，取平均值報(bào)告抑菌率。D6.4 試樣抑菌率計(jì)算Xb - Xc Y = ×100% （D.1） Xb 式中：Y 抑菌率Xb 標(biāo)準(zhǔn)空白試樣菌落數(shù)平均值Xc 抗菌織物試樣或未經(jīng)抗菌處理織物試樣菌落數(shù)平均值D6.5 試驗(yàn)有效性判斷當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)空白試樣菌落數(shù)平均值200Xb50時(shí)，判定試驗(yàn)有效，否則判定為無(wú)效，要重新進(jìn)行試驗(yàn)。D7 抗菌織物測(cè)試方法：吸收法FZ/T 73023

33、-2006D7.1提示本方法參照日本標(biāo)準(zhǔn)JIS L1902及美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)AATCC 100中的定量試驗(yàn)方法并作出適當(dāng)改進(jìn)，適用于溶出型抗菌織物，或吸水性較好且洗滌次數(shù)較少的非溶出型抗菌織物。未經(jīng)抗菌處理織物試樣是作為標(biāo)準(zhǔn)空白試樣的參照物，如客戶(hù)不能提供，則該試樣的測(cè)試可省略。D7.2 試驗(yàn)準(zhǔn)備D7.2.1 試樣準(zhǔn)備：精確稱(chēng)取0.4g±0.05g，邊長(zhǎng)約18mm的正方形疊起來(lái)作為一個(gè)試樣。準(zhǔn)備2個(gè)由附錄A制備的標(biāo)準(zhǔn)空白試樣，1個(gè)抗菌織物試樣。另取1個(gè)未經(jīng)抗菌處理織物試樣，作陽(yáng)性對(duì)照。做樣時(shí)應(yīng)小心，避免污染。 注1：2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)空白布試樣，其中1個(gè)用于“0”接觸時(shí)間測(cè)試接種菌數(shù)量，另1個(gè)用于18

34、h培養(yǎng)后測(cè)試生長(zhǎng)菌數(shù)量。D7.2.2 試樣滅菌：按下述注2至注5的要求，將試樣分別放入管形瓶中，把管形瓶放入到一個(gè)網(wǎng)狀金屬籃子里，在籃子上面蓋一層鋁箔，并且各個(gè)管形瓶口用鋁箔扎起來(lái)，把籃子放到滅菌鍋里保持103Kpa、 121滅菌15min，讓它自然冷卻到100，立即從滅菌鍋里取出來(lái)，拿走藍(lán)子上的鋁箔，放到超凈工作臺(tái)上晾干1h，注意扎緊管形瓶口的鋁箔，不讓其松散。 注2：如果試樣容易卷曲，取0.4g±0.05g試樣，疊成約18mm的正方形，用一段玻璃棒壓在試樣的上面，把它放入管形瓶里滅菌?；蛘咦龀?.4g±0.05g約18mm的正方形，在其一端或兩端用細(xì)線(xiàn)把它固定好,滅菌。

35、 注3：如果是棉花或毛狀物，放0.4g±0.05g到管形瓶里，壓上一段玻璃棒，滅菌。 注4：如果是紗線(xiàn)，把它們卷成0.4g±0.05g一束做成一個(gè)包狀，壓上一段玻璃棒，滅菌。注5：如果是地毯或地毯狀物，則剪下0.4g±0.05g放到管形瓶里，壓上一段玻璃棒，滅菌。D7.2.3 接種菌液的準(zhǔn)備：a）用吸管從D5.1制備的細(xì)菌懸液中吸0.3mL1mL（參考數(shù)值。由此步驟調(diào)整接種活菌數(shù)目，大腸桿菌取下限、金黃色葡萄球菌取上限），加入到裝有9mL營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管中，充分混合均勻后吸取1mL，加入到裝有9mL營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管中，充分混合均勻后吸取1mL，加入到裝有9mL 0.0

36、3mol/L P.B.S緩沖液的試管中，充分混合均勻后吸取1mL，加入到裝有9mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液的試管中，充分混合均勻。由此固定的四步稀釋操作程序，可將活菌數(shù)調(diào)整為0.7×10 5cfu/mL1.5×10 5 cfu/mL（大腸桿菌取下限、金黃色葡萄球菌取上限），用來(lái)對(duì)試樣接種。此接種菌液中約含1%的營(yíng)養(yǎng)肉湯，用以提供試驗(yàn)菌的營(yíng)養(yǎng)。此接種菌液不可放在冰箱里保存，應(yīng)盡快使用，以保持接種菌的活性。b）用0.03mol/L P.B.S緩沖液作為稀釋液，把D5.2制備的白色念珠菌懸液稀釋成含活菌數(shù)1.0×10 5 cfu/mL1.3×10

37、 5cfu/mL，用來(lái)對(duì)試樣接種。此接種菌液不可放在冰箱里保存，應(yīng)盡快使用，以保持接種菌的活性。D7.3 試驗(yàn)操作D7.3.1 試樣接種：用一支吸管精確地吸取已準(zhǔn)備好的接種菌液0.2mL，接種到已準(zhǔn)備好的試樣上面,在試樣上均勻地以幾個(gè)點(diǎn)滴上接種菌液，并把管形瓶蓋子扎緊。 注6：當(dāng)試樣拒水，難于浸漬接種液時(shí)，可在接種菌液中另加入0.05%非離子表面活性劑，如果加了表面活性劑，應(yīng)記載在試驗(yàn)報(bào)告里。D7.3.2 試樣培養(yǎng)：培養(yǎng)管形瓶里已接種的試樣（1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)空白試樣、1個(gè)抗菌織物試樣及1個(gè)未經(jīng)抗菌處理織物試樣），在37±1培養(yǎng)18h±1h。D7.3.3 洗脫試樣上的活菌：a）標(biāo)準(zhǔn)空

38、白試樣接種后“0”接觸時(shí)間洗脫。用于“0”接觸時(shí)間測(cè)試接種菌數(shù)量的標(biāo)準(zhǔn)空白試樣，接種后，立即向管形瓶中加入洗脫試樣活菌用冰冷生理鹽水20 mL，扎緊管形瓶蓋子，用手擊打（30次，幅度30cm）或振動(dòng)器振蕩（5s、5次），把試樣上的活菌洗脫下來(lái)。b）接種培養(yǎng)18h后的試樣活菌洗脫。分別向接種了試驗(yàn)菌，并培養(yǎng)18h±1h后的3個(gè)試樣中加入洗脫試樣活菌用冰冷生理鹽水20mL，扎緊管形瓶蓋，用手擊打（30次，幅度30cm）或振動(dòng)器振蕩（5s、5次），把每個(gè)試樣上的活菌洗脫下來(lái)。FZ/T 73023-2006D7.3.4 洗脫液稀釋?zhuān)河? mL吸管精確地從管形瓶里吸取1mL±0.1m

39、L洗脫液，放入裝有稀釋用冷生理鹽水9mL±0.1mL的試管，搖勻，然后用另一支1mL吸管吸取1mL，放入到另一支裝有稀釋用冷生理鹽水9mL±0.1mL的試管，搖勻，重復(fù)這些步驟，用10倍稀釋法準(zhǔn)備一個(gè)稀釋系列。D7.3.5 澆皿培養(yǎng)：從各個(gè)稀釋度的試管中每次吸取1mL±0.1mL，分別放到2個(gè)平皿中作平行樣，每次換一支吸管。在平皿中加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（或沙氏瓊脂培養(yǎng)基）約15 mL，室溫凝固。倒置平皿，放入生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)，溫度37±1，時(shí)間24h 48h（白色念珠菌48h 72h）。選擇菌落數(shù)在30300之間的合適稀釋度的平皿計(jì)數(shù)。注7: 標(biāo)準(zhǔn)空白試樣接

40、種 “0”接觸時(shí)間洗脫澆皿培養(yǎng)后，在10-1稀釋度平皿中，平均菌落數(shù)應(yīng)控制在70150的范圍，其中大腸桿菌宜控制在70左右，金黃色葡萄球菌宜控制在150左右,白色念珠菌宜控制在110左右，否則影響試驗(yàn)精度。D7.3.6 計(jì)算活菌數(shù)目：按照下式計(jì)算所獲的活菌數(shù)目（保留兩位有效數(shù)字）： M = E×N×20 （D.2） 式中：M 試樣的活菌數(shù)（cfu/片） E 菌落數(shù)（兩個(gè)平皿的平均值） N 稀釋指數(shù)，N = 100，101，102， 20 生理鹽水的體積D7.3.7 為降低誤差，對(duì)同一試樣至少應(yīng)作三次平行測(cè)試，取其平均值報(bào)告抑菌率。D7.4 試樣抗菌效果計(jì)算 Mb - McY

41、 = ×100% （D.3）Mb式中：Y 抑菌率Mb 18 h培養(yǎng)后標(biāo)準(zhǔn)空白試樣的活菌數(shù)Mc 18 h培養(yǎng)后抗菌織物試樣或未經(jīng)抗菌處理織物試樣的活菌數(shù)D7.5 試驗(yàn)有效性的判斷按照下式計(jì)算生長(zhǎng)值F，對(duì)于金黃色葡萄球菌及大腸桿菌，當(dāng)F1.5，對(duì)于白色念珠菌，當(dāng)F1.0時(shí)，說(shuō)明試驗(yàn)菌活性較強(qiáng)，試驗(yàn)可判定有效，否則判定為無(wú)效，要重新進(jìn)行試驗(yàn)。 F = lgMb lgMa （D.4） 式中：F 生長(zhǎng)值 Mb 18h培養(yǎng)后標(biāo)準(zhǔn)空白試樣的活菌數(shù) Ma “0”接觸時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)空白試樣的活菌數(shù)D8 抗菌織物測(cè)試方法：振蕩法D8.1 提示本方法參照美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)ASTM E2149所示振蕩燒瓶法并作出適當(dāng)改進(jìn)，

42、對(duì)于試樣的吸水性要求不高，纖維狀，粉未狀，有毛或羽的衣物，凹凸不平的織物等任意形狀的試料都能應(yīng)用，尤其適用于非溶出型抗菌織物。未經(jīng)抗菌處理織物試樣是作為標(biāo)準(zhǔn)空白試樣的參照物，如客戶(hù)不能提供，則該試樣的測(cè)試可省略。D8.2 試驗(yàn)準(zhǔn)備D8.2.1 試樣的準(zhǔn)備D8.2.1.1 取樣：將抗菌織物試樣、未經(jīng)抗菌處理織物試樣及由附錄A制備的標(biāo)準(zhǔn)空白試樣，在樣品中部取樣。D8.2.1.2 剪樣：，將所有試樣分別剪成0.5cm大小的碎片。FZ/T 73023-2006D8.2.1.3 稱(chēng)樣：用小稱(chēng)量杯稱(chēng)取抗菌織物試樣、未經(jīng)抗菌處理織物試樣及標(biāo)準(zhǔn)空白試樣0.75g±0.05g多份。將試樣用小紙片包好，

43、在103Kpa、121滅菌15min，備用。D8.2.2 接種菌液的準(zhǔn)備a）用吸管從D5.1制備的細(xì)菌懸液中吸取2 mL 3mL（參考數(shù)值。由此步驟調(diào)整接種活菌數(shù)目，大腸桿菌取下限、金黃色葡萄球菌取上限），加入到裝有9mL營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管中，充分混合均勻后吸取1mL，加入到另一支裝有9mL 營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管中，充分混合均勻后吸取1mL，加入到裝有9 mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液的試管中，充分混合均勻后吸取5 mL，加入到裝有45 mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液的三角形瓶中。充分混合均勻，稀釋至含活菌數(shù)目3×10 5cfu/mL4×10 5 cfu/mL

44、（由此固定的4次稀釋程序，此接種菌液中含有微量的營(yíng)養(yǎng)肉湯），用來(lái)對(duì)試樣接種。此接種菌液不可放在冰箱里保存，應(yīng)盡可能快地使用，以保持接種菌的活性。注8：由于不同的實(shí)驗(yàn)室所用的牛肉膏、蛋白胨的品位不同，上述的4次稀釋程序準(zhǔn)備的接種菌液的營(yíng)養(yǎng)可能會(huì)稍多了一點(diǎn)（對(duì)于大腸桿菌尤為明顯），其表現(xiàn)為振蕩18h后標(biāo)準(zhǔn)空白樣長(zhǎng)菌量與抗菌整理試樣長(zhǎng)菌量相差太小，拉不開(kāi)差距。此時(shí)，宜采用另一種固定的4次稀釋程序：用吸管從D5.1制備的細(xì)菌懸液中吸取2mL3mL（參考數(shù)值。由此步驟調(diào)整活菌數(shù)，大腸桿菌取下限、金黃色葡萄球菌取上限），加入到裝有9mL營(yíng)養(yǎng)肉湯的試管中，充分混合均勻后吸取1mL，加入到另一支裝有9mL 0

45、.03mol/L P.B.S緩沖液的試管中，充分混合均勻后吸取1mL，加入到裝有9 mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液的試管中，充分混合均勻后吸取5 mL，加入到裝有45 mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液的三角形瓶中。充分混合均勻，稀釋至含活菌數(shù)目3×10 5cfu/mL4×10 5 cfu/mL（此接種菌液中含有更微量的營(yíng)養(yǎng)肉湯），用來(lái)對(duì)試樣接種。（可事先作一下預(yù)試驗(yàn)，選取抑菌率測(cè)試效果好的一種固定的4次稀釋程序制備試樣接種的細(xì)菌液。） b）用吸管從D5.2制備的白色念珠菌懸液中吸取2mL 4mL，加入到9mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液中，進(jìn)

46、行10倍系列稀釋操作，充分混合均勻后吸取5mL，加入到45mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液中，充分混合均勻稀釋至含活菌數(shù)2.5×10 5cfu/mL3×10 5cfu/mL，用來(lái)對(duì)試樣接種。此接種菌液不可放在冰箱里保存，應(yīng)盡快使用，以保持接種菌的活性。D8.3 試驗(yàn)操作D8.3.1 準(zhǔn)備4個(gè)250mL三角形燒瓶，在其中一個(gè)燒瓶中加入標(biāo)準(zhǔn)空白試樣0.75g±0.05g，一個(gè)燒瓶中加入抗菌織物試樣0.75g±0.05g，一個(gè)燒瓶中加入未經(jīng)抗菌處理織物試樣0.75g±0.05g，另一個(gè)燒瓶不加試樣用于陽(yáng)性對(duì)照，然后在每個(gè)燒瓶中加入70mL&

47、#177;0.1mL 0.03mol/L P.B.S緩沖液。D8.3.2 “0”接觸時(shí)間制樣：用吸管往標(biāo)準(zhǔn)空白試樣燒瓶及陽(yáng)性對(duì)照燒瓶中各加入5mL已準(zhǔn)備好的接種菌液。蓋上燒瓶蓋, 放在往復(fù)式振蕩器上, 在24±1，以250300 r/min，振蕩1min ± 5s，然后作下一步“0”接觸時(shí)間取樣。D8.3.3 “0”接觸時(shí)間取樣：用吸管在“0”接觸時(shí)間制樣的兩個(gè)燒瓶中分別吸取1mL±0.1mL溶液，移入裝有9mL±0.1mL 0.03 mol/L P.B.S緩沖液的試管中，搖勻。吸取1mL±0.1mL溶液移入另一支裝有9mL±0.1m

48、L 0.03 mol/L P.B.S緩沖液的試管中，搖勻，再?gòu)脑嚬苤形?mL±0.1mL加入滅菌的平皿中，接著往每一平皿中倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（或沙氏瓊脂培養(yǎng)基）約15mL，室溫凝固；倒置平皿，37±1培養(yǎng)24h48h（白色念珠菌48h 72h）。各個(gè)試樣澆注兩個(gè)平皿作平行樣。選擇菌落數(shù)在30300之間的合適稀釋度的平皿計(jì)數(shù)。注9: 標(biāo)準(zhǔn)空白試樣接種 “0”接觸時(shí)間取樣并澆皿培養(yǎng)后，在10-2稀釋度平皿中，金黃色葡萄球菌及大腸桿菌的平均菌落數(shù)宜控制在200250的范圍，白色念珠菌的平均菌落數(shù)宜控制在150200的范圍，否則影響試驗(yàn)精確度。D8.3.4 定時(shí)振蕩接觸：用吸管往

49、抗菌織物試樣及未經(jīng)抗菌處理織物試樣的燒瓶中各加入5mL已準(zhǔn)備好的接種菌液，蓋好瓶蓋。已完成“0”接觸時(shí)間取樣且蓋好瓶蓋的另兩個(gè)燒瓶不需再加接種菌液。再將此4個(gè)試樣的燒瓶置于往復(fù)式振蕩器上，在24±1，以150 r/min，振蕩18h。D8.3.5 稀釋培養(yǎng)計(jì)數(shù)：到規(guī)定時(shí)間后，從每個(gè)燒瓶中用吸管吸取1mL±0.1mL試液，放入有9mL±0.1mL0.03 mol/LP.B.S緩沖液的試管中，搖勻。重復(fù)這些步驟，用10倍稀釋法進(jìn)行系列稀釋。FZ/T 73023-2006用新吸管從每個(gè)稀釋度的試管中分別取1mL±0.1mL，放入兩個(gè)平皿作平行樣，再向每個(gè)平皿中

50、倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（或沙氏瓊脂培養(yǎng)基）約15mL，室溫凝固，倒置平皿，37±1培養(yǎng)24h 48h（白色念珠菌48h 72h）。選擇菌落數(shù)在30300之間的合適稀釋度的平皿計(jì)數(shù)。D8.3.6 記錄結(jié)果，求出平均菌落數(shù)，即可按下式計(jì)算試樣燒瓶?jī)?nèi)的活菌濃度（保留兩位有效數(shù)字）：K = Z×N （D.5）式中：K 試樣燒瓶?jī)?nèi)的活菌濃度（cfu /mL）Z 菌落數(shù)（兩個(gè)平皿的平均值） N 稀釋指數(shù)，N = 100，101，102， D8.3.7 為降低誤差，對(duì)同一試樣至少應(yīng)作三次平行測(cè)試，取其平均值報(bào)告抑菌率。D8.4 試樣的抗菌效果計(jì)算 在振蕩接觸時(shí)間較長(zhǎng)的情況下，細(xì)菌已經(jīng)過(guò)多代繁

51、殖，在標(biāo)準(zhǔn)空白試樣的燒瓶?jī)?nèi)細(xì)菌一般會(huì)大大超過(guò)接種時(shí)的數(shù)量，此時(shí)，由比較抗菌織物試樣或未經(jīng)抗菌處理織物試樣與標(biāo)準(zhǔn)空白試樣燒瓶?jī)?nèi)的活菌數(shù)的方式計(jì)算出抑菌率。 Wb Wc Y = ×100% （D.6）Wb式中：Y 抑菌率Wb 標(biāo)準(zhǔn)空白試樣振蕩接觸18h后燒瓶?jī)?nèi)的活菌濃度Wc 抗菌織物試樣或未經(jīng)抗菌處理織物試樣振蕩接觸18h后燒瓶?jī)?nèi)的活菌濃度D8.5 試驗(yàn)有效性的判斷若對(duì)金黃色葡萄球菌及大腸桿菌等細(xì)菌：lg Wb lg Wa1.0，對(duì)白色念珠菌等真菌：lg Wb lg Wa 0.5，且陽(yáng)性對(duì)照樣與標(biāo)準(zhǔn)空白試樣燒瓶中的活菌濃度接近，說(shuō)明試驗(yàn)菌活性較強(qiáng)，試驗(yàn)可判定有效，否則判定為無(wú)效，要重新進(jìn)行試驗(yàn)。式中：Wb 標(biāo)準(zhǔn)空白試樣振蕩接觸18h后燒瓶?jī)?nèi)的活菌濃度 Wa 標(biāo)準(zhǔn)空白試樣 “0”接觸時(shí)間燒瓶?jī)?nèi)的活菌濃度 附 錄 E（規(guī)范性附錄）抗菌物質(zhì)的溶出性測(cè)試方法：暈圈法E1 提示本方法適用于抗菌織物所用抗菌物質(zhì)的溶出性測(cè)試,可用于判定試樣是否為溶出型抗菌織物，還可為抗菌織物的安全性提供判定依據(jù)。為防止抗菌織物在加工過(guò)程中殘留的浮離化學(xué)物質(zhì)的干擾，用于試驗(yàn)的織物試樣均應(yīng)按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范性附錄C進(jìn)行一次洗滌然后測(cè)試。E2 試驗(yàn)準(zhǔn)備E2.1 試樣準(zhǔn)備：將已各洗滌一次的標(biāo)準(zhǔn)空白試樣、抗菌織物試樣，各取1.5cm×1.5cm的試樣46塊。將試樣用小紙片包好，在103Kpa