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文檔簡介

1、實(shí)驗(yàn)五：分枝桿菌 銅綠假單胞菌 霍亂弧菌實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握結(jié)核分枝桿菌的根本特征和常用鑒定方法。 掌握臨床標(biāo)本中檢查抗酸桿菌的方法。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 1、示教：卡介苗減毒結(jié)核分枝桿菌在羅氏培育基上的生長表現(xiàn)。 2、痰標(biāo)本直接涂片檢查抗酸桿菌：抗酸染色法。示教：卡介苗減毒結(jié)核分枝桿菌在羅氏培育基 上的生長表現(xiàn)。 改良羅氏培育基是專門用于分枝桿菌的分別 培育的，主要成分為甘油、雞蛋液、馬鈴薯 粉、孔雀綠。結(jié)核分枝桿菌的培育特性： 1、懶：初次分別需2-8周才干看到菌落，一代需求18 小時(shí)。 2、饞：營養(yǎng)要求高，專性需氧。 3、丑：菌落呈菜花樣，枯燥、粗糙、灰白或灰黃，凸 起。 痰標(biāo)本直接涂片檢查抗酸桿菌涂片：

2、標(biāo)本經(jīng)適當(dāng)處置后直接涂片或厚膜涂片。用接種環(huán)直 接挑取標(biāo)本中膿性或干酪樣部分痰，制成 20MMX25MM大小的均勻薄涂片，或經(jīng)多次薄涂片制 成厚涂片。自然枯燥后火焰固定?？顾崛旧?、初染：將涂片用夾子夾住，外表覆蓋一層吸 水紙，滴加石碳酸復(fù)紅，并在載玻片下方用弱火加熱 至出現(xiàn)蒸汽勿煮干或煮沸，隨時(shí)補(bǔ)充染料以防干 涸，繼續(xù)5分鐘，水洗。 2、脫色：用3%鹽酸酒精脫色，直至無紅色染液 脫下，水洗。 3、復(fù)染：用美蘭染1分鐘，水洗，吸干，在油鏡 下察看。 結(jié)果察看：淡藍(lán)的背景下可見染成紅色的細(xì) 長或略帶彎曲的桿菌，有分枝生長 趨向，此即為抗酸陽性桿菌，其他 細(xì)菌或細(xì)胞被染成藍(lán)色，根據(jù)各 實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范報(bào)告：-，+，+， +，+，+。結(jié)核分枝桿菌鏡下形狀銅綠假單胞菌的鑒定 1、培育特點(diǎn)及菌落特征：在普通瓊脂平板上產(chǎn)生特征性的 藍(lán)綠色水溶性綠膿素和黃綠色青膿素，血平板上構(gòu)成大而扁平，潮濕，邊緣不齊，有金屬光澤，有生姜?dú)馕兜幕揖G色菌落，并構(gòu)成透明溶血環(huán)。2、95%以上的銅綠假單胞菌可經(jīng)過察看以下幾個(gè)特征而得到鑒定：氧化酶陽性10秒內(nèi)。菌落較大，生姜樣氣味。綠膿素產(chǎn)生。少數(shù)銅

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