新課標高中生物實驗知識點(共8頁)

1、精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上高中生物實驗知識點總結 整理者：吳海媛實驗一：使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞（必修一P7）1是低倍鏡還是高倍鏡的視野大，視野明亮？為什么？低倍鏡的視野大，通過的光多，放大的倍數(shù)小；高倍鏡視野小，通過的光少，但放大的倍數(shù)高。2.為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察？如果直接用高倍鏡觀察，往往由于觀察的對象不在視野范圍內而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察。3.用轉換器轉過高倍鏡后，轉動粗準焦螺旋行不行？不行。用高倍鏡觀察，只需轉動細準焦螺旋即可。轉動粗準焦螺旋，容易壓壞玻片。4.

2、使用高倍鏡觀察的步驟和要點是什么？答：（1）首先用低倍鏡觀察，找到要觀察的物像，移到視野的中央。（2）轉動轉換器，用高倍鏡觀察，并輕輕轉動細準焦螺旋，直到看清楚材料為止。5.總結：四個比例關系a.鏡頭長度與放大倍數(shù)：物鏡鏡頭越長，放大倍數(shù)越大，而目鏡正好與之相反。b.物鏡鏡頭放大倍數(shù)與玻片距離：倍數(shù)越大（鏡頭長）距離越近。c.放大倍數(shù)與視野亮度：放大倍數(shù)越大，視野越暗。d.放大倍數(shù)與視野范圍：放大倍數(shù)越大，視野范圍越小。實驗二  檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質（必修一P18）一、實驗原理：某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應。1可溶性還原糖（如葡萄糖、果

3、糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。葡萄糖+ Cu(OH)2  葡萄糖酸 + Cu2O（磚紅色）+ H2O，即Cu(OH)2被還原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 2脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色（或被蘇丹染液染成紅色）。淀粉遇碘變藍色。3蛋白質與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應。（蛋白質分子中含有很多肽鍵，在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用，產(chǎn)生紫色反應。）二 實驗材料1做可溶性還原性糖鑒定實驗，應選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。（因為組織的顏色較淺，易于觀察。）2做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實驗前

4、一般要浸泡34小時（也可用蓖麻種子）。3做蛋白質的鑒定實驗，可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清。三、實驗注意事項1. 可溶性糖的鑒定a.應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存，使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑；斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時，生成的Cu(OH)2在7090下分解成黑色CuO和水；b. 切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應，無Cu(OH)2生成。2. 蛋白質的鑒定a. A液和B液也要分開配制，儲存。鑒定時先加A液后加B液；先加NaOH溶液，為Cu2+與蛋白質反應提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入，會導致Cu2+

5、變成Cu(OH)2沉淀，而失效。b. CuSO4溶液不能多加；否則CuSO4的藍色會遮蓋反應的真實顏色。c. 蛋清要先稀釋；如果稀釋不夠，在實驗中蛋清粘在試管壁，與雙縮脲試劑反應后會粘固在試管內壁上，使反應不容易徹底，并且試管也不易洗干凈。3.斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別：斐林試劑雙縮脲試劑試劑的成分0.1g/mLNaOH溶液0.1g/mLNaOH溶液（雙縮脲試劑A）0.05g/mLCuSO4溶液0.01g/mLCuSO4溶液（雙縮脲試劑B）是否混合混合后再滴加先加雙縮脲試劑A后加雙縮脲試劑B是否加熱水浴加熱不加熱 *考點提示： （1）常見還原性糖與非還原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麥

6、芽糖都是還原性糖；淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。 （2)還原性糖植物組織取材條件？ 含糖量較高、顏色為白色或近于白色，如：蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。 （3)研磨中為何要加石英砂？不加石英砂對實驗有何影響？ 加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少，使鑒定時溶液顏色變化不明顯。 （4）斐林試劑甲、乙兩液的使用方法？混合的目的？為何要現(xiàn)混現(xiàn)用？ 混合后使用；產(chǎn)生氫氧化銅；氫氧化銅不穩(wěn)定。 （5)還原性糖中加入斐林試劑后，溶液顏色變化的順序為？ 淺藍色 棕色 磚紅色 （6）花生種子切片為何要??？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于顯微鏡的觀察。 （7）轉動細準焦螺旋時

7、，若花生切片的細胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片的厚薄不均勻。 （8）脂肪鑒定中乙醇作用？ 洗去浮色。 （9）雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用？先加A液的目的？怎樣通過對比看顏色變化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈堿性；先留出一些大豆組織樣液做對比。實驗三：觀察DNA、RNA在細胞中的分布（必修一P26）實驗原理：1甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色，可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布。2鹽酸能夠改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色體中的DNA

8、和蛋白質分離，有利于DNA與染色劑結合。分布：真核生物DNA主要分布在細胞核中，線粒體和葉綠體內也含有少量的DNA；RNA主要分布在細胞質中。 過程：制片水解沖洗涂片染色觀察實驗結果: 細胞核呈綠色,細胞質呈紅色. 體驗制備細胞膜的方法（必修一P40）實驗材料：人和其他哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核和眾多的細胞器，用這樣的紅細胞做實驗材料就只有細胞膜一種膜結構。實驗四：通過模擬實驗探究膜的透性（必修一P60）在一個長頸漏斗的漏斗口外密封上一層玻璃紙，往漏斗內注入蔗糖溶液，然后將漏斗浸入盛有清水的燒杯中，使漏斗管內外的液面高度相等。過一段時間后，漏斗內液面上升。玻璃紙（又叫賽璐玢）是一種半透膜

9、，水分子可以透過它，而蔗糖分子則不能。討論：1.漏斗管內的液面為什么會升高？由于單位時間內透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數(shù)量多于從長頸漏斗滲出的水分子數(shù)量，使得管內液面升高。2.如果用一層紗布代替玻璃紙，漏斗管內的液面還會升高嗎？用紗布代替玻璃紙時，因紗布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不會升高。3.如果燒杯中不是清水，而是同樣濃度的蔗糖溶液，結果會怎樣？半透膜兩側溶液濃度相等時，單位時間內透過半透膜進入長頸漏斗的水分子數(shù)量等于滲出水分子數(shù)量，液面不會升高。實驗五：用高倍顯微鏡觀察線粒體和葉綠體（必修一P47）一 實驗原理：1.葉綠體的辨認依據(jù)：葉綠體是綠色的，呈扁平的橢圓球形或球

10、形。2.線粒體辨認依據(jù)：線粒體的形態(tài)多樣，有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。3.健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料，可以使活細胞中線粒體呈現(xiàn)藍綠色二 實驗材料：觀察葉綠體時選用：蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是：葉子薄而小，葉綠體清楚，可取整個小葉直接制片，所以作為實驗的首選材料。若用菠菜葉作實驗材料，要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細胞不含葉綠體。三 討論1.細胞質基質中的葉綠體，是不是靜止不動的？為什么？答：不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動，這種運動能隨時改變橢球體的方向，使葉綠體既能接受較多光照，又不至于被強光灼傷。2、葉綠體的形態(tài)和分布，與葉綠體的功能

11、有什么關系？答：葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細胞中的葉綠體比下面的多，這可以接受更多的光照。實驗六 觀察植物細胞的吸水和失水（必修一P61“探究”）觀察植物細胞的質壁分離和復原一 實驗原理：1質壁分離的原理：當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞就會通過滲透作用而失水，細胞液中的水分就透過原生質層進入到溶液中，使細胞壁和原生質層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質層比細胞壁的收縮性大，當細胞不斷失水時，原生質層就會與細胞壁分離。2質壁分離復原的原理：當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，細胞就會通過滲透作用而吸水，外界溶液中

12、的水分就通過原生質層進入到細胞液中，整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài)，緊貼細胞壁，使植物細胞逐漸發(fā)生質壁分離復原。二  實驗材料和方法：紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色，易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質壁分離劑對細胞無毒害作用。質壁分離的方法(引流法)：制作洋蔥鱗片葉外表皮的臨時裝片。然后，從蓋玻片的一側滴入0.3g/ml的蔗糖溶液，在蓋玻片的另一側用吸水紙吸引。這樣重復幾次即可。    質壁分離復原的方法：改用清水實驗。1、條件：細胞內外溶液濃度差，活細胞，大液泡 2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞（具紫色

13、大液泡），質量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。 3、步驟：制作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片觀察蓋玻片一側滴蔗糖溶液,另一側用吸水紙吸引觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質層與細胞壁分離)蓋玻片一側滴清水, 另一側用吸水紙吸引觀察(質壁分離復原) 4、結論: 細胞外溶液濃度 細胞內溶液濃度，細胞失水 質壁分離 細胞外溶液濃度 細胞內溶液濃度，細胞吸水 質壁分離復原 知識概要：制片 觀察 加液 觀察 加水 觀察 考點提示： （1）洋蔥為何要選紫色的？若紫色過淡怎么辦？ 紫色的洋蔥有紫色的大液泡，便于觀察液泡的大小變化；縮小光圈，使用平面鏡，使視野變暗些。 （2）洋蔥表皮應撕還是削？為何？

14、 表皮應撕不能削，因為削的表皮往往太厚。 （3）植物細胞為何會出現(xiàn)質壁分離？ 動物細胞會嗎？ 當細胞失去水分時，其原生質層的伸縮性大于細胞壁的伸縮性；動物細胞不會發(fā)生質壁分離，因為動物細胞沒有細胞壁。 （4）質壁分離時，液泡大小和顏色的變化？復原時呢？ 細胞發(fā)生質壁分離時，液泡變小，紫色加深；當細胞質壁分離復原時，液泡變大，紫色變淺。 （5）若發(fā)生質壁分離后的細胞，不能發(fā)生質壁分離復原，其原因是什么？ 細胞已經(jīng)死亡（可能是外界溶液濃度過大，細胞失水過多或質壁分離時間過長） （6）高倍鏡使用前，裝片如何移動？ 若要把視野中上方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續(xù)向上移動。若要把視野中左方的物像

15、移到視野的正中心，則要將裝片繼續(xù)向左方移動，因為顯微鏡視野 中看到的是倒像。 （7）換高倍物鏡后，怎樣使物像清晰？視野明暗度會怎樣變化？如何調亮？換高倍物鏡后，應調節(jié)細準焦螺旋使物像變得清晰；視野會變暗，可調大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。 （8）所用目鏡、物鏡的長度與放大倍數(shù)的關系？ 目鏡越長，放大倍數(shù)越?。晃镧R越長，放大倍數(shù)越大。 （9）物像清晰后，物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數(shù)的關系？ 物鏡與載玻片之間的距離越小，放大倍數(shù)越大。 （10)總放大倍數(shù)的計算方法？放大倍數(shù)具體指面積的放大倍數(shù)還是長度的放大倍數(shù)？ 總放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積；放大倍數(shù)是指細小物體長

16、度或寬度的放大倍數(shù)。 （11）放大倍數(shù)與視野中細胞大小、多少、視野明暗的關系？ 放大倍數(shù)越大，視野中細胞越大、數(shù)目越少、視野越暗。 （12） 更換目鏡，若異物消失，則異物在目鏡上；更換物鏡，若異物消失，則異物在物鏡上、移動載玻片，若異物移動，則異物在載玻片上。 （13）怎樣利用質壁分離現(xiàn)象來測定植物細胞液的濃度？ 配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液 分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細胞的臨時裝片 用顯微鏡觀察某植物細胞是否發(fā)生質壁分離。某植物細胞液的濃度就介于不能引起質壁分離的濃度和能引起質壁分離的濃度之間。三  討論   1如果將上述表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相

17、同的蔗糖溶液中，這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？答：表皮細胞維持原狀，因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。2當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發(fā)生質壁分離？為什么？答：不會。因為紅細胞不具細胞壁。實驗七 比較過氧化氫在不同條件下的分解（必修一P78）探究影響酶活性的因素一 實驗原理鮮肝提取液中含有過氧化氫酶，過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經(jīng)計算，質量分數(shù)為3.5%的FeCl3溶液和質量分數(shù)為20%的肝臟研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù)，大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。二 實驗注意事項1.不讓H2O2接觸皮膚，H2O2有一定的腐蝕性2

18、. 不可用同一支滴管，由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶，會影響實驗準確性3.肝臟研磨液必須是新鮮的，因為過氧化氫酶是蛋白質，放置過久，可受細菌作用而分解，使肝臟組織中酶分子數(shù)減少，活性降低4.肝臟研磨要充分，研磨可破壞肝細胞結構，使細胞內的酶釋放出來，增加酶與底物的接觸面積。實驗七 影響酶活性的條件（必修一P83）實驗原理：1淀粉遇碘后，形成紫藍色的復合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖，麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。注：市售a-淀粉酶的最適溫度約60實驗八 探究酵母菌的呼吸方式（必修一P91） 實驗原理：1.酵母菌是一種單細胞真菌，在有氧和無

19、氧的條件下都能生存，屬于兼性厭氧菌，因此便于用來研究細胞呼吸的不同方式。方程式（略）2.CO2可使澄清石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變成黃色的時間長短，可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。3.橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇（酒精）發(fā)生化學反應，在酸性條件下，變成灰綠色。注意事項：增加水中氧氣的方法：用橡皮球或氣泵通入空氣，并用NaOH溶液除去空氣中的CO2實驗九  葉綠體色素的提取和分離（必修一P97）一  實驗原理與方法1色素的提取原理：葉綠體中的色素是有機物，不溶于水，易溶于無水乙醇等有機溶劑中。提取

20、方法：用無水乙醇等能提取色素。2色素分離的原理：層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。葉綠體中的色素不只一種，它們都能溶解在層析液中。然而，它們在層析液中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散得快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。分離方法：紙層析法。用毛細吸管在濾紙條的下端沿鉛筆線劃一條濾液細線，待濾液干后再劃一兩次，然后將濾紙條插入層析液中（濾液細線不能接觸層析液）。分離結果：濾紙條上從上到下出現(xiàn)四條色素帶：橙黃色（最窄，胡蘿卜素）、黃色（葉黃素）、藍綠色（最寬，葉綠素a）、黃綠色（葉綠素b）。胡蘿卜素與葉黃素之間距離最大，葉綠素a與葉綠素b之間距離最小。二 實驗注意事項1.加SiO2

21、為了研磨得更充分。2.加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。因為葉綠素含鎂，可被細胞液中的有機酸產(chǎn)生的氫代替，形成去鎂葉綠素，CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機酸，防止葉綠體被破壞。3.加無水乙醇是因為葉綠體色素易溶于無水乙醇等有機溶劑。三 實驗討論： 1濾紙條上的濾液細線，為什么不能觸及層析液？答：濾紙條上的濾液細線如觸及層析液，濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中，實驗就會失敗。2提取和分離葉綠體色素的關鍵是什么？答：提取葉綠體色素的關鍵是：葉片要新鮮、濃綠；研磨要迅速、充分；濾液收集后，要及時用棉塞將試管口塞緊，以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關鍵是：一是濾液細線要細且直，而且要重復劃幾次

22、；二是層析液不能沒及濾液線。實驗十 觀察有絲分裂 1、材料：洋蔥根尖（蔥，蒜） 2、步驟：（一）洋蔥根尖的培養(yǎng) （二）裝片的制作 制作流程：解離漂洗染色制片 1. 解離: 藥液: 質量分數(shù)為15%的鹽酸,體積分數(shù)為95%的酒精(1 : 1混合液). 時間: 35min .目的: 使組織中的細胞相互分離開來. 2. 漂洗: 用清水漂洗約3min. 目的: 洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色. 3. 染色: 用質量濃度為0.01g / mL或0.02g / mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3 5min 目的: 使染色體著色,利于觀察. 4. 制片: 將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把

23、根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片. 然后用拇指輕輕地按壓載玻片. 目的: 使細胞分散開來,有利于觀察. （三）觀察 1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細胞：細胞呈正方形，排列緊密,有的細胞正在分裂。 2、換高倍鏡下觀察：分裂中期分裂前、后、末期分裂間期。（注意各時期細胞內染色體形態(tài)和分布的特點）。其中，處于分裂間期的細胞數(shù)目最多。 *考點提示： （1)培養(yǎng)根尖時，為何要經(jīng)常換水？ 增加水中的氧氣，防止根進行無氧呼吸造成根的腐爛。 （2）培養(yǎng)根尖時，應選用老洋蔥還是新洋蔥？為什么？ 應選用舊洋蔥，因為新洋蔥尚在休眠，不易生根。 （3）為何每條根只能用根尖？取根尖的最佳時間是何時？為何？

24、 因為根尖分生區(qū)的細胞能進行有絲分裂；上午10時到下午2時；因為此時細胞分裂活躍。 （4）解離和壓片的目的分別是什么？壓片時為何要再加一塊載玻片？ 解離是為了使細胞相互分離開來，壓片是為了使細胞相互分散開來；再加一塊載玻片是為了受力均勻，防止蓋玻片被壓破。 （5）若所觀察的組織細胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？ 壓片時用力過大。 （6)解離過程中鹽酸的作用是什么？丙酮可代替嗎？ 分解和溶解細胞間質；不能，而硝酸可代替。 （7)為何要漂洗？ 洗去鹽酸便于染色。 （8)細胞中染色最深的結構是什么？ 染色最深的結構是染色質或染色體。 （9）若所觀察的細胞各部分全是紫色，其原因是什么？ 因為在根

25、尖只有分生區(qū)的細胞能夠進行細胞分裂；分生區(qū)的特點是：細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞處于分裂狀態(tài)；不能用高倍鏡找分生區(qū)，因為高倍鏡所觀察的實際范圍很小，難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。 （10）為何要找分生區(qū)？分生區(qū)的特點是什么？用高倍物鏡找分生區(qū)嗎？為什么？ 染液濃度過大或染色時間過長。 （11）分生區(qū)細胞中，什么時期的細胞最多？為什么？ 間期；因為在細胞周期中，間期時間最長。 （12）所觀察的細胞能從中期變化到后期嗎？為什么？ 不能，因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。 （13）觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體？為什么？ 不能，因為洋蔥表皮細胞一般不分裂。 （14）若觀察時不能看到染色體，其原因是什

26、么？ 沒有找到分生區(qū)細胞；沒有找到處于分裂期的細胞；染液過??；染色時間過短。實驗十一  細胞大小與物質運輸?shù)年P系（必修一P110）模擬探究細胞表面積與體積的關系一實驗原理：用瓊脂塊模擬細胞。瓊脂塊中含有酚酞，與NaOH相遇，呈紫紅色，可顯示物質（NaOH）在瓊脂塊中的擴散速度。方法：用含酚酞的瓊脂塊模擬細胞。2、現(xiàn)象：NaOH和酚酞相遇呈紫紅色。二.結論：瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減??；NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。實驗十二 觀察細胞的減數(shù)分裂 1、目的要求：通過觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片，識別減數(shù)分裂不同階段的染色體的形態(tài)、位

27、置和數(shù)目，加深對減數(shù)分裂過程的理解。 2、材料用具：蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片，顯微鏡。 3、方法步驟： （1）在低倍鏡下觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片，識別初級精母細胞、次級精母細胞和精細胞。 （2）先在低倍鏡下依次找到減數(shù)第一次分裂中期、后期和減數(shù)第二次分裂中期、后期的細胞，再在高倍鏡下仔細觀察染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目。 4、討論：（1）如何判斷視野中的一個細胞是處于減數(shù)第一次分裂還是減數(shù)第二次分裂？ （2）減數(shù)第一次分裂與減數(shù)第二次分裂相比，中期細胞中的染色體的不同點是什么？末期呢？ 實驗十三 低溫誘導染色體加倍 1、原理：用低溫處理植物分生組織細胞，能夠抑制紡錘體的形成，以致影響染

28、色體被拉向兩極，細胞也不能分裂成兩個子細胞，于是，植物細胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。 2、方法步驟： （1）洋蔥長出約1cm左右的不定根時，放入冰箱的低溫室內（4），誘導培養(yǎng)36h。 （2）剪取誘導處理的根尖約0.51cm，放入卡諾氏液中浸泡0.51 h，以固定細胞的形態(tài)，然后用體積分數(shù)為95%的酒精沖洗2次。 （3）制作裝片：解離漂洗染色制片 （4）觀察，比較:視野中既有正常的二倍體細胞,也有染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞. 3、討論：秋水仙素與低溫都能誘導染色體數(shù)目加倍，這兩種方法在原理上有什么相似之處？ 實驗十四 調查常見的人類遺傳病 1、 要求：調查的群體應足夠大；選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳

29、病。如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等. 2、 方法: 分組調查,匯總數(shù)據(jù),統(tǒng)一計算. 3、計算公式：某種遺傳病的發(fā)病率= （患病人數(shù)/被調查人數(shù)）×100% 4、討論: 所調查的遺傳病的遺傳方式, 發(fā)病率是否與有關資料相符, 分析原因. 實驗十五 探究植物生長調節(jié)劑對扦插枝條生根的作用 1、常用的生長素類似物:NAA(萘乙酸), 2,4-D, IPA(苯乙酸). IBA(吲哚丁酸)等 2、方法： 浸泡法：把插條的基部浸泡在配置好的溶液中，深約3cm，處理幾小時或一天。處理完畢就可以扦插了。這種處理方法要求溶液的濃度較低，并且最好是在遮蔭和空氣濕度較高的地方進行處理。 沾

30、蘸法：把插條的基部在濃度較高的藥液中蘸一下（約5s），深約1.5cm即可。 3、預實驗：先設計一組濃度梯度較大的實驗進行探索,在此基礎上設計細致的實驗. 4、實驗設計的幾項原則: 單一變量原則(只有溶液的濃度不同)；等量原則(控制無關變量,即除溶液的濃度不同外,其他條件都相同)；重復原則(每一濃度處理35段枝條) ；對照原則（相互對照、空白對照）；科學性原則 實驗十六 模擬尿糖的檢測1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、檢測方法：斐林試劑（水浴加熱）或班氏試劑或尿糖試紙 3、結果：（用斐林試劑檢測）試管內發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。 4、分

31、析：因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖，與斐林試劑發(fā)生反應產(chǎn)生磚紅色沉淀，而正常人尿液中無還原糖，所以沒有發(fā)生反應。 實驗十七 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化 1、培養(yǎng)酵母菌（溫度、氧氣、培養(yǎng)液）：可用液體培養(yǎng)基培養(yǎng) 2、計數(shù)：血球計數(shù)板(2mm×2mm方格,培養(yǎng)液厚0.1mm) 3、推導計算 4、討論：根據(jù)7天所統(tǒng)計的酵母菌種群數(shù)量畫出酵母菌種群數(shù)量的增長曲線；推測影響影響酵母菌種群數(shù)量變化的因素。 實驗十八 土壤中動物類群豐富度的研究 1、豐富度的統(tǒng)計方法通常有兩種：記名計算法和目測估計法 記名計算法：指在一定面積的樣地中，直接數(shù)出各種群的個體數(shù)目，這一般用于個體較大，種群數(shù)量有

32、限的群落。 目測估計法：按預先確定的多度等級來估計單位面積上個體數(shù)量的多少。等級的劃分和表示方法有：“非常多、多、較多、較少、少、很少”等等。 2、設計數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計表，分析所搜集的數(shù)據(jù)。實驗十九 探究水族箱（或魚缸）中群落的演替要求：（1）水族箱必須是密封的，且是透明的，放置于室內通風、光線良好的地方，但要避免陽光直接照射。 （2）組成成分：非生物成分、生產(chǎn)者、消費者和分解者 （3）各生物成分的數(shù)量不宜過多，以免破壞食物鏈 實驗二十 選修三實驗 DNA的粗提取與鑒定【復習目標】本課題通過嘗試對植物或動物組織中的DNA進行粗提取，了解DNA的物理化學性質，理解DNA粗提取以及DNA鑒定的原理。

33、【復習重點與難點】復習重點：DNA的粗提取和鑒定方法。復習難點：DNA的粗提取和鑒定方法?！局R回顧】一、實驗原理1、提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學性質的生物大分子。對于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA、 蛋白質等在物理和化學性質方面的差異，提取DNA，去除其他成分。1） DNA的溶解性 思考題1：DNA在氯化鈉溶液中的溶解度有什么特點？對此有什么應用？ DNA的溶解度隨氯化鈉的濃度變化而變化，DNA在0.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低。利用這一原理，選擇適當?shù)柠}溶液就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀。思考題2：利用什么原理

34、來將DNA與蛋白質分離開？ DNA不溶于灑精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于灑精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步分離。2）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解蛋白質，但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質不能忍受6080oC的高溫，而DNA在80以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。3）DNA的鑒定 思考題3：依據(jù)什么原理來鑒定DNA？ 在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實驗設計1、實驗材料的選取 凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大。在下面的生物材料中選

35、取適合的實驗材料：魚卵、豬肝、菜花（花椰菜）、香蕉、雞血、哺乳動物的紅細胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌2、 破碎細胞，獲取含DNA的濾液 1） 制備和提取細胞核物質：動物細胞的破碎比較容易，以雞血細胞為例。在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪拌，得到雞血細胞液。過濾后收集研磨液；如果實驗材料是植物細胞，需要先用洗滌劑溶解細胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和 食鹽 ，進行充分的攪拌和研磨。過濾后收集研磨液。思考：為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂？答：蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進入血細胞內，使血細胞脹裂，再加上

36、攪拌的機械作用，就加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂)，從而釋放出DNA。加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？答：洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解細胞膜，有利于DNA的釋放；食鹽的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。如果研磨不充分，會對實驗結果產(chǎn)生怎樣的影響?答：研磨不充分會使細胞核內的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少，影響實驗結果，導致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細胞成分？答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質。2）溶解細胞核的DNA：向收集的濾液中加入2mol/L的氯化鈉溶液，攪拌使DNA呈溶解狀態(tài)。3、去除濾液中的雜質 方案一的原理

37、是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，通過控制NaCl溶液濃度的嘗試去除雜質。具體做法是：在濾液中加入NaCl，使NaCl溶液物質的量濃度為2mol/L，過濾除去不溶的雜質，再調節(jié)NaCl溶液物質的量濃度為0.14 mol/L，析出DNA，過濾去除溶液中的雜質；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質，不分解DNA。具體做法：直接在濾液中加入嫩肉粉，反應1015min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質；方案三的原理是蛋白質和DNA的變性溫度不同。具體做法：將濾液放在6075的恒溫水浴箱中保溫1015min注意嚴格控制溫度范圍。思考：為什么反復地溶解與析出DNA，能夠去除雜質？答：用高鹽濃度的溶液

38、溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質；用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質。因此，通過反復溶解與析出DNA，就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質。方案二與方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解雜質蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質分開；方案三利用的是DNA和蛋白質對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質變性，與DNA分離。4、DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液，靜置23min，溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管，各加入物質的量濃度為0.0

39、15mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜诜兴屑訜?min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍。三、實驗案例：以雞血細胞DNA的提取和鑒定為例：1制備雞血細胞液：在雞血中加入質量濃度為01g/mL的檸檬酸鈉溶液，離心處理；制備雞血細胞液時，要在新鮮的雞血中加入檸檬酸鈉的原因：制備雞血細胞液時，要在新鮮的雞血中加入抗凝劑檸檬酸鈉，防止血液凝固。其原理是檸檬酸鈉能與血漿中Ca2+發(fā)生反應，生成檸檬酸鈣絡合物，血漿中游離的Ca2+大大減少，血液便

40、不會凝固，因為雞血紅細胞，白細胞都有細胞核，DNA主要存在于細胞核中，所以在離心或靜置沉淀后，要棄出上層清液血漿。2提取雞血細胞的細胞核物質：向雞血細胞液中加入蒸餾水，攪拌、過濾；思考1：加入蒸餾水的目的是什么？為什么能達到此目的？ 加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂)，從而釋放出DNA；蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進入血細胞內，使血細胞脹裂。3溶解細胞核內的DNA：加入2mol/L的氯化鈉溶液，攪拌，使DNA呈溶解狀態(tài)；4析出含DNA的黏稠物：加入蒸餾水，用玻璃棒攪拌；思考題2：此時加入蒸餾水的目的是什么？ 使氯化鈉溶液濃度接近014mol/L，使DNA最大限度地

41、析出。5濾取含DNA的黏稠物：過濾；思考題3：這次過濾與上次過濾的目的一樣嗎？為什么？ 不一樣；這次過濾是為了去除不溶于氯化鈉溶液的雜質，而上次過濾是為了去除破裂的細胞膜等物質。6將DNA的黏稠物再溶解：加入2mol/L的氯化鈉溶液，攪拌，使DNA呈溶解狀態(tài)；7過濾含有DNA的氯化鈉溶液：過濾；思考題4：這一步驟的目的是什么？ 除去含有DNA濾液中的雜質思考題5：為什么反復地溶解與析出DNA，能夠去除雜質？ 用高鹽濃度的溶液溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質；用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質。因此，通過反復溶解與析出DNA，就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質。8提

42、取含雜質較少的DNA：加入冷卻的95%的酒精，攪拌；思考題6：這一步驟的目的是什么？ 去除溶于酒精的雜質思考題7：為什么加入的酒精需要冷卻的？可抑制核酸水解酶的活性，防止降解DNA；降低分子的運動，易于形成沉淀析出；低溫有利于增加DNA分子柔韌性，減少斷裂。9DNA的鑒定：取兩支試管，各加入0015mol/L的氯化鈉溶液5mL，一支加入提取的DNA，兩支各加入4mL的二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝笾糜诜兴屑訜?。四、操作提示1、以血液為實驗材料時，每100ml血液中需要加入3g檸檬酸鈉，防止 血液凝固。2、加入洗滌劑后，動作要輕緩、 柔和 ，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻

43、璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免 加劇DNA分子的斷裂 ，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3、二苯胺試劑要 現(xiàn)配現(xiàn)用 ，否則會影響鑒定的效果。4、DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關系：當NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時，隨濃度的升高，DNA的溶解度降低；當NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時，隨濃度升高，DNA的溶解度升高。5、盛放雞血細胞液的容器，最好是塑料容器。雞血細胞破碎以后釋放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于細胞內DNA的含量本來就比較少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就會更少。因此，實驗過程中最好使用塑料的燒杯和試管，這樣可以減少提取過程的DNA的損失。6、提

44、取DNA的第一步是材料的選取，其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料，否則會由于實驗過程中或多或少的損失而造成檢測的困難；第二步是DNA的釋放和溶解，這一步是實驗成功與否的關鍵，要盡可能使細胞內的DNA全部溶解；第三步是DNA的純化，即根據(jù)DNA的溶解特性、對酶及高溫的耐受性的不同等特性，最大限度地將DNA與雜質分開；最后一步是對DNA進行鑒定，這是對整個實驗的結果的檢測。7、在DNA的析出的步驟中用到玻璃棒攪拌時，注意動作要輕緩，以免加劇DNA分子的斷裂，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。典例解析本實驗中有三次過濾：過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液過濾含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液

45、過濾溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液以上三次過濾分別為了獲得（ ）A含核物質的濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液B含核物質的濾液、濾液中DNA粘稠物、含DNA的濾液C含核物質的濾液、濾液中DNA粘稠物、紗布上的DNAD含較純的DNA濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液答案：A解析:用蒸餾水稀釋雞血細胞液，使血細胞的細胞膜、核膜破裂，釋放出核物質，此時過濾只能得到含DNA和其他物質如蛋白質的濾液，這種濾液必須經(jīng)過實驗中其他步驟得相繼處理，方能得到較純的DNA。DNA在0.13mol/LNaCl溶液中溶解度最低，成絲狀粘稠物，可經(jīng)過濾留在紗布上。 【習題鞏固】一、選擇題（10個）1.在研究

46、DNA的基因樣本前，采集來的血樣需要蛋白水解酶處理，然后用有機溶劑除去蛋白質。用蛋白水解酶處理血樣的目的是（ ）A.除去血漿中的蛋白質 B.除去染色體上的蛋白質 C.除去血細胞表面的蛋白質D.除去血細胞中的所有的蛋白質，使DNA釋放，便于進一步提純2與析出DNA粘稠物有關的敘述，不正確的是（ ）A.操作時緩緩滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度 B.在操作A時，用玻璃棒輕緩攪拌，以保證DNA分子完整 C.加蒸餾水可同時降低DNA和蛋白質的溶解度，兩者均可析出D.當絲狀粘稠物不再增加時，此時NaCl的濃度相當于0.14mol/L3洗滌劑能夠瓦解（ ），但對DNA沒有影響。A.細胞壁 B.細胞膜 C.細

47、胞核 D.細胞質4在沸水浴的條件下，DNA遇（ ）會被染成藍色。A.斐林試劑 B.蘇丹染液 C.雙縮脲試劑 D.二苯胺5在DNA提取過程中，最好使用塑料試管和燒杯，目的是（ ）A.不易破碎 B.減少提取過程中DNA的損失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷6下列操作中，對DNA的提取量影響最小的是（ ）A.使雞血細胞在蒸餾水中充分破裂，放出DNA等核物質B.攪拌時，要使用玻璃棒沿一個方向輕緩攪拌C.在“析出DNA粘稠物”時，要緩緩加蒸餾水，直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA時，要使用冷酒精，甚至再將混合液放入冰箱中冷卻E在DNA的溶解和再溶解時，要充分攪拌7DNA的粗提取中，將與濾

48、液體積相等的、冷卻的（ ），靜置23min，溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物。A.09%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液 C.質量分數(shù)15%的HCl D.體積分數(shù)為95%的酒精溶液8.以血液為實驗材料時，需要向血液中加入（ ），防止血液凝固。A.醋酸鈉 B.龍膽紫 C.檸檬酸鈉 D.醋酸洋紅9.在向溶解DNA的NaCl溶液中，不斷加入蒸餾水的目的是（ ）A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解雜質的速度 C.減少DNA的溶解度，加快DNA析出 D.減小雜質的溶解度，加快雜質的析出10.去除濾液中的雜質時，直接在濾液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（ ）分解蛋白質。A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.腸肽酶二、非選擇題（3個）1提取雞血中DNA時，要除去血液中的上清液，這是因為什么？2填寫本實驗完成下列實驗操作時所用試劑。提取雞血細胞