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1、南京市第29中學(xué)高考沖刺選修一 2016.51.研究酶的化學(xué)性質(zhì)和作用機(jī)理,有助于了解生命活動(dòng)的規(guī)律并指導(dǎo)生產(chǎn)和生活實(shí)踐。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1) 在實(shí)際生產(chǎn)中,固定化細(xì)胞技術(shù)實(shí)質(zhì)上固定的是_。制備固定化酵母細(xì)胞時(shí),常用的方法是下圖中_(填數(shù)字序號(hào)及名稱)。(2)在生活實(shí)踐中,酶制劑在洗衣粉中被廣泛應(yīng)用。某研究性學(xué)習(xí)小組為探究某品牌洗衣粉中酶催化作用的最適溫度,設(shè)計(jì)了如下裝置進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并將結(jié)果用曲線圖A、B表示如下圖。 使用該加酶洗衣粉的最適宜溫度為_(kāi)。 在0 和75 時(shí),酶的催化效率基本都為零。但當(dāng)溫度再度恢復(fù)到45 時(shí),后者酶的催化能力已不能恢復(fù),這是因?yàn)開(kāi)。堿性蛋白酶是枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)后期
2、向細(xì)胞外分泌的一種酶,與該酶合成有關(guān)的細(xì)胞器是_。若欲應(yīng)用固定化技術(shù)提高該酶的利用率,減少產(chǎn)物中的雜質(zhì),則應(yīng)采用_方法。(3)在現(xiàn)代生物工程中,可用酶在體外處理“蛋白質(zhì)DNA復(fù)合體”以獲得包裹在蛋白質(zhì)中的DNA片段信息,過(guò)程如下圖所示。 a、b過(guò)程中,酶作用的部位依次是_。 若將獲得的DNA片段用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程相比,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)所需酶的不同之處是_。1(1) 多酶系統(tǒng)(一系列酶或多種酶)包埋法(2) 45 高溫條件下酶的結(jié)構(gòu)已遭到破壞(或酶的活性已喪失) 核糖體化學(xué)結(jié)合或物理吸附法(只要答對(duì)一個(gè)即給分,答固定化細(xì)胞不得分)(3) 磷酸二酯鍵,肽鍵 需
3、用耐高溫的DNA聚合酶,不需要DNA解旋酶2下圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)裝置: (1)該實(shí)驗(yàn)依據(jù)的原理是( )ADNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的不同而不同B利用DNA不溶于酒精的性質(zhì),可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNACDNA是大分子有機(jī)物,不溶于水而溶于某些有機(jī)溶劑D在沸水浴中DNA遇二苯胺會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)(2)實(shí)驗(yàn)材料選用雞血細(xì)胞液,而不用雞全血,主要原因是雞血細(xì)胞液中含有較高含量的 。(3)在圖A所示的實(shí)驗(yàn)步驟中加蒸餾水的目的是_。通過(guò)圖B所示的步驟取得濾液,再在溶液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_;圖C所示實(shí)驗(yàn)步驟中加蒸餾水的目的是_。(4)
4、鑒定DNA的方法是,向溶有DNA絲狀物的試管中加入_試劑,混合均勻后,將試管置于沸水中加熱5 min,冷卻后可觀察到溶液呈_;也可取少許DNA絲狀物置于載玻片上,滴一滴_溶液,片刻后用水沖洗,可見(jiàn)絲狀物被染成_。2.(1)ABD (2) DNA (3)使血細(xì)胞破裂 使濾液中的DNA溶于濃鹽溶液降低鹽溶液的濃度,使DNA析出 (4)二苯胺藍(lán)色 甲基綠綠色3(8分)-氨基丁酸(GABA)是具有降血壓、抗焦慮等功能的水溶性氨基酸。科研人員通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究了白方腐乳在前發(fā)酵、鹽腌和后發(fā)酵過(guò)程中GABA的含量變化,為尋找生產(chǎn)富含GABA腐乳的工藝奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)步驟如下:豆腐白坯表面接種毛霉孢子后,在適宜的溫
5、度和濕度下培養(yǎng)48h,獲得毛坯。將毛坯分層整齊地?cái)[放在瓶中,鹽腌5d。腌制后加入鹵湯,置于28恒溫箱中后發(fā)酵90d。分別采集各時(shí)段的腐乳坯樣品,測(cè)定GABA含量,結(jié)果如下。 請(qǐng)分析回答:(1)與醋酸菌相比,毛霉細(xì)胞最大的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是 ;步驟中豆腐的含水量一般控制在 ,培養(yǎng)的最適溫度為 。(2)前發(fā)酵過(guò)程中,毛坯的GABA含量發(fā)生明顯變化的原因是 。(3)步驟中,加鹽腌制的正確方法是 。(4)步驟加入鹵湯中的酒精含量若控制在20%,則會(huì)導(dǎo)致 。(5)后發(fā)酵過(guò)程中,GABA含量再次增加的原因是 ,后發(fā)酵 d后的白方腐乳出廠銷售比較適宜。3.(8分)(1)具有核膜包被的細(xì)胞核 70% 15-18(2)
6、毛霉產(chǎn)生的蛋白酶促進(jìn)蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生GABA(3)逐層加鹽,隨層數(shù)的加高增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚些(4)腐乳成熟的時(shí)間會(huì)延長(zhǎng) (5)毛霉產(chǎn)生的蛋白酶繼續(xù)發(fā)揮作用 604某班同學(xué)用新鮮蘋(píng)果榨取果汁并制作果酒,其簡(jiǎn)要流程如下:(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,該小組同學(xué)發(fā)現(xiàn)榨取的果汁非常渾濁,解決的方法是 。(2)分離酵母菌應(yīng)使用 培養(yǎng)基,固定化酵母細(xì)胞常采用 法,固定化酵母細(xì)胞與固定化酶相比其優(yōu)點(diǎn)是 。若想使這些酵母細(xì)胞能反復(fù)使用,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一定要注意 。(3)在酸性條件下,可用 來(lái)檢測(cè)發(fā)酵產(chǎn)物中是否有酒精產(chǎn)生。若要探究酵母菌種群數(shù)量變化,使用血球計(jì)數(shù)板測(cè)得的酵母菌種群數(shù)量一般 (、 或 )使用稀釋涂布法
7、測(cè)得的酵母菌種群數(shù)量。(4)發(fā)酵完成后,該班同學(xué)制作的果酒品質(zhì)非常好,為方便后續(xù)年級(jí)使用,可將菌液 保存。(5)另一個(gè)班的同學(xué)用葡萄制做的果酒酒味醇正,放置一段時(shí)間后,發(fā)現(xiàn)果酒帶有明顯的酸味,請(qǐng)分析出現(xiàn)酸味的原因 。4. (1)用果膠酶處理 (2)選擇 包埋 能固定一系列酶無(wú)菌條件(避免微生物的污染)(3)重鉻酸鉀 (4)轉(zhuǎn)移到甘油中,與甘油充分混勻后,放在20的冷凍箱中(5)密封不嚴(yán),其他微生物進(jìn)行有氧呼吸,將果酒轉(zhuǎn)變成果酸5多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲(chóng)劑等生產(chǎn)過(guò)程中被廣泛使用,是土壤、河水中常見(jiàn)的污染物之一。下圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲的菌株Q的主要步驟。請(qǐng)回答:
8、(1)步驟的培養(yǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)液中加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源,目的是 。(2)步驟的培養(yǎng)過(guò)程中,需將錐形瓶放在搖床上振蕩,一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率;另一方面能 。(3)步驟用平板劃線法純化菌株Q過(guò)程中,在做第二次以及其后的劃線操作時(shí),總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線,原因是 。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)的目的是 。(4)接種環(huán)通過(guò)灼燒來(lái)滅菌,完成步驟中劃線操作,共需灼燒接種環(huán) 次。(5)為獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強(qiáng)的菌株,研究人員又對(duì)菌種Q進(jìn)行了誘變處理,得到突變株K。為了比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力,設(shè)計(jì)了下列實(shí)驗(yàn),請(qǐng)補(bǔ)全實(shí)驗(yàn)步驟:取9只錐形瓶均分成三組,編號(hào)
9、為A、B、C。 。 。28恒溫培養(yǎng)3天后,測(cè)定錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率。5(8分)(1)篩選出菌株Q (2)增加溶液中的溶氧量 (3)線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少 防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(或避免培養(yǎng)基中水分的過(guò)快揮發(fā)) (4)6 (5)向9支錐形瓶中分別加入等量以多環(huán)芳烴菲為唯一碳源的培養(yǎng)液向A、B、C三組培養(yǎng)液中分別加入等量的無(wú)菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液6利用微生物轉(zhuǎn)化膽固醇在醫(yī)藥生產(chǎn)上有重要作用。實(shí)驗(yàn)人員從土壤中篩選膽固醇轉(zhuǎn)化菌株的過(guò)程見(jiàn)下圖。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:(1)實(shí)驗(yàn)人員將土壤樣品接種到富集培養(yǎng)液中培養(yǎng)時(shí),需要將其置于搖床上不斷振蕩,其主要的作用有
10、、 。(2)培養(yǎng)一段時(shí)間后,從中取適量培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移接種到選擇培養(yǎng)液中培養(yǎng)36 h后,再轉(zhuǎn)移到相同的選擇培養(yǎng)液中培養(yǎng)。與培養(yǎng)液不同,培養(yǎng)液成份的主要特點(diǎn)是 。在相同的培養(yǎng)液中轉(zhuǎn)移培養(yǎng)主要是為了避免原培養(yǎng)液中 的干擾,同時(shí),又可以 。(3)從中取適量的培養(yǎng)液涂布到之前,需要 ,涂布前需將涂布器 。(4)根據(jù)中菌落的形態(tài)特征,選取所需的菌種接種到 培養(yǎng)基中臨時(shí)保藏。(5)為進(jìn)一步鑒定菌種,需從菌株中提取少量的DNA分子通過(guò) (填技術(shù))擴(kuò)增并檢測(cè)。6.(1)增加溶解氧 使菌種與培養(yǎng)液充分混勻(接觸) (2) 以膽固醇為唯一碳源(強(qiáng)調(diào)唯一) 碳源 篩選(純化)獲得可轉(zhuǎn)化膽固醇的菌種 (3)適當(dāng)稀釋 灼燒并
11、冷卻(答全給分) (4)斜面 (5)PCR7.人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃,可用來(lái)發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究。 請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項(xiàng)不需要的是 (填序號(hào))。酒精燈 培養(yǎng)皿 顯微鏡 無(wú)菌水(2) 稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里,將聚集在一起的菌種分散成_,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。“一個(gè)菌落”在生態(tài)學(xué)中屬于一個(gè)_。在涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過(guò)多的原因是 。(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí),若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒
12、精棉球擦凈的原因是 。(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。 研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落(見(jiàn)右圖)。 圖中降解圈大小與纖維素酶的 有關(guān)。 圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是 (填圖中序號(hào))。6. (1) (2)單個(gè)細(xì)菌 種群 培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果(3)避免培養(yǎng)基污染棉塞 (4)量與活性 8. (7分) 回答下列有關(guān)微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的問(wèn)題。苯酚(C6H5OH)是廣泛存在于化工行業(yè)廢水中的一種污染物。為了分離和純化高效分解苯酚的細(xì)菌,科研人員進(jìn)行了如下圖所示的實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)
13、題:(1)該實(shí)驗(yàn)中步驟使用了LB培養(yǎng)基,其主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉,請(qǐng)推測(cè)步驟的目的是 。該實(shí)驗(yàn)步驟中的培養(yǎng)基成分的與LB最大區(qū)別是以苯酚作為唯一的_ 。(2)接種用的平板培養(yǎng)基在制備時(shí)需注意的是_。A待培養(yǎng)基冷卻至50左右時(shí)進(jìn)行倒平板B倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行高壓滅菌處理C等到平板培養(yǎng)基冷卻凝固后才可以蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋D待平板冷卻凝固約5-10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置(3)步驟的目的是_。某種鏈球菌能引起人的咽喉感染,研究人員欲測(cè)試一種新抗生素(P)對(duì)該種鏈球菌的殺菌效果。將此鏈球菌分別接種在三個(gè)培養(yǎng)皿中,在2號(hào)培養(yǎng)皿中放入一片浸過(guò)抗生素(P)的濾紙圓片,在3號(hào)培養(yǎng)皿中放入沒(méi)
14、有浸抗生素的濾紙圓片,如下圖所示。培養(yǎng)皿1培養(yǎng)皿2培養(yǎng)皿3抗生素(1)三個(gè)培養(yǎng)皿中,實(shí)驗(yàn)組是_,對(duì)照組是_。(2)培養(yǎng)皿3中的小圓片在放置前需做處理,具體步驟是:_。8.(7分) (1)能使菌種成倍擴(kuò)增(使微生物大量繁殖) 碳源(2)AD(3)分離純化能分解苯酚的菌株(1) 培養(yǎng)皿2 培養(yǎng)皿1和3(寫(xiě)全給分) (2)將圓片高溫滅菌處理,浸在無(wú)菌水中,不添加任何抗生素9(8分)為了獲得-胡蘿卜素產(chǎn)品,某小組開(kāi)展了產(chǎn)-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是 ;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應(yīng)該 。(2)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其
15、目的是。(3)右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是。(填序號(hào))安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng),最可能的原因是 。(5)為增加-胡蘿卜素提取量,在研磨酵母細(xì)胞時(shí),添加石英砂的目的是 ;研磨時(shí) (填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是 。9(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌) 用牛皮紙(報(bào)紙)包扎器皿(2)抑制細(xì)菌(放線菌)生長(zhǎng) (3) (4)接種環(huán)溫度過(guò)高,菌被殺死(5)有助于研磨充分 不需要 -胡蘿卜素較
16、耐酸10. (8分)櫻桃番茄富含多種天然有機(jī)酸、人體必需氨基酸、維生素和多種礦物質(zhì),但因其含糖量不高,影響酒精發(fā)酵效果,經(jīng)實(shí)踐摸索,調(diào)整發(fā)酵工藝,櫻桃番茄成為釀造保健酒的好原料。下圖1是利用固定化酵母或游離酵母發(fā)酵櫻桃番茄果酒的工藝流程,請(qǐng)分析回答:(1) 發(fā)酵前,需要在櫻桃番茄汁中添加適量白砂糖,那么添加白砂糖的主要目的是_。(2) 主發(fā)酵結(jié)束后,需將上層酒液轉(zhuǎn)移到另一滅菌容器中進(jìn)行后發(fā)酵,為了防止醋酸菌污染,加入容器中液體的量應(yīng)_(填“注滿”“2/3”或“1/3”),以保證果酒品質(zhì)。(3) 圖2是固定化酵母發(fā)酵與游離酵母發(fā)酵的對(duì)比結(jié)果,從圖中可以看出,兩者發(fā)酵速率相近,但發(fā)酵前期游離發(fā)酵比
17、固定發(fā)酵產(chǎn)生的酒精量多,主要原因是_;后期游離酵母發(fā)酵速度減慢,除了底物濃度降低外,還可能是因?yàn)開(kāi)。(4) 為探究固定化酵母重復(fù)使用的效果,對(duì)固定化酵母進(jìn)行了2次連續(xù)的重復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn),圖3是實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,試分析在第2次發(fā)酵前期,酵母降糖速度明顯加快的原因是_。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明固定化細(xì)胞具有_的優(yōu)點(diǎn)。(5) 為分離純化優(yōu)良酵母菌品種,采用平板劃線法進(jìn)行如下操作,排序最合理的是_。A. B. C. D. 10. (8分)(1) 提高酒精的生成量(2) 注滿(3) 游離酵母和營(yíng)養(yǎng)液的接觸更充分,酒精排出更快酒精對(duì)游離酵母的抑制作用更強(qiáng)(4) 固定化材料中的活酵母數(shù)量比第一次多(或細(xì)胞增殖了)可反復(fù)利用(5)
18、 B(2分)11. (9分)“影印培養(yǎng)法”是一種使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的接種培養(yǎng)方法??茖W(xué)家采用“影印培養(yǎng)法”研究大腸桿菌抗鏈霉素突變是自發(fā)產(chǎn)生的還是在鏈霉素的作用下誘發(fā)產(chǎn)生的,具體操作步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖所示。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:(1) 為了滿足大腸桿菌生長(zhǎng)的需求,在制備培養(yǎng)基時(shí),除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外,還要考慮_和_等。(2) 在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中,為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_,操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_。靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能_。(3) 3號(hào)、7號(hào)、11號(hào)培養(yǎng)皿中加入鏈霉素的作用是_,3號(hào)培養(yǎng)皿中的菌落比1號(hào)、2號(hào)中的
19、菌落少很多,這說(shuō)明_。(4) 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得出的研究結(jié)論是_,依據(jù)是_。11. (9分)(1) 滲透壓酸堿度(2) 滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3) 選擇發(fā)生抗鏈霉素突變的大腸桿菌數(shù)量少(4) 大腸桿菌的抗鏈霉素突變是自發(fā)產(chǎn)生的1、2號(hào)(或12號(hào))培養(yǎng)皿中的抗藥性大腸桿菌沒(méi)有接觸鏈霉素12.(8分)某生物興趣小組分離提純葡萄皮上的野生酵母菌時(shí),選取了從自然界中采集到的葡萄,用無(wú)菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無(wú)菌的三角瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)在培養(yǎng)基配制過(guò)程中,加入了青霉素等抗生素,其目的是 。純化酵母菌時(shí),常用的接種方法是 。(2)該實(shí)驗(yàn)小組成功分離出某品種的酵母菌后,用移液器設(shè)定1
20、mL的接種 量分別接種于三個(gè)盛有等量液體培養(yǎng)基的錐形瓶中,放置在搖床上培養(yǎng),分別設(shè)定搖床轉(zhuǎn)速為210r/min、230r/min、250r/min,檢測(cè)結(jié)果如右圖所示。從圖中可看出 ,原因是 。(3) 該小組同學(xué)在計(jì)數(shù)時(shí)觀察到酵母菌出現(xiàn)抱團(tuán)現(xiàn)象。抱團(tuán)現(xiàn)象可能是酵母菌混合不均 造成的,因此取樣前將錐形瓶中的培養(yǎng)液 ,取樣時(shí)用吸管 。如果該現(xiàn)象是培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)目過(guò)多而造成的,需對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,稀釋10倍的操作方法是吸取1mL菌液注入盛有 的試管中,并 。12.(8分)(1)抑制細(xì)菌的生長(zhǎng) 平板劃線法(稀釋涂布法) (2) 搖床轉(zhuǎn)速越高,酵母菌繁殖的速度和總量越高 搖床轉(zhuǎn)速越高,提供
21、的氧氣越充足 (3)充分震蕩搖勻 來(lái)回吹吸若干次 9mL水 充分混勻 13. (8分)微生物與我們的生活密切相關(guān)。分析并回答下列與微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用相關(guān)的問(wèn)題。(1) 下表是某液體培養(yǎng)基成分含量表。編號(hào)成分NH4HCO3 KH2PO4CaSO4 FeCl3維生素H2O含量0.5 g0.3 g0.5 g0.5 g少許100 mL用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌,其同化作用的類型屬于_; 此培養(yǎng)液若用來(lái)篩選自生固氮菌,則應(yīng)除去的成分是表格中的_;若要將該液體培養(yǎng)基配制為固體培養(yǎng)基,則還需加入的物質(zhì)是_。(2) 檢驗(yàn)飲用水中大腸桿菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。 檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí),通常將水樣進(jìn)行一系列的
22、梯度稀釋,然后采用_法將不同稀釋度的水樣接種到培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量。下面4種菌落分布圖中,不可能用該方法得到的是_。 用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組。設(shè)置方法是_。 如分別取0.1 mL已稀釋103倍的水樣分別接種到3個(gè)培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為45、56、67,則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_(kāi)。 已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)氣?,F(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管,應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌?_。13. (8分)(1) 自養(yǎng)型NH4HCO3瓊脂(2) (稀釋)涂布平板D 相同條件下直接培養(yǎng)不涂布水樣的空白培養(yǎng)基 5.6
23、5;108個(gè) 通過(guò)無(wú)菌操作向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣,再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿,塞上塞子,混勻后置于37恒溫箱培養(yǎng)24 h。若試管內(nèi)有氣泡生成,說(shuō)明水樣中有大腸桿菌14. (9分)自生固氮菌可不與其它植物共生,能獨(dú)立完成固氮作用,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛的用途。研究人員從土壤中篩選高效的自生固氮菌株,并對(duì)其固氮能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1) 在配制含瓊脂的培養(yǎng)基和倒平板的過(guò)程中,下列選項(xiàng)不需要的是_(填序號(hào))酒精燈接種環(huán)高壓蒸汽滅菌鍋棉塞(2) 要從土壤樣品中分離出自生固氮菌,在獲得土壤浸出懸液后,可以采用稀釋涂布平板法將菌液涂布于_培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選。(3) 在涂布平板時(shí),
24、滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量不宜過(guò)多的原因是_。(4) 涂布培養(yǎng)四天后,可通過(guò)觀察_的形態(tài)特征來(lái)統(tǒng)計(jì)土壤中自身固氮菌的種類。(5) 為了進(jìn)一步篩選高效固氮菌,研究人員將上述獲得的等量的四種固氮菌分別接種到等量的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)相同時(shí)間后,對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)并測(cè)定培養(yǎng)液中的含氮量,結(jié)果如下表:甲菌乙菌丙菌丁菌菌量(個(gè)/mL)2.1×1052.5×1051.8×1052.0×105含氮量(K)3.324.385.345.32培養(yǎng)過(guò)程中需不斷振蕩的目的是_??梢圆捎胈方法對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù),假設(shè)計(jì)數(shù)室長(zhǎng)和寬均為1 mm,深0.1 mm,每個(gè)小方格中平均有7個(gè)固
25、氮菌,則10 mL培養(yǎng)液中有固氮菌的數(shù)量為_(kāi)個(gè);如果小方格中固氮菌的數(shù)量太多,無(wú)法數(shù)清,則應(yīng)_。由上述結(jié)果可知,_菌的固氮效率最高。14. (9分)(1) (2) 缺氮(3) 培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果(4) 菌落(5) 讓固氮菌與培養(yǎng)液充分接觸抽樣檢測(cè)2.8×108對(duì)培養(yǎng)液稀釋后計(jì)數(shù)丙15. (8分)某研究小組將一組相同圓紙片放入不同濃度的麥迪霉素(一種抗生素)溶液中浸泡后,放在接種有大腸桿菌的培養(yǎng)基上培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)結(jié)果如右圖1。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題:圖1圖2(1) 將裝有培養(yǎng)基的滅菌包裝入高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),注意不要裝得太擠,以免因_而影響滅菌的效果。加熱
26、初期,必須將滅菌鍋內(nèi)的冷空氣排盡,否則將因_而影響滅菌的效果。倒平板時(shí),待平板冷卻凝固后,應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)放置,并用記號(hào)筆在_上標(biāo)明培養(yǎng)基的種類、培養(yǎng)日期、平板上樣品的稀釋度、培養(yǎng)微生物名稱及制作者姓名等信息。(2) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯的是濃度為_(kāi)(填圖1中數(shù)字)的麥迪霉素。(3) 該實(shí)驗(yàn)中,宜使用_方法接種大腸桿菌,在培養(yǎng)和接種大腸桿菌時(shí)要特別注意進(jìn)行無(wú)菌操作。為了避免無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,對(duì)圓紙片的要求是_。(4) 該研究小組運(yùn)用上述實(shí)驗(yàn)方法,還研究了相同濃度的三種不同抗生素A、B、C對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響。請(qǐng)?jiān)谥付ㄎ恢?,以圖示的方法表示這一處理方案(可模仿圖1中圖示并
27、加以必要注解的方法)_。15. (8分)(1) 影響蒸汽流通(溫度)達(dá)不到規(guī)定溫度皿底(2) (3) 稀釋涂布平板法大小、質(zhì)地相同(4) 見(jiàn)圖2(每畫(huà)出2組圓紙片(含字母),并正確標(biāo)注得1分,共2分)圖216. (8分)酵母菌是日常生產(chǎn)和生活中應(yīng)用極其廣泛的一種微生物。下圖是有關(guān)酵母菌的實(shí)驗(yàn)操作。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1) 實(shí)驗(yàn)中試管用濾膜封口,其目的是_,A、C過(guò)程所采用的接種方法分別是_,_。(2) E過(guò)程利用血球計(jì)數(shù)極制片時(shí),操作步驟是_,多余的培養(yǎng)液用濾紙吸去。(3) G過(guò)程利用酵母菌進(jìn)行果酒制作,為適當(dāng)提高果酒的生產(chǎn)速率,進(jìn)氣口應(yīng)_,制作好的果酒,還可繼續(xù)生產(chǎn)果醋,用果酒制作果醋的原理是_(
28、寫(xiě)化學(xué)反應(yīng)式)。(4) H過(guò)程進(jìn)行酵母細(xì)胞固定化的方法是_,在用注射器將海藻酸鈉和酵母細(xì)胞的混合液滴加到X溶液中時(shí),應(yīng)注意控制好_。16. (8分)(1) 既保證氣體流通,又能防止雜菌污染平板劃線法稀釋涂布平板法(2) 先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上,用吸管吸取培養(yǎng)液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入(3) 先打開(kāi)后關(guān)閉C2H5OHO2CH3COOHH2O(4) 包埋法注射器的推進(jìn)速度/注射器距離X溶液液面高度(答一點(diǎn)即給分)17. (8分)請(qǐng)回答下列與玉米秸桿處理有關(guān)的問(wèn)題:(1) 秸桿的主要成分是纖維素,牛本身沒(méi)有相應(yīng)的消化酶,但胃內(nèi)有一種微生物可以幫助其分解,這種微生物與牛的種間關(guān)系為 _。尿素并不是牛馬的必須營(yíng)養(yǎng),過(guò)多甚至有害,但有經(jīng)驗(yàn)的農(nóng)民常在其草料內(nèi)噴少量尿素,據(jù)此題的信息你認(rèn)為尿素的作用是 _。(2) 分離純化能分解秸稈的微生物時(shí),需對(duì)培養(yǎng)基和接種針進(jìn)行滅菌處理,常用的方法依次是_。(3) 將玉米秸稈人工收獲后,將其鍘碎、壓實(shí)、密封儲(chǔ)藏。秸桿經(jīng)此
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