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文檔簡介

1、實驗十實驗十 蛋白質的化學性質蛋白質的化學性質【實驗目的】【實驗目的】 1掌握蛋白質的重要化學性質。掌握蛋白質的重要化學性質。 2了解核蛋白的組成。了解核蛋白的組成?!緦嶒灢僮鳌俊緦嶒灢僮鳌恳坏鞍踪|的鹽析一蛋白質的鹽析 取取1.5mL蛋白質溶液,參與等體積飽和硫蛋白質溶液,參與等體積飽和硫酸銨溶液濃度為酸銨溶液濃度為50%飽和,悄然搖動飽和,悄然搖動試管,使溶液混合均勻后,靜置數分鐘,試管,使溶液混合均勻后,靜置數分鐘,球蛋白即析出呈絮狀沉淀如無沉淀可再球蛋白即析出呈絮狀沉淀如無沉淀可再加少許飽和硫酸銨,用濾紙濾取上清液,加少許飽和硫酸銨,用濾紙濾取上清液,濾液中再參與固體硫酸銨粉末至不再溶解

2、,濾液中再參與固體硫酸銨粉末至不再溶解,析出的即為清蛋白,再加水稀釋,察看沉析出的即為清蛋白,再加水稀釋,察看沉淀能否溶解。淀能否溶解。二蛋白質的沉淀二蛋白質的沉淀 1用重金屬鹽沉淀蛋白質用重金屬鹽沉淀蛋白質 取三支試管,各加取三支試管,各加1mL蛋白質溶液,蛋白質溶液,分別各加分別各加3滴滴6%醋酸鉛溶液、醋酸鉛溶液、3滴滴2%硫硫酸銅溶液和酸銅溶液和3滴滴1%硝酸銀溶液,察看蛋硝酸銀溶液,察看蛋白質沉淀的析出。白質沉淀的析出。 2 2用有機酸沉淀蛋白質用有機酸沉淀蛋白質 取二支試管,各加取二支試管,各加1mL1mL蛋白質溶液,并加蛋白質溶液,并加5%5%醋酸溶液使之呈酸性該沉淀反響最好在弱

3、醋酸溶液使之呈酸性該沉淀反響最好在弱酸中進展。然后分別滴加飽和苦味酸、飽鞣酸中進展。然后分別滴加飽和苦味酸、飽鞣酸溶液,直至沉淀產生為止。酸溶液,直至沉淀產生為止。 用用10%10%三氯醋酸溶液、三氯醋酸溶液、3%3%磺柳酸溶液進展磺柳酸溶液進展類似實驗用量同前,察看景象。類似實驗用量同前,察看景象。三蛋白質的顏色反響三蛋白質的顏色反響 1 1黃蛋白反響黃蛋白反響 于試管中,加于試管中,加1mL1mL蛋白質溶液和蛋白質溶液和1010滴濃滴濃硝酸溶液,直火加熱煮沸,察看溶液和硝酸溶液,直火加熱煮沸,察看溶液和沉淀顏色。冷卻后,再參與沉淀顏色。冷卻后,再參與2020滴滴10%10%氫氯氫氯化鈉溶液

4、,察看顏色變化。化鈉溶液,察看顏色變化。2 2與茚三酮的反響與茚三酮的反響 在二支試管中,分別加在二支試管中,分別加1%1%賴氨酸溶賴氨酸溶液和液和1mL1mL蛋白質溶液,分別加蛋白質溶液,分別加2 2滴茚三酮滴茚三酮溶液,加熱至沸,察看有什么景象?溶液,加熱至沸,察看有什么景象? 3 3與硝酸汞試劑作用與硝酸汞試劑作用米倫反響米倫反響 在二支試管中,分別加在二支試管中,分別加1mL 0.5%1mL 0.5%苯酚苯酚溶液和溶液和1mL1mL蛋白質溶液,再各加蛋白質溶液,再各加0.5mL0.5mL米米倫試劑不可太多,苯酚溶液出現(xiàn)玫倫試劑不可太多,苯酚溶液出現(xiàn)玫瑰紅色,而蛋白質溶液加熱后出現(xiàn)沉淀,

5、瑰紅色,而蛋白質溶液加熱后出現(xiàn)沉淀,加熱凝固的蛋白質呈磚紅色,有時溶液加熱凝固的蛋白質呈磚紅色,有時溶液也呈紅色。也呈紅色。 4 4蛋白質的雙縮脲反響蛋白質的雙縮脲反響(1) (1) 雙縮脲的生成雙縮脲的生成 于枯燥試管中,加于枯燥試管中,加0.2g0.2g0.3g0.3g尿素,尿素,微火加熱,尿素熔化并構成雙縮脲,放微火加熱,尿素熔化并構成雙縮脲,放出的氨可用紅色石蕊試紙實驗。試管內出的氨可用紅色石蕊試紙實驗。試管內有白色固體出現(xiàn)后,停頓加熱。有白色固體出現(xiàn)后,停頓加熱。(2) (2) 雙縮脲反響雙縮脲反響 上述產物冷卻后,加上述產物冷卻后,加1mL10%1mL10%氫氧化鈉溶氫氧化鈉溶液,

6、搖勻,再加液,搖勻,再加2 2滴滴2%2%硫酸酮溶液,混勻,硫酸酮溶液,混勻,察看有無紫色出現(xiàn)。察看有無紫色出現(xiàn)。 于試管中,加于試管中,加1mL1mL清蛋白溶液和清蛋白溶液和1mL10%1mL10%氫氧化銅溶液,再加氫氧化銅溶液,再加1 1滴滴2 2滴滴2%2%硫酸銅溶硫酸銅溶液共熱,由于蛋白質與硫酸銅生成絡合物液共熱,由于蛋白質與硫酸銅生成絡合物而呈紫色。取而呈紫色。取1%1%賴氨酸溶液作對照,察看賴氨酸溶液作對照,察看顏色變化。顏色變化。(四四) 核蛋白組成的鑒定核蛋白組成的鑒定1 1核蛋白的水解核蛋白的水解 取取20mL20mL酵母核蛋白混懸液于離心管酵母核蛋白混懸液于離心管中離心分別

7、,棄去清液,將沉淀轉入小中離心分別,棄去清液,將沉淀轉入小燒杯中,加燒杯中,加15mL 5%15mL 5%硫酸,蓋上外表皿在硫酸,蓋上外表皿在水浴上煮沸約水浴上煮沸約1h1h煮沸過程中堅持原有煮沸過程中堅持原有體積,水解畢,離心分別,取上層清體積,水解畢,離心分別,取上層清液作以下檢查。液作以下檢查。 2 2核糖的鑒定核糖的鑒定 于試管中,加于試管中,加1mL 20%1mL 20%間苯二酚鹽酸間苯二酚鹽酸溶液,以小火加熱至沸,迅速參與溶液,以小火加熱至沸,迅速參與5 5滴水滴水解液,呈現(xiàn)紅色,如紅色不顯可再稍解液,呈現(xiàn)紅色,如紅色不顯可再稍加熱。加熱。 3 3磷酸的鑒定磷酸的鑒定 取取1010滴水解液,置于試管中,加滴水解液,置于試管中,加5 5滴滴7%7%鉬酸銨溶液和鉬酸銨溶液和2 2滴濃硝酸溶液,小心于滴濃硝酸溶液,小心于火上加熱,即有黃色沉淀生成?;鹕霞訜?,即有黃色沉淀生成。 4 4嘌呤與嘧啶的鑒定嘌呤與嘧啶的鑒定 取約取約4mL4mL水解液,置于小燒杯中,參水解液,置于小燒杯中,參與氨水至微堿性,過濾,在濾液中加與氨水至微堿性,過濾,在濾液中加1mL 1mL 5%5%硝酸銀銨溶液,靜置片刻,即有絮狀硝酸銀銨溶液,靜置片刻,即有絮狀的嘌呤或嘧啶銀鹽沉淀生成

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