冷刺激條件下硒和維生素E對(duì)大鼠心臟內(nèi)血管活性物質(zhì)的影響

1、    冷刺激條件下硒和維生素E對(duì)大鼠心臟內(nèi) 血管活性物質(zhì)的影響        摘要目的:用低硒/維生素E(Se/VE)飼料喂養(yǎng)的大鼠動(dòng)物模型，施以冰泳刺激，觀察Se,VE對(duì)心肌血管活性物質(zhì)的影響。方法:用60只Wistar大鼠，按體重和性別隨機(jī)分為低硒/維生素E組(Se/VE DG)及上述每kg飼料補(bǔ)硒(亞硒酸鈉)0.1 mg(Se/VE DG+Se)組、補(bǔ)-VE100mg(Se/VE DG+ VE)組、聯(lián)合補(bǔ)Se,VE (Se/VE DG+Se/VE)組、低硒/

2、維生素E組(Se/VE DG)和常規(guī)飼料組 (SG)等六組。飼養(yǎng)70d，測(cè)定各組動(dòng)物心肌內(nèi)皮素(ET),一氧化氮(NO),去甲腎上腺素(NE),血管緊張素(Ang-),單胺氧化酶(MAO-A),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px),脂褐素(lipofuscin)等水平。結(jié)果: Se/VE DG組心肌ET,Ang-含量明顯高于其它組；NO含量明顯低于其它組；心肌NE水平增高，而特異性分解NE的MAO-A活性降低；心肌Lipofuscin含量明顯增加；SOD,GSH-Px含量降低。補(bǔ)Se組、補(bǔ)Se/VE組、低Se/VE組和對(duì)照組上述指標(biāo)活性明顯改善。結(jié)論:冷刺激條件下硒和維

3、生素E對(duì)大鼠心臟內(nèi)血管活性物質(zhì)有明顯影響。主題詞物理刺激；硒；維生素E；血管 Effects of selenium and vitamin E on vasoactive substances in myocardium of rats under cold stressJIN YiQingdao Medical College of Qingdao University, Qingdao (266021)LI Bao-Yu LI Guang-ShengChangchun Tranditional Medical CollegeZHANG Hai-YingEndemic Diseases I

4、nstitute of Norman Bethune University of Medical ScienceAbstractAIM:To study the effects of selenium(Se) and vitamin E(VE) on vasoactive substances in myocardium of rats under cold stress.METHOD: 60 Wistar rats were divided into 6 groups: (1) Se,VE dificient group (Se/VE DG);(2) Se supplemented 0.1

5、mg/kg group(Se/VE DG+Se );(3) VE supplemented 100 mg/kg group(Se/VE DG+VE );(4) Se,VE supplemented group (Se/VE DG+Se/VE );(5) Se,VE dificient grain group( Se/VE DG);(6) Stock group(SG).Rats were fed for 70 days and were put in ice water stressed before killed.The contents of endothelin(ET),nitric o

6、xide(NO), noradrenaline(NE),angiotensin-(Ang-),activities of monoamine oxidase-A(MAO-A),superoxide dismutase(SOD),glutathione peroxidase(GSH-Px),and content of lipofuscin in myocardial were measured.RESULTS:Contents of ET, Ang- and NE were abviously increased and contents of NO and activities of MAO

7、-A,SOD, GSH-Px were markedly decreased in the myocardium of Se/VE DGrats,but above items were improved in differently grade in those rats fed on Se/VE DG supplemented Se,VE and Se/VE group.CONCLUSION: Se and /or VE played impotant role in some vasoactive substances of myocardium in rats fed on Se/VE

8、 dificient grain under cold stress.MeSH Physical stimulation;Selenium;Vitamin E;Blood vessels機(jī)體在受到各種強(qiáng)烈刺激后會(huì)產(chǎn)生一系列非特異性的防御反應(yīng),主要表現(xiàn)為交感神經(jīng)腎上腺髓質(zhì)興奮和下丘腦垂體腎上腺皮質(zhì)功能增強(qiáng)而引起一系列代謝改變，以動(dòng)員機(jī)體代償和適應(yīng)及抵抗各種刺激1。研究表明，血漿兒茶酚胺濃度升高是應(yīng)激反應(yīng)的重要特征之一，其水平的增高在應(yīng)激反應(yīng)引發(fā)的過氧化損傷中起主導(dǎo)作用2，并通過多種機(jī)制引起心肌損傷3。硒(selenium, Se)和維生素E(vitamine E, VE)對(duì)缺血缺氧性心肌具有保護(hù)

9、作用，但對(duì)血管活性物質(zhì)的影響機(jī)制不明。本研究用低Se,VE飼料喂養(yǎng)的大鼠動(dòng)物模型，施以冰泳刺激，觀察Se,VE對(duì)心肌血管活性物質(zhì)的影響。材料和方法(一)飼料： 低Se/VE組飼料購(gòu)于吉林省蛟河縣，Se 含量為0.013 mg/kg;VE含量為2.18 mg/kg。低Se/VE組飼料購(gòu)于長(zhǎng)春市郊區(qū)，Se含量為0.03 mg/kg;VE含量為4.88 mg/kg?；A(chǔ)飼料配方為玉米89%，黃豆10%，食鹽為1%，另添加維生素AD(醫(yī)用口服液，VA含量50 00 IU/g;VD含量5 000 IU/g) 49.6 mg/kg。正常飼料購(gòu)于白求恩醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部，Se含量為0.13 mg/kg;VE

10、含量為8.98 mg/kg。飼料中補(bǔ)硒為亞硒酸鈉，含硒為0.1 mg/kg飼料；補(bǔ)VE為-VE100 mg/kg飼料。(二)動(dòng)物和分組：Wistar大鼠60只，由白求恩醫(yī)科大學(xué)校動(dòng)物部提供，體重100 g左右，雌雄各半。按體重和性別隨機(jī)分為6組，每組10只：實(shí)驗(yàn)組按飼料含Se,VE量分為如下6組。低Se/VE組(Se,VE deficient group;Se/VE DG)；補(bǔ)Se 0.1 mg/kg組(Se/VE DG+Se)補(bǔ)VE100 mg/kg組(Se/VE DG+VE)補(bǔ)Se,VE組(Se/VE DG+Se/VE):低SE,VE飼料補(bǔ)充Se 0.1 mg/kg及 VE100 mg/k

11、g；低Se,VE組(Se/VE DG)；常規(guī)飼料組(stock group, SG)：飼正常飼料。(三)實(shí)驗(yàn)方法：喂養(yǎng)期間動(dòng)物自由飲水進(jìn)食，每7 d稱體重1次。喂養(yǎng)70 d后，于處死前兩日，每日冰泳(3°C)刺激1次，每次5 min.處死后立即取心室肌于液氮保存。勻漿后待測(cè)。內(nèi)皮素(endothelin, ET),血管緊張素（angiotensin-,Ang-）,一氧化氮(nitric oxide, NO)測(cè)定均按試劑盒說明書操作；ET放免試劑盒購(gòu)于北京東亞免疫試劑研究所；Ang-放免試劑盒購(gòu)于北方生物技術(shù)研究所；NO試劑盒購(gòu)于解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院。去甲腎上腺素(noradrenal

12、ine,NE)測(cè)定采用熒光法。單胺氧化酶A(monoamine oxidase-A,MAO-A)采用紫外法。超氧化物歧化酶(superoxide,SOD)采用鄰苯三酚自氧化法。谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione dismutase,GSH-Px)測(cè)定采用比色法。脂褐素(lipofuscin)采用熒光法。(四)統(tǒng)計(jì)處理結(jié)果(一) 心肌ET,Ang,NO含量測(cè)定結(jié)果（表1）：低Se/VE組心肌ET,Ang含量明顯高于其它組；NO含量明顯低于其它組。表1Se、VE 對(duì)大鼠心肌中ET、Ang-、NO含量的影響Tab 1 Effects of Se and VE on Contents of E

13、T ,Ang-,NOGroupET(pg/100mg WW)Ang-(pg/100mg WW) NO(ng/g WW)Se/VE DG155.57±63.6588.29±87.7510.70±0.70 Se/VE DGSe103.04±39.27*26.03±19.12*11.44±0.56Se/VE DG+VE81.25±35.50*25.07±19.84*11.63±0.64Se/VE DG+Se/VE46.92±30.44*21.21±17.39*11.71±0.58S

14、e/VE DG10.91±11.85*17.93±11.84*11.53±0.86SG15.04±14.66*21.12±25.52*11.83±0.96     *P0.01,vs Se/VE DG (二) 心肌NE,MAO-A水平檢測(cè)結(jié)果（表2）：低Se/VE組心肌NE水平增高，而特異性分解NE的MAO-A活性降低。補(bǔ)Se等各組心肌NE水平降低，MAO-A活性增加。表2Se、VE 對(duì)大鼠心肌中NE、MAO-A活性的影響Tab 2Effects of Se and VE on NE， MAo-

15、A in rat GroupNE(ng/g WW)MAO-A(nmol/h*mg-1 pro.)Se/VE DG399.87±53.83 6.23±2.21Se/VE DGSe363.74±63.437.30±1.34Se/VE DG+VE345.15±21.8513.62±4.46*Se/VE DG+Se/VE275.81±43.78*13.40±2.95*Se/VE DG312.98±36.73*9.83±2.21*SG322.97±34.37*11.93±2.38*&#

16、160;    *P0.05,*P0.01, vs Se/VE DG (三)心肌SOD,GSH-Px,lipofuscin的含量測(cè)定結(jié)果（表3）：低Se/VE組心肌lipofuscin含量明顯增加；SOD,GSH-Px含量降低。補(bǔ)Se/VE組和對(duì)照組SOD水平升高。補(bǔ)Se組、補(bǔ)Se,VE組、低Se,VE組和常規(guī)飼料組GSH-Px活性明顯升高。表3Se、VE 對(duì)大鼠心肌中l(wèi)ipofuscin、SOD、GSX-Px活性的影響Tab 3Effects of Se and VE on lipofuscin content, SOD andGroup Lipofuscin(

17、u/gWW)SOD(U/mg pro)GSH-Px(U/mg pro)Se/VE DG493.96±108.8014.03±3.830.39±0.12Se/VE DG+Se232.01±76.37*13.09±3.790.51±0.12*Se/VE DG+VE189.01±23.01*16.15±4.020.46±0.09Se/VE DG+Se/VE135.80±15.59*17.88±4.29*0.70±0.16*Se/VE DG163.73±53.70*15.1

18、3±3.790.50±0.08*SG 172.26±28.72*19.22±5.80*0.68±0.13*     *P0.05,*0.01,vs Se/VE DG 討論我們所用的低Se/VE飼料，是以玉米面為主并模擬克山病易感人群的膳食配方所配成，所飼大鼠心肌代謝偏移4，5。本文結(jié)果表明，在冷刺激條件下低Se,VEI組大鼠與常規(guī)飼料組相比心肌ET,Ang-含量升高；NE升高而MAO-A降低；自由基代謝紊亂，心肌Lipofuscin含量明顯增加；SOD,GSH-Px含量降低。說明Se,VE對(duì)心肌血管活性物質(zhì)代謝方面起極其重要的作用。機(jī)體在受到各種強(qiáng)烈刺激后會(huì)產(chǎn)生一系列非特異性的防御反應(yīng),主要表現(xiàn)為交感神經(jīng)腎上腺髓質(zhì)興奮和下丘腦垂體腎上腺皮質(zhì)功能增強(qiáng)而引