基因工程高考真題(2020年整理).doc

1、學(xué)海無涯高考生物一輪復(fù)習(xí)第三期現(xiàn)代生物科技專題專題聚焦一基因工程高考真題體驗(yàn)1. （08全國(guó)卷I 4）已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn)，如圖中箭頭所指，如果該線性 DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷，則會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的 DNA片段?，F(xiàn)有多個(gè)上述線性 DNA分子，若在 I 。4每個(gè)DNA分子上至少有一個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷，則理論上二講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性DN6子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同線性DHA分子熊切示意圖的DNA片段種類數(shù)是A.3B.4C.9D.12答案：C解析：考查了限制性內(nèi)切酶切割DNA片段的有關(guān)知識(shí)。這道題目可以轉(zhuǎn)化為單純的數(shù)字計(jì)算題。每個(gè) D

2、NA分子上至少有1個(gè)酶位點(diǎn)被該酶切斷，可以切得的種類有：a、b、c、d、ab、 bc、 cd、 abc、 bcd 九種。2. （08天津卷 4）為獲得純和高蔓抗病番茄植株，采用了下圖所示的方法：圖中兩對(duì)相對(duì)性狀獨(dú)立遺傳。據(jù)圖分析，不正確的是A、過程的自交代數(shù)越多，純合高蔓抗病植株的比例越高日 過程可以任取一植株的適宜花藥作培養(yǎng)材料C過程包括脫分化和再分化兩個(gè)過程D圖中篩選過程不改變抗病基因頻率答案：D解析：考查生物育種的有關(guān)知識(shí)。從圖中可以看出為獲得純合高蔓抗病番茄植株，一共采 取了三種育種手段：雜交育種、單倍體育種和基因工程育種。過程是多次自交和篩選， 使得純合高蔓抗病植株的比例提高；過程是

3、花藥離體培養(yǎng)，采用任一株F1的花藥均可；是植物組織培養(yǎng)獲得植株的過程，包括脫分化和再分化兩個(gè)階段。篩選純和高蔓抗病支 柱的過程實(shí)質(zhì)就是定向改變基因頻率的過程，即使得高蔓抗病基因的頻率升高。3. （08廣東卷 8）改良缺乏某種抗病性的水稻品種，不宜采用的方法是A.誘變育種B.單倍體育種C.基因工程育種D.雜交育種答案：B解析：本題考查育種的幾個(gè)基本方法的特點(diǎn)。正確把握“缺乏某種抗病性的水稻”及其原因是解答本題的關(guān)鍵?？赏ㄟ^誘變育種或基因工程育種的方法使水稻獲得抗性基因，可通過雜交育種培育抗病性水稻。單倍體育種過程，只是讓單倍體原有的染色體及其上面的基因加倍， 無抗病基因并不能產(chǎn)生相應(yīng)的變異。4.

4、 （11年四川卷）5.北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多， 抗凍能力越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意 圖，有關(guān)敘述正確的是A過程獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測(cè)序B多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，C過程構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D應(yīng)用DN琳針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)答案：B解析：過程1獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子，因此不能用于比目魚基因組測(cè)序，因此A錯(cuò)。導(dǎo)入農(nóng)桿菌是為了擴(kuò)增和更易導(dǎo)入蕃茄細(xì)胞，C錯(cuò)。DN琳

5、針技術(shù)不能檢測(cè)基因是否完全表達(dá)，目的基因的完全表達(dá)應(yīng)該檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)，D錯(cuò)。5. （2011年浙江卷）6、ada （酸脫氨酶基因）通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺甘酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤.的是A.每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B.每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)C.每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)adaD.每個(gè)人的ada至少表達(dá)一個(gè)腺甘酸脫氨酶分子答案：C6. （2012浙江卷）6.天然的玫瑰沒有藍(lán)色花，這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B,而開藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰，下列操作正確的是A.提取矮牽牛藍(lán)色花的 m

6、RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的 DNA再擴(kuò)增基因BB.利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC.利用DN咪合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D.將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞【答案】A【命題透析】通過特定的實(shí)例考查基因工程的相關(guān)概念及操作要領(lǐng)?！舅悸伏c(diǎn)撥】控制藍(lán)色色素合成的基因 B即為我們所需要的目的基因，可通過逆轉(zhuǎn)錄法獲得基因B,再進(jìn)行擴(kuò)增以增加其數(shù)量；基因文庫中保存的是各基因片段，提取時(shí)無須使用限制 性核酸內(nèi)切酶；為使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在且能向下一代遺傳，應(yīng)先在體外使用 DNA1接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后再導(dǎo)入大腸桿菌。7. （2012四川卷）2.

7、將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長(zhǎng)激素的基因后，重新置入大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi)，通過發(fā)酵就能大量生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素。下列敘述正確的是A.發(fā)酵產(chǎn)生的生長(zhǎng)激素屬于大腸桿菌的初級(jí)代謝產(chǎn)物B.大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長(zhǎng)激素的變異可以遺傳C.大腸桿菌質(zhì)粒標(biāo)記基因中腺喋吟與尿喀咤含量相等D.生長(zhǎng)激素基因在轉(zhuǎn)錄時(shí)需要解旋酶和DNA1接酶【答案】B【解析】A初級(jí)代謝產(chǎn)物是微生物生長(zhǎng)必需的，而人的生長(zhǎng)激素不是大腸桿菌必需的，幫A錯(cuò)。B可遺傳的變異有基因突變、基因重組和染色體變異，大腸桿菌是原核生物，但其變異 來源是基因重組。C基因?yàn)橛羞z傳效應(yīng)的 DNA片段，不含有U。D轉(zhuǎn)錄時(shí)不需要形成磷酸二 酯鍵，不需要 DNA連接酶。8.

8、（2012全國(guó)卷新課標(biāo)版）40.現(xiàn)代生物科技專題（15分）根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回 答下列問題：（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有 和。（2 ）質(zhì)粒運(yùn)載體用 EcoRI切割后產(chǎn)生的片段如下：AATTC "G GCTTAA為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是 。（3）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即 DNA連接酶和 DNA!接酶。（4）反轉(zhuǎn)錄作用的模板是 ,產(chǎn)物是。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn) 錄產(chǎn)物，常采用 技術(shù)。（5 ）基因工程中除質(zhì)粒外， 和 也可作為運(yùn)載

9、體。（6）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受 體細(xì)胞，原因是。【解析】本題著重考查基因工程方面的知識(shí)。限制性核酸內(nèi)切酶可以將DNA分子切成兩種類型的末端，平末端和黏性末端。兩種不同酶切割之后便于相連，所產(chǎn)生的黏性末端必須相同。EcoliDNA連接酶可以連接黏性末端，T 4DNA1接酶可以連接兩種末端，反轉(zhuǎn)錄是以mRN朋模板逆轉(zhuǎn)錄先合成單鏈 DNA再合成雙鏈DNA利用P C R技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增?；?工程中可以選用質(zhì)粒，噬菌體、動(dòng)植物病毒做載體。當(dāng)受體細(xì)胞是細(xì)菌時(shí)，為了增大導(dǎo)入的成功率，常用Ca+處理，得到感受態(tài)細(xì)胞，此時(shí)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的通透性增大，容易吸收重

10、 組質(zhì)粒?！敬鸢浮浚? ）平末端和粘性末端（2 ）切割產(chǎn)生的 DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同 （3） T 4 Ecoli （4） mRNA單鏈DNAPCR （聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） （5 ）動(dòng)植物病毒入噬菌體的衍生物（6）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA的能力極弱9. （2012福建卷）32.現(xiàn)代生物科技專題肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基 因工程技術(shù)將let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)驗(yàn)表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工 程技術(shù)基本流程如圖1oI-I代代培界請(qǐng)回答:(1)進(jìn)行過程時(shí)，需用 酶切開載體以插入let-7基因。載體應(yīng)用RN

11、咪合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)let-7基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為。(2)進(jìn)行過程時(shí)，需用 酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于傳代培養(yǎng)。(3)研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響RAS的表達(dá)，其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析，可從細(xì)胞提取 進(jìn)行分子雜交，以直接檢測(cè)let-7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制，可能是由于細(xì)胞中 (RASmRNA/RAS白)含量減少引起的?！敬鸢浮?10分)(1)限制性核酸內(nèi)切酶(或限制) 啟動(dòng)子(2)胰蛋白(3) RNA RAS 蛋白【解析】(1)過程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，在該過程中需要用限制酶對(duì)載體進(jìn)行切割以便 于目的基因的插入(限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制酶，寫其他的不得分

12、)；啟動(dòng)子是一段特殊的DNA列，是RNAm合酶結(jié)合和識(shí)別的位點(diǎn)，RNA聚合酶結(jié)合到該位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程。(2)過程表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理，使 之分散成單個(gè)的細(xì)胞，之后分裝到其他培養(yǎng)瓶里面進(jìn)行傳代培養(yǎng)。(3)判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)來進(jìn)行，從細(xì)胞中提取mRNA口用放射性同位素或者熒光標(biāo)記的目的基因單鏈DN/#段進(jìn)行雜交。根據(jù)題中信息“肺組織細(xì)胞中的let-7 基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)就增強(qiáng)，引發(fā)肺癌”導(dǎo)入let7基因后， 肺癌細(xì)胞受到抑制，說明RAS基因表達(dá)減弱，導(dǎo)致細(xì)胞中的RAS蛋白質(zhì)含量減少進(jìn)而導(dǎo)致癌 細(xì)胞受抑制。10.

13、 (2012山東卷)35. (8分)【生物一現(xiàn)代生物科技專題】毛角蛋白n型中間絲(KIF n)基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn) KIF n基因 的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流程如圖。(1)過程中最常用的運(yùn)載工具是 ,所需要的酶是限制酶和 。(2)在過程中，用 處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中,將成纖維細(xì)胞置于 5%CO勺氣體環(huán)境中，CO的作用是 。(3)在過成中，用 處理以獲取更多的卵(母)細(xì)胞。成熟卵(母)細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行 處理。(4)從重組細(xì)胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是 。在胚胎移植前，通過 技術(shù)可獲得較多胚胎。答案：(1)質(zhì)粒DNA連接酶(2)胰蛋白酶(或

14、膠原蛋白酶)維持培養(yǎng)基(液)的 pH(3)促性腺激素(或促濾泡素，孕馬血清)去核(4)(早期)胚胎培養(yǎng)胚胎分割解析：本題綜合考查基因工程的基本工具、動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的基礎(chǔ)知識(shí)，考查 識(shí)圖、獲取信息與處理信息的能力?；蚬こ趟玫幕竟ぞ哂邢拗菩詢?nèi)切酶、DNA1接酶和運(yùn)載體，其中，常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒，也可用噬菌體衍生物和動(dòng)植物病毒。在動(dòng)物細(xì)胞工程中，若將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞，常用胰蛋白酶和膠原蛋白酶來處理；若進(jìn)行核移植，需先對(duì)卵母細(xì)胞培養(yǎng)到MH中期并做去核處理；動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)需要無菌無毒條件，一定的營(yíng)養(yǎng)條件，血漿血清和Q、CO氣體條件，其中的氣體CO主要用于維持培養(yǎng) 液的pH。在動(dòng)物胚胎

15、工程中，常用促性腺激素處理雌性個(gè)體而使其超數(shù)排卵；常采用核移植和早 期胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲得重組胚胎，并進(jìn)一步培育出克隆動(dòng)物， 常采用胚胎分割并移植技術(shù)獲得更多的優(yōu)良個(gè)體。11.(2012 天津卷，7) 7. (13分)生物分子間的特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實(shí)例為體外處理“蛋白質(zhì) -DNA復(fù)合體”獲得 DNM段信息的過程圖。據(jù)圖回答:(1)過程酶作用的部位是 鍵，此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA過程酶作用的部位是 鍵。(2)、兩過程利用了酶的 特性。(3)若將得到的DN*段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒， 需要過程的測(cè)序結(jié)果與 酶 的識(shí)別序列進(jìn)行對(duì)比，已確定選用何種酶。(4)如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為 R

16、NA®聚合，則其識(shí)別、結(jié)合DNA列位基因的 O(5)以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有 (多選)A.分離得到核糖體，用蛋白酶酶解后提rRNAB.用無水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素C.通過分子雜交手段，用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進(jìn)行染色體定位D.將抑制成熟基因?qū)敕?，其mRNAf催化成熟酶基因的 mRNAi補(bǔ)結(jié)合，終止后者翻譯，延遲果實(shí)成熟。【答案】(1)磷酸二酯鍵，肽鍵(2)專一(3)限制性DNArt切酶(4)啟動(dòng)子(5) ACD(1) 】(1) DNAB作用的部位是 DNA勺磷酸二酯鍵，蛋白酶作用的部位是肽鍵。(2) 過程利用了各種酶催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的

17、特性，即專一性。(3) DN醺構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要用限制性DNA內(nèi)切酶切割，再與質(zhì)粒重組。(4) RN咪合酶識(shí)別和結(jié)合在基因的啟動(dòng)子上，才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。(5) 蛋白酶能特異性的酶解蛋白質(zhì)，分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異性，抑制成熟基因轉(zhuǎn)錄出的 mRNAf催化成熟酶基因的 mRN艱基互補(bǔ)結(jié)合，也具有特異性，光和色素易溶于有機(jī)溶劑，與酒精并不是特異性的溶解，所以選 ABG12. (2012江蘇卷)32.圖1表示含有目的基因 D的DNM段長(zhǎng)度(bp即堿基對(duì))和部分 堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有 Msp I、BamH I、Mbo I、Sm a I 4種限制性核酸內(nèi)切酶

18、切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CJ CGG GJ GATCC J GATCCCCX GGG請(qǐng)回答下列問題：目的基因口. 、 rn"I ： 11*tiN 111 r GGATCC CjqCfiUG CCCGGG CGATCC CCTAGCjGGtiCCC CCTAGGi i 燈 曾71 i I位工 i i i i i i ii TiTI ii 534 bp - A 一 不嬴 bp1 65g bp-圖1連接。末端，其產(chǎn)物(1)圖1的一條脫氧核甘酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由(2)若用限制酶Sma I完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末4 長(zhǎng)度為。(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被 T-A堿基

19、對(duì)替換，那么基因 D就突變?yōu)榛騞o從雜 合子分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶 Sma I完全切割，產(chǎn)物中共有種不同DNA段。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因 D通過同種限制酶處理后進(jìn)行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后， 為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加 的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是。答案：(1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)平537bp、790bp、661bp(3) 4(4) BamH I抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因 D與質(zhì)粒反向連接解析：(1) DNA鏈中相

20、鄰兩個(gè)堿基之間通過“脫氧核糖一磷酸一脫氧核糖”連接。來源：中*教* 網(wǎng)z*z*s*tep(4) SmaI識(shí)別的序列為GGGCCC切割后會(huì)產(chǎn)生平末端；圖1所示的DN份子中含有兩個(gè)SmaI的識(shí)別位點(diǎn)，第一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在左端534bp序列向右三個(gè)堿基對(duì)的位置；第二個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在右端658bp序列向左三個(gè)堿基對(duì)的位置，從這兩個(gè)位點(diǎn)切割后產(chǎn)生的DNAt段長(zhǎng)度分別為534+3, 796-3-3 , 658+3,即得到的 DNAt段長(zhǎng)度分別為 537bp、790bp和661bp。(3)在雜合子體內(nèi)含有基因 /口基因d,基因D的序列中含有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)， 經(jīng)過SmaI完全切 割會(huì)產(chǎn)生537bp、790bp和661b

21、p三種不同長(zhǎng)度的片段， 基因d的序列中含有一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)， 經(jīng) 過切割后會(huì)產(chǎn)生1327bp和661bp兩種長(zhǎng)度的片段，綜上，雜合子中分離到該基因的 DN射段經(jīng) 過切割后會(huì)產(chǎn)生4種不同長(zhǎng)度的片段。（4）能夠獲取目的基因并切開質(zhì)粒的限制酶有識(shí)別序列為GGATCCBamH I和識(shí)別序列為GATCJMboI,若使用MboI會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)粒中的抗生素 A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以 要用BamH I來切割目的基因和質(zhì)粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。因?yàn)槟康幕蚝瓦\(yùn)載體是用同種限制酶切割的，目的基因兩端的末端和質(zhì)粒切割后的兩個(gè)末端都能進(jìn)行互補(bǔ)，可能出現(xiàn)目的基因反向

22、連接在運(yùn)載體上的情況， 導(dǎo)致基因M能正確表達(dá)。13. （2011年江蘇卷）33. （8分）請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問題:（1）利用PCRa術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與 細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似（如下圖所示）。圖 中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延 伸的基礎(chǔ)。從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有 引物A的DNA片段所占的比例為。在第 輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核甘酸鏈等長(zhǎng)的 DNA片段。（2）設(shè)計(jì)引物是PCR術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某 同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物（只標(biāo)注了部分堿基f /ininiiTnninnuinTiuiinnnniiniiiiTTTL笫一輪循環(huán)。退火lirnrrmr.u延林tnninnnnnnn

23、niniiniinnniniiinn *序列）都不合理（如下圖），請(qǐng)分別說明理由。|n 第1組引物，C A G G C T引物I I I I I IA G C C T GI引物 I I I I _I _II _I _I _I r第2組引物A A C T GC A G TT用物 u '_""_ii_i_i_rrC (t A C T G A T T A第1組：; 第2組：。（3） PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定 DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的 功能,這是因?yàn)?°（4）用限制酶EcoRV Mbol單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA段長(zhǎng)度如下

24、圖（1 kb即1000個(gè)堿基對(duì)），請(qǐng)?jiān)诖痤}卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV Mbol的切割位點(diǎn)。Mbo 2.5kb 3888S83388R8WEcoRVI4kb1 L5kbEcdRV 2.5kb Mbo5.5kbMgaKBMaMaagaiaMiaflfflaaaMM6kb答案：33 . (8分)(1)15/16 三(2)引物I和引物n局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效引物I '自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效Mb3(3) DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核甘酸連續(xù)結(jié) 合到雙鏈DNA片段的引物鏈上(4)見右圖14.(11 年，海南31)生物一一選修 3:現(xiàn)代生物科技專題(15分) 回答有關(guān)基因工程的問題：(1) 構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí)，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生 (相同，不同)粘性末端的限制酶。(2) 利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是 。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn) 化大腸桿菌時(shí)，常用 處理大腸桿菌，以利于表達(dá)載體進(jìn)入： 為了檢測(cè) 胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA可用標(biāo)記