臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)血液常規(guī)檢驗(yàn)一、微量吸管的使用、毛細(xì)血管采血、計(jì)數(shù)板的鑒定與使用【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆瘴⒘课艿氖褂谩⒚?xì)血管采血、計(jì)數(shù)板的鑒定、構(gòu)造 與使用。【實(shí)驗(yàn)試劑】：紅細(xì)胞稀釋液、75%乙醇、消毒藥棉?！緦?shí)驗(yàn)器材】： 一次性采血針、計(jì)數(shù)板、蓋玻片、微量吸管、2ml吸管、中號(hào)試管、顯微鏡、小玻璃棒。【實(shí)驗(yàn)原理】：一次性采血針刺破毛細(xì)血管后，用微量吸管吸取一定量的血 液，稀釋一定的倍數(shù)，沖入計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的細(xì)胞的數(shù)量?！緦?shí)驗(yàn)方法】：一、微量吸管的使用：用抗凝血訓(xùn)練微量吸管的使用。、毛細(xì)血管采血（以紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為例）：準(zhǔn)備：取清潔干燥試管一支，加 2ml紅細(xì)胞稀釋液。采血部位選擇、按摩

2、T 75%乙醇棉球進(jìn)行刺針部位皮膚消毒-待酒精揮發(fā)干（否則血流不成滴）-自指尖腹內(nèi)側(cè)迅速刺針-擦去第一滴血-準(zhǔn)確吸 取10ul血液用無(wú)菌干棉球壓住傷口止血用無(wú)菌干棉球擦去管尖外圍余 血后將血液釋放到稀釋液底部回吸上清液 2-3次輕輕混勻。三、計(jì)數(shù)板構(gòu)造與應(yīng)用1 .計(jì)數(shù)板構(gòu)造外觀構(gòu)造：每塊計(jì)數(shù)板由“ H'型凹槽分上下兩個(gè)計(jì)數(shù)室，在計(jì)數(shù)室兩側(cè)各有一條支柱，比計(jì)數(shù)室高出 0.1mm將一塊平整光滑的血細(xì)胞計(jì)數(shù)專用蓋玻片（24.0mnrK 20.0mnt< 0.6mm覆蓋其上時(shí)，蓋玻片與計(jì)數(shù)室間形成 0.1m m的縫隙。格子構(gòu)造：計(jì)數(shù)池長(zhǎng)、寬各3mm平均分成9個(gè)大格，每個(gè)大方格的容 積是0

3、.1 mm3四角的四個(gè)大方格分別用單線劃分成 16個(gè)中方格，是白細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域；中央的大方格用雙線條劃分成 25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又用單線劃分成16個(gè)小方格，其中四角和正中的5個(gè)中方格是紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域。2. 計(jì)數(shù)板的使用:用清潔干燥柔軟的紗布擦拭計(jì)數(shù)板及蓋玻片-用推蓋法從計(jì)數(shù)板下緣 向前平推蓋玻片將其蓋在計(jì)數(shù)室上-充分混勻細(xì)胞懸液-充池-靜置-觀 察細(xì)胞分布情況（若嚴(yán)重不勻，應(yīng)重新充池。）【注意事項(xiàng)】：1. 采血部位應(yīng)選擇皮膚完整，不能有燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥。2. 針刺應(yīng)迅速，深度適宜（約 2-3mm。待血液自行流出，擦去第滴血。3. 微量吸管取血時(shí)應(yīng)將微量吸管管尖側(cè)著插入血滴中央。若

4、血流不暢,可以左手自采血部位遠(yuǎn)端向指尖稍壓力至血液流出為止。切忌用力擠壓，造 成組織液混入，影響結(jié)果準(zhǔn)確性。4.計(jì)數(shù)板在使用中勿讓手指接觸計(jì)數(shù)池及蓋玻片表面， 以訪油膩污染, 致使充液時(shí)起泡。二、血涂片的制作，瑞氏染色【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆昭谱鞣椒?，瑞氏染色原理及方法。【?shí)驗(yàn)試劑】：瑞吉氏復(fù)合染液（I液、n液）【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、載玻片、推玻片、一次性針頭、消毒棉球、洗耳球【實(shí)驗(yàn)原理】：細(xì)胞的著色既有化學(xué)的親和作用，又有物理的吸附作用，不 同的細(xì)胞由于其所含化學(xué)成分不一樣， 化學(xué)性質(zhì)各不相同，所以對(duì)染料的親 和力也不一樣，因此將細(xì)胞染成不同的顏色?！緦?shí)驗(yàn)方法】：一、瑞一吉氏復(fù)合染液配制I液：

5、取瑞特染粉1g,吉姆薩染粉0.3g，置潔凈研缽中，加少量甲醇（分析純），研磨片刻，吸出上層染液，再加少量甲醇，繼續(xù)研磨，再吸出 上層染液。如此連續(xù)幾次，共用甲醇 500ml。收集于棕色瓶中，每天早晚各振搖3'共5天，再存放一周，將染液過(guò)濾后即可使用。n液：磷酸鹽緩沖液（PH6.5 6.8 ），取磷酸二氧鉀（無(wú)水）6.64g， 磷酸氟二鈉（無(wú)水）2.56g，加少量蒸餾水溶解，調(diào)整PH后，加水至1000ml。二、血片制作、瑞氏染色方法準(zhǔn)備：取清潔干燥載玻片，邊緣光滑清潔推玻片各一張。1、制備血涂片：取載玻片-取血1滴于載玻片右端（邊緣留1.5cm空隙）f左手持載玻片，右手持推玻片f將推玻片

6、放至血滴前沿逐漸后移至 血滴沿推片散開后，推玻片與載玻片成 30°35°的夾角以平穩(wěn)的速度將血液向前推進(jìn)-干燥（手持載玻片末端迅速在空氣中揮動(dòng)干燥）。2、染色：將干透的血涂片放在水平位置加瑞吉氏復(fù)合染液I液數(shù)滴,以染液覆蓋整個(gè)血膜為度-靜置染 0.51minT滴加約2倍于I液量的n液 f用洗耳球吹氣混勻f染色 5- 10mi nf平持玻片用流線型水洗f干燥f鏡【注意事項(xiàng)】：1. 嚴(yán)格皮膚消毒。2. 血滴大、血黏度高、推片角度大、速度快則血膜厚，反之則血膜薄。3. 染料放置時(shí)間越長(zhǎng)，美蘭逐漸氧化為天青，染色效果越好。4染液淡，室溫低，細(xì)胞多則染色時(shí)間長(zhǎng)，反之減少染色時(shí)間。5水

7、洗方法為平持血涂片流線型水緩緩沖洗干凈，不要先倒掉染液。三、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆瞻准?xì)胞計(jì)數(shù)的原理、操作方法與結(jié)果報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：用白細(xì)胞稀釋液將全血稀釋一定的倍數(shù)并破壞紅細(xì)胞， 充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池,顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)量?！緦?shí)驗(yàn)試劑】白細(xì)胞稀釋液【實(shí)驗(yàn)器材】【實(shí)驗(yàn)方法】顯微鏡、改良Neubauer計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、玻璃棒準(zhǔn)備：取清潔干燥試管一支，加0.38ml白細(xì)胞稀釋液。采血部位按摩T 75%乙醇棉球進(jìn)行刺針部位皮膚消毒-待酒精揮發(fā)干（否則血流不成滴）-自指尖腹內(nèi)側(cè)迅速刺針-擦去第一滴血-準(zhǔn)確吸取20ul血液7用無(wú)菌干棉球壓住

8、傷口止血7用無(wú)菌干棉球擦去管尖外圍余血后7將血液輕輕釋放到稀釋液底部7回吸上清液2-3次7混勻7室溫靜置至液體變?yōu)樽睾稚醇t細(xì)胞破壞完全7清潔計(jì)數(shù)板、蓋玻片7充池7靜置23min待細(xì)胞下沉7低倍鏡下計(jì)數(shù)四角大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)7計(jì)算7報(bào)告。計(jì)算：WBC四個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)（N /4 X 10X 20X 1O6=N/2OX 1O9/L【注意事項(xiàng)】：1. 采血部位應(yīng)選擇皮膚完整，不能有燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥。2. 針刺應(yīng)迅速，深度適宜（約 2 3mm。待血液自行流出，擦去第一滴血。3.稀釋液要過(guò)濾使用，試管、計(jì)數(shù)板均須清潔，以免混入雜質(zhì)被誤認(rèn)為白細(xì)胞。4.加稀釋液、血液量應(yīng)精確,以保證稀釋

9、倍數(shù)。5.計(jì)數(shù)池內(nèi)細(xì)胞分布要均勻,每個(gè)大方格間白細(xì)胞數(shù)差異不得超過(guò)均值的± 10%，否則要重新充液計(jì)數(shù)。6.嚴(yán)格掌握計(jì)數(shù)原則，以免人為擴(kuò)大或縮小計(jì)數(shù)區(qū)域。7.白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí)，可加大稀釋倍數(shù)，反之白細(xì)胞過(guò)低時(shí)可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞數(shù)或加大取血量。四、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)（DC【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?掌握顯微鏡法外周血分類計(jì)數(shù)的方法、 各種白細(xì)胞的鏡下形 態(tài)?！緦?shí)驗(yàn)原理】:將血液制備成涂片，經(jīng)瑞-吉氏染色后顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞 的形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。通常分類100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算得出各種白細(xì)胞所占百分比?！緦?shí)驗(yàn)試劑】瑞-吉氏復(fù)合染液【實(shí)驗(yàn)器材】顯微鏡、外周血標(biāo)本片、香柏油、擦鏡紙、清潔劑【實(shí)驗(yàn)方法】準(zhǔn)

10、備：血涂片制備及瑞-吉氏染色待干低倍鏡下選擇細(xì)胞分布均勻、著色良好的區(qū)域-轉(zhuǎn)油鏡按一定的規(guī)律 移動(dòng)視野，依次進(jìn)行分類計(jì)夠100個(gè)白細(xì)胞7算出各種白細(xì)胞的百分比7報(bào)【注意事項(xiàng)】：1. 涂片制備要厚薄適中、均勻、頭體尾分明。2. 分類時(shí)要有程序地連續(xù)進(jìn)行，避免主觀選擇視野。3. 分類中如見幼紅細(xì)胞，不計(jì)入 100個(gè)白細(xì)胞內(nèi)，以分類100個(gè)白細(xì)胞過(guò)程中見到幼紅細(xì)胞多少個(gè)來(lái)報(bào)告，并應(yīng)注明其所屬階段,4. 分類中應(yīng)注意觀察成熟紅細(xì)胞、血小板的形態(tài)染色及其分布情況,注意有無(wú)寄生蟲（如瘧原蟲）及其他異常所見。五、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC及分類計(jì)數(shù)（DC）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆瞻准?xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)原理、方法與結(jié)果報(bào)告【

11、實(shí)驗(yàn)原理】：白細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：用白細(xì)胞稀釋液將全血稀釋一定的倍數(shù)并破壞紅細(xì)胞，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每 升血液中的白細(xì)胞數(shù)量。白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)原理：將血液制備成涂片，經(jīng)瑞-吉氏染色后顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。 通常分類100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算得出 各種白細(xì)胞所占百分比?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：白細(xì)胞稀釋液、瑞-吉氏復(fù)合染液【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、改良Neubauer計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、玻璃棒、 載玻片、推玻片、香柏油、擦鏡紙、清潔劑【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：1.取清潔干燥試管一支，加0.38ml白細(xì)胞稀釋液。2.取清潔干燥載玻片，邊緣光滑清潔推玻片各一張。采血部

12、位按摩T 75%乙醇棉球進(jìn)行刺針部位皮膚消毒-待酒精揮發(fā)干（否則血流不成滴）-自指尖腹內(nèi)側(cè)迅速刺針-擦去第一滴血-準(zhǔn)確吸取20ul血液-用無(wú)菌干棉球擦去管尖外圍余血后-將血液輕輕釋放到稀釋液底部-回吸上清液2-3次-混勻-另取血一滴于載玻片的右端-立即推制 血膜f用無(wú)菌干棉球壓住傷口止血f清潔計(jì)數(shù)板、蓋玻片f充池（靜置 2 3min待細(xì)胞下沉）-低倍鏡下計(jì)數(shù)四角大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)-將干透的血膜進(jìn)行瑞-吉氏染色-油鏡下分類計(jì)數(shù)T計(jì)算-報(bào)告。六、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC、Hb測(cè)定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆占t細(xì)胞計(jì)數(shù)，Hb測(cè)定原理、操作方法，規(guī)范的報(bào)告結(jié)【實(shí)驗(yàn)原理】：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：用等滲稀釋液將血液稀釋一滴倍

13、數(shù)，充入計(jì)數(shù)池,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求得內(nèi)升血液中的紅細(xì)胞 數(shù)。Hb測(cè)定（HiCN法）原理：血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白,后者再與氰離子結(jié)合形成穩(wěn)定地氰化搞鐵血紅蛋白（HiCN），HiCN在規(guī)定波長(zhǎng)（540nm和液層厚度（1cm的條件下具有一定的毫摩爾消光系數(shù)?？捎脴?biāo)準(zhǔn)的高精度分光光度計(jì)進(jìn)行直接定量測(cè)定，或用HiCN標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比色法測(cè)定，根據(jù)標(biāo)本的吸光度即可求出血紅蛋白濃度?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：紅細(xì)胞稀釋液（甲醛枸木緣酸鹽稀釋液），HiCN轉(zhuǎn)化液【實(shí)驗(yàn)器材】：改良Neubauer計(jì)數(shù)板、顯微鏡、分光光度計(jì)、玻璃試管、【實(shí)驗(yàn)方法】：RBC:取清潔干燥試管一支-加紅細(xì)胞稀

14、釋液1.99ml -加未梢血10ul 于稀釋液底部f吸取上清液嗽洗 34次f顛倒混勻f清潔計(jì)數(shù)板，蓋玻片-充液-靜置2' 3'f計(jì)數(shù)（中央大格中四角及正中 5個(gè)方各細(xì)胞數(shù)） f計(jì)算RBC=5個(gè)中方格細(xì)胞數(shù)X 5X 10X 200X 106=5個(gè)中方格細(xì)胞數(shù)X 1012兒。Hb測(cè)定:1. 直接定量測(cè)定法：取中號(hào)試管一支f加HiCN轉(zhuǎn)化液5mlf加未梢血 20ul f混勻靜置5'f 721比色，波長(zhǎng)540nm以轉(zhuǎn)化液為空白對(duì)照管f測(cè)其吸光度“ A”f計(jì)算（“ A”X 367.7 ）f報(bào)告2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法:將血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液稀釋成不同的三種濃度（150g/L、100g/L、50

15、g/L） 分別測(cè)其吸光度“ A”，以“A”為縱坐標(biāo)，血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液參考值（g/L ） 為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測(cè)樣本的血紅蛋白濃度?！咀⒁馐马?xiàng)】：1. 取血應(yīng)順利、準(zhǔn)確，采血部位不得有燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥,不得過(guò)渡擠壓，紅細(xì)胞數(shù)量明顯增高者可適當(dāng)加大稀釋倍數(shù)。2. HiCN轉(zhuǎn)化液應(yīng)置棕色瓶于 4C冰箱中，不能儲(chǔ)存于白色瓶、塑料瓶及強(qiáng)光下，否則會(huì)使CN丟失，結(jié)果偏低。3. HiCN轉(zhuǎn)化液中有氧化鉀劇毒，防止污染。測(cè)定后的比色液不能與酸性溶液混合，否則可產(chǎn)生劇毒的氫氰酸氣體。4. 所用分光光度計(jì)的波長(zhǎng)、吸光度需要校正，帶寬應(yīng)小于1nm比色杯光徑1.000cm時(shí)，測(cè)定溫度為

16、20C25C。七、血液常規(guī)檢驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆昭Ｒ?guī)的連續(xù)操作規(guī)程并規(guī)范的報(bào)告結(jié)果?！緦?shí)驗(yàn)原理】：見實(shí)驗(yàn)二、三、四、六【實(shí)驗(yàn)試劑】：紅細(xì)胞稀釋液、白細(xì)胞稀釋液、瑞-吉氏復(fù)合染液、HiCN轉(zhuǎn)化液【實(shí)驗(yàn)器材】：改良Neubauer計(jì)數(shù)板、分光光度計(jì)、玻璃試管、微量吸管、【實(shí)驗(yàn)方法】：取大、中、小號(hào)試管各一支-分別加 HiCN轉(zhuǎn)化液5ml、紅細(xì)胞稀釋液 2ml、白細(xì)胞稀釋液0.38ml -手指消毒針刺-分別取未梢血10ul于紅細(xì)胞 稀釋液中、20ul于白細(xì)胞稀釋液中、20ul于HiCN轉(zhuǎn)化液中-并及時(shí)混勻- 取清潔干燥玻片粘取1滴血液于玻片一端-推制血片-待干-721比色-瑞 氏染色-白細(xì)胞及紅細(xì)

17、胞計(jì)數(shù)-DC-計(jì)算-報(bào)告（血常規(guī)結(jié)果報(bào)告）成人兒童新生兒1.WBC: (4 10)X 109/L(5 12)X 109/L(15 20)X 109/L成年男性成年女性兒童正常值:2.RBC: (4- 5.5 )X 1012/L(6-7)X 1012/L(3.5-5) X 1012/L3.HB:120-165g/L110-150 g/L170-200 g/L4.DC:N:桿狀1 5%分葉50- 70%L: 20-40%M : 38%E : 0.5 5%B : 01%【注意事項(xiàng)】：1.取血應(yīng)順利、準(zhǔn)確,采血部位不得有燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥,不得過(guò)度擠壓。2. HiCN轉(zhuǎn)化液中有氧化鉀巨毒，防

18、止污染。測(cè)定后的比色液不能與酸性溶液混合，否則可產(chǎn)生劇毒的氫氰酸氣體。3. 細(xì)胞計(jì)數(shù)混合不易過(guò)分震搖。4. 瑞氏染色時(shí)加染液與緩沖液的比例為1： 1或1： 2。5. 采取標(biāo)本的順序：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血片制八、血小板計(jì)數(shù)（BPC或PLT）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆昭“宓挠?jì)數(shù)原理、方法、鏡下形態(tài)及結(jié)果報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：用稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后混勻，充入計(jì)數(shù)池中，于顯 微鏡下計(jì)數(shù)一定體積的血小板數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液內(nèi)的血小板數(shù)?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：10g/L草酸銨液【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、：改良 Neubauer計(jì)數(shù)板【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：取清潔干燥的小試管一支，加10g/L草酸銨液0

19、.38ml準(zhǔn)確取自然流出的外周血20ul T輕輕放入到上述稀釋液底部-回吸上清液漱洗吸管2-3次-混勻-室溫靜置10 min-清潔計(jì)數(shù)板、蓋玻片-混勻細(xì)胞懸液后充池-靜置10 mi n- 15mi n-于高倍鏡下計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角和中央5個(gè)中方格內(nèi)血小板總數(shù)計(jì)算報(bào)告計(jì)算：血小板數(shù)/L = 5個(gè)中方格內(nèi)血小板總數(shù)X 109/L【注意事項(xiàng)】：1. 所用試劑、器材應(yīng)10g/L草酸銨液稀釋液中無(wú)塵埃、細(xì)菌等污染。2. 毛細(xì)血管采血時(shí)，針刺深度應(yīng)達(dá) 3mm采血要快避免血液凝固.若遇血小板成簇分布時(shí)，應(yīng)重采標(biāo)本計(jì)數(shù).3.細(xì)胞懸液充入計(jì)數(shù)池中靜置時(shí)，應(yīng)注意保持濕度，避免水分蒸發(fā)。4.計(jì)數(shù)時(shí)光線不可太強(qiáng)，注

20、意微有折光性的血小板與塵埃的鑒別。血小板為輕度折光性的園形、橢園形。5.血小板計(jì)數(shù)應(yīng)在1h內(nèi)完成，否則結(jié)果可降低。九、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RQ【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆站W(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理、測(cè)定方法、鏡下形態(tài)、結(jié)果報(bào)告。【實(shí)驗(yàn)原理】：網(wǎng)織紅細(xì)胞為晚幼紅細(xì)胞脫核后，但尙未完全成熟的紅細(xì)胞。其胞質(zhì)中尙殘存核糖體、核糖核酸等堿性物質(zhì)，經(jīng)活體染色后于胞質(zhì)中可見藍(lán)綠色網(wǎng)點(diǎn)狀或點(diǎn)粒狀結(jié)構(gòu)?！緦?shí)驗(yàn)試劑】【實(shí)驗(yàn)器材】10g/L黃焦油籃生理鹽水溶液顯微鏡、試管、載玻片、推玻片【實(shí)驗(yàn)方法】溶液2-3滴準(zhǔn)備：取清潔干燥小試管一支，加 10g/L黃焦油籃生理鹽水取外周血2-3滴于上述試管中-立即混勻-37r下染色15- 20mh取

21、試管里的混合血液一滴于載玻片一端-推制成薄血膜-待干燥-油鏡下計(jì)數(shù)（于目鏡筒中放一縮小視野的硬紙片）至少1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅 細(xì)胞數(shù)-計(jì)算-報(bào)告計(jì)算：網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比=計(jì)數(shù)的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)/100【注意事項(xiàng)】：1. 網(wǎng)織紅細(xì)胞必須在活體染色下才能顯示。2. 染色時(shí)血液與染料的比例約為1:1,貧血時(shí)適當(dāng)增加血量，室溫較低時(shí)適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間或置 37C溫箱.3. 涂片應(yīng)厚薄適宜，以紅細(xì)胞不重疊為度，涂片后應(yīng)及時(shí)計(jì)數(shù)，否則網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)消失。4. 計(jì)數(shù)區(qū)域一般選擇血膜的體部，自體部向尾部迂回檢查。、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆帐人嵝粤＜?xì)胞直接計(jì)數(shù)的原理、操作方法、鏡下形態(tài)及 結(jié)果報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理

22、】：用嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定的倍數(shù)， 破壞紅細(xì)胞 和其他大部分白細(xì)胞并使嗜酸性粒細(xì)胞著色， 滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的嗜酸性粒細(xì)胞，經(jīng)換算得出每升血液中嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：2%伊紅-丙酮嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液【實(shí)驗(yàn)器材】：【實(shí)驗(yàn)方法】：顯微鏡、改良 Neubauer計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、玻璃棒準(zhǔn)備：取清潔干燥試管一支，加0.38ml嗜酸性粒細(xì)胞稀釋、亠 液。精確吸取外周血20ul -輕輕放入到上述稀釋液底部-回吸上清液漱 洗吸管2-3次-混勻-室溫靜置-清潔計(jì)數(shù)板、蓋玻片-混勻細(xì)胞懸液后 充池靜置3 min - Smin于低倍鏡下計(jì)數(shù)兩側(cè)計(jì)數(shù)池中10大方格（每

23、側(cè)計(jì)數(shù)池的四角和中央大方格）內(nèi)的嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)-計(jì)算-報(bào)告計(jì)算：嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)/L = 10個(gè)大方格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)X 2OX1O6/L【注意事項(xiàng)】：1. 計(jì)數(shù)應(yīng)在30min內(nèi)完成，因時(shí)間過(guò)長(zhǎng)嗜酸性粒細(xì)胞可被溶解，結(jié)果偏低。2. 血液加入稀釋液后應(yīng)及時(shí)混勻，否則易致血液凝固和細(xì)胞聚集，但不易用力振搖以免嗜酸性粒細(xì)胞破碎。3. 震搖與殘留的中性粒細(xì)胞區(qū)別， 中性粒細(xì)胞一般不受色或受色極淺，且其顆粒較小。4. 做嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)最好固定時(shí)間，以免受日間生理變化影響十一、血細(xì)胞分析儀使用、LEC血沉【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚菏煜ぱ?xì)胞分析儀的檢測(cè)原理及方法；掌握LEC的鏡下形態(tài)、血沉檢測(cè)方法及結(jié)果觀察報(bào)告?！緦?shí)

24、驗(yàn)原理】見儀器說(shuō)明書【實(shí)驗(yàn)試劑】血細(xì)胞分析儀、顯微鏡、血沉架、血沉管【實(shí)驗(yàn)器材】【實(shí)驗(yàn)方法】紅細(xì)胞沉降率（ESR :取抗凝血約2m|T灌制血沉管“ 0”刻度-垂直豎立在血沉架上-室溫靜置1小時(shí)-觀察紅細(xì)胞沉降毫米數(shù)-報(bào)告（紅細(xì)胞 沉降率： mm/h、凝血酶原時(shí)間測(cè)定（PT）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚耗康恼莆誔T測(cè)定方法、原理及結(jié)果觀察報(bào)告【實(shí)驗(yàn)原理】：在受檢血漿中加入足量的凝血活酶和鈣離子，測(cè)定血漿凝固所需的時(shí)間，即為血漿凝血酶原時(shí)間。本試驗(yàn)是外原性凝血系統(tǒng)常用的篩檢試驗(yàn)?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：1.血漿2. 組織凝血活酶3. 氯化鈣溶液【實(shí)驗(yàn)器材】：恒溫水浴箱、離心機(jī)、試管、微量加樣器、秒表【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：將

25、123.試劑分別置37C水溶預(yù)熱，小試管預(yù)熱。取已預(yù)熱清潔干燥小試管-加血漿 0.1ml，同時(shí)加組織凝血活酶液0.1ml、caci 20.1ml -混勻、開動(dòng)秒表計(jì)時(shí)-在 37E水溶中不斷輕輕搖動(dòng)小試管8-取出觀察，來(lái)回傾斜試管，混合物不再流動(dòng)時(shí)（出現(xiàn)膠凍狀）立即停表，讀取時(shí)間即為凝血酶原時(shí)間，作 3次取均值報(bào)告?！咀⒁馐马?xiàng)】：1. 采血應(yīng)“一針見血”，抗凝劑與血液比例（1： 9）應(yīng)準(zhǔn)確。取血后4h 內(nèi)完成測(cè)定。2. 試劑在用前先預(yù)溫到測(cè)定溫度，且不能超過(guò) 30分鐘。3. 標(biāo)本測(cè)定前應(yīng)先測(cè)定正常人混合血漿，其PT值在允許范圍內(nèi)才能測(cè)定樣本。4. 必須在36.5 37.5C溫度下操作。輸血技術(shù)、

26、ABO血型鑒定（正、反定型）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆昭丸b定（正定、反定）原理、測(cè)定方法及結(jié)果觀察、分析、報(bào)告。【實(shí)驗(yàn)原理】：根據(jù)紅細(xì)胞表面 A、B抗原與相應(yīng)的抗體特異性結(jié)合，可使紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集反應(yīng)這一原理，通過(guò)正、反定型來(lái)判斷型別。正定型：用已 知抗A、抗B型血清來(lái)測(cè)定紅細(xì)胞上有無(wú)相應(yīng)的 A B抗原；反定型：用已知A抗原和B抗原紅細(xì)胞來(lái)測(cè)定血清中有無(wú)相應(yīng)的抗 A、抗B抗體?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：標(biāo)準(zhǔn)抗A抗B血清；5% A B型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞生理鹽水懸液;生理鹽水【實(shí)驗(yàn)器材】：試管、離心機(jī)、記號(hào)筆、滴管、顯微鏡【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：1、分離血清，并做好標(biāo)記。2、洗滌紅細(xì)胞，制備5%紅細(xì)胞懸液，做好標(biāo)記。、正定（用

27、已知標(biāo)準(zhǔn)血清鑒定血型）。取試管2支分別標(biāo)明抗A、抗B字樣加5方紅C晨液各1滴離離心（1000轉(zhuǎn)/min 1分鐘）觀察結(jié)果。、反定（已知標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞鑒定血型）取標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞A B型各1-2滴-分別裝在大小相等并表明A B字樣的兩支試管中7分別加被檢者血清1-2滴7混勻離心7觀察結(jié)果結(jié)果判斷【注：（+）示凝集（）示不凝集】正定反定抗A（ B型）抗 B（ A型）被檢者血型B型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)A型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)+一A胞胞一+B+一一一O一+AB+【注意事項(xiàng)】：1. 格查對(duì)，切不可將姓名、標(biāo)本、血型等搞錯(cuò)，要求正、反定型結(jié)果致。2.觀察結(jié)果、登記、出報(bào)告均應(yīng)仔細(xì)查對(duì)3. 滴管、試管應(yīng)清潔干燥，各吸管不能混用，避免溶血及相

28、互污染、交叉配血實(shí)驗(yàn)（同型、異型配血）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆整}水介質(zhì)配血法的原理、操作方法及結(jié)果觀察、分析、報(bào)告。【實(shí)驗(yàn)原理】：天然抗體IgM因其分子鏈較長(zhǎng)，在鹽水介質(zhì)中，可以克服紅細(xì)胞表面電荷的排斥力，與含有相對(duì)應(yīng)抗原的紅細(xì)胞結(jié)合并出現(xiàn)肉眼可見的凝集?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：生理鹽水【實(shí)驗(yàn)器材】：試管、滴管、離心機(jī)、記號(hào)筆【實(shí)驗(yàn)方法】：1分離血清，并做好標(biāo)記。2、洗滌紅細(xì)胞，制備2%紅細(xì)胞懸液，做好標(biāo)記、同型交叉(1) 取試管2支分別注明主側(cè)、次側(cè):主側(cè)：受血得血清1滴+獻(xiàn)血者2%紅細(xì)胞懸液1滴。次側(cè)：受血者2 %紅細(xì)胞懸液1滴+獻(xiàn)血者血清1滴。(2) 充分混勻-離心1分鐘(1000轉(zhuǎn)/min )-觀察結(jié)

29、果。(3) 結(jié)果觀察：在白色背景下，先觀察上清液呈正常血清狀即無(wú)溶血現(xiàn)象，再輕搖試管，試管內(nèi)血球呈現(xiàn)均勻混濁也無(wú)凝集。 為叉配血試驗(yàn)相合, 若有溶血或凝集均不可輸。、異型交叉：“ O'型作為獻(xiàn)血者獻(xiàn)給“ A”或“B”或“AB'型，其結(jié)果是：主側(cè)不凝，次側(cè)凝?！咀⒁馐马?xiàng)】：1.嚴(yán)格查對(duì)，切不可將受血者、獻(xiàn)血者姓名、標(biāo)本、血型等搞錯(cuò)。2.觀察結(jié)果、登記、出報(bào)告均應(yīng)仔細(xì)查對(duì)。3. 吸管、試管應(yīng)清潔干燥，各吸管不能混用，避免溶血及相互污染。4. 交叉配血時(shí)主側(cè)、次側(cè)一定要分清。尿液檢驗(yàn)一、尿液理學(xué)及化學(xué)檢驗(yàn)（尿液外觀、SG PRO GLU KET URO【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳蛞旱囊话憷韺W(xué)

30、檢驗(yàn)及常用化學(xué)檢驗(yàn)原理、 操作方法及 結(jié)果觀察、報(bào)告。【實(shí)驗(yàn)原理】：1.PRO原理：磺基水楊酸發(fā)：在酸性條件下，磺基水楊酸的磺酸根陰離子與蛋白質(zhì)氨基酸陽(yáng)離子結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽沉淀。加熱醋酸法: 加熱煮沸使蛋白質(zhì)變性凝固，加乙酸使尿 pH接近等電點(diǎn)（pH5左右）而加速蛋白質(zhì)沉淀。2.GLU（班氏法）原理：葡萄糖在堿性溶液中加熱后，由環(huán)狀結(jié)構(gòu)變?yōu)閹┗逆湢罱Y(jié)構(gòu)而具有還原性，可將硫酸銅還原為黃或紅色的氧化亞銅（CqO）而沉淀。3. KET （朗格氏環(huán)狀法）原理：尿中的酮體（丙酮和已酰乙酸）與亞硝基鐵氰化鈉和硫酸銨作用，可生成異硝基、異硝基胺，后者與（CN 53生成紫紅色復(fù)合物。生成櫻4. UR

31、O原理：在酸性溶液中，尿膽原與對(duì)二氨基本甲醛反應(yīng),紅色化合物?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：5%冰乙酸液、200g/L磺基水楊酸液、班氏試劑、亞硝基鐵氰化鈉、氨水、Ehrlich 試劑【實(shí)驗(yàn)器材】：試管、PH試紙、滴管、酒精燈、試管夾、尿比重計(jì)【實(shí)驗(yàn)方法】：1、尿色，透明度：正常人黃色透明，若遇混濁尿，采取加熱加酸法鑒別；深黃色（黃膽病人）。2、尿PH值：正常尿液一般為弱酸必（PH6.5 ）。3、尿比重（SG）:成人為1.015 1.025 （多積尿），若受飲水、出汗影響比重波動(dòng)于1.003 1.030之間（隨機(jī)尿）。尿比重測(cè)定方法:斜持比重筒（量筒），將尿液沿管壁緩慢倒入量筒中以將比重計(jì)浮起為度,避免激起泡

32、沫，如有泡沫，可用濾紙吸去，將比重計(jì)輕輕放入并加以捻轉(zhuǎn),使其懸浮在尿液中，待比重計(jì)稍停穩(wěn)后，讀取液面的比重測(cè)度。4、尿蛋白定性試驗(yàn)（PRO）（兩種方法）（1）加熱醋酸法（參考方法）：取試管加尿至試管2/3處用試管夾夾持試管下1/3處-加熱上1/3處的尿液（注意：不斷轉(zhuǎn)動(dòng)試管均勻加熱, 防止尿液沸濺）-加冰醋酸23滴-再加熱煮沸-觀察結(jié)果-報(bào)告。（2） 200g/L磺基水楊酸法（首選方法）：取試管加尿約1ml于試管內(nèi)加磺柳酸數(shù)滴觀察結(jié)果報(bào)告。5、尿糖定性試驗(yàn)（GLU）（班氏法）：取試管加班氏試劑 1ml于試管內(nèi)加熱煮沸試劑仍呈清亮藍(lán)色滴加尿液23滴再次煮沸2min冷卻觀察結(jié)果-報(bào)告。6、尿酮體檢

33、驗(yàn)（KET）（即格氏環(huán)狀法）：取試管一支加尿液約 2ml 加冰乙酸數(shù)滴混勻加亞硝基鐵氰化鈉 （粉少許）震蕩混勻沿管壁輕輕 加入氨水作環(huán)狀試驗(yàn)報(bào)告。7、尿膽原檢驗(yàn)（URO（歐氏法）：取試管加新鮮尿1ml加歐立區(qū)試劑0.1ml混勻靜置10分鐘在白色背景下，從管口向管底觀察結(jié)果 報(bào)告?！咀⒁馐马?xiàng)】：1、認(rèn)真觀察尿色、量、測(cè) PH。2、加熱煮沸時(shí)，切忌管口對(duì)人，應(yīng)不時(shí)振動(dòng)試管，以防止溢出。3、尿膽原檢驗(yàn)時(shí)尿液應(yīng)新鮮，否則尿膽原在空氣中氧化為尿膽素而致假陰性結(jié)果。4、在測(cè)尿比重時(shí)應(yīng)注意校正溫度及尿量不足時(shí)的校正方法。、尿液沉渣鏡檢【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳虺猎鼧?biāo)本制作方法及尿沉渣顯微鏡下檢查的內(nèi)容?！緦?shí)驗(yàn)原理

34、】：用顯微鏡檢查方法，依據(jù)尿液細(xì)胞、管型等有形成分的形態(tài) 特征，識(shí)別并記錄其在一定顯微鏡視野內(nèi)的數(shù)目。【實(shí)驗(yàn)器材】：玻片、離心機(jī)、試管、顯微鏡【實(shí)驗(yàn)方法】：取中號(hào)試管一支7加混合均勻尿液約至試管2/3處7離心（5500轉(zhuǎn)/分鐘）5分鐘-一次性傾去上清液留取尿沉渣液約0.2ml -混勻7在載玻片上涂成薄片7鏡檢7報(bào)告報(bào)告方式:“少許”少數(shù)視野可見（1 4個(gè)）“+”占視野面積1/4或每個(gè)視野都有少量敬在（514個(gè)）“+”占視野面積的一半（15 29）“+”占視野面積的3/4 （3050）“+”滿視野（50個(gè)以上）注：低倍鏡下計(jì)數(shù)20個(gè)視野所見管型數(shù)，高倍鏡下計(jì)數(shù)至少10個(gè)視野各類 細(xì)胞數(shù)?！咀⒁馐?/p>

35、項(xiàng)】：1.尿在離心前和涂片前必須混勻2.棄去上清液應(yīng)一次性傾去勿來(lái)回顛倒。3.報(bào)告方式規(guī)范。三、1小時(shí)細(xì)胞排泄率測(cè)定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳蛞?小時(shí)細(xì)胞排泄率檢驗(yàn)原理、方法及結(jié)果觀察、報(bào) 告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：在日常生活不受限制的情況下，準(zhǔn)確留取3小時(shí)的全部尿液。取混勻后的部分尿液離心，留沉淀液，混勻充入細(xì)胞計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)一定體積 沉淀液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型，然后換算成 1小時(shí)尿中相應(yīng)的數(shù)量?！緦?shí)驗(yàn)器材】：量筒、細(xì)胞計(jì)數(shù)板、刻度離心管、離心機(jī)【實(shí)驗(yàn)方法】：1.準(zhǔn)確測(cè)量尿量，并記錄.2.將尿液充分混勻-取10ml尿于刻度離心內(nèi)-離心1500r/min5分鐘-準(zhǔn)確吸取上清液9m|T輕輕混勻管底沉淀-取1

36、滴充入計(jì)數(shù)板兩側(cè)的計(jì) 數(shù)池中T低倍鏡下計(jì)數(shù)18個(gè)大方格里的管型數(shù)，高倍鏡下計(jì)數(shù)10個(gè)大方格 里的紅細(xì)胞.白細(xì)胞包括腎小管上皮細(xì)胞-計(jì)算-報(bào)告計(jì)算:N=CX 10/D X 1000XC V/(10 X 3)式中：N為1小時(shí)尿中細(xì)胞或管型數(shù)D為計(jì)數(shù)的大格數(shù)C為計(jì)數(shù)D個(gè)大格所見的細(xì)胞或管型數(shù)V為3小時(shí)尿量毫升數(shù)【注意事項(xiàng)】：1.尿液標(biāo)本留取時(shí)可不限制飲食，但勿過(guò)量飲水。2.尿在離心前和充池前必須混勻3. 尿液應(yīng)新鮮檢查，PH應(yīng)在6以下，若為堿性尿，則細(xì)胞和管型易溶解。四、尿液分析儀的使用、 HCG僉測(cè)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳蛞悍治鰞x的使用方法及 HCG檢測(cè)原理、操作方法及結(jié)果觀察、報(bào)告。【實(shí)驗(yàn)原理】：H

37、CG僉測(cè)（膠乳凝集抑制試驗(yàn)）原理：將尿液與抗 HCG血清混合，待反應(yīng)后加入被HC®敏的膠乳懸液，若尿中含有 HCG則先于膠乳與血清結(jié)合，故膠乳仍呈均勻狀，不出現(xiàn)凝集，反之，非孕婦尿液因不含HCG抗血清中的抗體則膠乳抗原發(fā)生反應(yīng)，出現(xiàn)凝集?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：妊娠診斷血清、妊娠診斷抗原【實(shí)驗(yàn)器材】：尿液分析儀、顯微鏡、玻片、試管、尿液試紙條【實(shí)驗(yàn)方法】：1、尿液分析儀結(jié)構(gòu)、原理見教材;尿液分析儀的使用：每2個(gè)實(shí)驗(yàn)臺(tái)為一小組；由老師示教操作方法，注 意事項(xiàng)，然后每組抽人操作，認(rèn)真操作，熟練操作程序，為以后的臨床工作 打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，并學(xué)會(huì)在使用儀器過(guò)程中愛護(hù)儀器，保養(yǎng)儀器。2. HCG檢測(cè)：取玻

38、片一張7于玻片的一端加被檢尿液另一端加生理鹽水（陰性對(duì)照）各一滴-兩端同時(shí)加HC蹴血清各一滴-混勻1分鐘-再同時(shí) 加膠乳抗原各一滴-充分混勻-放置 5分鐘后觀察結(jié)果-報(bào)告陽(yáng)性：不凝集陰性:凝集1.【注意事項(xiàng)】：尿液、抗血清和膠乳抗原必須按規(guī)定順序滴加，滴量大小應(yīng)一致。2.不同批號(hào)的試劑不能互相搭配使用。4.標(biāo)本渾濁有沉淀時(shí)，應(yīng)離心取上清液測(cè)定。3.室溫低于20r，反應(yīng)緩慢，應(yīng)適當(dāng)加溫或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間。5. 試劑在2C8C冰箱保存，特別注意不能冰凍，否則膠乳上 HCG抗原釋放，不能再凝集。五、尿常規(guī)（RT）檢驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆漳虺Ｒ?guī)檢驗(yàn)規(guī)程，熟悉使用尿液分析儀?！緦?shí)驗(yàn)原理】見實(shí)驗(yàn)十三、十四【實(shí)驗(yàn)試

39、劑】200g/L磺基本楊酸、5%冰乙?！緦?shí)驗(yàn)器材】精燈【實(shí)驗(yàn)方法】：尿液分析儀、顯微鏡、玻片、試管、PH試紙、離心機(jī)、酒、理學(xué)檢驗(yàn)?zāi)蛏蛄客该鞫萈H、尿蛋白定性（兩種方法任選一種）1.法：取試管-加尿約1ml于試管內(nèi)-加磺柳酸數(shù)滴-觀察結(jié)果-報(bào)告。2.5%冰乙酰法：取試管-加尿至試管2/3處-用試管夾夾持試管下1/3處加熱上1/3處的尿液（注意：不斷轉(zhuǎn)動(dòng)試管均勻加熱，防止尿液沸濺） 加冰醋酸23滴再加熱煮沸觀察結(jié)果-報(bào)告。三、尿液沉渣鏡檢取中號(hào)試管一支加混合均勻尿液約至試管2/3處離心（5500轉(zhuǎn)/分鐘）5分鐘-一次性傾去上清液留取尿沉渣液約 0.2ml -混勻-在載玻片上 涂成薄片-鏡檢-報(bào)

40、告報(bào)告方式f細(xì)胞成分：用最低值最高值/HPF（或平均值/HPF）報(bào)管型成分：用最低值最高值/LPF（或平均值/LPF）報(bào)占視野1/4為+,占視野告。I結(jié)晶成分：用高倍視野觀察，1/2為+，占視野3/4為+，滿視野為+。四、尿液分析儀使用 每2個(gè)實(shí)驗(yàn)臺(tái)為一小組；由老師示教操作方法，注意事項(xiàng)，然后每組抽人操 作，認(rèn)真操作，熟練操作程序，為以后的臨床工作打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，并學(xué)會(huì)在 使用儀器過(guò)程中愛護(hù)儀器，保養(yǎng)儀器。排泄物及分泌物檢驗(yàn)一、糞常規(guī)（Rt）檢驗(yàn)及糞隱血（0B【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆占S便外觀、顯微鏡檢查的方法及糞便隱血試驗(yàn)的方法, 熟悉鏡檢時(shí)糞便中各物質(zhì)的形態(tài)和估計(jì)方式。生理鹽水、10g/L鄰聯(lián)甲苯胺

41、冰乙酸溶液、3%過(guò)氧化氫 顯微鏡、竹簽、載玻片、濾紙【實(shí)驗(yàn)原理】：糞隱血（0B試驗(yàn)原理：血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過(guò) 氧化物酶的活性，能催化過(guò)氧化氫分解釋放新生態(tài)氧，將受體鄰聯(lián)甲苯胺氧 化成鄰甲偶氮苯而顯藍(lán)色?！緦?shí)驗(yàn)器材】【實(shí)驗(yàn)試劑】【實(shí)驗(yàn)方法】、糞便外觀檢查1 .顏色2.粘稠度二、顯微鏡檢驗(yàn)取玻片-加生理鹽水1 2滴-用竹簽自糞便多處取材(特別是膿、血、粘液等異常部分)-與鹽水混合涂成薄片(以能透過(guò)字跡為度)-低倍 鏡觀察有無(wú)蟲卵、原蟲-轉(zhuǎn)高倍鏡檢驗(yàn)細(xì)胞情況并對(duì)其數(shù)量進(jìn)行估計(jì)-報(bào)告報(bào)告方式：細(xì)胞數(shù)報(bào)告1020個(gè)視野的最低值至最高值或報(bào)告平均值。低倍鏡直接報(bào)告見到XX蟲卵及食物殘?jiān)亩嗷蛏佟?/p>

42、三、糞便潛血試驗(yàn)(OB試驗(yàn))用竹簽挑取少許糞便于濾紙片上，滴加鄰聯(lián)甲苯胺冰乙酸液23滴,再加 HQ (1mol/L )23滴，于標(biāo)本上立即觀察結(jié)果，報(bào)告。(-)2后仍不顯色 (+) 10S后由淺蘭漸變深蘭 (+)初顯淺蘭褐色漸變成明顯蘭褐色 (+)立即呈現(xiàn)蘭褐色 (+)立即呈現(xiàn)黑蘭色【注意事項(xiàng)】：1. 鏡檢時(shí)至少每張涂片觀察10個(gè)視野。2. 因3%過(guò)氧化氫不穩(wěn)定，長(zhǎng)時(shí)間放置可使反應(yīng)減弱，所以試驗(yàn)前應(yīng)檢查試劑是否有效，可將過(guò)氧化氫滴于未染色的血片上， 如產(chǎn)生泡沫表示過(guò)氧 化氫有效。、陰道分泌物檢驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆贞幍狼鍧嵍鹊膬?nèi)容、判定標(biāo)準(zhǔn)及常見陰道菌的形態(tài)?！緦?shí)驗(yàn)器材】陰道分泌物標(biāo)本片、顯微鏡、

43、擦鏡紙、清潔液、鏡油【實(shí)驗(yàn)方法】.陰道分泌物清潔度檢查：先用低倍鏡觀察，再用高倍鏡檢查，根據(jù)上皮細(xì)胞、白細(xì)胞(或膿細(xì)胞)、桿菌、球菌的多少分度。(清潔度I , n,陰道清潔度的分級(jí)判斷清潔度陰道桿菌雜菌（球菌）上皮細(xì)胞白細(xì)胞（或膿細(xì)胞）I+-+0-5/H PFn+-+5-15/H PFrn-+-15-30/H PFIV-+-> 30/HPF二.展片：陰道桿菌、霉菌、淋病雙球菌、陰道線索細(xì)胞等。（要求繪出鏡下形態(tài)）【注意事項(xiàng)】：【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹靠凑蛊瑫r(shí)不可動(dòng)粗調(diào)更不要移動(dòng)視野，看不清只可動(dòng)微調(diào)體液檢驗(yàn)、潘氏試驗(yàn)、李凡他試驗(yàn)、精子鏡檢:掌握潘氏試驗(yàn)、李凡他試驗(yàn)的檢測(cè)原理、操作方法及結(jié)果觀察、報(bào)告，熟悉鏡下異常及正常的精子形態(tài)?！緦?shí)驗(yàn)原理】潘氏試驗(yàn)原理：腦積液中球蛋白與苯酚結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽而產(chǎn)生白色混濁或沉淀。李凡他試驗(yàn)原理：漿膜上皮細(xì)胞在炎癥反應(yīng)的刺激下分泌粘蛋白量增加。粘蛋白是一種酸性糖蛋白，等電點(diǎn)為 PHA5,因此在稀乙酸中出現(xiàn)白色沉淀?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：飽和苯酚溶液、冰乙酸【實(shí)驗(yàn)器材】：試管、吸管、量筒、滴管【實(shí)驗(yàn)方法】：一、潘氏法或潘迪試驗(yàn)取飽和石碳酸（苯酚）約2ml于試管中，用滴管加入標(biāo)本1滴，置黑色 背景處觀