衛(wèi)生理化檢驗第一章

1、衛(wèi)生理化檢驗技術衛(wèi)生理化檢驗技術檢驗教研室劉玉枝衛(wèi)生理化檢驗衛(wèi)生理化檢驗 是什么？為什么學？學些什么？是什么？為什么學？學些什么？定義內(nèi)容意義第一節(jié)第一節(jié) 衛(wèi)生理化檢驗的內(nèi)容與意義衛(wèi)生理化檢驗的內(nèi)容與意義2是什么？定義衛(wèi)生檢驗衛(wèi)生理化檢驗衛(wèi)生微生物檢驗定義：運用物理、化學的基礎理論和方法，特別是現(xiàn)代化的儀器分析理論與技術為手段，檢測分析環(huán)境中與人體健康密切相關的物質(zhì)種類和數(shù)量的一門技術性學科。3為什么學？意義1 用來檢驗其監(jiān)測對象是否符合相應的衛(wèi)生 標準。2 可初步闡明環(huán)境中各種物理、化學因素對 人體的影響程度。3 為制定各類衛(wèi)生標準和采取衛(wèi)生措施提供 科學依據(jù)。4學什么？內(nèi)容及其分類衛(wèi)生理化

2、檢驗檢驗性質(zhì)研究領域檢驗對象監(jiān)督檢驗鑒定檢驗委托檢驗營養(yǎng)與食品衛(wèi)生檢驗環(huán)境衛(wèi)生檢驗勞動衛(wèi)生檢驗水質(zhì)檢驗、食品檢驗、空氣檢驗、土壤與底質(zhì)檢驗、化妝品檢驗5衛(wèi)生理化檢驗的一般程序樣品采集樣品前處理樣品分析檢驗結(jié)果報告6（一）樣品采集部分整體樣品從整體中抽出部分的過程，叫做樣品采集樣品采集部分與整體是有差異的，兩者之間的差異稱之為采樣誤差采樣誤差7（二）樣品分析前處理 由于樣品的種類、形態(tài)各異，所含有的成分復雜，其中待測組分的存在形式也不同。因此許多樣品不能直接用于檢測分析，必須采用適當?shù)姆椒ㄟM行預處理。8（三）樣品分析 應根據(jù)檢驗目的、檢測項目，結(jié)合實驗室的實際情況，選擇適宜的方法對樣品進行檢測分

3、析。由于衛(wèi)生理化檢驗是衛(wèi)生監(jiān)督與執(zhí)法過程中的一個重要環(huán)節(jié)。因此具體檢驗方法的選擇應根據(jù)國家頒布的各種標準檢驗方法。（四）檢驗結(jié)果的報告 對于任何一份樣品的檢驗，最后都應發(fā)出規(guī)范的檢驗結(jié)果報告書。9第二節(jié) 衛(wèi)生理化檢驗常用分析方法 在日常的衛(wèi)生理化檢驗工作中，采樣、樣品前處理之后，將開始進行分析。由于檢驗目的不同，樣品的種類、狀態(tài)、性質(zhì)各異，選用的分析方法就各不相同。 常用的分析方法有：感官檢驗、物理檢查、化學分析和物理化學分析等。10選擇檢驗方法遵循的原則選用的方法應適用于被檢樣品的形狀。測定方法應具有良好的精密度和準確度。方法的靈敏度或最低檢出濃度應滿足衛(wèi)生標準所規(guī)定的最高允許濃度。根據(jù)被測

4、成分含量范圍選擇分析方法。盡量避免使用危害人體健康或污染環(huán)境的試劑和方法。耗費低、節(jié)約人力。11衛(wèi)生理化檢驗常用分析方法感官檢查法物理檢查法化學分析法理化分析法12感官檢測法檢測點：外觀、顏色、氣味、滋味、彈性、聲響等。如感官檢查不符合衛(wèi)生標準，可不必再進行理化檢驗。聽覺13物理檢查法 物理 性質(zhì) 數(shù)據(jù)密度折光率熔點旋光度計算組分含量Eg：水質(zhì)檢驗中電導率測定14化學分析法預試驗確證試驗重量分析滴定分析以化學變化為基礎識別反應現(xiàn)象，判斷有無。準確測定含量利用某一類物質(zhì)的通性，確定存在。靈敏度高、選擇性差測定某一組分特性。確認“檢出”選擇性高組分分離，稱量被測組分重量。麻煩、費時、準確度高揮發(fā)法

5、、萃取法、沉淀法、吸附法用已知濃度標準液滴定，推算被測組分含量。酸堿滴定、氧化還原滴定、沉淀滴定、配位滴定15物理化學分析法儀器分析法16電化學分析法 是利用物質(zhì)的電化學特性為基礎的分析方法。常用的方法有：電位法電位法 直接電位法（PH計、離子活度計） 電位滴定法（自動電位滴定儀）電導法：電導法：以測定溶液的電導為基礎。（電導率儀）極譜分析法極譜分析法 ：是一種特殊的電解方法。（極譜儀） 17色譜法 又稱層析法，以待測組分在互不相溶的兩相中吸附、分離、離子交換或其它親和作用的差異為依據(jù)建立起來的各種分離分析方法； 具有高靈敏度、高選擇性、測定快速、應用廣等優(yōu)點； 常用于有機物分析； 薄層色譜法

6、薄層色譜法 氣相色譜法氣相色譜法 高效液相色譜法高效液相色譜法 18薄層色譜法 是將固定相均勻地涂布在光潔的玻璃板或金屬板上形成薄層，將試樣放在薄層上，再用流動相將試樣展開分離，然后根據(jù)比移值定性，根據(jù)待測組分斑點大小、顏色深淺或其它方法定量。 19氣相色譜法 是以氣體為流動相，固定相裝填在玻璃管或金屬管中，試樣中待測組分被分離后，用檢測器檢測，并由記錄儀記錄成色譜圖，然后根據(jù)保留值定性，由峰高或峰面積進行定量； 是一種靈敏、快速、準確的現(xiàn)代色譜分析方法； 氣相色譜儀。 2021高效液相色譜法 是在液相色譜和氣相色譜法的基礎上發(fā)展起來的一種色譜分析法； 采用高壓泵輸送液體流動相，并選用分離效果

7、極高的固定相對待測組分進行分離，再結(jié)合其它檢測技術進行定性定量； 具有分離效能高、分析速度快、測定靈敏度高、自動化程度高等特點。 2223光化學分析法 又稱為光譜分析法光譜分析法，是以物質(zhì)的光化學性質(zhì)為基礎建立起來的分析方法，即利用物質(zhì)發(fā)射的輻射能或物質(zhì)對輻射的吸收、散射、折射、衍射等性質(zhì)。 主要的分析方法有： 紫外紫外-可見分光光度法可見分光光度法 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 熒光分析法熒光分析法 比濁法比濁法 24紫外-可見分光光度法 是利用物質(zhì)的分子或離子對某一波長范圍光的吸收作用，對物質(zhì)進行定性、定量分析； 是歷史悠久、應用最廣泛的光化學分析法； 具有儀器簡單、操作方便、分析

8、速度快、靈敏度較高、選擇應用性較好 ，應用廣泛的特點。25紫外可見分光光度 光源 狹縫 分光器 樣品池 光電倍增管 檢流計26原子吸收分光光度法 又稱原子吸收光譜法； 當特定波長的光通過樣品蒸氣時，被待測元素的基態(tài)原子吸收，根據(jù)透射光強度減弱的程度，求得樣品中待測元素含量； 具有靈敏度高，選擇性好，干擾少，精密度好，應用范圍廣等特點。27熒光分析法 是利用一定波長的紫外-可見光照射某些物質(zhì)，這些物質(zhì)就會發(fā)射出特定波長和不同強度的可見光（稱為熒光），從而對物質(zhì)進行定性、定量分析； 主要特點是靈敏度高。28比濁法 是利用光線照射渾濁液時， 一部分光被微粒吸收，一部分被微粒散射，一部分光透過渾濁液，

9、通過測定散射光或透過光的強度來定量待測組分； 分為： 吸光度比濁法吸光度比濁法 散射光比濁法散射光比濁法29第三節(jié) 樣品前處理樣品前處理：又叫樣品分析前的處理。 是在樣品分析前必須采取一定的措施，消除或減少干擾測定的各種因素。30樣品前處理的原則完全分離不受損；不引入被測組分和干擾組分；不影響后續(xù)分析；不用或少用試劑以免帶入雜質(zhì)；安全、簡便、高效。31樣品前處理方法干法有機質(zhì)分解法提取法揮發(fā)分離法其他方法浸漬法萃取法濕法蒸發(fā)法氣化法蒸餾法升華法頂空法吸附法沉淀法透析法離子交換法固相萃取組分分離有機質(zhì)破壞32（一）有機質(zhì)分解法干法又稱灰化法 在高溫灼燒下使樣品脫水、炭化，并在空氣中氧的作用下，使

10、有機物徹底氧化分解，生成的二氧化碳、水和其他氣體揮發(fā)逸去，剩下的無機物用鹽酸溶解后供測定用。分三個步驟：炭化灰化溶解適用于：Pb、Cu、Zn、Cr、Fe等金屬元素不適用：As、Hg方法簡單、試劑用量少、實用性強，但易造成殘留損失。3334（一）有機質(zhì)分解法濕法（消化法） 在強酸性和加熱沸騰強酸性和加熱沸騰的條件下，使樣品中的有機化合物被強氧化劑氧化，其化學結(jié)構被破壞，將待測元素釋放出來。常用消化方法：硫酸高溫催化法硝酸-硫酸法1.硝酸-高氯酸法35硝酸-硫酸法硝酸浸泡開始消化補加氧化劑終止消化脫硝五個階段所加試劑現(xiàn)象硝酸硫酸硝酸水&飽和草酸銨無液體黃色液體黃色、棕紅色氣體液體無色或微黃

11、色濃厚白煙產(chǎn)生濃厚白煙產(chǎn)生36消化操作技術敞口消化法回流消化法冷消化法密封罐消化法微波消解法敞口消化法回流裝置圖37（二）提取法方法方法常用名常用名樣品形態(tài)樣品形態(tài)萃取劑形態(tài)萃取劑形態(tài)固固液萃取液萃取浸漬法固體液體液液液萃取液萃取萃取法液體液體液液固萃取固萃取固相萃取液體固體基本原理是：利用樣品中不同組分在不同溶劑中 溶解度的不同來實現(xiàn)分離的。Eg: AB兩種組分，A是待測組分，B是干擾組分。已知試劑甲，A組分可以溶解于甲試劑，B不能，就可以選用甲試劑，將A組分提取出來。38（二）提取法浸漬法原理：利用液體溶劑浸泡固體樣品，將其中要分離 的組分溶解，以達到提取分離的目的。常用溶劑：水、酸性水溶

12、液、堿性水溶液缺點：1. 樣品組分溶解擴散需要有一個過程才能最終達到平衡狀態(tài)，需要重復幾次。2. 樣品中的雜質(zhì)也會同時被浸出，檢測前需要凈化。分類：冷浸法、回流提取法。39冷浸法冷浸法 將固體樣品粉碎，放入溶劑中混勻，振搖30min后靜置，傾出或過濾出溶液，重復2-3次，合并溶液供測定使用。40回流提取法回流提取法 當提取過程需要加熱時，為避免揮發(fā)性組分和溶劑的揮發(fā)損失，采用回流提取裝置，即利用蒸餾燒瓶和冷凝管作為提取儀器，通過水浴加熱回流，以保證樣品中要分離的組分被溶劑充分溶解提取。 提取效率高、不適用于受熱易分解的組分。41（二）提取法萃取法利用液體萃取劑液體萃取劑來提取與它互不相容或部分

13、相溶的液液體樣品體樣品中的組分。有機溶劑水溶液萃取操作： 取一定量樣品溶液于分液漏斗中，調(diào)節(jié)至適宜的酸度后，加萃取劑，充分震蕩。靜置分層后，打開分液漏斗的玻璃塞，再將旋塞緩緩旋開，下層溶液放入另一容器中，使兩相分離。再取新的萃取劑，反復萃取3-4次，合并萃取液供分析測定。 萃取操作視頻42（二）提取法固相萃取法 固相萃取法又稱液-固萃取法，是20-70年代發(fā)展起來的樣品前處理方法。是利用某些大分子顆粒，通過吸附、分配或離子交換等作用，將待測的有機組分截留在柱子上，經(jīng)過洗滌后再用少量溶劑洗脫下來，起到分離和濃縮的作用。43（三）揮發(fā)分離法 揮發(fā)分離法是利用物質(zhì)揮發(fā)性的差別，在常溫或低溫加熱下，使

14、樣品中易揮發(fā)的組分與不揮發(fā)的組分分離的方法。既可以用于被測組分的分離，也可以用于除去干擾組分。方法有：氣化法、蒸發(fā)法、蒸餾法、升華法、頂空法等44（三）揮發(fā)分離法氣化法 氣化法是利用被測物質(zhì)在常溫常溫下所具有的揮發(fā)性，與不揮發(fā)的干擾組分分離的方法。通常是利用氧化還原反應使待測組分形成低沸點的單質(zhì)或化合物，從樣品溶液中逸出供分析測定。Eg：SnCL2+HgCL2SnCL2+Hg 低沸點化合物中最常見的是氫化物，因此可以用化學方法將待測組分轉(zhuǎn)變成氣態(tài)的氫化物。Eg: S2-+2H+ H2S45（三）揮發(fā)分離法蒸發(fā)法 蒸發(fā)法是在低溫加熱低溫加熱的條件下使揮發(fā)性組分氣化逸出，達到分離的目的。當樣品中含

15、有受熱易分解的組分時，通過減壓便可在更低的溫度甚至室溫下，使揮發(fā)性組分氣化。Eg：食品中水分和脂肪含量的測定46（三）揮發(fā)分離法蒸餾法 在較高溫度下，利用蒸餾裝置，將樣品中具有揮發(fā)性或經(jīng)處理后具有揮發(fā)性的組分更快、更完全地蒸餾出來。分為：直接蒸餾法、 水蒸氣蒸餾法、 減壓蒸餾法47直接蒸餾法裝置圖將樣品溶液置于燒瓶中，熱源直接加熱燒瓶。適用于沸點在40-150度之間的物質(zhì)。如水中氨氮、氟化物、氰化物等水樣預處理。48水蒸氣蒸餾法裝置圖利用水蒸氣對樣品溶液加熱進行蒸餾，加熱溫度不會超過100度，適用于具有一定蒸汽壓而沸點較高的組分。如水中揮發(fā)性酚類的測定。49減壓蒸餾裝置圖在低于常壓的條件下進行

16、蒸餾，適用于高沸點、易分解的有機化合物的預處理。減壓可降低沸點，因而可在較低的溫度下蒸餾，防止組分分解。50（三）揮發(fā)分離法頂空法 頂空法是利用待測組分的揮發(fā)性，而干擾成分不具揮發(fā)性，實現(xiàn)被測組分與干擾組分分離。在密閉的容器中，通過適當加溫或結(jié)合通入氮氣的方法使其從樣品溶液中揮發(fā)出來，再進行測定。分：靜態(tài)頂空法 動態(tài)頂空法51靜態(tài)頂空法動態(tài)頂空法靜態(tài)頂空法是將樣品置于密閉容器中，保持恒溫狀態(tài)，經(jīng)過一段時間后達到平衡，用注射器抽出上層的空氣用于測定。動態(tài)頂空法一般和分析儀器一起配套使用，向樣品中不斷通入氮氣，揮發(fā)性成分隨氮氣一起排出，進入右邊的檢測儀器中檢測。52小結(jié)方法應用基本原理有機質(zhì)破壞干法無機元素測定長時間高溫或氧化處理，破壞有機物，以離子的形式釋放出被測元素濕法組分分離提取法浸漬法固體樣品利用待測組分與干擾組分溶解性不同進行分離萃取法液體樣品固相萃取法液體樣品揮發(fā)法氣化法常溫利用 被測組分與干擾組分揮發(fā)性不同進行分離蒸發(fā)法低溫加熱蒸餾法高溫，蒸餾裝置頂空法密閉容器53第四節(jié) 檢測報告 一.檢測結(jié)果的表示方法： 1.通用的物理單位常表示為 溫度、氣壓Pa或kPa、風速m/s 2.水