革蘭氏染色的機(jī)理和步驟

1、1革蘭氏染色的機(jī)理和步驟機(jī)理：G+、G-主要由其CW化學(xué)成分的差異而引起對(duì)乙醇的通透性， 抗脫色能力的差異。主要有肽聚糖的厚度和結(jié)構(gòu)所決定。G+的CW:肽聚糖層厚，脂質(zhì)含量低。乙醇脫色時(shí) CW脫水，孔徑減 少，透性降低，不易脫色，呈初染得藍(lán)紫色。G-的CW:肽聚糖層薄，脂質(zhì)含量高。乙醇脫色時(shí)，類脂被乙醇溶解， 透性升高，細(xì)胞被復(fù)染顯紅色。步驟：涂片：在干凈的載玻片上滴一滴水，用接種環(huán)挑取菌體均勻 涂布于水中。 固定：將玻片靠近酒精燈火焰，蒸干水分，但不要烤焦。 初染：用堿性顏料結(jié)晶紫對(duì)菌液涂片進(jìn)行初染。 媒染：以碘液媒染1min，水洗，吸干水分。（細(xì)胞內(nèi)形成結(jié) 晶紫與碘的復(fù)合物，增強(qiáng)相互作用）

2、 脫色（關(guān)鍵步驟）：以95%的乙醇脫色30s,應(yīng)適當(dāng)振蕩均勻， 是乙醇脫色完全。 水洗，吸干。 復(fù)染：?（第 2張）復(fù)染30s，水洗吸干。 干燥鏡檢。2、用滲透皮層膨脹學(xué)說解說芽孢耐熱機(jī)制。芽孢的耐熱性在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽離子和水分的透性很差，以及皮層的離子強(qiáng)度很高，這就使皮層產(chǎn)生了極高的滲透壓去奪取芽孢核 心中水分，其結(jié)果造成皮層的充分膨脹和核心的高度失水，正是這種 失水的核心才賦予芽孢極強(qiáng)的耐熱性。3、引起微生物培養(yǎng)過程中 PH變化的幾種可能反應(yīng)，并說明如何能 夠維持微培PH穩(wěn)定。答：培養(yǎng)過程中，由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用，代謝產(chǎn)物的形成與積累， 會(huì)導(dǎo)致PH變化。（第2張中的圖）還與培養(yǎng)基的C/

3、N比有關(guān)，C/N高，經(jīng)培養(yǎng)基后PH顯著下降，C/N 低，經(jīng)培養(yǎng)基后PH明顯上升。PH調(diào)節(jié)：加入緩沖劑常用:一氫二氫磷酸鹽，K2HPO4呈堿性，KH2PC4酸性，只在一定的PH范圍內(nèi)調(diào)節(jié)（64-7.2） 大量產(chǎn)酸的菌株，加 CaCC3調(diào)節(jié)，CaCCb難溶于水，不會(huì)使培養(yǎng) 液的PH過度增加，但可不斷中和微生物產(chǎn)的酸。 培養(yǎng)液中存在天然的緩沖系統(tǒng)，如 AA，肽，Pr均屬兩性電解質(zhì)， 也起緩沖的作用。 過酸：治標(biāo)-加NaOH、Na2CO3中和，治本-加適量氮源： NaNO3、Pr、NH3 H2O;增加通風(fēng)量。 過堿：治標(biāo)-H2SO4、HCl中和，治本-加適量碳源:G類，脂 類;減小通風(fēng)量。3、抗生素法

4、和菌絲過濾法為何能濃縮營養(yǎng)缺陷型突變株？抗生素法（青霉素法）：適用于細(xì)菌。原理：青霉素抑制肽聚糖鏈間的交聯(lián)，組織了合成完整的CW，野生型B處于正常生長繁殖，所以 對(duì)青霉素敏感，可被抑制或殺死；營缺 B在基本培養(yǎng)基上休眠狀態(tài) 存活下來，從而達(dá)到濃縮營缺型目的。制霉菌素法適用于真菌，其可 與cm上？（第1張）醇作用，引起cm損傷，因?yàn)樗荒軞⑺郎L 繁殖著的真菌，所以菌絲過濾法：基本培上，野生型霉菌，？菌的孢子能萌發(fā)并長成菌絲， 而缺型孢子一般不萌發(fā)，或不能長成菌絲，因此培養(yǎng)一段時(shí)間后，用 滅菌脫脂棉或?yàn)V紙濾去菌絲，收集濾液，重復(fù)數(shù)遍后可除去大部分野 生型，從而4、生產(chǎn)蛋白酶的枯草芽孢桿菌發(fā)生遺傳

5、變異，使得產(chǎn)量性狀下降， 你如何解決？寫出具體實(shí)驗(yàn)方案。答：將一定量的枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液，做一定濃度的稀釋，涂布在含 有酪素蛋白質(zhì)的基本培養(yǎng)基上，37° C培養(yǎng)一段時(shí)間后，取出培養(yǎng)基, 觀察單菌落形成的透明圈大小，取透明圈直徑與菌落直徑之比較大的 菌落，挑取培養(yǎng)做進(jìn)一步的鑒定，即可得到高產(chǎn)蛋白酶的枯草芽孢桿 菌。5、以磺胺為例，說明化學(xué)治療機(jī)的作用機(jī)制。答：機(jī)理:磺胺是葉酸組成部分對(duì)氨基苯甲酸的結(jié)構(gòu)類似物，（磺胺類藥物取代對(duì)氨基苯甲酸，干擾葉酸的合成，抑制了轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)，導(dǎo)致代謝紊亂，從而抑制B生長），磺胺的抑菌作用是因?yàn)樵S多細(xì)菌需要 自己合成葉酸而生長，磺胺對(duì)人體細(xì)胞無毒性，因?yàn)槿梭w

6、缺乏從對(duì)氨 基苯甲酸合成葉酸的相關(guān)酶-二氫葉酸合成酶，不能用外界提供的 對(duì)氨基苯甲酸自行合成葉酸，而必須直接利用葉酸為生長因子進(jìn)行生 長。（磺胺類-與正常代謝產(chǎn)物競爭酶的活性中心，干擾了酶的功能，從而干擾代謝的正常進(jìn)行）。6、畫出生長曲線。（第1張）1、微生物的共性？哪個(gè)最基本？答：體積小，面積大（最基本）吸收多，轉(zhuǎn)化快生長旺，繁殖快思適應(yīng)性強(qiáng)，易變異分布廣，種類多。2、比較G+, G- B在CW結(jié)構(gòu)，組成，對(duì)溶菌酶，青霉素的敏感性 4方面的異同點(diǎn)。結(jié)構(gòu)成分對(duì)溶菌酶青霉素G+單層，組分簡單，厚肽聚糖（90% ）磷壁酸（10%）敏感生長期的G+對(duì)其敏感G-多層，組分復(fù)雜，薄內(nèi)壁層：肽聚糖外 膜：

7、脂多糖，磷脂， 脂蛋白敏感不敏感3、表型延遲現(xiàn)象？如何克服？答：表型延遲：表型的改變落后于？（第四張）改變的現(xiàn)象，分為分離性延遲；突變的？經(jīng)DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂后變成純合狀態(tài)，表 型才能表現(xiàn)出來。生理性延遲；雜合狀態(tài)t純合狀態(tài)，仍不能表現(xiàn) 出來，（如營缺型）通過中間培養(yǎng)（CM，培養(yǎng)過夜），可使突變？穩(wěn) 定下來，克服表型延遲。4、培養(yǎng)B常用的斜面培養(yǎng)基是什么？簡述配制程序。答：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基稱量;按配方依次準(zhǔn)確稱量融化：取少量水于燒杯中，加1%的蛋白 胨，加熱溶解，加0.5%的牛肉膏，加熱溶解，力口 0.5%的NaCI,熱熔, 加水補(bǔ)充到所需體積。調(diào)PH至7.6左右。加瓊脂固體2%,熱熔。分

8、裝入試管，加塞，包扎，高壓滅菌擱置斜面（斜面長度不超過 試管一半）無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入37° C的溫室中培養(yǎng)24-28h，以檢查滅菌是否徹底。5、啤酒酵母在分批發(fā)酵中的生長曲線分哪幾個(gè)時(shí)期？在菌種擴(kuò)培時(shí)，哪個(gè)時(shí)期做種子？為什么？答：延滯期，對(duì)數(shù)生長期，穩(wěn)定期，衰退期。對(duì)數(shù)期做種子。利于縮 短延滯期。6、菌種衰退的根本原因？防治措施？答：？的自發(fā)突變。措施：減少傳代次數(shù)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件采用不易衰退的菌種傳代米取良好的菌種保藏措施4、菌種衰退的根本原因，防止措施。如何區(qū)分衰退和飾變？答：根本原因：？的自發(fā)突變。（傳代次數(shù)的影響，是負(fù)突變株比 例占優(yōu)勢，培養(yǎng)條件）防止措施見上題。

9、區(qū)分：衰退：指隨著菌體的不斷生長，負(fù)突變菌株的數(shù)量占整個(gè)菌體 數(shù)量的比例增大，最終導(dǎo)致菌株的生產(chǎn)性能大幅下降的現(xiàn)象。原有形態(tài)性狀不典型，生長速率下降代謝產(chǎn)物生產(chǎn)力下降對(duì)宿主侵襲力下降抵抗力下降 飾變:遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)不發(fā)生變化，而只在轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)譯水平上的表型變化，可以同一條件繼續(xù)培養(yǎng)，觀察子代的情況。飾變特點(diǎn)：暫時(shí)性，不可遺傳性，表現(xiàn)為全部個(gè)體的行為。變異：遺 傳性，群體中極少數(shù)個(gè)體的行為。5、gone?突變的特點(diǎn)？答：自發(fā)性非對(duì)應(yīng)性稀有性（突變率 10-610-9）獨(dú)立性 可誘發(fā)性（升高1010A5倍）穩(wěn)定性可逆性（原養(yǎng)型 <=>突變型）6、v （第三張）的特點(diǎn)。答：形體微小，能通過細(xì)

10、胞濾器（0.22um）,電子顯微鏡下才能看 見不具有細(xì)胞機(jī)構(gòu)，主要成分 NA，PrV只含有一種核酸，DNA 或RNA無核糖體，即無產(chǎn)能酶系，也無 Pr,NA合成酶系，專性活 細(xì)胞內(nèi)寄生無個(gè)體生長，也不進(jìn)行二分裂，以NA,Pr等“元件”裝配，實(shí)現(xiàn)大量繁殖。離體下以無生命的生物大分子狀態(tài)存在對(duì)大 多數(shù)抗生素不敏感，對(duì)干擾素敏感。7、？月元病毒的致病機(jī)理。答：月元病毒是一種Pr侵染顆粒，僅有Pr組成，稱作PrP。細(xì)胞型PrP-PrPAc對(duì)蛋白酶敏感，無凝聚能力，而致病型 PrP-PrPAsc對(duì)蛋白酶有一定抗性，可凝集成纖維狀組織，PrPAsc進(jìn)入細(xì)胞后，與PrPAc結(jié)合，形成PrPAsc-PrPAc

11、復(fù)合體，PrPAc構(gòu)型發(fā) 生改變，轉(zhuǎn)化成PrPAsc, PrPAsc數(shù)量呈指數(shù)增加，其潛伏期長，對(duì)中 樞神經(jīng)損害嚴(yán)重。估菌計(jì)數(shù)法及其特點(diǎn)（筆記 P31）乳糖操縱子（P30）1、營養(yǎng)價(jià)值融化溫度C）凝固溫度C）常用C（%）瓊脂無96401.52.0明膠氮源35205122、伴孢晶體？它在何種B中產(chǎn)生？答：伴孢晶體：蘇云金芽孢桿菌等少數(shù)芽孢桿菌在其形成芽孢的同時(shí)， 會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體（5肉毒素）稱為伴孢晶體。對(duì)約200種昆蟲無為鱗翅目幼蟲有毒殺作用，可制成 B殺蟲劑。3、霉菌菌落的特征？答：質(zhì)地疏松，呈絮狀，網(wǎng)狀，絨毛狀，地毯狀。形態(tài)大，分為 局限性生長（青、曲）和蔓延

12、性生長（根毛）菌落干燥（孢子） 顏色豐富，正反顏色常不一致，中心與邊緣常不一致。各種霉菌， 在一定培養(yǎng)基上，形成的菌落大小，形狀，顏色相對(duì)穩(wěn)定，為分類依 據(jù)之一。4、利用磷酸鹽或碳酸鈣如何維持 PH穩(wěn)定性？答：磷酸氫二鉀略呈堿性，磷酸氫二鉀略呈酸性，兩物質(zhì)以等摩爾 濃度溶液PH為6.8,其緩沖能力一般在6.47.2范圍內(nèi)有效。磷酸氫二鉀+H陽離子-> 磷酸氫二鉀+K陽離子磷酸二氫鉀+K陽離子+0H- t磷酸氫二鉀+H20大量產(chǎn)酸的菌株，加入碳酸鈣調(diào)節(jié)，碳酸鈣難溶于水，不會(huì)使培養(yǎng) 基PH過度升高，但可不斷中和微生物產(chǎn)的酸，同時(shí)放出二氧化碳， 而降培養(yǎng)基PH控制在一定范圍。5、單倍體酵母細(xì)胞

13、經(jīng)？（第5張）誘變后，得到一系列的突變株， 欲從中分離篩選出一株（Leu-）,請?jiān)O(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)程序。答：淘汰型野生型t （制霉菌素法檢出t鑒定（濾紙片法） 將單倍體酵母細(xì)胞突變株，制成菌懸液，均勻涂布于完全培養(yǎng)基上， 長成單個(gè)菌落之后，以逐個(gè)檢出的方式接種于完全培養(yǎng)基上，并影印到基本培養(yǎng)基上，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，在完全培養(yǎng)基上生長， 而在基本培養(yǎng)基上不生長的，即為營養(yǎng)缺陷型菌株。將此菌株檢出離 心，水洗之后制成適當(dāng)濃度的菌懸液，與基本培養(yǎng)基均勻混合后，傾 注于平板中，干燥凝固之后，在板上劃分幾個(gè)區(qū)，在區(qū)中加入蘸有色 AA的濾紙片，經(jīng)培養(yǎng)后，在紙片周圍有渾濁的生長圈的，說明為色 AA營養(yǎng)缺

14、陷株。6、MR,V.P實(shí)驗(yàn)的原理。答：MR :用來檢測由G產(chǎn)生的有機(jī)酸，如甲酸，乙酸，孚L酸等，細(xì) 菌代謝糖產(chǎn)酸，PH降低，甲基紅指示劑由橙色（PH=6.3）變成紅色（PH=4.2）大腸桿菌-陽性：利用乳糖產(chǎn)生乳酸，培養(yǎng)后 PH<4.5大腸桿菌-陰性：早起產(chǎn)有機(jī)酸，后轉(zhuǎn)化有機(jī)酸t(yī)乙醇，丙酮酸。V.P.用來測定細(xì)菌利用 G產(chǎn)生非酸性或中性末端產(chǎn)物的能力，如 丙酮酸。丙酮酸經(jīng)縮合T乙酰甲基甲醇（經(jīng)堿性、氧化）7二乙酰。 二乙酰與蛋白胨中精AA中胍基作用，生成紅色化合物，產(chǎn)氣腸桿菌 -陽性，大腸桿菌-陰性。7、什么叫生長曲線？單細(xì)胞微生物的典型生長曲線分幾期？劃分依 據(jù)？答：生長曲線：將少量純

15、種單細(xì)胞微生物接種到定量的液體培養(yǎng)基中， 定時(shí)取樣測定細(xì)胞數(shù)量，以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐 標(biāo)作圖，得到一條反應(yīng)在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。分為延滯期，對(duì)數(shù)期，穩(wěn)定期，衰亡期。根據(jù)生長速率常數(shù)劃分，即單位時(shí)間內(nèi)分裂次數(shù)的不同。8為什么誘變時(shí)，要制成充分分散的單細(xì)胞或單孢子懸液？對(duì)放線菌進(jìn)行誘變育種時(shí)，宜處理其孢子還是菌絲細(xì)胞？為什么？答：使每個(gè)細(xì)胞均勻接觸誘變劑，減少表型延遲現(xiàn)象，并避免長出不純菌落。多使用單核無性孢子，由于孢子生理上處于休眠狀態(tài)，單核區(qū)基中了大部分的DNA，減少分離表型延遲，提高突變效果。培養(yǎng)基原則：目的明確適宜的營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適控制 PH條件控制氧化

16、還原電位原料來源經(jīng)濟(jì)節(jié)約滅菌處理1、青霉素的作用機(jī)制？答：原理：B-內(nèi)酰胺環(huán)的結(jié)構(gòu)與肽聚糖單體五肽尾末端的 D-Ala-D-Ala二肽結(jié)構(gòu)相近，因而可競爭性的抑制轉(zhuǎn)肽酶的活性，抑制單體間交聯(lián)，形成缺損的 CW。青霉素對(duì)生長旺盛的 G+有明顯的抑制作用，對(duì)休眠期的無抑制，對(duì) G+的作用比G-強(qiáng)得多。2、篩選抗代謝結(jié)構(gòu)類似物突變株的意義是什么？答：在含有較高濃度終代謝結(jié)構(gòu)類似物的培養(yǎng)基中，野生型細(xì)胞不能生長，而遺傳性的解除了反饋抑制或反饋?zhàn)栌龅目勾x結(jié)構(gòu)類似物突 變株則能生長，突變株在終產(chǎn)物累積的情況下仍然可以不斷合成這一 產(chǎn)物，所以采取一定的方法，篩選到抗代謝結(jié)構(gòu)類似物突變株，即可 獲得終產(chǎn)物的

17、高產(chǎn)菌株。3、釀酒酵母生活史。（同P15）4、烈性噬菌體？生活史包括幾個(gè)過程？答：感染宿主細(xì)胞后能在細(xì)胞內(nèi)正常復(fù)制并引起宿主細(xì)胞迅速裂解的噬菌體。吸附-侵入-增殖（NA復(fù)制，Pr的生物合成）-裝配（成熟）-裂 解（釋放）5、縮短延滯期的措施答：利用遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性，使延滯期縮短，利用對(duì) 數(shù)生長期的細(xì)胞做種子，盡量使接種前后使用的培養(yǎng)基組成不要相 差太大適當(dāng)擴(kuò)大接種量6、計(jì)算代時(shí)（G）,繁殖代數(shù)（n）,生長速率常數(shù)（R）答：見第七張7、誘變育種？舉例非電離輻射誘變劑電離輻射誘變劑烷化劑插入誘變劑間接引起堿基置換的誘變劑答：誘變育種：指利用物理或化學(xué)誘變劑處理微生物群體細(xì)胞，促進(jìn) 其突變

18、率顯著提高，然后從中選取少數(shù)符合育種目的的突變株的方 法。紫外線x射線，丫射線EMS，NTG吖啶類顏料，ICR類堿 基類似物（5-BU等）（直接引起：亞硝酸 G:C<->A:T,羥胺:只引起G:C<->A:T烷 化劑 G:C<->A:T）8什么是鑒別培養(yǎng)基？利用 EMB培養(yǎng)正常大腸桿菌和沙門氏菌時(shí)， 菌落現(xiàn)象？為什么？答;鑒別培養(yǎng)基：用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)集中加 入能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顏色反應(yīng)的指示劑，從而用肉眼就能將該種微生物的菌落與外形相似的其他微生物菌落相區(qū)分的培養(yǎng) 基。伊紅和美藍(lán)在低酸度時(shí)結(jié)合形成沉淀，起產(chǎn)酸指示劑作用，大腸桿

19、菌 強(qiáng)烈分解乳糖而產(chǎn)生大量混合酸，菌落被染成深紫色，還可看到綠色 金屬閃光。沙門氏菌不能利用乳糖，菌落無色通明。1、微生物的產(chǎn)能方式有？與食品發(fā)酵工業(yè)密切相關(guān)的微生物的代謝方式有哪幾種？答：微生物產(chǎn)能方式分為：發(fā)酵，有氧呼吸，無氧呼吸。與食品發(fā)酵工業(yè)密切相關(guān)的發(fā)酵，實(shí)質(zhì)是底物水平磷酸化，底物氧 化不徹底，產(chǎn)能水平低，為厭氧條件，兼性厭氧菌在有氧的條件下, 從發(fā)酵T呼吸作用，對(duì)發(fā)酵作用抑制（巴氏效應(yīng)）2、高壓蒸汽滅菌法的操作步驟和注意事項(xiàng)？答：步驟：取出內(nèi)層鍋，外層鍋加水至與三角擱架相平放回內(nèi)層 鍋，放入帶滅菌物品，加蓋并將蓋上排氣軟管插入內(nèi)層鍋打開加熱 開關(guān)，并同時(shí)打開排氣閥3-5Min關(guān)上排

20、氣閥，溫度升至121C計(jì)時(shí)， 控制熱源119-123C 15-20min關(guān)上開關(guān)，斷電后壓力降0開蓋取物 無菌檢查注意；切勿忘記加水，水量不可過少三角瓶，試管口不要與桶壁接觸切勿忘記打開排氣閥排鍋內(nèi)空氣壓力降為0才能打開排氣閥，開蓋3、培養(yǎng)基應(yīng)包括哪幾種營養(yǎng)物質(zhì)？如何控制 PH?答；碳源，氮源，能源，生長因子，無機(jī)鹽，水治標(biāo) 過酸-NaOH、NH3 H20,過堿-H2SO4、HCI治本 酸-加氮源，增大通風(fēng)量，堿-加堿？（第8張）源，減小通風(fēng)量加緩沖劑：加碳酸鈣4、如何延長對(duì)數(shù)生長期？答;補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)，調(diào)整PH,取走代謝產(chǎn)物，改善物化條件，調(diào)整營養(yǎng)配比，C/N比4/1時(shí)，菌體大量繁殖。5、簡述

21、烈性噬菌體一步生長曲線制作過程，并繪制曲線圖。答:適量噬菌體接種于培養(yǎng)好的高濃度敏感細(xì)胞中，經(jīng)數(shù)min吸附后，將培養(yǎng)物高倍稀釋，或加入抗 V抗血清，中和給定時(shí)間內(nèi)未吸 附的噬菌體，從而使因吸附噬菌體建立同步感染適溫下繼續(xù)培養(yǎng)， 定時(shí)取樣，測樣品中V的效價(jià)。感染T橫坐標(biāo)，V效價(jià)縱坐標(biāo)，繪 制定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的試驗(yàn)曲線。（曲線見第9張）6、利用物理化學(xué)誘變劑對(duì)微生物進(jìn)行誘變的目的有哪些？中間培養(yǎng) 的目的？用簡圖表示利用EMS對(duì)微生物進(jìn)行誘變育種的過程？答：誘變育種目的：獲得高產(chǎn)菌株抗性突變種營養(yǎng)缺陷型突變 株（檢致癌物，高產(chǎn)次代產(chǎn)物 ） 中間培養(yǎng)為了克服表型延遲現(xiàn)象。EMS （甲基磺酸乙

22、酯）烷化劑直接引起堿基置換（烷化后的堿基引起堿基配對(duì)錯(cuò)誤，也能使嘌呤整體直接從DNA鏈上脫下來，產(chǎn)生一個(gè)缺口，在與缺口相對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)上，就能配上任何 堿基，從而引起轉(zhuǎn)換或顛換）選擇出發(fā)菌株-前培養(yǎng)，制作菌懸液- EMS合適劑量誘變處理-中 間培養(yǎng)t初篩培養(yǎng)基涂布t劃線分離t菌種鑒定7、簡圖表示兩親株細(xì)胞（A+B-、A-B+ ）進(jìn)行原生質(zhì)體融合的操作示 意圖，并對(duì)主要步驟作簡要說明。答：見第9張常用培養(yǎng)基：細(xì)菌-牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（PH7-7.5）放線菌-高氏1號(hào)培養(yǎng)基（PH7-7.5）酵母菌-麥芽汁培養(yǎng)基 （PH4.5-5,5）霉菌-查氏合成培養(yǎng)基（PH4.5-5,5）1、放線菌的培養(yǎng)：28C, 3-5d, PH=77.5 染色：碳酸復(fù)紅 染1min觀察：（鏈霉菌）菌落干燥緊密，正反顏色不一致，邊緣有輻射狀皺 褶，小不蔓延，不易挑起。2、 酵母菌培養(yǎng)：2528C, 24h, PH=4.55.5,染色：美藍(lán)-活體染色