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文檔簡介
1、微生物細(xì)胞進(jìn)展大小丈量和細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。加強(qiáng)微生物細(xì)胞大小的感性認(rèn)識(shí)。二、根本原理1、微生物細(xì)胞大小的丈量 微生物細(xì)胞的大小是微生物根本的形狀特征,也是分類鑒定的根據(jù)之一。微生物大小的測定,需求在顯微鏡下,借助特殊丈量工具測微尺包括鏡臺(tái)測微尺和目鏡測微尺。 測微尺原理:鏡臺(tái)測微尺是中央部分刻有準(zhǔn)確等分線的載玻片,普通是將1mm等分為100格,每格長0.01mm(即10m)。鏡臺(tái)測微尺并不直接用來丈量細(xì)胞的大小,而是用于校正目鏡測微尺每格的相對長度,然后再用目鏡測微尺丈量微生物細(xì)胞的大小。二、根本原理2、顯微直接計(jì)數(shù) 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將小量待測樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻
2、片上又稱計(jì)菌器,于顯微鏡下直接計(jì)數(shù)的一種簡便、快速、直觀的方法。 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板原理:計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片,其上由四條槽構(gòu)成三個(gè)平臺(tái),中間較寬的平臺(tái)又被一短橫槽隔成兩半,每一邊的平臺(tái)上各該有一個(gè)方格網(wǎng),每個(gè)方格多共分為九個(gè)大方格,中間的大方格即為計(jì)數(shù)室。二、根本原理 每個(gè)計(jì)數(shù)室大方格邊長為1mm,那么每個(gè)大方格的面積為1mm2,蓋上蓋玻片后,蓋玻片與載玻片之間的高度為0.1mm,所以計(jì)數(shù)室的容積為0.1mm3即萬分之一毫升。 每個(gè)計(jì)數(shù)室有25或16個(gè)中方格。計(jì)數(shù)時(shí),通常數(shù)五個(gè)中方格的總菌數(shù),然后求得每個(gè)中方格的平均值,再乘以25或16,就得出一個(gè)大方格的總菌數(shù),然后換算成1ml菌液中的總菌數(shù)
3、。3、儀器或其他器具:目鏡測尺、鏡臺(tái)測微尺、血球計(jì)數(shù)板、蓋玻片、無菌吸管、酒精燈、顯微鏡、擦鏡紙、濾紙等使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)兩線完全重合數(shù)出兩重合線之間鏡臺(tái)測微尺和目鏡測微尺所占的格數(shù)根據(jù)兩測微尺重合格數(shù),計(jì)算出目鏡測微尺每格實(shí)踐長度 。按上述步驟分別校正低倍鏡、高倍鏡和油鏡的下目鏡測尺每小格的實(shí)踐長度。操作要點(diǎn):察看光陰線不宜過強(qiáng),否那么難以找到鏡臺(tái)測微尺的刻度。換高倍鏡和油鏡校正時(shí),防止接物鏡壓壞鏡臺(tái)測微尺和損壞鏡頭。水沖洗計(jì)數(shù)室后,再用無水乙醇將血球計(jì)數(shù)室沖洗干凈 置枯燥箱枯燥 。個(gè)菌體計(jì)算;個(gè)菌體計(jì)算;操作要點(diǎn):操作要點(diǎn):血球計(jì)數(shù)室要清潔。血球計(jì)數(shù)室要清潔。察看光陰線不宜過強(qiáng),否那么難以
4、找到計(jì)察看光陰線不宜過強(qiáng),否那么難以找到計(jì)數(shù)室。數(shù)室。汲取菌液前菌液要充分搖勻。汲取菌液前菌液要充分搖勻。血球計(jì)數(shù)室充溢菌液后,要靜置血球計(jì)數(shù)室充溢菌液后,要靜置5min。接目鏡放大倍數(shù):接目鏡放大倍數(shù):2將各菌測定結(jié)果填入下表將各菌測定結(jié)果填入下表mmmmm下次實(shí)驗(yàn)工程:培育基的配制與高壓蒸汽滅菌校正公式:校正公式: 目鏡測微尺每格長度目鏡測微尺每格長度(m)(m)兩重合線間鏡臺(tái)測微尺小格數(shù)兩重合線間鏡臺(tái)測微尺小格數(shù)10/10/兩重合線間目鏡測微尺小格數(shù)兩重合線間目鏡測微尺小格數(shù) 16小方格小方格 25中方格計(jì)數(shù)室中方格計(jì)數(shù)室 25小方格小方格 16中方格計(jì)數(shù)室中方格計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室的刻度有兩種規(guī)格:計(jì)數(shù)室的刻度有兩種規(guī)格: 計(jì)算公式:計(jì)算公式:25個(gè)中方格計(jì)算公式:個(gè)中方格計(jì)算公式:總 菌 液 中 的 總 菌 數(shù) 個(gè)總 菌 液 中 的 總 菌 數(shù) 個(gè) / m l A/525104B 50000AB16個(gè)中方格計(jì)算公式:個(gè)中方格計(jì)算公式:總 菌 液 中 的 總 菌 數(shù) 個(gè)總 菌 液 中 的 總 菌 數(shù) 個(gè)
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