2017技能大賽高職雞新城疫抗體水平測定正式賽卷及評分標準

1、2017年全國職業(yè)院校技能大賽雞新城疫抗體水平測定項目公開賽題一、競賽內(nèi)容本項目為雞新城疫抗體水平測定（微量法），測定方法按新城 疫抗體診斷技術（GB/T16550-2008）標準，競賽總時間為180分鐘。 具體步驟及其分值如下：（一）試驗器材準備（占總成績的 8%按照操作規(guī)程進行器材準備，要求器材擺放有序，物品標識合理， 桌面整潔等。（二） 配制1%鳥紅細胞懸液（占總成績的18%按照操作規(guī)程進行采血、離心、洗滌、配制1%鳥紅細胞懸液，要求采血規(guī)范、熟練、采血量適量、離心機使用規(guī)范、洗滌次數(shù)及洗 滌時間適宜等。（三）血凝試驗（占總成績的 20%按照操作規(guī)程，用微量移液器在 96孔V型血凝反應板

2、滴加稀釋 液、新城疫標準抗原，充分混勻，倍比稀釋后，添加1%鳥紅細胞懸液，充分振蕩混勻，正確判定抗原的血凝效價。要求微量移液器使用 規(guī)范、倍比稀釋操作規(guī)范、結(jié)果正確等。（四） 配制四單位病毒（占總成績的10%根據(jù)血凝試驗結(jié)果，按照操作規(guī)程配制四單位病毒。 要求稀釋倍 數(shù)計算正確，稀釋液體積加入得當、四單位病毒配制量適宜等。（五）血凝抑制試驗（占總成績的 20%按照操作規(guī)程，對20個被檢血清進行血凝抑制試驗操作，并設新城疫標準陽性血清對照、陰性血清對照；正確讀取抗體滴度結(jié)果， 完成報告。要求移液器使用規(guī)范、反應板各孔的稀釋正確、感作時間 得當、結(jié)果判斷正確等。（六）抗體滴度報告（占總成績的 24

3、%按照操作規(guī)程，正確讀取抗體滴度結(jié)果，完成報告。要求抗體滴 度報告方式正確、場地整潔、結(jié)果誤差小等。二、評分標準項目技能競賽評分標準見表1。表1項目技能競賽評分標準廳P考核內(nèi)容考核要點分值評分標準1試驗器材 準備（8分）儀器使用與 材料準備2儀器正確使用，1分； 材料準備到位，1分。物品標識4不標小不行分；標識合理，2分；標示清晰，2分。注：缺一個器皿未標注，扣 0.5分，扣完2分為止。實桌間整潔度2擺放合理,2分； 酌情扣分。2配制1%鳥 紅細胞懸 液（18分）采血方法 米血量6抗硼劑適里，2分；米血方法規(guī)范、熟練，2分； 采血量控制在2-4mL之間（每超 1mL扣1分）2分。注：雞未保定好

4、，扣1分；采血 前未消9扣1分；血液與抗硼劑 比為4:1 ,差異較小扣1分，差 異較大扣2分；米血木,針見血, 每多加一針扣0.5分；未用干棉 球按壓止血，扣1分；采血未成 功的，扣6分等。以上細節(jié)累加， 6分扣完為止。離心機使用4離心機使用規(guī)范，4分。注：未做好平衡扣2分，平衡時 未加套管等，各扣1分，累積扣 完4分為止。紅細胞懸液配 制方法8稀釋液倍數(shù)正確（離心時原抗凝 血的3-4倍稀釋，稀釋后每管最多/、可超過12mL, 2分； 離心機轉(zhuǎn)速、離心時間止確廳p考核內(nèi)容考核要點分值評分標準（2000 r/m , 5-10 min） , 2分； 洗滌次數(shù)適宜，2分；壓積紅細胞吸取正確，2分。注

5、：最后配置1%!細月包為10-20 mL每超過10 mL扣1分，最多 扣2分。3血凝試驗 （20 分）器材使用4微量移液器使用規(guī)范，2分； 槍頭更換操作符合規(guī)范，2分。 注：加槍頭時操作規(guī)范，/、口用 力撞擊槍盒，移液槍垂直加樣為 規(guī)范，傾斜角度不要過人，否則 酌情扣分。操作程序6及時換槍頭，2分；加樣順序止確，1分；倍比稀釋操作規(guī)范，1分； 震揚及感作時間得當（可以使用 振揚器，以液體不震出孔外為 準），2分。結(jié)果判定準確10生理鹽水對照孔的RBM明顯鈕 扣狀沉到孔底時判定結(jié)果，4分； 對照孔結(jié)果止確，能確定完全凝 集的新城疫標準抗原最高稀釋 倍數(shù)，4分； 能把完全凝集的病毒的最高稀 釋倍數(shù)

6、作為1個血凝單位，2分。 注：讀數(shù)時，有跳孔現(xiàn)象的，每 跳1孔扣2分。4配制四 單位 病母 （10 分）器材選擇4器材選擇合理，2分； 使用規(guī)范、熟練，2分。配制方法4稀釋倍數(shù)計算止確，2分； 稀釋液加入得當、操作規(guī)范，2 分。配制量適宜2配制量適宜，2分；注：配置量10-20 mL為適量， 每超過10 mL扣1分，最多扣2 分。5血凝抑制 試驗（20 分）器材使用4器材使用規(guī)范、熟練，4分； 酌情扣分。操作程序696孔V型微量反應板各孔加入的 稀釋劑止確，1分；被檢血清、新城疫標準陰性血清 對照、標準陽性血清對照加入正 確（參照國標，每缺一個對照扣 1分），2分；感作時間適宜（以國標為準，時 日不止確扣2分）、2分:廳p考核內(nèi)容考核要點分值評分標準槍頭更換正確，1分。結(jié)果判定準確10能在生理鹽水對照孔紅細胞呈 明顯鈕扣狀沉淀到孔底時判定 結(jié)果，2分；在對照孔結(jié)果正確情況下，能從 背側(cè)觀察RBCW無呈淚珠樣流 淌，2分；能把完全不凝集（RBCI全流卜） 作為被檢血清的最高稀釋倍數(shù)， 3分；陰性血清與標準對照的HI滴度 不大于2log2 ,陽性血清與標準 抗原對照的HI滴度與已知滴度 相差1個稀釋度范圍內(nèi)，3分。6抗體滴度 報告 （24 分）抗體滴度報告2抗體滴度報告方式正確，2分； 注：若超過10孔，應寫成 10log2。結(jié)果誤差20每個樣本