藥廠及醫(yī)療器械的純化水及環(huán)境檢驗培訓

1、潔凈室（區(qū)）環(huán)境以及純化水的檢驗培訓第一部分 潔凈室（區(qū)）環(huán)境檢驗一、潔凈室（區(qū)）的定義二、潔凈室（區(qū)）的預期用途三、潔凈室（區(qū)）的構(gòu)成四、潔凈室（區(qū)）的潔凈度級別和設置原則五、潔凈室（區(qū)）的日常監(jiān)測項目六、影響潔凈室（區(qū)）潔凈度的主要因素第二部分 純化水檢驗一、純化水定義二、純化水制備方法三、純化水制備流程四、純化水的使用要求和儲存要求五、純化水的檢測方法和監(jiān)測周期六、純化水的用途第一部分 潔凈室（區(qū)）環(huán)境檢驗一、潔凈室（區(qū)）的定義潔凈室（區(qū)）是指將一定空間范圍內(nèi)的空氣中的塵粒、微粒子、有害空氣、細菌、微生物等污染物排除，并將室內(nèi)溫度、潔凈度、室內(nèi)壓力、氣流速度與氣流分布、照明等在某一需求范

2、圍內(nèi)，而所給予特別設計的房間。其建筑結(jié)構(gòu)、裝備及其作用均具有減少該房間（區(qū)域）內(nèi)污染源的介入、產(chǎn)生和滯留的功能。不論外在空氣條件如何變化，其室內(nèi)均能具有維持原先所設定要求的潔凈度、溫濕度及壓力等性能的特性。對于醫(yī)療器械而言，潔凈室（區(qū)）包括生產(chǎn)區(qū)域和檢驗區(qū)域。無菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)范（YY0033-2000）標準中對潔凈室（區(qū)）定義有了明確的規(guī)定，即需要對塵埃及微生物含量進行控制的房間（區(qū)域），其建筑結(jié)構(gòu)、裝備及其作用均具有減少對該房間（區(qū)域）內(nèi)污染源的介入、產(chǎn)生和滯留的功能。二、潔凈室（區(qū)）的預期用途潔凈室（區(qū)）最主要的作用在于控制產(chǎn)品所接觸大氣的潔凈度及溫濕度，使產(chǎn)品能在一個良好的環(huán)境空間

3、中生產(chǎn)、制造和微生物檢驗，此空間我們稱之為潔凈室（區(qū)）。三、潔凈室（區(qū)）的構(gòu)成一般情況下，潔凈室（區(qū)）是指醫(yī)療器械生產(chǎn)和檢驗所需的工作環(huán)境，對于生產(chǎn)環(huán)節(jié)，應包括與生產(chǎn)產(chǎn)品工藝流程相對應的功能間，如注塑間、干燥間等；對于檢驗環(huán)節(jié)，應包括與檢驗有關的功能間，如陽性對照間、無菌檢驗間和微生物限度間等；為生產(chǎn)服務的輔助功能間，如洗衣間、潔具間等以及連接各功能間的緩沖過渡通道。四、潔凈室（區(qū)）的潔凈度級別和設置原則（一）潔凈度級別潔凈度：潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中含大于或等于某一粒徑懸浮粒子的允許統(tǒng)計數(shù)。依據(jù)無菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)范（YY0033-2000）標準，潔凈室（區(qū)）的環(huán)境級別分為30萬級、10萬

4、級、萬級和100級。潔凈度級別塵埃最大允許數(shù)，個/m3微生物最大允許數(shù)0.5m5m沉降菌，個/皿浮游菌，個/m3100級3,50001510,000級350,0002,0003100100,000級3,500,00020,00010500300,000級10,500,00060,00015（二）設置原則除了上述標準之外，國家食品藥品監(jiān)督管理局2009年發(fā)布的醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（試行）中分別規(guī)定了植入性醫(yī)療器械潔凈室（區(qū)）設置原則和無菌醫(yī)療器械潔凈室（區(qū)）設置原則，體外診斷試劑生產(chǎn)實施細則（試行）中也規(guī)定了相應產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)境級別要求，生產(chǎn)企業(yè)應結(jié)合相應法規(guī)要求和技術標準要求識別并確定本企業(yè)潔

5、凈環(huán)境級別，并驗證后執(zhí)行。醫(yī)療器械法規(guī)和標準沒有規(guī)定的，生產(chǎn)企業(yè)可參照上述要求確定產(chǎn)品生產(chǎn)潔凈級別，或自行驗證并確定產(chǎn)品的生產(chǎn)潔凈級別。潔凈室（區(qū)）潔凈度級別設置原則：1.采用使污染降至最低限的生產(chǎn)技術，以保證醫(yī)療器械不受污染或能有效排除污染。倡導技術進步，建議用先進的生產(chǎn)技術。包括先進的生產(chǎn)工藝、先進的設備、工裝和設施等。在生產(chǎn)過程中盡量減少人為因素，最大程度地使產(chǎn)品不暴露在操作環(huán)境中，盡可能避免人與產(chǎn)品的直接接觸。2.植入和介入到血管內(nèi)器械，不清洗零部件的加工，末道清洗、組裝、初包裝及其封口，不低于萬級。植入到人體組織、與血液、骨腔或非自然腔道直接或間接接觸器械，（不清洗）零部件的加工、末

6、道清洗、組裝、初包裝及其封口等，不低于10萬級。與人體損傷表面和粘膜接觸器械，（不清洗）零部件的加工、末道精洗、組裝、初包裝及其封口，不低于30萬級。3.與無菌醫(yī)療器械的使用表面直接接觸、不清洗即使用的初包裝材料，宜遵循與產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)境的潔凈度級別相同的原則，使初包裝材料的質(zhì)量滿足所包裝無菌醫(yī)療器械的要求。若初包裝材料不與無菌醫(yī)療器械使用表面直接接觸，不低于30萬級。對于有要求或無菌操作技術加工的，在萬級下的局部100級潔凈室（區(qū)）內(nèi)。潔凈工作服清洗、干燥和穿潔凈工作服室、專用工位器具的末道清洗與消毒的區(qū)域的空氣潔凈度級別可低于生產(chǎn)區(qū)一個級別。無菌工作服的整理、滅菌后的貯存應在萬級潔凈室（區(qū)）內(nèi)

7、。4.醫(yī)療器械法規(guī)規(guī)定，高風險生物活性物料（如強毒微生物、芽胞菌制品、激素類試劑組分、放射性物質(zhì)）的操作應使用單獨的空氣凈化系統(tǒng)，與相鄰區(qū)域應保持負壓，排出的空氣不應循環(huán)使用；陰性、陽性血清、質(zhì)?；蜓褐破返奶幚聿僮鲬斣谥辽偃f級環(huán)境下進行，與相鄰區(qū)域保持相對負壓，并符合防護規(guī)定；生產(chǎn)激素類試劑組分的潔凈環(huán)境應當采用獨立的專用的空氣凈化系統(tǒng)，且凈化空氣不得循環(huán)使用；強毒微生物操作區(qū)、芽胞菌制品操作區(qū)應與相鄰區(qū)域保持相對負壓，配備獨立的空氣凈化系統(tǒng)，排出的空氣不得循環(huán)使用。酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑、免疫熒光試劑、免疫發(fā)光試劑、聚合酶鏈反應（PCR）試劑、金標試劑、干化學法試劑、細胞培養(yǎng)基、校準品與質(zhì)

8、控品、酶類、抗原、抗體和其他活性類組分的配制及分裝等產(chǎn)品的配液、包被、分裝、點膜、干燥、切割、貼膜、以及內(nèi)包裝等工藝環(huán)節(jié)，現(xiàn)場核實，至少應在10萬級潔凈環(huán)境中進行操作，無菌物料的分裝必須在局部100級潔凈環(huán)境下進行。5.無菌實驗室原則上應設3間萬級下的局部100級潔凈室（區(qū)），用作無菌室、陽性對照室和微生物限度室。無菌檢測實驗室原則上應當和潔凈生產(chǎn)區(qū)分開設置，有獨立的區(qū)域、單獨的空調(diào)送風系統(tǒng)和專用的人流物流通道及實驗準備區(qū)等。陽性對照室應配備百級潔凈工作臺；如陽性對照室處于非受控環(huán)境，應提供驗證資料，并配備生物安全柜。企業(yè)可在啟用的潔凈室（區(qū)）入口處張貼潔凈室（區(qū)）平面圖，標識潔凈室（區(qū)）布局

9、、環(huán)境控制級別以及人流物流走向等。五、潔凈室（區(qū)）的日常監(jiān)測項目依據(jù)無菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)范（YY0033-2000）標準，潔凈室（區(qū)）的監(jiān)測項目包括溫濕度、壓力、風速、換氣次數(shù)、塵埃粒子數(shù)、沉降菌或浮游菌。監(jiān)測項目技術指標監(jiān)測方法監(jiān)測頻次100級10,000級100,000級300,000級溫度, （無特殊要求時）1828JGJ 711次/班相對濕度, %45651次/班風速, m/s水平層流0.4垂直層流0.31次/月?lián)Q氣次數(shù),次/ h2015121次/月靜壓差,Pa不同級別潔凈室(區(qū)) 之間5潔凈室(區(qū))與室外大氣101次/月塵埃個/m30.5m3,500350,0003,500,000

10、10,500,000GB/T 162921次/季5m02,00020,00060,000浮游菌數(shù),個/m35 100 500GB/T 162931次/季沉降菌數(shù),個/皿1 3 10 15GB/T 162941次/周其中，潔凈度（沉降菌）的檢驗標準按國家技術監(jiān)督局發(fā)布的醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法，采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。（一） 沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）的溫濕度須達到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空

11、氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。潔凈室（區(qū)）的溫度和相對濕度應與其生產(chǎn)及工藝要求相適應（無特殊要求時，溫度在1826，相對濕度在45%65%之間為宜），同時應滿足測試儀器的使用范圍。（二） 沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）已經(jīng)過消毒。測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員不得多于2人。靜態(tài)測試時，培養(yǎng)皿暴露時間為30min以上；動態(tài)測試時，培養(yǎng)皿暴露時間為不大于4h。（三） 將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預先確定取樣點，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5h，再將培養(yǎng)皿蓋上蓋后倒置。全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在303

12、5培養(yǎng)，時間不少于3天。用肉眼直接計數(shù)，然后用510倍放大鏡檢查，是否有遺漏。七、影響潔凈室（區(qū)）潔凈度的主要因素（一）醫(yī)療器械產(chǎn)品自身特性（二）醫(yī)療器械生產(chǎn)工藝（三）人員、設施衛(wèi)生要求由于患者或工作人員自身帶菌而污染或由于和非完全無菌的用具，器械和人的接觸而污染（四）大氣環(huán)境由于空氣中所含細菌的沉降、附著或被吸入而污染（五）其他由于昆蟲等其他因素而污染細菌還可能產(chǎn)生毒性物質(zhì)、色素等代謝產(chǎn)物污染類型示例來源：（舉例）處理方法：（舉例）非活性（粒子）金屬斑點服裝纖維設備員工服裝外界空氣水供應浮游粒子通過HEPA過濾接觸地方清洗和滅菌水純化系統(tǒng)活性（微生物）細菌發(fā)酵菌人員水外界空氣設備，工具浮游粒

13、子通過HEPA過濾液體無菌過濾（0.2um）組分蒸汽滅菌或輻射滅菌內(nèi)毒素（通常和浮游細）來自某種生物（通常為水生）的細胞壁殘渣暴露一段時候之后的濕設備更換零部件或者容器/密封裝置熱苛性鈉溶液高溫（200）根據(jù)時間決定第二部分 純化水檢驗一、工藝用水定義在醫(yī)療器械生產(chǎn)過程中，根據(jù)不同的工序及質(zhì)量要求，所用的不同要求的水的總稱。依據(jù)中華人民共和國藥典規(guī)定，工藝用水包括飲用水、純化水、注射用水和滅菌注射用水。其中：（一）飲用水是指供人生活的飲水和生活用水，應符合生活飲用水衛(wèi)生標準（GB5749-2006）。（二）純化水是指經(jīng)蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其它適宜方法制備的供藥用的水，不含任何附加劑。

14、純化水是以飲用水為原水，經(jīng)過一定方法去除水中雜質(zhì)、離子、懸浮物等后得到的符合標準要求的水。理想的純化水（不含雜質(zhì)）在25oC下的電阻率為18.2M.cm（電導率為0.055s/cm），電導率隨溫度變化，溫度越高，電導率越大。（三）目前，醫(yī)療器械行業(yè)內(nèi)還有“蒸餾水”和“去離子水”的說法。其中：（1）蒸餾水即采用特殊設計的蒸餾器以飲用水為原水用蒸餾法制備的純化水。也屬于純化水的一種，其要求與純化水一致。蒸餾水優(yōu)點是可除水中的非揮發(fā)性雜質(zhì)；但能耗較大、制水量小。（2）去離子水為采用離子交換法、反滲透法、超濾法等非熱處理制備的純化水。即去離子水是指除去了呈離子形式雜質(zhì)后的純化水?，F(xiàn)在的工藝主要采用反滲

15、透的方法制取，也屬于純化水的一種。（3）去離子水被稱為“超純水”或是“18兆歐水”的說法一般用于半導體行業(yè)中。相對而言，蒸餾水只是先汽化再冷凝，其純度如電導率一般不如純度高的去離子水。蒸餾水與去離子水檢驗項目的主要區(qū)別見表。檢驗項目蒸餾水去離子水電 導 率×熱    原××二、工藝用水制備方法水中需要去除的物質(zhì)包括：電解質(zhì)、顆粒、有機物、微生物。其中電解質(zhì)以各類可溶性無機物、有機物離子狀態(tài)存在于水中，因具有導電性，可通過測量水的電導率反映這類電解質(zhì)在水中的含量；溶解氣體包括CO2、CO、H2S、Cl2、O2、CH4、N2等；有機酸、有

16、機金屬化合物等有機物在水中常以陰性或中性狀態(tài)存在，分子量大，通常用總有機碳（TOC)和化學耗氧量(COD)反映這類物資在水中相對含量；懸浮顆粒主要以泥沙、塵埃、微生物、膠化顆粒、有機物等為主，用顆粒計數(shù)器反映這類雜質(zhì)在水中的含量；微生物則包括細菌、浮游生物、藻類、病毒、熱原等。目前，針對上述水中雜質(zhì)去除的要求，純化水制備主要有以下方式：（一）樹脂離子交換法這是最早使用的至今依然被許多企業(yè)所采用的一種方法。其用陰、陽樹脂交換水中離子使水質(zhì)得到純化的方法，投資少、使用方便。但是，當交換樹脂飽和后需用大量酸堿去再生樹脂使其恢復活力，所排放出來的廢酸堿易污染環(huán)境。（二）蒸餾冷凝法這是過去常用的一種制備

17、純化水的方法。其先把原水加熱蒸發(fā)，再冷凝下來除去水中離子，以制備純化水。由于這種方法存在耗能大、水中溶解氣體難去除、設備容易結(jié)垢等缺點，逐漸不被采用。（三）電滲析法目前這種使用電滲析膜片制取純化水的方法在部分企業(yè)中使用。由于電滲析法在制水過程中濃水排放量大，水源消耗多，從節(jié)能用水的角度，這種方法也越來越不被優(yōu)先采用。（四）反滲透法（RO)從上世紀80年代后半期開始逐漸此法在制藥、醫(yī)療器械生產(chǎn)工業(yè)中被采用。其利用反滲透膜，并借助于外界施加的壓力（如水泵壓力）為動力，強制原水中的水分子透過有選擇性透過膜達到除鹽、除雜質(zhì)的目的，使水得到純化。這種方法操作方便，出水量大，無污染，近年來已被廣泛地使用。

18、制備過程：當純水和鹽水被理想半透膜隔開，理想半透膜只允許水通過而阻止鹽通過，此時膜純水側(cè)的水會自發(fā)地通過半透膜流入鹽水一側(cè)，這種現(xiàn)象稱為滲透，若在膜的鹽水側(cè)施加壓力，那么水的自發(fā)流動將受到抑制而減慢，當施加的壓力達到某一數(shù)值時，水通過膜的凈流量等于零，這個壓力稱為滲透壓力，當施加在膜鹽水側(cè)的壓力大于滲透壓力時，水的流向就會逆轉(zhuǎn)，此時，鹽水中的水將流入純水側(cè)，上述現(xiàn)象就是水的反滲透（RO）處理的基本原理。 RO反滲透膜孔徑小至納米級（1納米=10-9米），在一定的壓力下，H2O分子可以通過RO膜，而源水中的無機鹽、重金屬離子、有機物、膠體、細菌、病毒等雜質(zhì)無法通過RO膜，從而使可以透過的純水和無

19、法透過的濃縮水嚴格區(qū)分開來。 一般性的自來水經(jīng)過RO膜過濾后的純水電導率5s/cm（RO膜過濾后出水電導=進水電導×除鹽率，一般進口反滲透膜脫鹽率都能達到99%以上，5年內(nèi)運行能保證97%以上。對出水電導要求比較高的，可以采用2級反滲透，再經(jīng)過簡單的處理，水電導能小于1s/cm）, 符合國家實驗室三級用水標準。再經(jīng)過原子級離子交換柱循環(huán)過濾，出水電阻率可以達到18.2M.cm，超過國家實驗室一級用水標準（GB6682-2008）。 （五）反滲透+電去離子（Electrodeionization，簡稱EDI）法EDI是一種將離子交換技術，離子交換膜技術和離子電遷移技術相結(jié)合的純水制造技

20、術。屬綠色環(huán)保技術。EDI凈水設備具有連續(xù)出水、無需酸堿再生等優(yōu)點，已在制備純水的系統(tǒng)中逐步代替混床作為精處理設備使用。三、工藝用水制備流程不同方法獲得的純化水主要制備流程見表。制備方法蒸餾法電滲析樹脂離子交換法反滲透反滲透+EDI流程原水預處理離子交換過濾蒸餾用水原水預處理電滲析離子交換精濾用水原水預處理離子交換混床精濾用水原水預處理一級RO二級RO精濾用水原水預處理組合反滲透混床精濾用水原水預處理一級ROEDI精濾用水其中：（一）預處理是通過物理方法（如澄清、沙濾、活性碳 (除氯離子)）、化學方法（如加藥殺菌、混凝、絡合、離子交換）、電化學方法（如電凝聚）去除原水中的懸浮物、膠體、微生物以

21、及原水中過高的濁度和硬度。（二）脫鹽過程典型的處理方法為陰陽離子交換、反滲透、電滲析、EDI等；該過程結(jié)束可制得純水。（三）后處理過程典型的方法包括：反滲透和蒸餾。四、工藝用水的使用要求和儲存要求（一）注射用水必須貯存在無毒、無腐蝕的不銹鋼（或耐腐蝕搪瓷、玻璃）密閉容器中，不能存放在塑料容器中（若將不銹鋼對注射用水的污染程度當作1，則PVC的污染程度就為7.6）。注射用水應在制備后的12小時內(nèi)使用。如貯存時間需要超過12小時者，必須在80以上保溫、65以上循環(huán)保溫、4度以下存放或其它適宜方法無菌貯存在優(yōu)質(zhì)不銹鋼貯槽中，貯槽必須密閉，排氣口應有無菌過濾裝置。（二）生產(chǎn)企業(yè)應對純化水制備后存儲的相

22、關要求進行驗證并確認，并提供驗證確認報告。五、工藝用水的監(jiān)測項目和監(jiān)測周期（一）檢驗依據(jù)： 中國藥典2010版二部標準 【性狀】  本品為無色的澄清液體；無臭，無味。 【檢查】  酸堿度   取本品10ml，加甲基紅指示液2滴，不得顯紅色；另取10ml，加溴麝香草酚藍指示液5滴，不得顯藍色。 硝酸鹽  取本品5ml置試管中，于冰浴中冷卻，加10%氯化鉀溶液0.4ml與0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml，搖勻，緩緩滴加硫酸5ml，搖勻，將試管于50水浴中放置15分鐘，溶液產(chǎn)生的藍

23、色與標準硝酸鹽溶液取硝酸鉀0.163g，加水溶解并稀釋至100ml，搖勻，精密量取1ml，加水稀釋成100ml，再精密量取10ml，加水稀釋成100ml，搖勻，即得(每1ml相當于1gNO3)0.3ml,加無硝酸鹽的水4.7ml,用同一方法處理后的顏色比較,不得更深(0.000006%)。 亞硝酸鹽  取本品10ml，置納氏管中，加對氨基苯磺酰胺的稀鹽酸溶液(1100)1ml與鹽酸萘乙二胺溶液(0.1100)1ml，產(chǎn)生的粉紅色，與標準亞硝酸鹽溶液取亞硝酸鈉0.750g(按干燥品計算)，加水溶解，稀釋至100ml，搖勻，精密量取1ml，加水稀釋成100ml，搖勻，

24、再精密量取1ml，加水稀釋成50ml，搖勻，即得(每1ml相當于1gNO2)0.2ml，加無亞硝酸鹽的水9.8ml，用同一方法處理后的顏色比較，不得更深(0.000002%)。 氨   取本品50ml，加堿性碘化汞鉀試液2ml，放置15分鐘；如顯色，與氯化銨溶液(取氯化銨31.5mg，加無氨水適量使溶解并稀釋成1000ml)1.5ml，加無氨水48ml與堿性碘化汞鉀試液2ml制成的對照液比較，不得更深(0.00003%)。 電導率  應符合規(guī)定(附錄 S)。 總有機碳  不得過0.50

25、mg/L (附錄 R) 。 易氧化物   取本品100ml，加稀硫酸10ml，煮沸后，加高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)0.10ml，再煮沸10分鐘，粉紅色不得完全消失。 以上總有機碳和易氧化物兩項可選做一項。 不揮發(fā)物   取本品100ml，置105恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干，并在105干燥至恒重，遺留殘渣不得過1mg。 重金屬   取本品100ml，加水19ml，蒸發(fā)至20ml，放冷，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量使成25ml，加硫代乙酰胺試液2ml，搖勻，放置2分鐘，與標準鉛溶液1.0ml加水19ml用同一方法處理后的顏色比較，不得更深(0.00001%)。 微生物限度&#