中藥成分鑒別常用顯色劑及其配制方法

1、中藥成分鑒別常用顯色劑及其配制方法一、通用顯色劑(1硫酸濃硫酸與甲醇等體積小心混合,冷卻;15%濃硫酸的正丁醇溶液;5%濃硫酸的乙酸酐溶液;5%濃硫酸的乙醇溶液;濃硫酸與乙酸等體積混合。用以上任一試液噴薄層板后,于110烘烤15min,不同類的成分顯不同顏色。(2碘0.5%碘的氯仿溶液;碘蒸氣在一密閉的玻璃缸內預先放入少許碘結晶,使缸為碘蒸氣飽和。將薄層板放入缸內數分鐘即可顯色,碘對很多化合物顯黃棕色。(3高錳酸鉀-硫酸高錳酸鉀0.5g溶于15ml 40%硫酸中。檢測易還原性物質。(4鉻酸-硫酸重鉻酸鉀5g溶于100ml 40%硫酸中。易還原性物質顯色。(5熒光顯色液0.25%的羅丹明B乙醇溶

2、液;0.01%的熒光素乙醇溶液;0.1%的桑色素乙醇溶液。用以上任一試液噴薄層板后,在熒光背景下可能顯黑色或其他熒光斑點。二、專屬性顯色劑(一生物堿及含氮類化合物(1改良碘化鉍鉀(Dragendorff試劑堿式硝酸鉍0.85g溶于10ml冰醋酸與40ml水中;碘化鉀0.8g溶于20ml水中。試液與試液等量混合置棕色瓶內保存作貯備液。用前將1ml貯備液、2ml冰醋酸與10ml水混合。用于生物堿與某些含氮化合物,顯橙紅色。(2碘-碘化鉀(Wagner碘1g與碘化鉀10g溶于50ml水(微溫,加2ml乙酸,加水至100ml。用于生物堿,顯棕褐色。(3碘鉑酸 5ml 15%氯化鉑溶液加45ml 10%

3、碘化鉀溶液,用水稀釋至100ml。用于生物堿,不同生物堿顯不同顏色。(4碘鉑酸鉀 10%六氯鉑酸溶液3ml與97ml水混合,加100ml 6%碘化鉀溶液,混勻。新鮮配制。用于生物堿與其他有機含氮化合物,不同生物堿顯不同顏色。(5Eh rlich 10%對二甲氨基苯甲醛鹽酸溶液與丙酮按1:4混合。對二甲氨基苯甲醛1g,溶于100ml 96%乙醇中。用于吲哚類,有時噴后要加熱。(6硫酸高鈰銨 1%本品的85%磷酸溶液。用于吲哚類,長春花生物堿顯各種顏色。(7對二甲氨基苯甲醛-硫酸 65ml濃硫酸與35ml水混合,放冷后加對二甲氨基苯甲醛125mg,再加入5%三氯化鐵溶液0.05ml。本試液可保存一

4、周。用于麥角生物堿。(8肉桂醛-鹽酸肉桂醛5ml、乙醇95ml和5ml 36%鹽酸混合,新鮮配制。用于吲哚類衍生物。(9呫噸氫醇 0.1g本品溶于90ml乙醇中,加10ml 36%的鹽酸,用前新鮮配制。用于色氨酸及其他吲哚類生物堿。(10氯化鐵-過氯酸 0.5mol/L三氯化鐵溶液1ml與35%過氯酸溶液50ml混合。用于吲哚類生物堿。(11三氯化鐵-碘三氯化鐵5g、碘2g溶于50ml丙酮與50ml 20%酒石酸的混合液中。用于黃嘌呤生物堿類,不同生物堿顯不同顏色。(12硫酸鈰-硫酸(改良Sonnenschein試劑硫酸鈰0.1g混懸于4ml水中,加1g三氯乙酸,加熱煮沸,放冷,逐滴加入濃硫酸

5、直至渾濁消失。用于生物堿、含碘有機化合物的顯色,噴后110烤幾分鐘,不同生物堿顯不同顏色。(13硫氰酸鈷(試液硫氰酸銨3g、氯化鈷1g溶于20ml水中。用于生物堿,伯、仲、叔胺類。(14碘化汞鉀(Meyer試劑 1.36g氯化汞和5g碘化鉀各溶于20ml水中,混合后加水稀釋至100ml即可。(15硅鎢酸(Bertrand試劑 5g硅鎢酸溶于100ml水中,加鹽酸少量調至pH=2左右。(16苦味酸試劑 1g苦味酸溶于100ml水中。(17鞣酸試劑鞣酸1g加乙醇1ml溶解后再加水至10ml。(184-甲基傘形酮 0.02g本品溶于35ml乙醇,加水至100ml。用于含氮雜環(huán)化合物。(19硫酸銅-聯

6、苯胺0.3g硫酸銅溶于100ml水-乙醇(5:4的混合液中;0.1%聯苯胺的50%乙醇溶液。用時先噴試液,于60干燥后再噴試液。用于吡啶單羧酸的顯色。(20氯化銅 0.5%氯化銅溶液。用于肟類。(21硝普鈉-鐵氰化物 10%氫氧化鈉溶液、10%硝普鈉溶液、10%鐵氰化鉀溶液和水按(1: 1:1:3混合,冰箱內保存(可保存數周,使用前取適量與等體積丙酮混合。用于氯基氰、胍、肌酸、肌酸酐、脲和硫脲及其衍生物的顯色。(22硝普鈉-過氧化氫 5%硝普鈉溶液2ml、10%氫氧化鈉1ml與5ml 3%過氧化氫溶液混合后,加15ml水。冰箱可保存數日。用于胍、尿素、硫脲及其衍生物、肌酸和肌酸酐的檢測。(23

7、三氯化銻試劑 25g三氯化銻溶于75g氯仿中成飽和溶液。用于秋水仙生物堿類。(二黃酮類黃酮類化合物在紫外燈或日光下多顯不同顏色,用氨薰、噴三氯化鋁或氫氧化鈉溶液等皆會使顏色加深或變色。(1三氯化鋁-乙醇試液三氯化鋁1g,加100ml乙醇溶解,即得。用于含氧雜環(huán)化合物。(2氫氧化鉀(鈉試劑 10%氫氧化鉀或氫氧化鈉水溶液。(3氨氣。(4三氯化銻試液 10%三氯化銻的氯仿溶液。噴后110烤5min,用于黃酮類。(5堿式(或中性醋酸鉛試劑 1%堿式醋酸鉛(或飽和中性醋酸鉛水溶液。用于黃酮類。(6硫酸銅-枸椽酸鈉硫酸銅(CuSO45H2O1.73g、檸檬酸鈉17.3g與無水碳酸鈉10g溶于水并稀釋至1

8、00ml。用于含鄰二羥基的黃酮類與香豆精類。(7硼氫化鉀試劑1%2%硼氫化鉀異丙醇溶液,必須新鮮配制;濃鹽酸。先噴溶液,5min后放入鹽酸蒸氣缸內。用于雙氫黃酮類化合物,顯紅、橙紅色。(8鹽酸鎂粉試劑濃鹽酸和鎂粉。(9醋酸鎂試劑 2%醋酸鎂甲醇溶液。(三糖類(1茴香醛-硫酸試劑茴香醛0.5ml加入50ml乙酸,混勻后加1ml硫酸,用前新鮮配制。改良試液。0.5ml茴香醛、9ml乙醇、0.5ml濃硫酸與0.1ml乙酸混合后立即使用。用于糖類、甾族、萜類。噴后將薄層板置100105烤,不同糖顯不同顏色。(2-萘酚-硫酸 15%的-萘酚-乙醇溶液10.5ml、濃硫酸6.5ml、乙醇40.5ml與水4

9、ml 的混合液。噴后100烤幾分鐘,多數糖顯藍色,鼠李糖顯橙色。用于糖類的顯色。(3苯胺-二苯胺-磷酸 4g二苯胺、4ml苯胺與20ml 85%磷酸共溶于200ml丙酮中。噴后85烤10min,用于還原糖,不同糖顯不同顏色。(4對二甲氨基苯甲醛-乙酰丙酮 a.50%氫氧化鉀溶液5ml與20ml乙醇混合;b.乙酰丙酮與正丁醇(1:100的混合液。兩種溶液均需新鮮配制,臨用前混合。取a.混合液0.5ml,加入10ml b.溶液。對二甲氨基苯甲醛1g溶于30ml乙醇中,加30ml 36%鹽酸,需要時用180ml正丁醇稀釋。使用時先噴試液,于105加熱5min,再噴試液,于90干燥5min。用于氨基糖

10、類。(5酚-硫酸試劑酚3g、濃硫酸5ml溶于95ml乙醇中。噴后110加熱幾分鐘,糖顯棕色。(61,3-二羥基萘酚-磷酸試劑 0.2%1,3-二羥基萘酚乙醇溶液100ml與85%磷酸100ml 混勻。噴后120加熱510min,酮糖顯紅色,醛糖顯淡藍色。(7鄰氨基聯苯-磷酸鄰氨基聯苯0.3g溶于5ml 85%磷酸與95ml乙醇,即得。用于糖類。(8苯胺-磷酸 2mol/L苯胺的水飽和正丁醇溶液與0.67mol/L磷酸正丁醇溶液,按1:2(體積混合。用于糖類。(9咔唑-硫酸 0.5g咔唑、5ml硫酸溶于95ml乙醇中。用于糖類。(103,5-二氨基苯甲酸-磷酸試劑 3,5-二氨基苯甲酸二鹽酸鹽1

11、g溶于25ml 80%磷酸中,加水稀釋到60ml。噴后100加熱15min,2-去氧糖在日光下顯棕色,在紫外光下顯黃綠色熒光。(11苯胺-鄰苯二甲酸試劑 0.93g苯胺、1.66g鄰苯二甲酸溶于100ml水飽和的正丁醇溶液中。噴后105110加熱10min,糖顯紅棕色。(12百里酚-硫酸試劑百里酚0.5g、硫酸5ml溶于95ml乙醇。噴后120加熱1520min,多數糖在白色背影上顯暗紅色,繼續(xù)加熱則變成淺紫色。(13萘雷鎖辛-磷酸 0.2%萘雷鎖辛乙醇溶液100ml與85%磷酸溶液10ml相混合。用于糖類。(144-氨基馬尿酸 0.3%的4-氨基馬尿酸乙醇溶液。用于還原糖。(15酞酸苯胺 0

12、.93g苯胺和1.66g酞酸溶于100ml水飽和的正丁醇中。用于糖類。(16硝普鈉-偏高碘酸鈉2.5%偏高碘酸鈉溶液;7%硝普鈉溶液、水與飽和的哌嗪乙醇溶液按照1:3:20比例混合。使用時先噴試液,室溫干燥10min,再噴試液。用于脫氧糖。(17偏高碘酸鈉-聯苯胺-硝酸銀0.1%偏高碘酸鈉溶液;聯苯胺2.8g溶于80ml乙醇、70ml水、30ml丙酮與1.5ml 1mlo/L鹽酸的混合液中;20ml丙酮加1ml飽和硝酸銀溶液,然后逐滴加水直至沉淀的硝酸銀剛剛溶解。使用時先噴試液,干燥,再噴試液,放入含25%氫氧化銨溶液的容器內5min后,取出輕輕噴試液。用于糖和含1,2二羥基多醇類。(18聯苯

13、胺-三氯乙酸 0.5g聯苯胺溶于10ml乙酸,加10ml 40%三氯乙酸水溶液,用乙醇稀釋至100ml。用于糖類。(19蒽酮 0.3g蒽酮溶于10ml乙酸與20ml乙醇中,加入3ml 85%磷酸與1ml水。置冰箱內保存。用于酮糖。(20氨性硝酸銀試劑 1g硝酸銀,加20ml水溶解,滴加適量的氨水,邊加邊攪拌,至開始產生的沉淀將近全溶為止,過濾。用于糖類。(21堿性酒石酸銅試劑結晶硫酸銅6.23g,加100ml水;酒石酸鉀鈉34.6g、氫氧化鈉10g,加100ml水。用時將試液與試液等量混合。用于糖類。(22呫噸氫醇冰醋酸(Xanthydrol試劑 10mg呫噸氫醇溶于100ml冰醋酸(含1%的

14、鹽酸中。用于-去氧糖。(四強心苷(13,5-二硝基苯甲酸(Kedde試劑 2% 3,5-二硝基苯甲酸的甲醇液與2mol/L氫氧化鉀甲醇溶液或5%氫氧化鈉乙醇液,用前等量混合。強心苷顯紫紅色,幾分鐘后褪色。(2三氯乙酸25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液。三氯乙酸3.3g溶于10ml氯仿,加30%過氧化氫溶液12滴。噴后110加熱710min,紫外燈下觀察熒光。用于甾族、洋地黃苷與藜蘆堿。(3堿性三硝基苯試劑間三硝基苯100ml溶于40ml二甲基甲酰胺溶液,加濃鹽酸34滴,加水至100ml;5%碳酸鈉溶液。使用時先噴試液,再噴試液,于90100加熱45min。用于強心苷,在淺橙色背景上顯橙紅色。(4硫

15、酸-次氯酸鹽 10ml 1mol/L硫酸與3ml次氯酸鈉溶液(10%活性氯混合。用于洋地黃苷。(5三氯化銻試劑 25%或飽和的三氯化銻氯仿溶液。噴后100加熱5min,在紫外燈或日光下觀察。(五蒽醌類蒽醌類化合物本身在日光下顯黃色或橙黃色,在紫外光下則顯黃、紅、橙色熒光。薄層展開后用氨熏或噴氫氧化鉀(鈉堿溶液,則顏色變深或變色。(1氫氧化鉀試劑 10%氫氧化鉀甲醇溶液。(2氨氣。(3醋酸鎂試劑 0.5%醋酸鎂甲醇溶液,噴后100加熱5min。(4乙酸鋁溶液 0.5%乙酸鋁水溶液,噴后紫外燈下看熒光。(5硼酸試劑 1%硼酸水溶液。(6堿式醋酸鉛試劑 1%堿式醋酸鉛水溶液。(六香豆素與酯類香豆素母

16、體本身無熒光,但羥基香豆素在紫外光下常顯亮藍色熒光。層析法檢識常用以下顯色劑。(1羥胺-氯化鐵a.鹽酸羥胺20g溶于50ml水,用乙醇稀釋至200ml,冷涼處保存;b.氫氧化鉀50g溶于少許水中,加500ml乙醇。氯化鐵(FeCl36H2O10g溶于20ml 36%鹽酸溶液中,加乙醚200ml搖勻,置密閉容器內保存。使用時將試液a.與b.按1:2混合,濾去沉淀,濾液放冰箱保存。先噴此試液,稍干,再噴試液。用于內酯類、酯類、酰胺與羧酸酐類。香豆素類顯紅色。(2三氯化鐵試劑 5%三氯化鐵的水溶液或甲醇溶液。檢識含有酚羥基的香豆素。(3重氮化試劑對硝基苯胺0.35g,溶于濃鹽酸5ml中,加水至50m

17、l;亞硝酸鈉5g,加水50ml。取、液等量在冰水浴中混合后使用。香豆素顯黃、橙、紅、棕、紫等顏色。(44-氨基安替比林-鐵氰化鉀2% 4-氨基安替比林乙醇溶液;8%鐵氰化鉀溶液。使用時先噴試液,后噴試液,最后用氨熏。香豆素和酚類顯橙紅至深紅色,Emerson反應。(5硝普鈉1mol/L氫氧化鈉溶液;硝普鈉2g溶于100ml 75%乙醇中。用時先噴試液,空氣中干燥,再噴試液。用于各種硫代內酯。(6氫氧化鉀 5%氫氧化鉀甲醇溶液。用于香豆素、蒽醌苷及其苷元。(7糠醛-硫酸1%糠醛丙酮溶液;10%硫酸丙酮溶液。用時先噴試液,再噴試液。用于氨基甲酸酯。(8二苯胺 1%的二苯胺乙醇溶液。用于硝酸酯。(9

18、氯化鐵-磺基水楊酸1%氯化鐵的80%乙醇溶液;1%磺基水楊酸的80%乙醇溶液。用時先置于溴蒸氣中10min后噴試液,空氣干燥15min,再噴試液。用于硫代磷酸酯類。(七皂苷類(1磷鉬酸乙醇液 25%的磷鉬酸乙醇溶液。噴后在140加熱510min,皂苷元均顯深藍色。(2碘蒸氣薄層展開后置密閉的碘蒸氣缸中,皂苷元皆顯棕黃色斑點。(3三氯乙酸溶液三氯乙酸或三氯乙酸和乙酸(1:2的溶液。噴后在100加熱20min,皆顯黃色。(4硫酸甲醇溶液硫酸和甲醇(1:1的溶液。噴后加熱,不同的皂苷元可顯紅褐色、紫色、黃色或黑色,所顯顏色與溫度有關。(八萜類與甾體化合物(1香草醛-硫酸試劑濃硫酸1ml加到50ml冰

19、醋酸中,冷后加0.5g香草醛。用于萜類。噴后105加熱510min。(2亞甲藍溶液 0.025g亞甲藍溶于100ml 0.025mol/L硫酸溶液中,臨用前用等量丙酮稀釋。用于甾族硫酸酯類。(3肉桂醛-乙酐-硫酸1%肉桂醛的乙醇溶液;新鮮配制的濃硫酸與乙酐(1:12,體積比混合物。先噴試液,90干燥5min,后噴試液,室溫放置12min后,置烘箱內90加熱。用于甾體皂苷元。(4間二硝基苯2%間二硝基苯乙醇溶液;2.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液。用前將試液與試液等體積混合。用于17-甾酮類。(5氯胺T-三氯乙酸3%氯胺T溶液,新鮮制備;25%三氯乙酸乙醇溶液,使用前將試液與試液按1:4比例混合。

20、用于甾體苷。(6氯磺酸-乙酸氯磺酸5ml在冷卻條件下加10ml乙酸溶解。用于三萜、甾醇與甾族化合物。(7高氯酸 20%高氯酸溶液,用于甾族。(8乙酸酐-硫酸 5ml乙酐與等體積濃硫酸在冷卻情況下混合,混合液小心地加入50ml無水乙醇中,冷卻,臨用前新鮮配制。用于許多甾族與三萜苷。(9磷鉬酸5%磷鉬酸乙醇溶液。10%磷鉬酸乙醇溶液。20%磷鉬酸乙醇溶液或甲基溶纖劑溶液。用于甾醇與甾族化合物、還原性化合物、類脂。(10磷鎢酸 20%本品乙醇溶液。用于甾醇與甾族化合物、還原性化合物。(11三氯化銻 25%或飽和的三氯化銻氯仿溶液。噴后100加熱5min,在紫外燈或日光下觀察。用于甾族皂苷元、甾族糖苷

21、與萜類衍生物、維生素A、D、類胡蘿卜素。(12五氯化銻 1份五氯化銻與4份氯仿或四氯化碳混合,用前新鮮配制。用于萜類、甾族皂苷元、維生素A、維生素D與維生素E、油類與樹脂類、苯氧烷羧酸酯類。(13對二甲氨基苯甲醛-乙酸-磷酸 0.25g對二甲氨基苯甲醛溶于50g乙酸、5g 85%磷酸與20ml水的混合液中(置棕色瓶保存。用于薁類與原薁類。(九醇類(1香草醛-硫酸濃硫酸1ml加到50ml冰醋酸中,冷后加0.5g香草醛。用于高級醇、酚、甾族化合物與精油。(2二苯基苦基偕肼 15mg二苯基苦基偕肼溶于25ml氯仿中。用于醇類、萜烯、羰基、酯與醚。(3硝酸鈰銨 5g本品溶于100ml 4mol/L硝酸

22、溶液。105加熱5min,醇類在黃色背景顯棕色。(4碘化鉍鉀堿式硝酸鉍1.7g溶于20ml乙酸中,加80ml水;碘化鉀40g溶于100ml 水與200ml乙酸的混合液中,將后一溶液加入前一溶液中,再加水至1000ml。20%氯化鋇溶液。用前試液與試液按2:1比例混合。用于聚乙二醇及其醚與酯類。(5乙酸鉛 1g本品溶于100ml苯,即得。用于1,2-二羥基化合物。(十酚類(1三氯化鐵試劑 5%三氯化鐵的水溶液或甲醇溶液。(2重氮化試劑對硝基苯胺0.35g,溶于濃鹽酸5ml中,加水至50ml;亞硝酸鈉5g,加水50ml。取、液等量在冰水浴中混合后使用。(34-氨基安替比林-鐵氰化鉀2% 4-氨基安

23、替比林乙醇溶液;8%鐵氰化鉀溶液。使用時先噴試液,后噴試液,最后用氨熏。香豆素和酚類顯橙紅至深紅色,Emerson反應。(4對氨基苯磺酸 4.5g對氨基苯磺酸溶于45ml溫熱的12mol/L鹽酸中,用水稀釋至500ml,取10ml于冰中冷卻,加10ml 4.5%亞硝酸鈉冷溶液,于0放15min。臨用前加等體積10%碳酸鈉水溶液。用于酚類、胺類和能偶合的雜環(huán)化合物。(5堅牢藍B鹽試劑0.5%本品水溶液;0.1mol/L氫氧化鈉溶液。用時先噴試液,再噴試液。用于能偶合的酚與胺,噴后可見光下顯棕、紫或綠色。(6鐵氰化鉀-氯化鐵1%鐵氰化鉀溶液。2%氯化鐵溶液。使用前將兩者等量混合。用于酚類、胺類、硫

24、代硫酸鹽與異硫代氰酸鹽。(7Pauly試劑 0.5g對氨基苯磺酸和0.5g亞硝酸鉀溶于100ml 1mol/L鹽酸溶液中,即得。噴霧后再噴1mol/L氫氧化鈉溶液。用于酚類和能偶合的芳胺。(8重氮化聯苯胺聯苯胺5g加36%鹽酸14ml,用水稀釋至1000ml;10%亞硝酸鈉溶液,用前新鮮配制。用時將和在0下等體積混合,并不斷攪拌。本試劑僅能保存2 3小時。(十一醛和酮(12,4-二硝基苯肼試液 1.5g 2,4-二硝基苯肼,加20ml 50%的硫酸溶液,溶解后,加水至100ml,過濾,即得。用于醛基、酮基與酮糖。醛和酮化合物顯黃色。(2二硝基苯肼乙醇溶液 1g 2,4-二硝基苯肼溶于1000m

25、l乙醇,再緩緩加入10ml鹽酸,搖勻,即得。用于醛基、酮基與酮糖。(3雙甲酮-磷酸 0.3g雙甲酮(5,5-二甲基環(huán)己烷-1,3-二酮溶于90ml乙醇與10ml 85%磷酸的混合液中。用于酮糖。(4鄰聯茴香胺鄰聯茴香胺的乙酸飽和溶液。（十二）氨基酸、肽與胺類 （1）茚三酮試劑 茚三酮 0.3g 溶于 100ml 正丁醇中，加冰 3ml?；?0.2g 茚三酮溶于 100ml 乙醇中。用于氨基酸、胺與氨基糖類，噴后 110加熱到顯色。 （2）雙縮脲（Biuret）試劑 1硫酸銅溶液；40氫氧化鈉溶液。使用前等體積混合。 （3）靛紅-乙酸鋅 靛紅 1g、醋酸鋅 1g 溶于 100ml 95的異丙醇中，加熱至 80，冷卻后 加 1ml 冰乙酸，置冰箱冷存。用于氨基酸與某些肽類。 （4）吲哚醌試劑 吲哚醌 1g 溶于 100ml 乙醇中，加冰乙酸 10ml。 （5）Ehrling 試劑 對二甲氨醛 1g 溶于