芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

1、會計學(xué)1芳酸類非甾體抗炎藥物的分析芳酸類非甾體抗炎藥物的分析第1頁/共74頁第2頁/共74頁OHR OH醇羥基醇羥基酚羥基酚羥基醇醇酚酚第3頁/共74頁R COOH羧酸羧酸COOH芳酸芳酸OROCR酯酯游離羧基游離羧基游離羧基游離羧基第4頁/共74頁按結(jié)構(gòu)分類按結(jié)構(gòu)分類水楊酸類水楊酸類鄰氨基苯甲酸類鄰氨基苯甲酸類芳酸類非甾體藥物：分子結(jié)構(gòu)中含芳酸類非甾體藥物：分子結(jié)構(gòu)中含有有取代苯基取代苯基的一類羧酸化合物。的一類羧酸化合物。鄰氨基苯乙酸類鄰氨基苯乙酸類芳基丙酸類芳基丙酸類吲哚乙酸類吲哚乙酸類苯并噻嗪甲酸類苯并噻嗪甲酸類其他非甾體抗炎藥其他非甾體抗炎藥第5頁/共74頁1 典型藥物分類與理化性質(zhì)

2、典型藥物分類與理化性質(zhì)一、水楊酸類一、水楊酸類 典型藥物典型藥物 水楊酸水楊酸( (salicylic acid) ) 游離羧基游離羧基酚羥基，發(fā)酚羥基，發(fā)生三氯化鐵生三氯化鐵反應(yīng)反應(yīng)苯環(huán)苯環(huán)第6頁/共74頁COOHOCOCH3游離羧基游離羧基阿司匹林阿司匹林(aspirin)酯鍵酯鍵苯環(huán)苯環(huán)pKa = 3.49直接中和法直接中和法兩步滴定法兩步滴定法水解后生成水解后生成水楊酸水楊酸雜質(zhì)雜質(zhì)水解后才發(fā)水解后才發(fā)生三氯化鐵生三氯化鐵反應(yīng)反應(yīng)第7頁/共74頁雙水楊酯雙水楊酯OHOOOOH第8頁/共74頁甲芬那酸甲芬那酸二、鄰氨基苯甲酸類二、鄰氨基苯甲酸類有強烈綠色熒光有強烈綠色熒光第9頁/共74頁

3、ClClONaONH有刺鼻感有刺鼻感第10頁/共74頁CH2CHCH3CH3COOHCH3CH布洛芬布洛芬ibuprofen四、芳基丙酸類四、芳基丙酸類第11頁/共74頁NOOHOOCl吲哚美辛吲哚美辛第12頁/共74頁SNOHOONHONCH3吡羅昔康吡羅昔康第13頁/共74頁OHNHCH3O第14頁/共74頁第15頁/共74頁第16頁/共74頁第17頁/共74頁第18頁/共74頁第19頁/共74頁 2 鑒別試驗鑒別試驗一、與三氯化鐵的反應(yīng)一、與三氯化鐵的反應(yīng) 1.水楊酸反應(yīng)水楊酸反應(yīng)紫堇色紫堇色OHOHOFeCl3OOOFeOH+3HClH2Oa.反應(yīng)極為靈敏。反應(yīng)極為靈敏。b.反應(yīng)適宜的

4、反應(yīng)適宜的pH值為值為46 ，在強酸性下配合，在強酸性下配合 物分解。物分解。第20頁/共74頁阿司匹林阿司匹林OCOCH3COOHH2OCOOHOHCH3COOH+Fecl3紫堇色紫堇色配位化合物配位化合物水解后鑒別水解后鑒別第21頁/共74頁OHNHCOCH3FeCl3ONHCOCH3 +3HCl33Fe+對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚 藍紫色藍紫色 2.酚羥基反應(yīng)酚羥基反應(yīng)第22頁/共74頁OCH3HOOCNHNH2NO2NO2NNHO2NNO2+硫酸二硝基苯肼二硝基苯肼酮洛芬酮洛芬腙腙橙色橙色第23頁/共74頁三、重氮化偶合反應(yīng)三、重氮化偶合反應(yīng)芳香第一氨的反應(yīng)芳香第一氨的反應(yīng)NaNO2Na

5、OH-萘酚萘酚 Ar-N2+Cl-Ar-N=N-ArHClAr-NH2 重氮鹽重氮鹽偶合偶合紅色紅色對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚貝諾酯貝諾酯第24頁/共74頁貝諾酯貝諾酯水解水解重氮化重氮化偶合偶合第25頁/共74頁紫色吲哚美辛硫酸重鉻酸鉀黃色綠色鹽酸亞硝酸鈉四、氧化反應(yīng)四、氧化反應(yīng)甲芬那酸 黃色(綠色熒光)(JP13) K2Cr2O7 深藍色棕綠色 H2SO4 第26頁/共74頁五、水解反應(yīng)五、水解反應(yīng)1.阿司匹林阿司匹林酯結(jié)構(gòu)水解酯結(jié)構(gòu)水解第27頁/共74頁2.雙水楊酯雙水楊酯雙水楊酯雙水楊酯NaOH煮沸水楊酸鈉水楊酸鈉稀HCl水楊酸水楊酸（白色）（白色）沉淀在醋酸銨沉淀在醋酸銨試液中可溶解試

6、液中可溶解第28頁/共74頁第29頁/共74頁1.紫外分光光度法紫外分光光度法最大吸收波長（和最大吸收波長（和/ /或最小吸收波長）或最小吸收波長）吸光度法吸光度法吸光度比值法吸光度比值法七、光譜法七、光譜法第30頁/共74頁對照圖譜對照對照圖譜對照藥品紅外光譜集藥品紅外光譜集水楊酸的紅外吸收光譜圖水楊酸的紅外吸收光譜圖2.紅外分光光度法紅外分光光度法第31頁/共74頁八、薄層色譜法八、薄層色譜法比較供試品溶液與對照品溶液的比移值比較供試品溶液與對照品溶液的比移值九、九、HPLC比較供試品溶液與對照品溶液的保留時間比較供試品溶液與對照品溶液的保留時間第32頁/共74頁 3 特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)

7、檢查阿司匹林中游離水楊酸及有關(guān)物質(zhì)的檢查阿司匹林中游離水楊酸及有關(guān)物質(zhì)的檢查1.阿司匹林中游離水楊酸的檢查阿司匹林中游離水楊酸的檢查來源：生產(chǎn)過程中乙酰化不完全，或貯藏過程中來源：生產(chǎn)過程中乙酰化不完全，或貯藏過程中 水解產(chǎn)生水解產(chǎn)生 。 4223SOHOCOCH乙?；阴；?075COOHOHCOOHOCOCH3第33頁/共74頁ChP2005方法：方法：鐵鹽鐵鹽比色法比色法（稀硫酸鐵銨（稀硫酸鐵銨 ） 原理：阿司匹林結(jié)構(gòu)中無酚羥基，不與高鐵鹽反應(yīng)原理：阿司匹林結(jié)構(gòu)中無酚羥基，不與高鐵鹽反應(yīng); 水楊酸有酚羥基，則可與高鐵反應(yīng)呈水楊酸有酚羥基，則可與高鐵反應(yīng)呈紫堇色紫堇色。 缺點：供試品溶液制

8、備過程中阿司匹林可水解生成缺點：供試品溶液制備過程中阿司匹林可水解生成 新的游離水楊酸。新的游離水楊酸。 ChP2010采用采用HPLC檢查。檢查。原料藥和制劑均需檢查游離水楊酸，限量各不相同原料藥和制劑均需檢查游離水楊酸，限量各不相同。第34頁/共74頁第35頁/共74頁第36頁/共74頁第37頁/共74頁第38頁/共74頁 雜質(zhì)對照品法雜質(zhì)對照品法 方法：方法： 供試品供試品供試品溶液供試品溶液 雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品對照品溶液對照品溶液 第39頁/共74頁供供試試品品對對照照品品第40頁/共74頁 判斷：供試品中所含雜質(zhì)斑點不判斷：供試品中所含雜質(zhì)斑點不得超過相應(yīng)的雜質(zhì)對照斑點。得超過相應(yīng)

9、的雜質(zhì)對照斑點。 優(yōu)點：同一物質(zhì)，同一優(yōu)點：同一物質(zhì)，同一R Rf f值比較，值比較，準(zhǔn)確度高、直觀性強。準(zhǔn)確度高、直觀性強。 缺點：需要雜質(zhì)對照品。缺點：需要雜質(zhì)對照品。 第41頁/共74頁 2.2.主成分自身對照法主成分自身對照法（高低濃度對比法）（高低濃度對比法） 方法：方法： 對照溶液一定量供試品溶液供試品溶液稀釋溶劑溶解 S第42頁/共74頁（）第43頁/共74頁 判斷：判斷： 供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點不得深供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點不得深于對照溶液的主斑點（或熒光強度）于對照溶液的主斑點（或熒光強度）第44頁/共74頁第45頁/共74頁 一、酸堿滴定法一、酸堿滴定法 1.直接滴定法阿司匹

10、林直接滴定法阿司匹林原理原理: 阿司匹林分子中有阿司匹林分子中有游離羧基游離羧基，具弱酸性，具弱酸性，可用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液直接滴定。，可用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液直接滴定。第46頁/共74頁方法方法: 取本品約取本品約0.4g, 精密稱定精密稱定, 加加中性乙醇中性乙醇 (對對 酚酞指示液顯中性酚酞指示液顯中性) 20mL溶解后溶解后, 加加酚酚 酞酞指示液指示液3滴滴, 用用氫氧化鈉氫氧化鈉滴定滴定(0.1mol/L) 滴定。每滴定。每 1ml的氫氧化鈉滴定的氫氧化鈉滴定(0.1mol/L) 相當(dāng)于相當(dāng)于18.02mg的的C9H8O4 。 第47頁/共74頁生成的鈉鹽是強堿弱酸鹽，偏堿性。生成的鈉鹽是強堿弱酸鹽

11、，偏堿性。（2）指示劑為何選用）指示劑為何選用酚酞酚酞？討論討論: :（1 1）溶劑為何使用）溶劑為何使用中性乙醇中性乙醇？ 使用乙醇：使用乙醇：a.使供試品易于溶解使供試品易于溶解;b.防止酯水解防止酯水解 使用中性乙醇：乙醇對酚酞顯酸性，扣除乙醇的使用中性乙醇：乙醇對酚酞顯酸性，扣除乙醇的酸性對測定的影響。酸性對測定的影響。 （3）操作）操作事項事項滴定過程中不斷振搖，防止局部水解滴定過程中不斷振搖，防止局部水解 。 （4）特點）特點 操作簡便，但缺乏專屬性，酸性物質(zhì)有干擾。操作簡便，但缺乏專屬性，酸性物質(zhì)有干擾。 不適合不適合用于水楊酸含量較高的樣品測定。用于水楊酸含量較高的樣品測定。（

12、5）滴定度的計算）滴定度的計算第48頁/共74頁mlmg18.02Lg18.02 11molg180.16Lmol0.1CMbaT第49頁/共74頁第50頁/共74頁第51頁/共74頁3. 水解后剩余滴定法阿司匹林水解后剩余滴定法阿司匹林原理原理: 阿司匹林酯結(jié)構(gòu)在堿性條件下易于水解阿司匹林酯結(jié)構(gòu)在堿性條件下易于水解, 加入加入定量過量定量過量的氫氧化鈉滴定液的氫氧化鈉滴定液, 加熱加熱 水解水解, 剩余的堿用硫酸滴定液回滴定。剩余的堿用硫酸滴定液回滴定。 OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O第52頁/共74頁方法：取

13、本品約方法：取本品約1.5g，精密稱定，置燒杯中，精密稱定，置燒杯中，加氫氧化鈉滴定液加氫氧化鈉滴定液(0.5mol/L)50.0ml，混合，緩，混合，緩緩煮沸緩煮沸10min 加加酚酞酚酞指示液，用硫酸滴定液指示液，用硫酸滴定液(0.25mol/L)滴定，并將滴定結(jié)果用滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗空白試驗校校正。每正。每lml的氫氧化鈉滴定液的氫氧化鈉滴定液(0.5mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于45.04mg的的C9H8O4 。討論：討論：（1）為何做）為何做空白試驗空白試驗？如何操作？如何操作？ 氫氧化鈉在加熱時易吸收氫氧化鈉在加熱時易吸收CO2，生成碳酸鹽。，生成碳酸鹽。使測定結(jié)果偏高使測定結(jié)

14、果偏高。不加入樣品，其余操作步驟和加樣一致。不加入樣品，其余操作步驟和加樣一致。（2）滴定度如何計算？）滴定度如何計算？第53頁/共74頁%100VV%0WTF）（含量阿司匹林：氫氧化鈉阿司匹林：氫氧化鈉=1:2 T=0.5180.161/2=45.04(mg/ml) F：硫酸滴定液的校正因子：硫酸滴定液的校正因子第54頁/共74頁4. 兩步滴定法兩步滴定法ChP2005 阿司匹林片和腸溶片阿司匹林片和腸溶片原理原理: 阿司匹林片中加入少量穩(wěn)定劑（酒石酸阿司匹林片中加入少量穩(wěn)定劑（酒石酸或枸櫞酸）或枸櫞酸）, 制劑過程中分解產(chǎn)物（水楊酸、制劑過程中分解產(chǎn)物（水楊酸、醋酸）均消耗氫氧化鈉。因此，

15、不能采用直醋酸）均消耗氫氧化鈉。因此，不能采用直接滴定法，采用先接滴定法，采用先“中和中和”再再“水解滴定水解滴定”的兩步滴定法。的兩步滴定法。 第55頁/共74頁酒石酸酒石酸枸櫞酸枸櫞酸水楊酸水楊酸醋酸醋酸+NaOH 酒石酸鈉酒石酸鈉枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉水楊酸鈉水楊酸鈉醋酸鈉醋酸鈉不用于含量計算不用于含量計算COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第56頁/共74頁+NaOH COONaCH3 定量過量定量過量 OHSONaSOHNaOH224242 剩剩余余OHCOONaOCOCH3COONa第57頁/共74頁方法方法中和中和:取本品取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取片

16、片，精密稱定，研細，精密稱取片粉適量粉適量(約相當(dāng)于阿司匹林約相當(dāng)于阿司匹林0.3 g)，置錐形瓶中，置錐形瓶中，加入，加入中性乙醇中性乙醇20ml，振搖使溶解，加酚酞，振搖使溶解，加酚酞指示液指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液滴，滴加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)至溶液至溶液顯粉紅色顯粉紅色。此時此時中和中和了存在的了存在的游離酸游離酸，阿司匹林阿司匹林也同時也同時成為鈉鹽成為鈉鹽。第58頁/共74頁第59頁/共74頁 討論討論: : （1）優(yōu)點優(yōu)點 消除了酸性雜質(zhì)的干擾消除了酸性雜質(zhì)的干擾（2）反應(yīng)的摩爾比反應(yīng)的摩爾比 阿司匹林阿司匹林:氫氧化鈉氫氧化鈉1:1 T=0.1180.16=18

17、.02mg/ml（3）含量計算含量計算 %100W%平均片重標(biāo)示量含量樣空FTVVF：硫酸滴定液的校正因子：硫酸滴定液的校正因子第60頁/共74頁第61頁/共74頁二、紫外二、紫外-可見分光光度法可見分光光度法1. 直接紫外直接紫外-可見分光光度法可見分光光度法原理原理:藥物在藥物在某一波長某一波長處有最大吸收，采用處有最大吸收，采用 對照品法對照品法或或吸收系數(shù)法吸收系數(shù)法進行含量測定。進行含量測定。%11CMEA C L第62頁/共74頁USP（29）測定阿司匹林膠囊的含量?？蓪ⅲy定阿司匹林膠囊的含量?？蓪⑺酒チ峙c水楊酸和其他中性堿性雜質(zhì)分離。司匹林與水楊酸和其他中性堿性雜質(zhì)分離。2

18、. 柱分配色譜紫外分光光度法柱分配色譜紫外分光光度法1.色譜柱的制備：色譜柱的制備：硅藻土硅藻土3g和新制碳酸氫鈉液（和新制碳酸氫鈉液（112）2ml的混合填充劑的混合填充劑第63頁/共74頁2.對照溶液：用冰醋酸氯仿溶液（對照溶液：用冰醋酸氯仿溶液（1100） 供試液：樣品的氯仿溶液供試液：樣品的氯仿溶液鹽酸鹽酸-甲醇（甲醇（150 ）3.樣品上樣、氯仿洗滌樣品上樣、氯仿洗滌 乙酰水楊酸和水楊酸成鈉鹽保留于柱上，不乙酰水楊酸和水楊酸成鈉鹽保留于柱上，不 被氯仿洗脫。氯仿可除去中性或堿性雜質(zhì)被氯仿洗脫。氯仿可除去中性或堿性雜質(zhì)。第64頁/共74頁 乙酰水楊酸游離，被氯仿洗脫。水楊酸酸性乙酰水楊酸游離，被氯仿洗脫。水楊酸酸性 較強，醋酸不能使其游離而保留在色譜柱上較強，醋酸不能使其游離而保留在色譜柱上。5.收集洗脫液，收集洗脫液，280nm波長處測定吸收度，按波長處測定吸收