第8章化妝品的檢驗

1、 8. 化妝品的檢驗目錄8.1 化妝品檢驗規(guī)則及穩(wěn)定性試驗化妝品檢驗規(guī)則及穩(wěn)定性試驗8.2 化妝品通用檢驗方法化妝品通用檢驗方法8.3 化妝品產品質量檢驗化妝品產品質量檢驗8.4 化妝品中有害物質含量分析化妝品中有害物質含量分析8.5 化妝品微生物檢驗方法化妝品微生物檢驗方法化妝品含義: 指以涂抹、噴灑或其它類似方法，施于人體表面（表皮、毛發(fā)、指甲、口唇等），起到清潔、保養(yǎng)、美化或消除不良氣味，并對使用部位具有緩和作用的物質。 分類: 護膚化妝品、美容化妝品、美發(fā)用化妝品、和專用化妝品等。 質量特征： 安全性（長期使用安全）、穩(wěn)定性（長期的穩(wěn)定）、有用性（保持皮膚正常的生理功能和容光煥發(fā)的效果

2、）和使用性（舒適），甚至還包括消費者的偏愛性。 8.1 檢驗規(guī)則及穩(wěn)定性試驗一、檢驗規(guī)則 1基本術語 （1）常規(guī)檢驗項目。每批產品必檢項目（理化、感官、衛(wèi)生指標中細菌總數、重量指標和外觀要求）。 （2）非常規(guī)檢驗項目。指非逐批檢驗的項目，如衛(wèi)生指標中除細菌總數以外的其它項目。 （3）適當處理。指不破壞銷售包裝，從整批化妝品中剔除個別不合格品的挑揀過程。 （4）樣本。指每批抽樣量的全體。 （5）單位產品。指單件化妝品（瓶、支、袋、盒）。2檢驗分類 交收檢驗出廠前由生產廠的檢驗部門或收貨方按產品標準逐批進行檢驗，交收檢驗項目為常規(guī)檢驗項目。 型式檢驗全面檢查，每年不得少于一次。 有下列情形之一時，

3、也應進行型式檢驗。 當原料、工藝、配方有重大改變，影響產品性能時；產品長期停產后（6個月以上）恢復生產時；出廠檢驗結果與上次型式檢驗有較大差異時；國家質量監(jiān)督機構提出進行型式檢驗要求時。 型式檢驗的項目包括常規(guī)檢驗項目和非常規(guī)檢驗項目。3抽樣 工藝條件、品種、生產日期相同的產品為一批。收貨方也可按一次交貨產品為一批。（1）交收檢驗抽樣 包裝外觀檢驗項目的抽樣按GB/T 2828.1-2003的二次抽樣方案抽樣。其中不合格（缺陷）分類分類檢查水平（IL）、合格質量水平（AQL）見表。包裝外觀檢驗項目的內容 注意： 該項目為破壞性試驗。 （2）型式檢驗抽樣 型式檢驗中的常規(guī)檢驗項目以交收檢驗結果為

4、依據；非常規(guī)檢驗項目可從任一批產品中抽取23單位樣品，按產品標準規(guī)定的方法檢驗。 4判定規(guī)則 交收檢驗判定規(guī)則 當衛(wèi)生指標不符合標準時，該批產品為不合格，不得出廠； 當感官理化指標中任一項不符合標準時，允許復驗，由供需雙方共同抽樣，若不合格，則該批產品不合格批，不得出廠；當質量（容量）指標不符合產品標準時，允許加倍復驗，仍不合格時，該批產品判為不合格批。（2）型式檢驗判定規(guī)則 型式檢驗中常規(guī)檢驗項目的判定與交收檢驗判定規(guī)則相同。 型式檢驗中的非常規(guī)檢驗項目中有一項不符合產品標準規(guī)定時，即判整批產品為不合格。（3）仲裁檢驗 當供需雙方對產品質量發(fā)生爭議時，由雙方共同按本標準進行抽樣檢驗，或委托上

5、級質監(jiān)站進行仲裁檢驗。5轉移規(guī)則 （1）除非另有規(guī)定，在檢查開始時應使用正常檢查。 （2）從正常檢查到加嚴檢查。當正常檢查時，若在連續(xù)5批中有2批經初次檢查（不包括再次提交檢查批）不合格，則從下一批轉到加嚴檢查。 （3）從加嚴檢查到正常檢查。當進行加嚴檢查時，若連續(xù)5批經初次檢查（不包括再次提交檢查批）合格，則從下一批檢查轉入正常檢查。 6檢查的停止和恢復 加嚴檢查開始后，若不合格批數（不包括再次提交檢查批）累計到5批，則暫時停止產品交收檢查。 暫停檢查后，若生產方確實采取了措施，使提交檢查批達到或超過標準要求，則經主管部門同意后，可恢復檢查。一般從加嚴檢查開始。7檢查后處置 質量（容量）不合

6、格批和B類不合格批，允許生產廠處理后再次提交檢查。再次提交按加嚴抽樣方案進行檢查。 C類不合格批，生產方經適當處理后再次提交檢查，按加嚴抽樣方案進行檢查或由供需雙方協商處理。 1耐熱試驗 耐熱試驗是膏霜、乳液和液狀化妝品重要的穩(wěn)定性試驗項目，如發(fā)乳、唇膏、潤膚乳液、護發(fā)素、染發(fā)乳液、洗發(fā)膏、浴液、洗面奶、發(fā)用摩絲、雪花膏、香脂等產品均需進行耐熱試驗。 基本原理： 將電熱恒溫培養(yǎng)箱調節(jié)到（401），取兩份樣品，將其中一份置于電熱恒溫培養(yǎng)箱內保持24 h后，取出，恢復室溫后與另一份樣品進行比較，觀察其是否有變稀、變色、分層及硬度變化等現象，判斷產品的耐熱性能。2耐寒試驗 同耐熱試驗一樣，耐寒試驗也

7、是膏霜、乳液和液狀等類產品的重要的穩(wěn)定性試驗項目。 基本原理： 先將電冰箱調節(jié)到（-5 -15）1 ，然后取兩份樣品，將其中一份置于電冰箱內保持24 h后，取出，恢復室溫后與另一份樣品進行比較，觀察其是否有變稀、變色、分層及硬度變化等現象，以判斷產品的耐寒性能。3離心試驗 離心試驗是檢驗乳液類化妝品貨架壽命的試驗，是加速分離試驗的必要檢驗法，如洗面奶、潤膚乳液、染發(fā)乳液等均需作離心試驗。其方法是：將樣品置于離心機中，以（20004000）r/min的轉速試驗30 min后，觀察產品的分離、分層狀況。4色澤穩(wěn)定性試驗 色澤穩(wěn)定性試驗是檢驗有顏色化妝品色澤是否穩(wěn)定的試驗。由于各類化妝品的組成、性狀

8、等各不相同，所以其檢驗方法也各不相同。如發(fā)乳的色澤穩(wěn)定性試驗采用紫外線照射法，香水、花露水的色澤穩(wěn)定性試驗采用干燥箱加熱法。8.2 化妝品通用檢驗方法1 pH值的測定 人體皮膚的pH值一般都在4.56.5，偏酸性。這是由于皮膚表面分有皮膚和汗液，其中含有乳酸、游離氨基酸、尿酸和脂肪酸等酸性物質。膏霜類和乳液類化妝品應有不同的pH值，pH值是化妝品一項重要的性能指標。 稱取試樣一份（0.1 g），分數次加蒸餾水10份，并不斷攪拌，加熱至40 ，使其完全溶解，冷卻至此（251）或室溫，待用（含油量較高的產品可加熱至（7080），冷卻后去掉油塊待用；粉狀產品可沉淀過濾后待用）。 pH計進行pH值測定

9、。2 粘度的測定 流體受外力作用流動時，在其分子間呈現的阻力稱為粘度（或稱粘性）。粘度是流體的一個重要的物理特性，是膏霜類和乳液類化妝品的重要質量指標之一。 粘度一般用旋轉式粘度計測定 3 濁度的測定 香水、頭水類和化妝水類制品或由于靜止陳化時間不夠部分不溶解的沉淀物尚未析出完全，或由于香精中不溶物如浸膠和凈油中的含蠟量度過高，都易使產品變混濁，混濁是這些化妝品的主要質量問題之一。 濁度的測定目測法:試樣在水浴或冷凍劑中的清晰度。4 相對密度的測定 相對密度是指一定體積的物料質量與同體積水的質量之比。它是液狀化妝品的一項重要性能指標。 相對密度的測定方法常用密度計法。5 色澤穩(wěn)定度的測定 色澤

10、是化妝品的一項重要性能指標，色澤的穩(wěn)定性則是化妝品的主要質量問題之一。 色澤穩(wěn)定度測定的方法主要是目測法比較試樣加熱一定溫度后顏色的變化 6 香水、花露水中香精的測定 香精是賦予化妝品一定的香氣，帶給使用者優(yōu)雅舒適感。幾乎所有化妝品都使用香精，所以香精是化妝品的主要基質原料之一。 化妝品中香精的測定常用的方法是乙醚萃取法。 利用香精混溶于乙醚的原理，用乙醚將香精從試樣中提取出來，除去醚后稱重，以此得到香精的含量。8.3 化妝品產品質量檢驗 一、膏霜和乳液類化妝品的質量檢驗 膏霜和乳液類化妝品包括雪花膏、冷霜、奶液和香粉密、潤膚霜、清潔霜等。這些產品主要是由水和水溶性物質、脂質（油脂和蠟）、乳化

11、劑等三類物質組成的乳化體，乳化體的乳化類型主要是水包油型（O/W）和油包水型（W/O），也有油包水水包油型（O/W/O）、水包油油包水型（W/O/W）等多重乳化體系。 1潤膚膏霜的質量檢驗 潤膚膏霜有水包油型（O/W型）和油包水型（W/O型）兩種類型，為適用于人體皮膚的具有一定稠度的乳化型膏霜，其感官指標及理化指標見表 雪花膏感官指標及理化指標 （1）感官檢驗 色澤檢驗及膏體檢驗用目測法在室內無陽光直射處觀察。香氣憑嗅覺鑒定。（2）滲油率的檢驗 先將恒溫箱調節(jié)至（401），在已稱量的培養(yǎng)皿中稱取樣品約10 g（約占培養(yǎng)皿面積1/4），刮平，精密稱量。再將培養(yǎng)皿斜放在烘箱內的15 角架上保持24

12、 h后取出，放入干燥器內冷卻后再稱重，如有油滲出，則將滲油部分小心揩去，留下膏體部分，然后將培養(yǎng)皿連同剩余的膏體部分進行稱量計算樣品滲油率（3）乳化體類型檢驗 對膏霜、乳液等乳化狀化妝品，必須進行乳化體類型檢驗。檢驗方法有：染料法、溶解法、導電性測定等方法。 1）染料法 將產品涂抹在表面皿上形成約1.6 mm厚、面積為6.5 m2的薄膜，在薄膜的不同部位，分別灑上少量油溶性染料和水溶性染料。用顯微鏡觀察染料擴展情況。 2）溶解法 取少量產品觀察，如易與礦物油相混合為油包水型；如易與水相混合為水包油型。 3）導電性測定法2潤膚乳液質量檢驗 潤膚乳液是具有流動性的水包油型化妝品。主要用于滋潤人體皮

13、膚。潤膚液的感官及理化指標指標。（1）感官檢驗 色澤：取樣品在非陽光直射條件下目測。 香氣：用辨香紙蘸取試樣，用嗅覺進行辨別。 結構：取試樣擦于皮膚上，在室內和非陽光直射條件下觀察。（2）離心試驗 在離心管中注入試樣約2/3高度并裝實，用軟木塞塞好。然后，放入調節(jié)至（381）的電熱恒溫培養(yǎng)箱內，保溫1 h后，立即移入離心機中，并將離心機調整到2000 r/min，30 min后觀察現象。3洗面奶質量檢驗 洗面奶是乳液類化妝品，主要用于清潔面部皮膚，具有去除表皮污物、油脂等功能，同時有利于皮膚的柔軟、潤滑和生成保護層，尤其適用于干性皮膚的人使用。 洗面奶的感官及理化指標 二、液體洗滌類化妝品 液

14、體洗滌類化妝品主要包括香波、沐浴液和潔面產品等。對液體洗滌類化妝品的基本要求是必須具有去污能力、起泡能力，并具有一定護理（護發(fā)、護膚）能力。 液體洗滌類化妝品的代表產品是液體香波，本章僅對以表面活性劑為主體復配而成的、能清潔頭發(fā)并保持其美觀作用的發(fā)用香波。香波的感官及理化指標見下表 洗發(fā)香波感官、理化、衛(wèi)生指標 1感官檢驗 （1）外觀、色澤：取樣品在非陽光直射條件下進行目測。 （2）香氣：用辨香紙蘸取樣品，用嗅覺辨別。2表面活性劑類型的判斷 搖動后觀察泡沫，有泡沫，試樣含有表面活性劑組分；于上述試樣水溶液中加入（23）mL稀鹽酸溶液，再次搖動，觀察。如果泡沫消失，試樣只含有肥皂而無其它類型的表

15、面活性劑；如果泡沫依然保留，表明有其它類型的表面活性劑存在。 如果泡沫繼續(xù)保持，則表明有烷基（芳基）磺酸鹽離子型表面活性劑、陽離子型或非離子型表面活性劑，或表面活性劑的混合物存在。3泡沫力的測定 泡沫力的測定采用羅氏-米爾法。4表面活性劑含量的測定 乙醇溶解法 指甲是由上皮細胞角化后重疊堆積而成的一種半透明狀的硬板，供保護手指尖用。指甲油是用來修飾和增加指甲美觀的化妝用品，染指甲已成為近代美容不可缺少的一個重要部分。指甲油的感官及理化指標見表 指甲油感官及理化指標 三、指甲油的質量分析 1牢固度的檢驗 用指甲油筆刷蘸指甲油涂在馬口鐵皮上，涂一層后放置24 h，用繡花針劃成橫五條、豎五條，每條距

16、離間隔lmm，指甲油無顯著脫落現象為合格。2干燥速度的檢驗 在20 ，用指甲油筆刷蘸指甲油涂在馬口鐵皮上，干燥時間小于15 min為合格。3抗水性的檢驗 取經過干燥速度檢驗的馬口鐵皮，放置24 h后，將馬口鐵皮浸入水中，油涂層表面無氣泡和脫落現象為合格。4. 不揮發(fā)物的測定 拿掉指甲油瓶中的刷子，蓋好瓶蓋稱量。 將（1.01.2）g指甲油倒進質量已恒定的高65 mm、直徑45 mm的稱量瓶中，再稱量指甲油瓶，兩次稱量的質量差就是樣品質量。 打開稱量瓶蓋，用手轉動稱量瓶，使指甲油以膜狀覆蓋稱量瓶的內壁。然后在105 烘箱中加熱2h，冷卻，稱量，即為不揮發(fā)物與稱量瓶質量。 市售染發(fā)的染發(fā)劑大多是由

17、合成染料制得，外觀上多為乳狀和膏狀。 按類型又可分為染發(fā)膏、染發(fā)香波、染發(fā)水等。 按染料分子能否進入毛發(fā)的內部，染發(fā)劑又可分為暫時性、半永久性及永久性染發(fā)劑。 除染料外，在染發(fā)劑中還有表面活性劑、溶劑、分散劑、整理劑等。這類產品的檢測項目主要有：外觀、香氣、pH值、染色能力、氧化劑濃度、耐熱、耐寒等。 1染色能力的測定 1）氧化型染發(fā)劑 按說明書使用方法取適量試樣，攪拌均勻，將放置在玻璃平板上的頭發(fā)用試樣涂抹均勻。按規(guī)定的方法和時間停留后，用水漂洗干凈，晾干后在非陽光直射的明亮處觀察。 2）非氧化型染發(fā)劑 按說明書中使用方法，將放置在玻璃平板上的頭發(fā)用試樣涂抹均勻達到飽和狀態(tài)。涂抹時應使試樣均

18、勻覆蓋所有的發(fā)絲，但又不至引起粘連。然后按規(guī)定的方法和時間停留后，用水漂洗干凈，晾干后在非陽光直射的明亮處觀察。如產品說明書中未規(guī)定等候時間，應停留15min后觀察。2氧化劑濃度的測定 原理： 準確稱取試樣約1g于150mL三角燒瓶中，然后加10 mL蒸餾水和10 mL體積比為11的硫酸，搖勻，用0.1molL的高錳酸鉀溶液滴定至顯粉紅色，30s不褪色為終點。 氣霧和噴霧類化妝品主要產品有發(fā)用摩絲和定型發(fā)膠。摩絲是以高分子聚合物為主要原料的發(fā)泡定型護發(fā)劑，用于頭發(fā)整理定型，補充頭發(fā)的水分和油分，修飾美化發(fā)型。發(fā)膠為膠狀定發(fā)用品，是一種透明非流動性的凝膠體，在頭發(fā)上形成膠膜，增加頭發(fā)光澤。 氣霧

19、和噴霧類化妝品主要檢測項目有感官檢驗（外觀、香氣）、穩(wěn)定性檢驗（耐熱試驗、耐寒試驗）、通用檢驗（pH值測定）、噴出率、起噴次數、泄漏試驗、內壓力、總固體、殘留物等。1泄漏試驗 檢驗氣壓式化妝品是否存在噴射劑外泄的問題。適用于發(fā)用摩絲和定型發(fā)膠的泄漏試驗。 預先將恒溫水浴箱調節(jié)至50 ，然后放入產品，3 min內以每分鐘冒出氣泡不超過5個為合格。2內壓力試驗 檢驗氣壓式化妝品的瓶內壓力是否超過規(guī)定壓力。適用于發(fā)用摩絲和定型發(fā)膠的內壓力試驗。 取試樣一瓶，除去帽蓋套，拔去噴頭，裝上金屬接管和壓力表（01.0 MPa，精度1.5），置于恒溫至25 水浴箱中30 min，將壓力表朝下壓，讀出0.8 M

20、Pa。3噴出率試驗 檢驗定型發(fā)膠的噴出率。 取試樣一瓶稱量后，按罐上標注的正確噴射方法，噴出劑液，噴畢稱量，將包裝罐打開倒出余液擦干凈后稱量空罐。噴出率大于95為合格。4殘留物試驗參照 本試驗是檢驗發(fā)用摩絲噴完后的殘留物。 按使用說明將已稱量的產品內容物全部噴出，然后稱量，再將包裝罐打開，倒出殘留物擦干凈后再稱量空罐。殘留物小于5 為合格5起噴次數試驗 適用于檢驗定型發(fā)膠的起噴次數。 將泵式噴發(fā)膠按動，至開始噴出液體止，計算按動次數。小于5次為合格。 化妝品粉塊包括胭脂、眼影和粉餅等，一般由顏料、粉體、膠合劑和香料等混合后經壓制而成的粉餅狀。其感官、理化指標見表胭脂感官、理化指標 1涂擦性能

21、將試樣盒打開，置于（501）的恒溫箱中，保持24 h后取出，恢復室溫后，用產品所附粉撲或粉刷在塊面不斷輕擦，隨時吹去擦下的粉粒。擦拭100次，觀察油塊大小。2疏水性 從粉餅表面將粉輕輕刮下，用80目篩子篩過，稱取0.1 g過篩物于100 mL水中，觀察30min，應無下沉。3跌落試驗 粉盒置于50cm高度，粉盒底部朝下，水平地自由跌落。打開粉盒觀察。依次逐份記錄粉盒、鏡子等的破碎、脫落情況、粉塊碎裂情況。當出現破損不大于1/5時則為合格。 指標主要：外觀、氣味、pH、游離氨含量、疏基乙酸銨含量等 1游離氨含量測定 用移液管吸取冷燙液10 mL于100 mL容量瓶中用水稀釋至刻度，再用移液管吸取

22、10 mL放入300 mL錐型瓶中，加50 mL水，準確加入25 mLc(1/2H2SO4)0.l molL的硫酸標準溶液。加熱至沸（12）min，冷卻后加入23滴0.1 的溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑。用c(NaOH)0.l molL的氫氧化鈉標準溶液滴定至溶液由紅變綠為終點。2巰基乙酸銨含量的測定 精確吸取冷燙液2 mL，置錐型瓶中，加水60 mL，體積比為1 10的硫酸10 mL，l 的淀粉指示劑2 mL，以c(1/2I2)0.1 mol/L的碘標準溶液滴定至溶液呈穩(wěn)定的藍色即為終點。 香水類化妝品包括香水、古龍水和花露水，其主要作用是散發(fā)香氣，它們之間只是香精的香型和用量、酒精的濃度等不

23、同而已，主要成分都是香精、酒精和水等 1色澤 取樣于25 mL比色管內，在室溫和非陽光直射下目測。2香氣 先將等量的試樣和規(guī)定試樣分別放在相同的容器內，然后按下列程序進行鑒定。 用（0.51.0）cm寬，（1015）cm長的吸水紙作為評香紙，分別蘸取試樣和標樣約（l2）cm（兩者須接近），用嗅覺來鑒定。除辨其當時的香氣外，還要鑒別其在揮發(fā)過程中的全部香氣應與規(guī)定相符，無異雜氣味。3清晰度 原瓶在室溫和非陽光直射下距觀察者30cm處觀察。 香粉系人的面部護膚品，由粉體基質、護膚物和芳香物等組成。具有抵御風沙撲打，減弱高溫刺激及紫外線傷害，遮蔽或彌補面部瑕疵，芳肌等作用。 爽身粉系人的體部護膚衛(wèi)生

24、品，由粉體基質、吸汗劑等組成。浴后使用，具有吸汗、爽膚、芳肌等作用。 痱子粉系人的體部護膚衛(wèi)生品，由粉體基質、吸汗劑、殺菌劑等組成。具有吸汗殺菌、防痱、止痱等作用。1感官檢驗 （1）粉體:取適量粉樣，置于白色襯物上，在室內光亮處，用肉眼觀察粉體。 （2）色澤:取適量粉樣，置于白色襯物上，在室內光亮處，用肉眼觀察粉體。 （3）香氣:取適量粉樣，涂抹在皮膚上，用鼻子嗅察。2細度測定 稱取約5g粉體，置于120目篩內，用軟毛刷刷落粉體，稱取篩出物質量。測試兩次，取平均值 8.4 化妝品中有害元素含量分析 測定砷的方法有斑點比色法、銀鹽比色法、原子熒光光譜法和原子吸收光譜法等。 二乙氨基二硫代甲酸銀分

25、光光度法 1.原理 經灰化或消解后的試樣，在還原劑作用下五價砷還原為三價砷。三價砷與新生態(tài)氫生成砷化氫氣體。通過用乙酸鉛溶液浸泡的棉花除去硫化氫干擾，然后與溶于三乙醇胺、氯仿中的二乙氨基二硫代甲酸銀作用，生成棕紅色的膠態(tài)銀，可進行比色定量。 雙硫腙萃取分光光度法 原子吸收分光光度法 8.5 化妝品微生物檢驗方法 化妝品中，特別是一些高級的護膚膏等含有蛋白質、氨基酸、維生素以及各種植物的提取液等營養(yǎng)成分較高的物質，為霉菌、細菌等微生物的滋生、繁殖提供了良好的生長條件，影響化妝品的質量和并危害人體健康。 我國藥品微生物檢驗法規(guī)定，乳劑或外用液體每克（或每毫升）含雜菌數按品種不同控制在（500100

26、0）個 在此，主要討論化妝品微生物檢驗時樣品的采集，細菌總數測定，糞大腸菌群、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌的測定。8.5.1 化妝品微生物標準檢驗方法總則 檢驗方法總則按國家標準（GB 7918.1-1987）執(zhí)行，包括樣品的采集及注意事項，供檢樣品的制備，不同類型的樣品的檢樣制備的統一標準。1樣品的采集及注意事項 （1）所采集的樣品，應具有代表性，一般視每批化妝品數量大小，隨機抽取相應數量的包裝單位。檢驗時，應分別從兩個包裝單位以上的樣品中共取10 g或10 mL；包裝量小的樣品，取樣量可酌減。 （2）供檢樣品，應嚴格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應有破裂，在檢驗前不得啟開，以防再污染。 （3）接到

27、樣品后，應立即登記，編寫檢驗序號，并按檢驗要求盡快檢驗。如不能及時檢驗，樣品應放在室溫陰涼干燥處，不要冷藏或冷凍。 （4）若只有一個樣品，而同時需做多種分析，如細菌、毒理、化學等，則宜先取出部分樣品作細菌檢驗，再將剩余樣品作其它分析。 （5）如檢出糞大腸菌群或其它致病菌，自報告發(fā)出起該菌種及被檢樣品應保存一個月備查。2供檢樣品的制備 （1）培養(yǎng)基和試劑 1）生理鹽水：稱取8.5 g氯化鈉溶解于1000 mL蒸餾水中，分裝入加玻璃球的三角瓶中，每瓶90 mL，在0.1 MPa壓強下高壓滅菌20 min。 2）SCDLP液體培養(yǎng)基 制備方法： 將上述成分混合后，加熱溶解，調節(jié)pH為7.27.3，分

28、裝后，在0.1 MPa壓強下高壓滅菌20 min。注意振蕩，使沉淀于底層的吐溫80充分混合，冷卻至25 左右使用。 3）滅菌液體石蠟和吐溫80。（3）不同類型樣品制備 1）水溶性的液體樣品：取10 mL加到90 mL滅菌生理鹽水中，如樣品少于10 mL，仍按10倍稀釋法進行。 2）油性液體樣品：取樣品10 mL，先加5 mL滅菌液體石蠟混勻，再加10 mL滅菌吐溫80，在（4044）水浴中振蕩混合10 min，加入滅菌的生理鹽水75 mL（在4044 水浴中預溫），在（4044）水浴中乳化，制成（1 10）的懸浮液。 3）親水性半固體樣品：稱取10 g樣品，加到已加有90 mL滅菌生理鹽水并帶

29、玻璃球的經過滅菌的三角瓶中，充分振蕩混勻，放入32 水浴靜置15 min。用其上清液作為（1 10）的稀釋液。 4）疏水性半固體樣品： 稱取10 g樣品，放到經滅菌的研缽中，加10 mL滅菌液體石蠟，研磨成粘稠狀，再加10 mL滅菌吐溫80，研磨，等溶解后，加70 mL滅菌生理鹽水，在（4044）水浴中充分混合，制成（1 10）的稀釋液。 如有均質器，上述水溶性膏霜、半固體樣品、粉劑固體樣品，可稱取10 g加90 mL滅菌生理鹽水，均質（12）min；疏水性膏霜及眉筆、口紅筆等，稱取10 g加90 mL SCDLP液體培養(yǎng)基或1 g樣品加l mL滅菌液體石蠟、l mL滅菌吐溫80、7 mL滅菌

30、生理鹽水，均質（35）min。8.5.2 細菌總數測定 細菌總數系指1 g或1 mL化妝品中所含的活菌數量。測定細菌總數可用來判斷化妝品被細菌污染的程度，是對化妝品進行衛(wèi)生學評價的綜合依據。這里主要介紹標準平板計數法。1測定原理 化妝品中污染的細菌種類不同，每種細菌都有它一定的生理特性。因此測定的結果，只包括在本方法所使用的條件下（在卵磷脂、吐溫80營養(yǎng)瓊脂上，于37 培養(yǎng)48 h）生長的一群嗜中溫的需氧及兼性厭氧的細菌總數。測定步驟 用滅菌吸管，吸取按1 10稀釋的檢樣2 mL分別注入到兩個滅菌平皿內，每皿l mL，另取l mL注入到9 mL滅菌生理鹽水試管中（注意勿使吸管接觸液面），更換一

31、支吸管，并充分混勻，使成1 100的稀釋液，吸取2 mL，分別注入到兩個滅菌平皿內，每皿l mL。如樣品含菌量高，還可再稀釋成1 1000、1 10000等，每種稀釋度應換1支吸管。 將熔化并冷至（4550）的卵磷脂、吐溫80、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿內，每皿約15 mL，另傾注一個不加樣品的滅菌空平皿，作空白對照，隨即轉動平皿，使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉平皿，置37 培養(yǎng)箱內培養(yǎng)48 h。菌落計數方法 先用肉眼觀察，對菌落數進行計數，然后再用放大510倍的放大鏡檢查，以防遺漏。 記下各平皿的菌落數后，求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數。 若平皿中有連成片狀的菌落或花點樣菌

32、蔓延生長時，該平皿不宜計數。若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數分布又很均勻，則可將此半個平皿菌落計數后乘2，以代表全皿菌落數。 8.5.3 糞大腸菌群的檢驗 糞大腸菌細菌來源于人和溫血動物的糞便。檢出糞大腸菌群表明該化妝品已被糞便污染，有可能存在其它腸道致病菌或寄生蟲等病原體的危險。因此糞大腸菌被列為重要的衛(wèi)生指標菌。 1測定原理 檢驗方法是根據糞大腸菌群所具有的生物特征，如革蘭氏陰性無芽孢桿菌在44 培養(yǎng)（2448）h能發(fā)酵乳糖產酸并產氣，能在選擇性培養(yǎng)基上產生典型菌落，能分解色氨酸產生靛基質。 3培養(yǎng)基和試劑 （1）乳糖膽鹽培養(yǎng)基 制備方法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于蒸餾水中，調

33、pH到7.4，加入指示劑，混勻、分裝試管（每支試管中加一個小倒管），在69 kPa壓力下滅菌20 min。 （2）雙倍濃度乳糖膽鹽培養(yǎng)基 上述成分不變，蒸餾水量不變，其它成分加倍。 （3）伊紅美蘭（EMB）瓊脂 制備方法：先將瓊脂加到900 mL蒸餾水中，加熱溶解，然后加磷酸氫二鉀、乳糖及蛋白胨混勻，使之溶解。再以蒸餾水補足至1000 mL，校正pH為7.27.4。分裝于燒瓶內。在0.1 MPa壓力下高壓滅菌15 min，備用。臨用時加入乳糖并加熱熔化瓊脂。冷卻至60 左右，以無菌方式加入經滅菌的伊紅美蘭溶液，搖勻，傾注平皿備用。（4）蛋白胨水（作靛基質試驗用） 制備方法： 將上述成分加熱熔化，調pH為7.07.2，分裝小試管，在0.1 MPa壓力下高壓滅菌15 min。（5）靛基質試劑 柯凡克試劑：將5 g對二甲氨基苯甲醛溶解到75 mL戊醇中，