顯微鏡使用與細胞觀察

1、顯微鏡的使用顯微鏡的使用與細胞觀察與細胞觀察普通生物學實驗普通生物學實驗目錄目錄 1生物學實驗課的基本要求生物學實驗課的基本要求 2實驗目的實驗目的 3實驗用品實驗用品 4實驗內(nèi)容實驗內(nèi)容n光學顯微鏡的使用練習光學顯微鏡的使用練習n制作并觀察人口腔上皮細胞臨時裝片制作并觀察人口腔上皮細胞臨時裝片n制作并觀察洋蔥細胞臨時裝片制作并觀察洋蔥細胞臨時裝片 5生物繪圖生物繪圖生物學實驗課的基本要求生物學實驗課的基本要求n課前預習實驗指導，主動參閱相關資料。課前預習實驗指導，主動參閱相關資料。n準確理解老師對實驗的要求。準確理解老師對實驗的要求。n利用實驗指導或相關資料完成實驗。利用實驗指導或相關資料完

2、成實驗。n實驗操作一定要規(guī)范。實驗操作一定要規(guī)范。n在實驗過程中要認真觀察，積極思考，并可在實驗過程中要認真觀察，積極思考，并可以與其他同學討論。不做與實驗無關的事。以與其他同學討論。不做與實驗無關的事。n訓練自己獨立實驗的能力。訓練自己獨立實驗的能力。n認真、規(guī)范、準時完成實驗報告。認真、規(guī)范、準時完成實驗報告。實驗目的實驗目的n了解雙目顯微鏡的基本構(gòu)造了解雙目顯微鏡的基本構(gòu)造及其維護及其維護，掌握，掌握顯微鏡的使用方法。顯微鏡的使用方法。n學習臨時裝片制作的技術。學習臨時裝片制作的技術。n觀察動、植物細胞臨時裝片，了解動、植物觀察動、植物細胞臨時裝片，了解動、植物細胞的基本結(jié)構(gòu)特點。細胞的

3、基本結(jié)構(gòu)特點。n學習生物繪圖的基本方法。學習生物繪圖的基本方法。實驗用品實驗用品n材料材料： 人口腔上皮細胞；洋蔥（人口腔上皮細胞；洋蔥（Allium cepa）鱗莖。）鱗莖。n器材和儀器器材和儀器： BK1000顯微鏡、投影儀、解剖器材、培養(yǎng)皿、燒顯微鏡、投影儀、解剖器材、培養(yǎng)皿、燒杯、滴管、載玻片、蓋玻片、擦鏡紙、吸水紙、杯、滴管、載玻片、蓋玻片、擦鏡紙、吸水紙、紗布、蒸餾水。紗布、蒸餾水。n試劑：試劑： 生理鹽水、生理鹽水、0.1%的亞甲基藍溶液、的亞甲基藍溶液、 I2KI溶液。溶液。實驗內(nèi)容實驗內(nèi)容n顯微鏡的構(gòu)造和使用顯微鏡的構(gòu)造和使用n臨時裝片的制作與觀察臨時裝片的制作與觀察1 1

4、制作并觀察人口腔上皮細胞臨時裝片制作并觀察人口腔上皮細胞臨時裝片2 2 制作并觀察制作并觀察洋蔥洋蔥細胞臨時裝片細胞臨時裝片7College of Life Sciences顯微鏡的構(gòu)造和使用顯微鏡的構(gòu)造和使用單目顯微鏡的結(jié)構(gòu)單目顯微鏡的結(jié)構(gòu)91312 雙目復式顯微鏡的構(gòu)造雙目復式顯微鏡的構(gòu)造1.1.目鏡目鏡 2.2.止緊螺釘止緊螺釘 3.3.物鏡轉(zhuǎn)換器物鏡轉(zhuǎn)換器 4.4.物鏡物鏡 5.5.載物臺載物臺 6.6.聚光器（光欄聚光器（光欄調(diào)節(jié)桿）調(diào)節(jié)桿）7.7.聚光器調(diào)節(jié)螺聚光器調(diào)節(jié)螺旋旋 8.8.粗、細準焦螺旋粗、細準焦螺旋 9.9.鏡座鏡座 10.10.亮度調(diào)節(jié)開亮度調(diào)節(jié)開關關 11.11.

5、標本片夾手柄標本片夾手柄 12.12.鏡臂鏡臂 13.13.縱橫向移動縱橫向移動手輪手輪11顯微鏡的構(gòu)造圖顯微鏡的構(gòu)造圖顯微鏡的構(gòu)造顯微鏡的構(gòu)造機械部分機械部分n顯微鏡的構(gòu)造可分為保證成象的光學系統(tǒng)和用以安顯微鏡的構(gòu)造可分為保證成象的光學系統(tǒng)和用以安裝光學系統(tǒng)的機械部分。裝光學系統(tǒng)的機械部分。n機械部分：機械部分：n鏡座和鏡柱：鏡座和鏡柱：n鏡臂：鏡臂：n鏡筒：鏡筒：n物鏡轉(zhuǎn)換器：物鏡轉(zhuǎn)換器：n載物臺：載物臺：n調(diào)節(jié)輪：大的為粗調(diào)節(jié)輪，小的為細調(diào)節(jié)輪，旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)輪：大的為粗調(diào)節(jié)輪，小的為細調(diào)節(jié)輪，旋轉(zhuǎn)一周鏡筒升降一周鏡筒升降0.10.1毫米。毫米。光學部分光學部分n光學部分包括物鏡、目鏡、聚光器

6、、反光鏡等。物鏡和目鏡直接參與顯光學部分包括物鏡、目鏡、聚光器、反光鏡等。物鏡和目鏡直接參與顯微鏡的成像，聚光器和反光鏡起調(diào)節(jié)光強度和改變?nèi)肷涔獾淖饔?。微鏡的成像，聚光器和反光鏡起調(diào)節(jié)光強度和改變?nèi)肷涔獾淖饔谩 物鏡物鏡：也叫接物鏡（或鏡頭），它由：也叫接物鏡（或鏡頭），它由15組透鏡組成，其功能是聚集組透鏡組成，其功能是聚集來自標本的光線，使標本第一次放大成一個倒立的實像。來自標本的光線，使標本第一次放大成一個倒立的實像。na放大倍數(shù)放大倍數(shù)：從：從3到到100，常用的低倍鏡為，常用的低倍鏡為10，高倍鏡為，高倍鏡為40，油鏡頭為油鏡頭為100，放大倍數(shù)的計算方法：，放大倍數(shù)的計算方法：n

7、物鏡的放大倍數(shù)物鏡的放大倍數(shù)=相當?shù)墓鈱W筒長相當?shù)墓鈱W筒長/物鏡的焦距物鏡的焦距n（光學筒長（光學筒長=物鏡上焦點平面到目鏡下焦點平面的距離）物鏡上焦點平面到目鏡下焦點平面的距離）nb工作距離工作距離：是指物鏡最下面透鏡的表面到蓋玻片上表面之間的距離：是指物鏡最下面透鏡的表面到蓋玻片上表面之間的距離。物鏡的放大倍數(shù)越大，它的工作距離越小。低倍鏡的工作距離為。物鏡的放大倍數(shù)越大，它的工作距離越小。低倍鏡的工作距離為6.5毫毫米，高倍鏡為米，高倍鏡為0.6毫米，而油鏡頭僅為毫米，而油鏡頭僅為0.2毫米，使用時要倍加注意。毫米，使用時要倍加注意。nC焦點深度焦點深度：指視野中垂直范圍內(nèi)所能清晰觀察到

8、的界限。在用不同：指視野中垂直范圍內(nèi)所能清晰觀察到的界限。在用不同倍數(shù)的物鏡觀察物體時，所能看到垂直的清晰范圍是不同的。物鏡的倍倍數(shù)的物鏡觀察物體時，所能看到垂直的清晰范圍是不同的。物鏡的倍數(shù)越大，焦點深度越淺。數(shù)越大，焦點深度越淺。nD分辨力分辨力：是分辯被檢物體細微結(jié)構(gòu)的能力，也就是判別兩個物體點：是分辯被檢物體細微結(jié)構(gòu)的能力，也就是判別兩個物體點之間最短距離的本領。是衡量顯微鏡質(zhì)量優(yōu)劣的主要根據(jù)。分辨力與鏡之間最短距離的本領。是衡量顯微鏡質(zhì)量優(yōu)劣的主要根據(jù)。分辨力與鏡口率（又稱數(shù)值孔徑）關系很大，鏡口率越大，分辯率越高，物鏡的價口率（又稱數(shù)值孔徑）關系很大，鏡口率越大，分辯率越高，物鏡的

9、價值也越高。值也越高。n 目鏡目鏡：也叫接目鏡，其作用是將由物鏡放大的倒立實像放大成一個：也叫接目鏡，其作用是將由物鏡放大的倒立實像放大成一個正立的虛像。目鏡僅起放大物像的作用，并不增加顯微鏡的分辨力。正立的虛像。目鏡僅起放大物像的作用，并不增加顯微鏡的分辨力。一般目鏡有數(shù)個，它的放大倍數(shù)分別是一般目鏡有數(shù)個，它的放大倍數(shù)分別是5，7，10，15等。等。n 聚光器聚光器：安裝在載物臺下，一般由：安裝在載物臺下，一般由23個凸透鏡組成，上面的透鏡是個凸透鏡組成，上面的透鏡是平面的。它的功用是收集從光源射來的平行光線，并匯集成光束，集平面的。它的功用是收集從光源射來的平行光線，并匯集成光束，集中在

10、一點，以增強照明度，再經(jīng)過被檢物體照射到物鏡中去。利用齒中在一點，以增強照明度，再經(jīng)過被檢物體照射到物鏡中去。利用齒輪和齒條升降，能調(diào)節(jié)光線的強弱，使物像明晰。輪和齒條升降，能調(diào)節(jié)光線的強弱，使物像明晰。n 虹彩光圈虹彩光圈：裝在聚光器之下，由一片壓一片的鐵片組成。調(diào)拔操縱：裝在聚光器之下，由一片壓一片的鐵片組成。調(diào)拔操縱桿可以改變光圈的大小，調(diào)節(jié)光線的強弱。有的顯微鏡在載物臺下安桿可以改變光圈的大小，調(diào)節(jié)光線的強弱。有的顯微鏡在載物臺下安裝有盤光闌，它是一片有數(shù)個口徑大小不同并可轉(zhuǎn)動的金屬圓盤。它裝有盤光闌，它是一片有數(shù)個口徑大小不同并可轉(zhuǎn)動的金屬圓盤。它旋轉(zhuǎn)時，可以調(diào)節(jié)下方反射來的光線強弱

11、，以適于被檢標本的要求。旋轉(zhuǎn)時，可以調(diào)節(jié)下方反射來的光線強弱，以適于被檢標本的要求。n 反光鏡反光鏡：安裝在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向轉(zhuǎn)動，它：安裝在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向轉(zhuǎn)動，它的作用是把光源射出的光線反射至聚光器或通光孔。它分平、凹兩面的作用是把光源射出的光線反射至聚光器或通光孔。它分平、凹兩面，凹面鏡有聚光作用，在光源微弱時使用，如光源充足則用平面鏡。，凹面鏡有聚光作用，在光源微弱時使用，如光源充足則用平面鏡。13顯微鏡的成像原理顯微鏡的成像原理顯微鏡的成像原理顯微鏡的成像原理n其實普通的光學顯微鏡是根據(jù)凸透鏡的成像原理，要經(jīng)過其實普通的光學顯微鏡是根據(jù)凸透鏡的成

12、像原理，要經(jīng)過凸透鏡的兩次成像。第一次先經(jīng)過物鏡（凸透鏡凸透鏡的兩次成像。第一次先經(jīng)過物鏡（凸透鏡1 1）成像）成像，這時候的物體應該在物鏡，這時候的物體應該在物鏡( (凸透鏡凸透鏡1 1）的一倍焦距和兩倍）的一倍焦距和兩倍焦距之間，根據(jù)物理學的原理，成的應該是放大的倒立的焦距之間，根據(jù)物理學的原理，成的應該是放大的倒立的實像。而后以第一次成的物像作為實像。而后以第一次成的物像作為“物體物體”，經(jīng)過目鏡的，經(jīng)過目鏡的第二次成像。由于我們觀察的時候是在目鏡的另外一側(cè)，第二次成像。由于我們觀察的時候是在目鏡的另外一側(cè)，根據(jù)光學原理，第二次成的像應該是一個虛像，這樣像和根據(jù)光學原理，第二次成的像應該

13、是一個虛像，這樣像和物才在同一側(cè)。因此第一次成的像應該在目鏡（凸透鏡物才在同一側(cè)。因此第一次成的像應該在目鏡（凸透鏡2 2）的一倍焦距以內(nèi)，這樣經(jīng)過第二次成像，第二次成的像）的一倍焦距以內(nèi)，這樣經(jīng)過第二次成像，第二次成的像是一個放大的正立的虛像。如果相對實物說的話，應該是是一個放大的正立的虛像。如果相對實物說的話，應該是倒立的放大的虛像。倒立的放大的虛像。 閱讀閱讀 ：顯微鏡的機械結(jié)構(gòu)：顯微鏡的機械結(jié)構(gòu)n本顯微鏡的機械結(jié)構(gòu)緊湊，精度較高。粗、微調(diào)機構(gòu)集中在儀器的下方，重心較本顯微鏡的機械結(jié)構(gòu)緊湊，精度較高。粗、微調(diào)機構(gòu)集中在儀器的下方，重心較低，安放穩(wěn)定。載物臺位于弧形鏡臂上面，試樣為復置安放

14、，能勝任體積寬廣的低，安放穩(wěn)定。載物臺位于弧形鏡臂上面，試樣為復置安放，能勝任體積寬廣的被觀察物體。目鏡管呈被觀察物體。目鏡管呈45傾斜，工作者觀察舒適。照明附設在圓形底盤內(nèi)，便傾斜，工作者觀察舒適。照明附設在圓形底盤內(nèi)，便于移放。各部分構(gòu)造分述如下，見圖于移放。各部分構(gòu)造分述如下，見圖19。n底座起支撐整個鏡體的作用。為了防止震動，有的在底座上裝有四只防震橡皮腳底座起支撐整個鏡體的作用。為了防止震動，有的在底座上裝有四只防震橡皮腳。n照明照明7 照明設備裝于底盤內(nèi)，在底座內(nèi)裝有一低壓（照明設備裝于底盤內(nèi)，在底座內(nèi)裝有一低壓（68V，15W）燈泡作為光源）燈泡作為光源，由變壓器降壓供電，靠調(diào)節(jié)

15、次級電壓（，由變壓器降壓供電，靠調(diào)節(jié)次級電壓（68V）來改變燈光的亮度，燈座具有偏）來改變燈光的亮度，燈座具有偏心環(huán)，為調(diào)整光源后固定燈座于底盤用。光源前有聚光鏡組（一），反光鏡及孔心環(huán)，為調(diào)整光源后固定燈座于底盤用。光源前有聚光鏡組（一），反光鏡及孔徑光欄，安裝在圓形底盤上，聚光鏡組（二）及視場光欄安裝在物鏡支架上，它徑光欄，安裝在圓形底盤上，聚光鏡組（二）及視場光欄安裝在物鏡支架上，它們組成顯微鏡的照明系統(tǒng)，使試樣表面獲得充分、均勻的照明。們組成顯微鏡的照明系統(tǒng)，使試樣表面獲得充分、均勻的照明。n粗動調(diào)焦裝置粗動調(diào)焦裝置6 粗動手輪安裝在鏡體齒輪箱的兩側(cè)，位置適合觀察者手臂支撐于粗動手輪安

16、裝在鏡體齒輪箱的兩側(cè)，位置適合觀察者手臂支撐于工作桌上操作。手輪傳動內(nèi)部的齒輪，使支承載物臺的彎臂作上下升降。在粗動工作桌上操作。手輪傳動內(nèi)部的齒輪，使支承載物臺的彎臂作上下升降。在粗動手輪之一側(cè)，附設有制動環(huán)，用以緊固調(diào)焦正確后的載物臺位置，使不易受到偶手輪之一側(cè)，附設有制動環(huán)，用以緊固調(diào)焦正確后的載物臺位置，使不易受到偶然震動而變異，尤以用于顯微照相時的必要有效裝置。如需緊固載物臺不動，可然震動而變異，尤以用于顯微照相時的必要有效裝置。如需緊固載物臺不動，可將制動環(huán)按右螺旋方向旋緊，如需再調(diào)節(jié)粗動手輪，則必須先將此環(huán)以反方向旋將制動環(huán)按右螺旋方向旋緊，如需再調(diào)節(jié)粗動手輪，則必須先將此環(huán)以反

17、方向旋松，否則易損壞機件。松，否則易損壞機件。n圖圖19 XJB1 型金相顯微鏡外形結(jié)構(gòu)圖型金相顯微鏡外形結(jié)構(gòu)圖n微動調(diào)焦裝置微動調(diào)焦裝置5 微動手輪與粗動手輪同軸，用于使顯微鏡本體沿著滑軌緩慢移動微動手輪與粗動手輪同軸，用于使顯微鏡本體沿著滑軌緩慢移動。左側(cè)的手輪上刻有分度，每分格表示微動升降。左側(cè)的手輪上刻有分度，每分格表示微動升降0.002mm，機體齒輪箱刻有二條，機體齒輪箱刻有二條白線，貼連支架上有一條白線，是用以表示微動升降的極限范圍，當微動手輪旋白線，貼連支架上有一條白線，是用以表示微動升降的極限范圍，當微動手輪旋到極限位置時，微動手輪就自動被限制住，此時，應該倒轉(zhuǎn)旋動使用，否則將

18、會到極限位置時，微動手輪就自動被限制住，此時，應該倒轉(zhuǎn)旋動使用，否則將會損壞機件。損壞機件。顯微鏡的機械結(jié)構(gòu)顯微鏡的機械結(jié)構(gòu)n載物臺載物臺1 放置試樣用的機械載物臺是顯微鏡的重要部件。常見的載物臺為放置試樣用的機械載物臺是顯微鏡的重要部件。常見的載物臺為圓形，位于鏡架上方，利于放置各種幾何形狀試樣進行觀察，移動結(jié)構(gòu)采圓形，位于鏡架上方，利于放置各種幾何形狀試樣進行觀察，移動結(jié)構(gòu)采用粘性油膜與托架聯(lián)結(jié)，托架與臺面之間有方形導架，引導載物臺在水平用粘性油膜與托架聯(lián)結(jié)，托架與臺面之間有方形導架，引導載物臺在水平面上一定范圍內(nèi)作十字定向移動，當移到極限位置時有限止作用，避免載面上一定范圍內(nèi)作十字定向移

19、動，當移到極限位置時有限止作用，避免載物臺滑出托架之外。載物臺必須牢固，不易發(fā)生震動；其工作臺位置必須物臺滑出托架之外。載物臺必須牢固，不易發(fā)生震動；其工作臺位置必須與顯微鏡光軸垂直；載物臺移動時試樣的像應基本清晰。載物臺有圓形和與顯微鏡光軸垂直；載物臺移動時試樣的像應基本清晰。載物臺有圓形和方形兩種。一般備有能在水平面內(nèi)作前后、左右和方形兩種。一般備有能在水平面內(nèi)作前后、左右和360 度旋轉(zhuǎn)的螺絲和刻度旋轉(zhuǎn)的螺絲和刻度。載物臺上還備有彈簧壓片和場光圈。明場用的玻璃場光圈有度。載物臺上還備有彈簧壓片和場光圈。明場用的玻璃場光圈有13mm、21mm 和和27mm 三種；暗場用的金屬場光圈有三種；

20、暗場用的金屬場光圈有10mm、15mm 和和20mm 三種。三種。n孔徑光欄孔徑光欄15 和視場光欄和視場光欄14 孔徑光欄裝在照明反光鏡座上面，刻有孔徑光欄裝在照明反光鏡座上面，刻有05 分分劃線，它為孔徑大小之毫米值。調(diào)整孔徑光欄能夠控制入射光束的粗細，劃線，它為孔徑大小之毫米值。調(diào)整孔徑光欄能夠控制入射光束的粗細，以保證物像達到清晰的程度。視場光欄裝在物鏡支架下面，其作用是控制以保證物像達到清晰的程度。視場光欄裝在物鏡支架下面，其作用是控制視場范圍，使目鏡中視場明亮而無陰影。可以旋轉(zhuǎn)滾花套圈來調(diào)節(jié)視場大視場范圍，使目鏡中視場明亮而無陰影?？梢孕D(zhuǎn)滾花套圈來調(diào)節(jié)視場大小。在套圈上方有兩顆滾

21、花螺釘，用來調(diào)整光欄中心與光軸重合。小。在套圈上方有兩顆滾花螺釘，用來調(diào)整光欄中心與光軸重合。顯微鏡的機械結(jié)構(gòu)顯微鏡的機械結(jié)構(gòu)n物鏡轉(zhuǎn)換器物鏡轉(zhuǎn)換器3 這是快速更換物鏡的裝置。轉(zhuǎn)換器呈球面形，上有三個螺孔符這是快速更換物鏡的裝置。轉(zhuǎn)換器呈球面形，上有三個螺孔符合互換性，可安裝不同放大倍數(shù)的物鏡，旋動轉(zhuǎn)換器可使各物鏡鏡頭進入光合互換性，可安裝不同放大倍數(shù)的物鏡，旋動轉(zhuǎn)換器可使各物鏡鏡頭進入光路，與不同的目鏡搭配使用，可獲得各種放大倍數(shù)。當轉(zhuǎn)換各物鏡到光軸上路，與不同的目鏡搭配使用，可獲得各種放大倍數(shù)。當轉(zhuǎn)換各物鏡到光軸上時，有顯著感覺的定位器定位。有不同類型的轉(zhuǎn)換器。按安裝物鏡的孔數(shù)可時，有顯著

22、感覺的定位器定位。有不同類型的轉(zhuǎn)換器。按安裝物鏡的孔數(shù)可分為兩類，一類是用于低、中級金相顯微鏡的轉(zhuǎn)換器，有分為兩類，一類是用于低、中級金相顯微鏡的轉(zhuǎn)換器，有3 孔和孔和4 孔；另一類孔；另一類是用于高級金相顯微鏡的轉(zhuǎn)換器，有是用于高級金相顯微鏡的轉(zhuǎn)換器，有5 孔或孔或5 孔以上。按定位方式也可分為兩孔以上。按定位方式也可分為兩類，一類是外定位轉(zhuǎn)換器，定位搭子在上面，加工方便，但不夠美觀；另一類，一類是外定位轉(zhuǎn)換器，定位搭子在上面，加工方便，但不夠美觀；另一類是內(nèi)定位轉(zhuǎn)換器，定位搭子在里面，加工精度高，外形美觀。物鏡轉(zhuǎn)換器類是內(nèi)定位轉(zhuǎn)換器，定位搭子在里面，加工精度高，外形美觀。物鏡轉(zhuǎn)換器有一固定

23、座和一個轉(zhuǎn)動搭子，中間排有鋼珠以保證回轉(zhuǎn)輕便。物鏡轉(zhuǎn)換器需有一固定座和一個轉(zhuǎn)動搭子，中間排有鋼珠以保證回轉(zhuǎn)輕便。物鏡轉(zhuǎn)換器需保證兩方面的精度：一是定位精度，即各個物鏡座孔的中心偏移量要盡量小保證兩方面的精度：一是定位精度，即各個物鏡座孔的中心偏移量要盡量?。欢驱R焦精度，即當一個物鏡調(diào)焦在工作位置后，轉(zhuǎn)換其他物鏡時，應不；二是齊焦精度，即當一個物鏡調(diào)焦在工作位置后，轉(zhuǎn)換其他物鏡時，應不需重新調(diào)焦或只許稍微調(diào)焦就能得到清晰的像。需重新調(diào)焦或只許稍微調(diào)焦就能得到清晰的像。n目鏡管目鏡管11 呈傾斜呈傾斜45單管形式，接在裝有棱鏡的半球形鏡座上，可隨時拆卸單管形式，接在裝有棱鏡的半球形鏡座上，可隨時

24、拆卸或?qū)⒛跨R平向轉(zhuǎn)或?qū)⒛跨R平向轉(zhuǎn)90（以便接合照相設備作金相照相之用）。（以便接合照相設備作金相照相之用）。n物鏡物鏡2 本顯微鏡的物鏡為本型號顯微鏡專用的，除螺紋是按國家標準外，一本顯微鏡的物鏡為本型號顯微鏡專用的，除螺紋是按國家標準外，一般不適用于其他顯微鏡，般不適用于其他顯微鏡，45及及100物鏡筒設有防壓彈簧，使前透鏡萬一觸物鏡筒設有防壓彈簧，使前透鏡萬一觸及試樣時，不會因碰壓而損壞透鏡，不同倍率物鏡的鏡筒上涂以不同顏色的及試樣時，不會因碰壓而損壞透鏡，不同倍率物鏡的鏡筒上涂以不同顏色的環(huán)線，以示區(qū)別（例環(huán)線，以示區(qū)別（例10紫色，紫色，45黃色，黃色，100白色）。白色）。顯微鏡的成

25、像原理顯微鏡的成像原理n眾所周知，放大鏡是最簡單的一種光學儀器，眾所周知，放大鏡是最簡單的一種光學儀器， 它實際上是一塊會聚透鏡它實際上是一塊會聚透鏡（凸透鏡），利用它可以將物體放大。其成像光學原理如圖（凸透鏡），利用它可以將物體放大。其成像光學原理如圖1-1所示。所示。n當物體當物體AB 置于透鏡焦距置于透鏡焦距f 以外時，得到倒立的放大實像以外時，得到倒立的放大實像AB（如圖（如圖1-1（a），它的位置在），它的位置在2倍焦距以外。若將物體倍焦距以外。若將物體AB 放在透鏡焦距內(nèi)，就可放在透鏡焦距內(nèi)，就可看到一個放大正立的虛象看到一個放大正立的虛象AB（如圖（如圖1-1（b）。映象的長度與

26、物體長）。映象的長度與物體長度之比（度之比（AB/AB）就是放大鏡的放大倍數(shù)（放大率）。若放大鏡到物）就是放大鏡的放大倍數(shù)（放大率）。若放大鏡到物體之間的距離體之間的距離a 近似等于透鏡的焦距近似等于透鏡的焦距(af)，而放大鏡到像間的距離，而放大鏡到像間的距離b 近近似相當于人眼明視距離（似相當于人眼明視距離（250mm），則放大鏡的放大倍數(shù)為：），則放大鏡的放大倍數(shù)為：N=b/a=250/fn由上式知，透鏡的焦距越短，放大鏡的放大倍數(shù)越大。一般采用的放大由上式知，透鏡的焦距越短，放大鏡的放大倍數(shù)越大。一般采用的放大鏡焦距在鏡焦距在10100mm 范圍內(nèi)，因而放大倍數(shù)在范圍內(nèi)，因而放大倍數(shù)在

27、2.525倍之間。進一步提倍之間。進一步提高放大倍數(shù)，將會由于透鏡焦距縮短和表面曲率過分增大而使形成的映高放大倍數(shù)，將會由于透鏡焦距縮短和表面曲率過分增大而使形成的映象變得模糊不清。為了得到更高的放大倍數(shù)，就要采用顯微鏡，顯微鏡象變得模糊不清。為了得到更高的放大倍數(shù)，就要采用顯微鏡，顯微鏡可以使放大倍數(shù)達到可以使放大倍數(shù)達到15002000倍。倍。（a a）實像放大）實像放大（b b）虛像放大）虛像放大顯微鏡的成像原理顯微鏡的成像原理n顯微鏡不象放大鏡那樣由單個透鏡組成，而是由兩級特定顯微鏡不象放大鏡那樣由單個透鏡組成，而是由兩級特定透鏡所組成?？拷挥^察物體的透鏡叫做物鏡，而靠近眼透鏡所組成

28、?？拷挥^察物體的透鏡叫做物鏡，而靠近眼睛的透鏡叫做目鏡。借助物鏡與目鏡的兩次放大，就能將睛的透鏡叫做目鏡。借助物鏡與目鏡的兩次放大，就能將物體放大到很高的倍數(shù)（物體放大到很高的倍數(shù)（20002000倍）。圖倍）。圖1-21-2所示是在顯微所示是在顯微鏡中得到放大物像的光學原理圖。鏡中得到放大物像的光學原理圖。n被觀察的物體被觀察的物體AB AB 放在物鏡之前距其焦距略遠一些的位置放在物鏡之前距其焦距略遠一些的位置，由物體反射的光線穿過物鏡，經(jīng)折射后得到一個放大的，由物體反射的光線穿過物鏡，經(jīng)折射后得到一個放大的倒立實象，目鏡再將實像放大成倒立虛像，這就是我們在倒立實象，目鏡再將實像放大成倒立

29、虛像，這就是我們在顯微鏡下研究實物時所觀察到的經(jīng)過二次放大后的物像。顯微鏡下研究實物時所觀察到的經(jīng)過二次放大后的物像。n在設計顯微鏡時，讓物鏡放大后形成的實像位于目鏡的焦在設計顯微鏡時，讓物鏡放大后形成的實像位于目鏡的焦距之內(nèi)，并使最終的倒立虛像在距眼睛距之內(nèi)，并使最終的倒立虛像在距眼睛250mm 250mm 處成像，這處成像，這時觀察者看得最清晰。時觀察者看得最清晰。圖圖1-2 1-2 顯微鏡光學原理圖顯微鏡光學原理圖顯微鏡的成像原理顯微鏡的成像原理n透鏡成像規(guī)律是依據(jù)近軸光線得出的結(jié)論。近軸光線是指與光軸接近平行（即透鏡成像規(guī)律是依據(jù)近軸光線得出的結(jié)論。近軸光線是指與光軸接近平行（即夾角很

30、?。┑墓饩€。由于物理條件的限制，實際光學系統(tǒng)的成像與近軸光線成夾角很?。┑墓饩€。由于物理條件的限制，實際光學系統(tǒng)的成像與近軸光線成像不同，兩者存在偏離，這種相對于近軸成像的偏離就叫做像差。像差的產(chǎn)生像不同，兩者存在偏離，這種相對于近軸成像的偏離就叫做像差。像差的產(chǎn)生降低了光學儀器的精確性。按像差產(chǎn)生原因可分為兩類：一類是單色光成像時降低了光學儀器的精確性。按像差產(chǎn)生原因可分為兩類：一類是單色光成像時的像差，叫做單色像差。如球差、慧差、像散、像場彎曲和畸變均屬單色像差的像差，叫做單色像差。如球差、慧差、像散、像場彎曲和畸變均屬單色像差；另一類是多色光成像時，由于介質(zhì)折射率隨光的波長不同而引起的像

31、差，叫；另一類是多色光成像時，由于介質(zhì)折射率隨光的波長不同而引起的像差，叫做色差。色差又可分為位置色差和放大率色差。做色差。色差又可分為位置色差和放大率色差。n透鏡成像的主要缺陷就是球面差和色差（波長差）。球面差是指由于球面透鏡透鏡成像的主要缺陷就是球面差和色差（波長差）。球面差是指由于球面透鏡的中心部分和邊緣部分的厚度不同，造成不同折射現(xiàn)象，致使來自于試樣表面的中心部分和邊緣部分的厚度不同，造成不同折射現(xiàn)象，致使來自于試樣表面同一點上的光線經(jīng)折射后不能聚集于一點（圖同一點上的光線經(jīng)折射后不能聚集于一點（圖1-31-3），因此使映像模糊不清。），因此使映像模糊不清。球面像差的程度與光通過透鏡的

32、面積有關。光圈放得越大，光線通過透鏡的面球面像差的程度與光通過透鏡的面積有關。光圈放得越大，光線通過透鏡的面積越大，球面像差就越嚴重；反之，縮小光圈，限制邊緣光線射入，使用通過積越大，球面像差就越嚴重；反之，縮小光圈，限制邊緣光線射入，使用通過透鏡中心部分的光線，可減小球面像差。但光圈太小，也會影響成像的清晰度透鏡中心部分的光線，可減小球面像差。但光圈太小，也會影響成像的清晰度。色差的產(chǎn)生是由于白光中各種不同波長的光線在穿過透鏡時折射率不同，其。色差的產(chǎn)生是由于白光中各種不同波長的光線在穿過透鏡時折射率不同，其中紫色光線的波長最短，折射率最大，在距透鏡最近處成像；紅色光線的波長中紫色光線的波長

33、最短，折射率最大，在距透鏡最近處成像；紅色光線的波長最長，折射率最小，在距透鏡最遠處成像；其余的黃、綠、藍等光線則在它們最長，折射率最小，在距透鏡最遠處成像；其余的黃、綠、藍等光線則在它們之間成像。這些光線所成的像不能集中于一點，而呈現(xiàn)帶有彩色邊緣的光環(huán)。之間成像。這些光線所成的像不能集中于一點，而呈現(xiàn)帶有彩色邊緣的光環(huán)。色差的存在也會降低透鏡成像的清晰度，也應予以校正。通常采用單色光源（色差的存在也會降低透鏡成像的清晰度，也應予以校正。通常采用單色光源（或加濾光片），也可使用復合透鏡。如圖或加濾光片），也可使用復合透鏡。如圖1-31-3所示。所示。（a a）球面像差）球面像差 （b b）色差

34、）色差圖圖1-31-3透鏡產(chǎn)生像差的示意圖透鏡產(chǎn)生像差的示意圖低倍鏡、高倍鏡、油鏡的使用低倍鏡、高倍鏡、油鏡的使用n見光盤。見光盤。光學顯微鏡的使用練習光學顯微鏡的使用練習n顯微鏡的使用主要包括兩個方面，光度和焦距的調(diào)節(jié)。按顯微鏡的使用主要包括兩個方面，光度和焦距的調(diào)節(jié)。按照下列步驟進行操作：照下列步驟進行操作：n檢查亮度調(diào)節(jié)開關檢查亮度調(diào)節(jié)開關 確保其處于最小值。接通電源，打開確保其處于最小值。接通電源，打開開關。開關。n低倍物鏡下對光低倍物鏡下對光 掌握通過亮度調(diào)節(jié)開關、聚光鏡和虹彩掌握通過亮度調(diào)節(jié)開關、聚光鏡和虹彩光圈來調(diào)節(jié)視野亮度的方法。將視野調(diào)節(jié)得明亮而均勻后光圈來調(diào)節(jié)視野亮度的方法

35、。將視野調(diào)節(jié)得明亮而均勻后，轉(zhuǎn)換成高倍物鏡，注意觀察視野亮度發(fā)生了什么變化？，轉(zhuǎn)換成高倍物鏡，注意觀察視野亮度發(fā)生了什么變化？應該如何進行調(diào)整？應該如何進行調(diào)整？n取取“上上”字制片觀察字制片觀察 在低倍物鏡下找到物像并使用聚焦在低倍物鏡下找到物像并使用聚焦器調(diào)節(jié)至最清晰程度，觀察到的放大器調(diào)節(jié)至最清晰程度，觀察到的放大“上上”字是正的還是字是正的還是倒的？將制片左移或右移，物像移動的方向是否與制片移倒的？將制片左移或右移，物像移動的方向是否與制片移動方向一致？為什么？轉(zhuǎn)換成高倍鏡，動方向一致？為什么？轉(zhuǎn)換成高倍鏡，“上上”字的大小、字的大小、位置和亮度發(fā)生了什么變化？位置和亮度發(fā)生了什么變化

36、？n觀察氣泡觀察氣泡 在載玻片上滴一滴稀膠水，用解剖針攪拌使產(chǎn)在載玻片上滴一滴稀膠水，用解剖針攪拌使產(chǎn)生小的氣泡，加蓋玻片后在顯微鏡下觀察。在顯微鏡下看生小的氣泡，加蓋玻片后在顯微鏡下觀察。在顯微鏡下看到的氣泡，其外圍一黑圈，中間明亮。應該記住氣泡在顯到的氣泡，其外圍一黑圈，中間明亮。應該記住氣泡在顯微鏡下的形象，在以后的實驗中，不要把氣泡誤認為植物微鏡下的形象，在以后的實驗中，不要把氣泡誤認為植物組織中的結(jié)構(gòu)組織中的結(jié)構(gòu) 。 n觀察浮游生物觀察浮游生物 在載玻片上放一滴含有浮游生物的水，然在載玻片上放一滴含有浮游生物的水，然后輕輕加上蓋玻片。蓋玻片一定要擦拭清潔，否則將影響后輕輕加上蓋玻片。

37、蓋玻片一定要擦拭清潔，否則將影響觀察。觀察。 先在先在1010 物鏡下觀察浮游生物的游動情況，并試著物鏡下觀察浮游生物的游動情況，并試著移動載玻片追蹤浮游生物。最后在高倍物鏡下觀察，并改移動載玻片追蹤浮游生物。最后在高倍物鏡下觀察，并改變光圈的大小，了解其對物像的影響。變光圈的大小，了解其對物像的影響。 光學顯微鏡的使用練習光學顯微鏡的使用練習顯微鏡復原顯微鏡復原n亮度調(diào)到最小再關電源。亮度調(diào)到最小再關電源。n載物臺降到最低。載物臺降到最低。n低倍鏡低倍鏡(10(10倍倍) )轉(zhuǎn)到垂直的位置。轉(zhuǎn)到垂直的位置。n蓋上顯微鏡套。蓋上顯微鏡套。n顯微鏡上的拉桿始終保持拉開狀態(tài)。顯微鏡上的拉桿始終保持

38、拉開狀態(tài)。臨時裝片的制作與觀察臨時裝片的制作與觀察制作并觀察人口腔上皮細胞臨時裝片制作并觀察人口腔上皮細胞臨時裝片n用牙簽粗的一端，放在口腔里，輕刮口腔用牙簽粗的一端，放在口腔里，輕刮口腔頰頰內(nèi)幾下內(nèi)幾下(注意不注意不要用力過猛，以免損傷頰部要用力過猛，以免損傷頰部)。將刮下的白色粘性物。將刮下的白色粘性物薄而均薄而均勻勻地涂在載玻片上。加一滴地涂在載玻片上。加一滴0.9Nacl溶液溶液（不宜過多，?。ú灰诉^多，恰在蓋玻片之下為宜），然后加蓋玻片。先在低倍顯微鏡下在蓋玻片之下為宜），然后加蓋玻片。先在低倍顯微鏡下觀察?？谇簧掀ぜ毎?shù)個連在一起。由于口腔上皮細胞觀察?？谇簧掀ぜ毎?shù)個連在一起

39、。由于口腔上皮細胞薄而透明，因此光線需要薄而透明，因此光線需要暗暗些。找到口腔上皮細胞后，將些。找到口腔上皮細胞后，將其放在視野中心，再轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。口腔上皮細胞呈扁平其放在視野中心，再轉(zhuǎn)高倍鏡觀察?？谇簧掀ぜ毎时馄蕉噙呅?。試辨認細胞核、細胞質(zhì)、細胞膜。多邊形。試辨認細胞核、細胞質(zhì)、細胞膜。n若觀察不清楚時，可在蓋片一側(cè)加一滴若觀察不清楚時，可在蓋片一側(cè)加一滴0.1的亞甲藍的亞甲藍，另，另一側(cè)用條形吸水紙吸。如此，可使染液流入蓋片下面，將一側(cè)用條形吸水紙吸。如此，可使染液流入蓋片下面，將細胞染成淺藍色。核染色較深。細胞染成淺藍色。核染色較深。n染液不可加得過多，以免妨礙觀察。染液不可加得過多

40、，以免妨礙觀察。n 細胞膜細胞膜細胞核細胞核細胞質(zhì)細胞質(zhì)人的口腔上皮細胞人的口腔上皮細胞32制作并觀察洋蔥細胞臨時裝片制作并觀察洋蔥細胞臨時裝片 取片取片 n取一片干凈的載玻片，用滴管在其中央加一滴蒸餾水。取一片干凈的載玻片，用滴管在其中央加一滴蒸餾水。 裝片裝片 n取洋蔥鱗莖，把它切成八瓣，剝下一片新鮮的肉質(zhì)鱗葉，用刀片在其取洋蔥鱗莖，把它切成八瓣，剝下一片新鮮的肉質(zhì)鱗葉，用刀片在其內(nèi)表面劃一個邊長為內(nèi)表面劃一個邊長為5mm5mm的正方形，然后用鑷子撕下正方形塊內(nèi)表皮的正方形，然后用鑷子撕下正方形塊內(nèi)表皮，迅速將其置于載玻片上的水滴中；如果內(nèi)表皮發(fā)生卷曲，應細心用，迅速將其置于載玻片上的水滴

41、中；如果內(nèi)表皮發(fā)生卷曲，應細心用解剖針將它展平。解剖針將它展平。 蓋片蓋片 n應該用鑷子夾住蓋玻片一側(cè)，使蓋玻片另一側(cè)邊緣與水滴邊緣相接觸應該用鑷子夾住蓋玻片一側(cè)，使蓋玻片另一側(cè)邊緣與水滴邊緣相接觸，然后慢慢放下，直到放平為止，這樣可使蓋玻片下的空氣逐漸被水，然后慢慢放下，直到放平為止，這樣可使蓋玻片下的空氣逐漸被水擠出，以免產(chǎn)生氣泡，影響觀察效果。擠出，以免產(chǎn)生氣泡，影響觀察效果。 觀察觀察 n將制好的裝片放在顯微鏡載物臺上，先用低倍物鏡觀察，注意視野中將制好的裝片放在顯微鏡載物臺上，先用低倍物鏡觀察，注意視野中能容納多少個表皮細胞以及細胞的大小能容納多少個表皮細胞以及細胞的大小? ? 后換

42、高倍物鏡，注意此時看后換高倍物鏡，注意此時看到的細胞數(shù)目與大小有何變化？和在低倍鏡下觀察到的物像有何不同到的細胞數(shù)目與大小有何變化？和在低倍鏡下觀察到的物像有何不同? ? 為什么為什么? ? 你能識別出洋蔥表皮細胞的基本結(jié)構(gòu)嗎你能識別出洋蔥表皮細胞的基本結(jié)構(gòu)嗎? ?331、準備、準備(1)(1)用潔凈的紗布把載蓋用潔凈的紗布把載蓋玻片和玻片和 擦拭干凈。擦拭干凈。(2)(2)把載玻片放在實驗室把載玻片放在實驗室臺上臺上, ,用吸管在載玻片的用吸管在載玻片的中央滴一滴清水中央滴一滴清水(3)(3)用鑷子從洋蔥鱗片用鑷子從洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)的表皮上葉內(nèi)側(cè)的表皮上, ,撕一撕一小塊透明薄膜小塊透明薄膜.

43、(4)(4)把撕下的薄膜浸入載玻片把撕下的薄膜浸入載玻片上的水滴中上的水滴中, ,用鑷子把薄膜展用鑷子把薄膜展平平. .(5)5)用鑷子夾起蓋玻片用鑷子夾起蓋玻片, ,使它的一邊使它的一邊接觸載玻片上的水滴接觸載玻片上的水滴, ,然后輕輕地蓋然后輕輕地蓋在薄膜上在薄膜上, ,避免蓋玻片避免蓋玻片 下出現(xiàn)氣泡下出現(xiàn)氣泡。生物生物繪圖繪圖的基本要求的基本要求n科學性和準確性?？茖W性和準確性。 繪生物圖不同于一般的美術創(chuàng)作，必須具有高度的科學性和繪生物圖不同于一般的美術創(chuàng)作，必須具有高度的科學性和準確性。必須認真觀察要畫的對象準確性。必須認真觀察要畫的對象切片或標本等，學習與之有關的文字記切片或標本

44、等，學習與之有關的文字記載及描述，正確理解了各部分的特征，選出正常的典型材料，才能在繪圖時保載及描述，正確理解了各部分的特征，選出正常的典型材料，才能在繪圖時保證形態(tài)結(jié)構(gòu)的準確性。證形態(tài)結(jié)構(gòu)的準確性。n點、線要清晰流暢。點、線要清晰流暢。 線條要一筆畫出，粗細均勻，光滑清晰，接頭處無分叉和線條要一筆畫出，粗細均勻，光滑清晰，接頭處無分叉和重線條痕跡，切忌重復描繪。一般用圓點襯陰，表示明暗和顏色的深淺，給予重線條痕跡，切忌重復描繪。一般用圓點襯陰，表示明暗和顏色的深淺，給予立體感。點要圓而整齊，大小均勻，根據(jù)需要靈活掌握疏密變化，不能用涂抹立體感。點要圓而整齊，大小均勻，根據(jù)需要靈活掌握疏密變化，不能用涂抹陰影的方法代替圓點。陰影的方法代替圓點。n比例要正確。比例要正確。繪圖要按生物各器官、組織以及細胞等各部構(gòu)造原有比例繪出，繪圖要按生物各器官、組織以及細胞等各部構(gòu)造原有比例繪