涎腺腫瘤AgNOR和p53表達(dá)的關(guān)系

1、涎腺腫瘤AgNOR和p53表達(dá)的關(guān)系作者：毛明劉彥普唐玉祥王曉峰朱峰 【關(guān)鍵詞】腫瘤 關(guān)鍵詞:腫瘤;涎腺;核仁組成區(qū);圖像分析;免疫組化 0引言 涎腺腫瘤是口腔頜面部較常見的一類腫瘤，約占所有口腔頜面腫瘤的22.7%.我們對(duì)多種涎腺腫瘤分別進(jìn)行細(xì)胞核仁組成區(qū)嗜銀蛋白（argyrophilicnucleolarorganizerre-gions，AgNORs）的嗜銀染色，p53mAb的免疫組化檢測(cè).用圖像分析儀進(jìn)行定量分析，并和正常涎腺組織細(xì)胞對(duì)比.旨在探討AgNORs技術(shù)在良惡性腫瘤中的變化規(guī)律和在診斷中的價(jià)值，及和基因調(diào)控的關(guān)系. 1材料和方法 1.1材料收集第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院頜面外科和解

2、放軍第三醫(yī)院1984/1997間切除并經(jīng)病理科確診腫瘤的石蠟包埋手術(shù)標(biāo)本47例，其中多形性腺瘤7例，腺淋巴瘤8例，粘液表皮樣癌7例，腺樣囊性癌15例，腺泡細(xì)胞癌5例，腺癌5例.對(duì)照組為6例正常涎腺組織.突變型p53mAb，DakoEn-VsionTM+/HRP，Mouse顯色系統(tǒng)（Dako公司產(chǎn)品）. 1 / 41.2方法嗜銀染色依照Howell一步法.使用M550型計(jì)算機(jī)全自動(dòng)圖像分析儀，每例測(cè)定68個(gè)視野隨機(jī)挑選50個(gè)細(xì)胞核，測(cè)定核內(nèi)AgNORs顆粒數(shù)、顆粒面積及核的面積.并進(jìn)行AgNOR的形態(tài)學(xué)分型.免疫組化技術(shù)采用DakoEn-VsionTM+/HRP免疫組織化學(xué)方法.用人乳腺癌石蠟切

3、片作陽性對(duì)照，PBS溶液代替一抗的結(jié)果為陰性對(duì)照.采用方差分析對(duì)計(jì)數(shù)資料作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理. 2結(jié)果 2.1細(xì)胞核仁組成區(qū)嗜銀染色鏡下細(xì)胞核呈淡黃色，Ag-NORs顆粒為棕黑色位于細(xì)胞核或核仁內(nèi)，惡性腫瘤與正常組織之間AgNORs顆粒數(shù)有高度顯著性差異（P<0.01），與良性腫瘤之間，良性腫瘤和正常組織之間的顆粒數(shù)也有顯著性差異（P<0.05）.惡性腫瘤和正常對(duì)照組顆粒面積（GA）和核面積（NA）比值有明顯差異性外，與良性腫瘤組也有顯著性差異，而良性腫瘤組和正常對(duì)照組無顯著性差異（P>0.05）. 2.2細(xì)胞內(nèi)嗜銀蛋白和p53表達(dá)的關(guān)系32例惡性腫瘤中，20

4、例為p53陽性，15例良性腫瘤中，4例為p53陽性.正常對(duì)照組全部為陰性.當(dāng)細(xì)胞核中的AgNORs顆粒2粒以上者，同時(shí)是p53陽性結(jié)果的有一定的符合，符合率是84%.p53陽性的表達(dá)率隨著顆粒面積的增大，也有增高并有一定的相關(guān)性（r=0.92，P<0.01）. 3討論我們發(fā)現(xiàn)涎腺良惡性腫瘤間，正常涎腺與惡性腫瘤之間AgNORs計(jì)數(shù)均存在高度顯著性差異，而AgNORs顆粒隨惡性程度增加而增加.形態(tài)學(xué)上惡性腫瘤多為彌散型，良性腫瘤多為單一型.同時(shí)發(fā)現(xiàn)GA/NA比值在良惡性腫瘤間亦有差異.p53是一種重要的抑癌基因，它的表達(dá)產(chǎn)物是轉(zhuǎn)錄因子，為G1期DNA損傷的檢查點(diǎn)1.隨著顆粒數(shù)的增高，p53陽性表達(dá)率亦增高，且與顆粒面積有一定的相關(guān)性.總的趨勢(shì)體現(xiàn)了p53陽性表達(dá)的腫瘤組織有相對(duì)高的細(xì)胞增殖指數(shù). 因此，AgNORs技術(shù)可以作為涎腺良惡性腫瘤鑒別診斷的可靠手段之一，特別是對(duì)于術(shù)前活檢標(biāo)本，AgNORs計(jì)數(shù)和形態(tài)的觀察將有助于明確病變的性質(zhì).它和腫瘤細(xì)胞基因調(diào)控失常導(dǎo)致細(xì)胞異常增殖的關(guān)系有待進(jìn)一步討論. 參考文獻(xiàn): 1MaLL，LiGR，YangP，XinXY.Studyontherelationshipbe-tweenproteinoverexpressionandmutationsofexons5-7inP53andclinicalbiologicalbehavior