污水處理培訓(xùn)參考資料(化驗(yàn))

1、污水處理培訓(xùn)參考資料（二）實(shí)驗(yàn)一：COD的測(cè)定重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)法一、原理: 是在水樣中加如一定量的重鉻酸鉀和催化劑硫酸銀,在強(qiáng)酸性介質(zhì)中加熱回流一定時(shí)間,部分重鉻酸鉀被水樣中可氧化物質(zhì)還原,用硫酸亞鐵銨滴定剩余的重鉻酸鉀,根據(jù)消耗重鉻酸鉀的量計(jì)算COD的值. 二、儀器 1.500mL全玻璃回流裝置. 2.加熱裝置(電爐). 3.25mL或50mL酸式滴定管,錐形瓶,移液管,容量瓶等. 三、試劑 1.重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(c1/6K2Cr2O7=0.2500mol/L) 2.試亞鐵靈指示液 3.硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液c(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O0.1mol/L（使用前標(biāo)定） 4.硫酸硫

2、酸銀溶液 標(biāo)定步驟 硫酸亞鐵銨標(biāo)定 :準(zhǔn)確吸取10.00mL重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液于250mL錐形瓶中,加水稀釋至110mL左右,緩慢加入10mL濃硫酸,搖勻.冷卻后,加入3滴試亞鐵靈指示液(約0.15mL),用硫酸亞鐵銨溶液滴定,溶液的顏色由黃色經(jīng)藍(lán)綠色至紅褐色即為終點(diǎn). 四、 測(cè)定步驟: 取20mL水樣，加入10mL的重鉻酸鉀，插上回流裝置，再加入30mL硫酸硫酸銀,加熱回流 2h 冷卻后,用90.00mL水沖洗冷凝管壁,取下錐形瓶. 溶液再度冷卻后,加3滴試亞鐵靈指示液,用硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,溶液的顏色由黃色經(jīng)藍(lán)綠色至紅褐色即為終點(diǎn),記錄硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量. 五、空白樣： 測(cè)定水樣的

3、同時(shí),取20.00mL重蒸餾水,按同樣操作步驟作空白實(shí)驗(yàn).記錄滴定空白時(shí)硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量. 六、計(jì)算 CODCr(O2,mg/L)=8×1000(V0-V1)·C/V 七、注意事項(xiàng) 1、使用0.4g硫酸汞絡(luò)合氯離子的最高量可達(dá)40mg，如取用20.00mL水樣，即最高可絡(luò)合2000mg/L氯離子濃度的水樣。若氯離子的濃度較低，也可少加硫酸汞，使保持硫酸汞:氯離子=10:1(W/W)。若出現(xiàn)少量氯化汞沉淀，并不影響測(cè)定。 2、本方法測(cè)定COD的范圍為50500mg/L。對(duì)于化學(xué)需氧量小于50mg/L的水樣，應(yīng)改用0.0250mol/L重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液?；氐螘r(shí)用0.01

4、mol/L硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液。對(duì)于COD大于500mg/L的水樣應(yīng)稀釋后再來(lái)測(cè)定。 3、水樣加熱回流后，溶液中重鉻酸鉀剩余量應(yīng)為加入量的1/54/5為宜。 4、用鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液檢查試劑的質(zhì)量和操作技術(shù)時(shí)，由于每克鄰苯二甲酸氫鉀的理論CODCr為1.176g,所以溶解0.4251g鄰苯二甲酸氫鉀(HOOCC6H4COOK)于重蒸餾水中，轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶，用重蒸餾水稀釋至標(biāo)線，使之成為500mg/L的CODcr標(biāo)準(zhǔn)溶液。用時(shí)新配。 5、CODCr的測(cè)定結(jié)果應(yīng)保留三位有效數(shù)字。 6、每次實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)對(duì)硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液進(jìn)行標(biāo)定，室溫較高時(shí)尤其注意其濃度的變化。7、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中按規(guī)范安全

5、操作，加熱過(guò)程中注意水等防止不要濺到電爐等用電設(shè)備上，防止驟冷驟熱，為防止加熱爆炸等可在加熱溶液中加入一定量的防爆玻璃珠。實(shí)驗(yàn)二：揮發(fā)性脂肪酸（VFA）的測(cè)定揮發(fā)性脂肪酸是厭氧消化過(guò)程的重要中間產(chǎn)物，甲烷菌主要利用VFA形成甲烷，只有少部分甲烷由CO2和H2生成。但CO2和H2生成也經(jīng)過(guò)高分子有機(jī)物形成VFA的中間過(guò)程。由此看來(lái)，形成甲烷的過(guò)程離不開(kāi)VFA的形成，但是VFA在厭氧反應(yīng)器中的積累能反映出甲烷菌的不活躍狀態(tài)或反應(yīng)器操作條件的惡化，較高的VFA（例如乙酸）濃度對(duì)甲烷菌有抑制作用。因此在反應(yīng)器運(yùn)行中，出水VFA用作重要的控制指標(biāo)。 在VFA測(cè)定中，常進(jìn)行VFA總量測(cè)定，其單位異mmol

6、/L或換算為按乙酸計(jì)，以單位mg/L表示。 VFA包括甲酸，乙酸，丙酸，丁酸，戊酸，己酸以及它們的異構(gòu)體。在運(yùn)轉(zhuǎn)良好的高速厭氧反應(yīng)器中，VFA中乙酸可占有很高的比例，但是當(dāng)反應(yīng)器運(yùn)行狀態(tài)不好時(shí)，丙，丁酸濃度會(huì)上升。滴定法分析1 原理：將廢水以磷酸酸化后，從中蒸發(fā)出揮發(fā)性脂肪酸，再以酚酞為指示劑用NaOH溶液滴定餾出液。廢水中的氨態(tài)氮可能對(duì)測(cè)定形成干擾，因此應(yīng)當(dāng)首先在堿性條件下蒸發(fā)出氨態(tài)氮。2 藥品 1) 10% NaOH 溶液； 2) NAOH標(biāo)準(zhǔn)溶液，0.1000mol/L;3) 10%磷酸溶液，取70ml密度1.7g/cm3的磷酸用水稀釋至1L;4）酚酞指示劑，1%的乙醇溶液。 3 測(cè)定步

7、驟 蒸餾瓶中放入50ml待測(cè)廢水，其VFA含量不超過(guò)30mmol。放入幾滴酚酞指示劑。加入10% NaOH溶液，使溶解呈堿性，并使NaOH略過(guò)量。蒸餾至蒸餾瓶中剩余液體為5060ml為止。用蒸餾水將蒸餾瓶中的剩余液體稀釋至原來(lái)體積，用10ml 10%的磷酸酸化，在接收瓶中放入10ml蒸餾水并使接收瓶與蒸餾瓶上的冷凝管連接，導(dǎo)入管應(yīng)浸入接收瓶的液面以下。蒸餾至瓶中液體為1520ml為止。待蒸餾瓶冷卻以后，加入50ml蒸餾水再次蒸餾，至1020ml液體為止。 加入10滴酚酞，用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡粉色不消失為止。 4 計(jì)算 揮發(fā)性脂肪酸含量計(jì)算如下： VFA=V (NaOH)*C*1000/V

8、s (mmol/L) 式中：V(NaOH) 滴定消耗的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml; C 滴定消耗的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的準(zhǔn)確濃度，mol/L; Vs 被測(cè)廢水水樣的體積，ml.實(shí)驗(yàn)三：廢水中懸浮物（SS）的測(cè)定一、懸浮固體的測(cè)定原理：懸浮固體系指剩留在濾料上并于103-105烘至恒重的固體。測(cè)定的方法是將水樣通過(guò)濾料后，烘干固體殘留物及濾料，將所稱重量減去濾料重量，即為懸浮固體（非過(guò)濾性殘?jiān)?。二、儀器1、烘箱 2、分析天平 3、干燥器 4、孔徑為0.45m濾膜及相應(yīng)的濾器或中速濾紙。 5、玻璃漏斗 6、內(nèi)徑為30-50稱量瓶三、測(cè)定步驟 1、將濾膜放在稱量瓶中，打開(kāi)瓶蓋，在103-105烘干2

9、h，取出冷卻后蓋好瓶蓋稱重，直至恒重（兩次稱量相差不超過(guò)0.0005g） 2、去除懸浮物后震蕩水樣，量取均勻適量水樣（使懸浮物大于2.5mg），通過(guò)上面稱至恒重的濾膜過(guò)濾；用蒸餾水洗殘?jiān)?-5次。如樣品中含有油脂，用10Ml石油醚分兩次淋洗殘?jiān)?3、小心取下濾膜，放入原稱量瓶?jī)?nèi)，在103-105烘箱內(nèi)，打開(kāi)瓶蓋烘2h，冷卻后蓋好蓋稱重，直至恒重為止。計(jì)算：懸浮固體（mg/L）= (A-B)×1000×1000/V式中：A懸浮固體+濾膜及稱量瓶重（g）B濾膜及稱量瓶重（g）V水樣體積注意事項(xiàng)： 1、樹(shù)葉、木棒、水草等雜質(zhì)應(yīng)從水樣中除去。 2、廢水粘度高時(shí)，可加2-4倍蒸餾水

10、稀釋，震蕩均勻，待沉淀物下降后在過(guò)濾。 3、也可采用石棉坩堝進(jìn)行過(guò)濾。實(shí)驗(yàn)4 水中氨氮的測(cè)定（納氏試劑比色法）HJ535-2009代替GB 7479-87一實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 了解水中氨氮的測(cè)定意義。2 掌握水中氨氮的測(cè)定方法和原理。二實(shí)驗(yàn)原理氮是蛋白質(zhì)、核酸、酶、維生素等有機(jī)物中的重要組分。純凈天然水體中的含氮物質(zhì)是很少的，水體中含氮物質(zhì)的主要來(lái)源是生活污水和某些工業(yè)廢水。當(dāng)含氮有機(jī)物進(jìn)入水體后，由于微生物和氧的作用，可以逐步分解或氧化為無(wú)機(jī)氨（NH3）、銨（NH4+）、亞硝酸鹽（NO2-）和最終產(chǎn)物（NO3-）。氨和銨中的氮稱為氨氮（Ammonia nitrogen 簡(jiǎn)稱NH3-N）。水中氨氮的含

11、量在一定程度上反映了含氮有機(jī)物的污染情況。在污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)（GB8978-1996）和地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（GB3838-2002）中，氨氮都是重要的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。以游離態(tài)的氨或銨離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與氨氮含量成正比，于波長(zhǎng)420 nm處測(cè)量吸光度。 氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成棕色膠態(tài)化合物， 干擾及消除：水樣中含有懸浮物、余氯、鈣鎂等金屬離子、硫化物和有機(jī)物時(shí)會(huì)產(chǎn)生干擾，含有此類物質(zhì)時(shí)要作適當(dāng)處理，以消除對(duì)測(cè)定的影響。 若樣品中存在余氯，可加入適量的硫代硫酸鈉溶液去除，用淀粉-碘化鉀試紙檢驗(yàn)余氯是否除盡。在顯色時(shí)加入適量的酒石酸鉀鈉溶液，可消除鈣鎂等

12、金屬離子的干擾。若水樣渾濁或有顏色時(shí)可用預(yù)蒸餾法或絮凝沉淀法處理。三. 儀器與試劑1 尤尼柯WFJ7200型可見(jiàn)分光光度計(jì)，具20mm比色皿。2 納氏試劑（碘化汞-碘化鉀-氫氧化鈉（HgI2-KI-NaOH）溶液）：稱取 16.0g氫氧化鈉（NaOH），溶于50ml水中，冷卻至室溫。 稱取7.0g碘化鉀（KI）和10.0g碘化汞（HgI2），溶于水中，然后將此溶液在攪拌下，緩慢加入到上述50ml氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至100ml。貯于聚乙烯瓶?jī)?nèi)，用橡皮塞或聚乙烯蓋子蓋緊，于暗處存放，有效期1年。3 酒石酸鉀鈉溶液：稱取50.0g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O）溶于100m

13、L水中，加熱煮沸以驅(qū)除氨，充分冷卻后稀釋至100ml。4 氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（1000g/ml）：稱取3.8190g氯化銨（NH4Cl，優(yōu)級(jí)純，在100105干燥2h），溶于無(wú)氨水中，移入1000ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻?？稍?5保存1個(gè)月。5 氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（10g/mL）：吸10.00ml氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于1000ml容量瓶?jī)?nèi)，用無(wú)氨水稀釋至刻度，搖勻。臨用前配制。以下為水樣需預(yù)處理時(shí)所需試劑6. 硫代硫酸鈉溶液（3.5g/L）：稱取3.5g硫代硫酸鈉（Na2S2O3）溶于水中，稀釋至1000ml。 7. 硫酸鋅溶液（100g/L）：稱取10.0g硫酸鋅（ZnSO4·7H2

14、O）溶于水中，稀釋至100ml。 8. 氫氧化鈉溶液（250g/L）：稱取25g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100ml。 9. 氫氧化鈉溶液（1mol/L）：稱取4g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100ml。 10. 鹽酸溶液(1mol/L)：量取8.5ml鹽酸于適量水中用水稀釋至100ml。 11. 硼酸（H3BO3）溶液（20g/L）：稱取20g硼酸溶于水，稀釋至 1 L。12. 溴百里酚藍(lán)指示劑（0.5g/L）：稱取0.05g溴百里酚藍(lán)溶于50ml水中，加入10ml無(wú)水乙醇，用水稀釋至100ml。 13. 淀粉-碘化鉀試紙：稱取1.5g可溶性淀粉于燒杯中，用少量水調(diào)成糊狀，加入200ml沸水，攪拌

15、混勻放冷。加 0.50 g碘化鉀（KI）和 0.50 g 碳酸鈉（Na2CO3），用水稀釋至250ml。將濾紙條浸漬后，取出晾干，于棕色瓶中密封保存。四. 實(shí)驗(yàn)步驟1. 制備無(wú)氨水每升水加入0.1ml濃硫酸進(jìn)行蒸餾，餾出水接收于玻璃容器中。2. 校準(zhǔn)曲線的繪制在7個(gè)50ml比色管中，分別加入0.00、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00ml氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其所對(duì)應(yīng)的氨氮含量分別為0.0、5.0、10.0、30.0、50.0、70.0和100µg，加水至標(biāo)線。加入1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，搖勻，再加入納氏試劑1.0ml，搖勻。放置10min后，在波長(zhǎng)420nm

16、下，用20mm比色皿，以水作參比，測(cè)量吸光度。以空白校正后的吸光度為縱坐標(biāo)，以其對(duì)應(yīng)的氨氮含量（µg）為橫坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。 3. 樣品預(yù)處理樣品采集與保存：水樣采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶?jī)?nèi)，要盡快分析。如需保存，應(yīng)加硫酸使水樣酸化至 pH2，25下可保存 7 d。去除余氯：若樣品中存在余氯，可加入適量的硫代硫酸鈉溶液去除。每加0.5ml 可去除0.25 mg余氯。用淀粉-碘化鉀試紙檢驗(yàn)余氯是否除盡。 絮凝沉淀：100ml樣品中加入1ml硫酸鋅溶液和0.10.2 ml氫氧化鈉溶液（250g/L，6.25mol/L），調(diào)節(jié)pH約為10.5，混勻，放置使之沉淀，傾取上清液分析。必要時(shí)，用經(jīng)

17、水沖洗過(guò)的中速濾紙過(guò)濾，棄去初濾液20 ml。也可對(duì)絮凝后樣品離心處理。 預(yù)蒸餾：將50ml硼酸溶液移入接收瓶?jī)?nèi)，確保冷凝管出口在硼酸溶液液面之下。分取 250 ml樣品，移入燒瓶中，加幾滴溴百里酚藍(lán)指示劑，必要時(shí)，用氫氧化鈉溶液(1.0mol/L)或鹽酸溶液調(diào)整pH至6.0（指示劑呈黃色）7.4（指示劑呈藍(lán)色），加入0.25g輕質(zhì)氧化鎂及數(shù)粒玻璃珠，立即連接氮球和冷凝管。加熱蒸餾，使餾出液速率約為10 ml/min，待餾出液達(dá)200 ml 時(shí)，停止蒸餾，加水定容至250 ml。4. 樣品測(cè)定取經(jīng)預(yù)處理后的適量水樣（使氨氮含量不超過(guò)0.1mg），加入50mL比色管中，稀釋至刻度。按與校準(zhǔn)曲線相

18、同的步驟測(cè)量吸光度。注：經(jīng)蒸餾或在酸性條件下煮沸方法預(yù)處理的水樣，須加一定量氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)水樣至中性，用水稀釋至50 ml標(biāo)線，再按與校準(zhǔn)曲線相同的步驟測(cè)量吸光度。 空白試驗(yàn)：用水代替水樣，按與樣品相同的步驟進(jìn)行前處理和測(cè)定。五. 數(shù)據(jù)處理由水樣測(cè)得的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得氨氮含量（µg）。式中：m由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的氨氮量(µg)； V水樣體積（mL）。六. 注意事項(xiàng)1. 納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例，對(duì)顯色反應(yīng)的靈敏度有較大影響。靜置后生成的沉淀應(yīng)除去。2. 納氏試劑顯色后的溶液顏色會(huì)隨時(shí)間變化，應(yīng)在較短時(shí)間內(nèi)完成比色操作。實(shí)驗(yàn)五：總磷的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)方法鉬酸銨分光光度法

19、GB 11893-891 主題內(nèi)容與適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用過(guò)硫酸鉀（或硝酸高氯酸）為氧化劑，將未經(jīng)過(guò)濾的水樣消解，用鉬酸銨分光光度測(cè)定總磷的方法?？偭装ㄈ芙獾?、顆粒的、有機(jī)的和無(wú)機(jī)磷。本標(biāo)準(zhǔn)適用于地面水、污水和工業(yè)廢水。取25mL試料，本標(biāo)準(zhǔn)的最低檢出濃度為0.01mgL，測(cè)定上限為0.6mgL。在酸性條件下，砷、鉻、硫干擾測(cè)定。2 原理在中性條件下用過(guò)硫酸鉀（或硝酸高氯酸）使試樣消解，將所含磷全部氧化為正磷酸鹽。在酸性介質(zhì)中，正磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)，在銻鹽存在下生成磷鉬雜多酸后，立即被抗壞血酸還原，生成藍(lán)色的絡(luò)合物。3 試劑本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑除另有說(shuō)明外，均應(yīng)使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或?qū)I(yè)標(biāo)準(zhǔn)的分析試劑

20、和蒸餾水或同等純度的水。3.1 硫酸(H2SO4)，密度為1.84gmL。3.2 硝酸(HNO3)，密度為1.4gmL。3.3 高氯酸(HClO4)，優(yōu)級(jí)純，密度為1.68gmL。3.4 硫酸(H2SO4)，11。3.5 硫酸，約c(1/2H2SO4)1mo1L：將27mL硫酸(3.1)加入到973mL水中。3.6 氫氧化鈉(NaOH)，1mo1L溶液：將40g氫氧化鈉溶于水并稀釋至1000mL。3.7 氫氧化鈉(NaOH)，6mo1L溶液；將240g氫氧化鈉溶于水并稀釋至1000mL。3.8 過(guò)硫酸鉀，50gL溶液：將5g過(guò)硫酸鉀(K2S2O8)溶解干水，并稀釋至100mL。3.9 抗壞血酸

21、，100gL溶液：溶解10g抗壞血酸(C6H8O6)于水中，并稀釋至100mL。此溶液貯于棕色的試劑瓶中，在冷處可穩(wěn)定幾周。如不變色可長(zhǎng)時(shí)間使用。3.10 鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨(NH4)6Mo7O24·4H2O于100mL水中。溶解0.35g酒石酸銻鉀KSbC4H4O7· 1 H2O于100mL水中。在不斷攪拌下把鉬酸銨溶液徐徐加到300mL硫酸(3.4)中，加酒石酸銻鉀溶液并且混合均勻。此溶液貯存于棕色試劑瓶中，在冷處可保存二個(gè)月。3.11 濁度一色度補(bǔ)償液：混合兩個(gè)體積硫酸(3.4)和一個(gè)體積抗壞血酸溶液(3.9)。使用當(dāng)天配制。3.12

22、 磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：稱取0.2197±0.001g于110干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氫鉀(KH2PO4)，用水溶解后轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加入大約800mL水、加5mL硫酸(3.4)用水稀釋至標(biāo)線并混勻。1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含50.0g磷。本溶液在玻璃瓶中可貯存至少六個(gè)月。3.13 磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：將10.0mL的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.12)轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線并混勻。1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含2.0g磷。使用當(dāng)天配制。3.14 酚酞，10gL溶液：0.5g酚酞溶于50mL95乙醇中。4 儀器實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備和下列儀器。4.1 醫(yī)用手提式蒸氣消毒器或一般壓力鍋

23、(1.11.4kgcm2)。4.2 50mL具塞(磨口)刻度管。4.3 分光光度計(jì)。注：所有玻璃器皿均應(yīng)用稀鹽酸或稀硝酸浸泡。5 采樣和樣品5.1 采取500mL水樣后加入1mL硫酸(3.1)調(diào)節(jié)樣品的pH值，使之低于或等于1，或不加任何試劑于冷處保存。注：含磷量較少的水樣，不要用塑料瓶采樣，因易磷酸鹽吸附在塑料瓶壁上。5.2 試樣的制備：取25mL樣品(5.1)于具塞刻度管中(4.2)。取時(shí)應(yīng)仔細(xì)搖勻，以得到溶解部分和懸浮部分均具有代表性的試樣。如樣品中含磷濃度較高，試樣體積可以減少。6 分析步驟6.1 空白試樣按(6.2)的規(guī)定進(jìn)行空白試驗(yàn)，用水代替試樣，并加入與測(cè)定時(shí)相同體積的試劑。6.

24、2 測(cè)定6.2.1 消解6.2.1.1 過(guò)硫酸鉀消解：向(5.2)試樣中加4mL過(guò)硫酸鉀(3.8)，將具塞刻度管的蓋塞緊后，用一小塊布和線將玻璃塞扎緊(或用其他方法固定)，放在大燒杯中置于高壓蒸氣消毒器(4.1)中加熱，待壓力達(dá)1.1kgcm2，相應(yīng)溫度為120時(shí)、保持30min后停止加熱。待壓力表讀數(shù)降至零后，取出放冷。然后用水稀釋至標(biāo)線。注：如用硫酸保存水樣。當(dāng)用過(guò)硫酸鉀消解時(shí)，需先將試樣調(diào)至中性。6.2.1.2 硝酸-高氯酸消解：取25mL試樣(5.1)于錐形瓶中，加數(shù)粒玻璃珠，加2mL硝酸(3.2)在電熱板上加熱濃縮至10mL。冷后加5mL硝酸(3.2)，再加熱濃縮至10mL，放冷。加

25、3mL高氯酸(3.3)，加熱至高氯酸冒白煙，此時(shí)可在錐形瓶上加小漏斗或調(diào)節(jié)電熱板溫度，使消解液在錐形瓶?jī)?nèi)壁保持回流狀態(tài)，直至剩下34mL，放冷。加水10mL，加1滴酚酞指示劑(3.14)。滴加氫氧化鈉溶液(3.6或3.7)至剛呈微紅色，再滴加硫酸溶液(3.5)使微紅剛好退去，充分混勻。移至具塞刻度管中(4.2)，用水稀釋至標(biāo)線。注：用硝酸-高氯酸消解需要在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。高氯酸和有機(jī)物的混合物經(jīng)加熱易發(fā)生危險(xiǎn)，需將試樣先用硝酸消解，然后再加入硝酸高氯酸進(jìn)行消解。絕不可把消解的試作蒸干。如消解后有殘?jiān)鼤r(shí)，用濾紙過(guò)濾于具塞刻度管中，并用水充分清洗錐形瓶及濾紙，一并移到具塞刻度管中。水作中的有機(jī)物用過(guò)

26、硫酸鉀氧化不能完全破壞時(shí)，可用此法消解。6.2.2 發(fā)色分別向各份消解液中加入1mL抗壞血酸溶液(3.9)混勻，30s后加2mL鉬酸鹽溶液(3.10)充分混勻。注：如試樣中含有濁度或色度時(shí)，需配制一個(gè)空白試樣(消解后用水稀釋至標(biāo)線)然后向試料中加入3mL濁度色度補(bǔ)償液(3.11)，但不加抗壞血酸溶液和鉬酸鹽溶液。然后從試料的吸光度中扣除空白試料的吸光度。砷大于2mgL干擾測(cè)定，用硫代硫酸鈉去除。硫化物大于2mgL干擾測(cè)定，通氮?dú)馊コ?。鉻大于50mgL干擾測(cè)定，用亞硫酸鈉去除。6.2.3 分光光度測(cè)量室溫下放置15min后，使用光程為30mm比色皿，在700nm波長(zhǎng)下，以水做參比，測(cè)定吸光度。扣

27、除空白試驗(yàn)的吸光度后，從工作曲線(6.2.4)上查得磷的含量。注：如顯色時(shí)室溫低于13，可在2030水花上顯色15min即可。6.2.4 工作曲線的繪制取7支具塞刻度管(4.2)分別加入0.0，0.50，1.00，3.00，5.00，10.0，15.0mL磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.14)。加水至25mL。然后按測(cè)定步驟(6.2)進(jìn)行處理。以水做參比，測(cè)定吸光度。扣除空白試驗(yàn)的吸光度后，和對(duì)應(yīng)的磷的含量繪制工作曲線。7 結(jié)果的表示總磷含量以C(mgL)表示，按下式計(jì)算：式中：m試樣測(cè)得含磷量，g；V測(cè)定用試樣體積，mL。8 精密度與準(zhǔn)確度8.1 十三個(gè)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定(采用6.2.1.1消解)含磷2.06m

28、gL的統(tǒng)一樣品8.1.1 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.75。8.1.2 再現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.5。8.1.3 準(zhǔn)確度相對(duì)誤差為1.9。8.2 六個(gè)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定(采用6.2.1.2消解)含磷量2.06mgL的統(tǒng)一樣品。8.2.1 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4。8.2.2 再現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4。8.2.3 準(zhǔn)確度相對(duì)誤差為1.9。實(shí)驗(yàn)六：五日生化需氧量（BOD5）的測(cè)定生化需氧量是指在有溶解氧的條件下，好氧微生物在分解水中有機(jī)物的生物化學(xué)氧化過(guò)程中所消耗的溶解氧量。同時(shí)亦包括如硫化物、亞鐵等還原性無(wú)機(jī)物質(zhì)氧化所消耗的氧量，但這部分通常占很小比例。1實(shí)驗(yàn)原理：生化需氧

29、量是指在規(guī)定條件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物質(zhì)，主要是有機(jī)物質(zhì)所進(jìn)行的生物化學(xué)過(guò)程中消耗溶解氧的量。分別測(cè)定水樣培養(yǎng)前的溶解氧含量和在20±1培養(yǎng)五天后的溶解氧含量，二者之差即為五日生化過(guò)程所消耗的氧量（BOD5）。對(duì)于某些污水及大多數(shù)工業(yè)廢水、生活廢水，因含較多的有機(jī)物，需要稀釋后再培養(yǎng)測(cè)定，以降低其濃度，保證降解過(guò)程在有足夠溶解氧的條件下進(jìn)行。其具體水樣稀釋倍數(shù)可借助于高錳酸鉀指數(shù)或化學(xué)需氧量（CODcr）推算。對(duì)于不含或少含微生物的工業(yè)廢水，在測(cè)定BOD5時(shí)應(yīng)進(jìn)行接種，以引入能分解廢水中有機(jī)物的微生物。當(dāng)廢水中存在難于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有機(jī)物或含

30、有劇毒物質(zhì)時(shí)，應(yīng)接種經(jīng)過(guò)馴化的微生物。2實(shí)驗(yàn)儀器：（1）恒溫培養(yǎng)箱。（2）5-20L細(xì)口玻璃瓶。（3）1000-2000mL量筒。（4）攪棒：棒長(zhǎng)應(yīng)比所用量筒高度長(zhǎng)20cm。在棒的底端固定一個(gè)直徑比量筒直徑略小，并帶有幾個(gè)小孔的硬橡膠板。（5）溶解氧瓶：200-300mL，帶有磨口玻璃塞并具有供水封用的鐘形口。（6）虹吸管：供分取水樣和添加稀釋水用。3實(shí)驗(yàn)試劑：（1）磷酸鹽緩沖溶液：將8.5kg磷酸二氫鉀（KH2PO4），21.75g磷酸氫二鉀（K2HPO4），33.4g磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化銨（NH4Cl）溶于水中，稀釋至1000mL。此溶液的pH應(yīng)為

31、7.2。（2）硫酸鎂溶液：將22.5g硫酸鎂（MgSO4）·7H2O)溶于水中，稀釋至1000mL。（3）氯化鈣溶液：將27.5g無(wú)水氯化鈣溶于水，稀釋至1000mL。（4）氯化鐵溶液：將0.25g氯化鐵（FeCl3·6H2O）溶于水，稀釋至1000mL。（5）鹽酸溶液（0.5mol/L）：將40mL(=1.18g/mL)鹽酸溶于水，稀釋至100mL。（6）氫氧化鈉溶液（0.5mol/L）：將20g氫氧化鈉溶于水，稀釋至1000mL。（7）亞硫酸鈉溶液（1/2Na2SO3=0.025mol/L）：將1.575g亞硫酸鈉溶于水，稀釋至1000mL。此溶液不穩(wěn)定，需每天配制。（

32、8）葡萄糖-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：將葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH）在103干燥1h后，各稱取150mg溶于水中，移入1000mL容量瓶?jī)?nèi)并稀釋至標(biāo)線，混合均勻。此標(biāo)準(zhǔn)溶液臨用前配制。（9）稀釋水：在5-20L玻璃瓶?jī)?nèi)裝入一定量的水，控制水溫在20左右。然后用無(wú)油空氣壓縮機(jī)或薄膜泵，將此水曝氣2-8h，使水中的溶解氧接近于飽和，也可以鼓入適量純氧。瓶口蓋以兩層經(jīng)洗滌晾干的紗布，置于20培養(yǎng)箱中放置數(shù)小時(shí)，使水中溶解氧含量達(dá)8mg/L左右。臨用前于每升水中加入氯化鈣溶液、氯化鐵溶液、硫酸鎂溶液、磷酸鹽緩沖溶液各1mL，并混合均勻。稀釋水的pH值應(yīng)為7.

33、2，其BOD5應(yīng)小于0.2mg/L。（10）接種液：可選用以下任一方法，以獲得適用的接種液。城市污水，一般采用生活污水，在室溫下放置一晝夜，取上層清液供用。表層土壤浸出液，取100g花園土壤或植物生長(zhǎng)土壤，加1L水，混合并靜置10min，取上清液供用。用含城市污水的河水或湖水。污水處理廠的出水。當(dāng)分析含有難于降解物質(zhì)的廢水時(shí)，在排污口下游3-8km處取水樣做為廢水的馴化接種液。如無(wú)此種水源，可取中和或經(jīng)適當(dāng)稀釋后的廢水進(jìn)行連續(xù)曝氣、每天加入少量該種廢水，同時(shí)加入適量表層土壤或生活污水，使能適應(yīng)該種廢水的微生物大量繁殖，可用做接種液。一般馴化過(guò)程需要3-8d。（11）接種稀釋水：取適量接種液，加

34、于稀釋水中，混勻。每升稀釋水中接種液加入量：生活污水為1-10mL；表層土壤浸出液為20-30mL；河水、湖水為10-100mL。接種稀釋水的pH值應(yīng)為7.2，BOD5值以在0.3-1.0mg/L之間為宜。接種稀釋水配制后應(yīng)立即使用。4測(cè)定步驟：（1）水樣的預(yù)處理水樣的pH值若超出6.5-7.5范圍時(shí)，可用鹽酸或氫氧化鈉稀溶液調(diào)節(jié)至近于7，但用量不要超過(guò)水樣體積的0.5%。若水樣的酸度或堿度很高，可改用高濃度的堿或酸液進(jìn)行中和。水樣中含有銅、鉛、鋅、鎘、鉻、砷、氰等有毒物質(zhì)時(shí)，可使用經(jīng)馴化的微生物接種液的稀釋水進(jìn)行稀釋，或增大稀釋倍數(shù)，以減小毒物質(zhì)的濃度。含有少量游離氯的水樣，一般放置1-2h

35、，游離氯即可消失。對(duì)于游離氯在短時(shí)間不能加入1+1乙酸10mL，10%（m/V）碘化鉀溶液1mL，混勻。以淀粉溶液為指示劑，用亞硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定游離碘。根據(jù)亞硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗的體積及其濃度，計(jì)算水樣中所需加亞硫酸鈉溶液的量。從水溫較低的水域中采集的水樣，可遇到含有過(guò)飽和溶解氧，此時(shí)應(yīng)將水樣迅速升溫至20左右，充分振搖，以致出過(guò)飽和的溶解氧。從水溫較高的水域或廢水排放口取得的水樣，則應(yīng)迅速使其冷卻至20左右，并充分振搖，使與空氣中氧分壓接近平衡。（2）水樣的測(cè)定不經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定溶解氧含量較高、有機(jī)物含量較少的地面不，可不經(jīng)稀釋，而直接以虹吸法將約20的混勻水樣轉(zhuǎn)移至兩個(gè)溶解氧瓶?jī)?nèi)，轉(zhuǎn)移過(guò)程

36、中應(yīng)注意不使其產(chǎn)生氣泡。以同樣的操作使兩個(gè)溶解氧瓶充滿水樣，加塞水封，立即測(cè)定其中一瓶溶解氧。將另一瓶放入培養(yǎng)箱中，在20±1培養(yǎng)5d后，測(cè)其溶解氧。需經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定稀釋倍數(shù)的確定：地面水可由測(cè)得的高錳酸鹽指數(shù)乘以適當(dāng)?shù)南禂?shù)求出稀釋倍數(shù)（見(jiàn)下表）。高錳酸鹽指數(shù)（mg/L）系數(shù)<55-1010-20>200.2、0.30.4、0.60.5、0.7、1.0工業(yè)廢水可由重鉻酸鉀法測(cè)得的COD值確定。通常需作三個(gè)稀釋比，即使用稀釋水時(shí)，由COD值分別乘以系數(shù)0.075、0.15、0.225，即獲得三個(gè)稀釋倍數(shù)；使用接種稀釋水時(shí)，則分別乘以0.075、0.15和0.25,獲得三個(gè)

37、稀釋倍數(shù)。稀釋倍數(shù)確定后按下列方法之一測(cè)定水樣。a.一般稀釋法：按照選定的稀釋比例，用虹吸法沿筒壁引入部分稀釋水（或接種稀釋水）于1000mL量筒中，加入需要量的均勻水樣，再引入稀釋水（或接種稀釋水）至800mL，用帶膠板的玻璃棒小心上下攪勻。攪拌時(shí)勿使攪棒的膠板露出水面，防止產(chǎn)生氣泡。按不經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定步驟，進(jìn)行裝瓶，測(cè)定當(dāng)天溶解氧和培養(yǎng)5d后的溶解氧含量。取兩溶解氧瓶，用虹吸法裝滿稀釋水（或接種稀釋水）作為空白，分別測(cè)定5d前、后的溶解氧含量。b.直接稀釋法：直接稀釋法是在溶解氧瓶?jī)?nèi)直接稀釋。在已知兩個(gè)容積相同（其差小于1mL）的溶解氧瓶?jī)?nèi)，用虹吸法加入部分稀釋水（或接種稀釋水），再加入

38、根據(jù)瓶容積和稀釋比例計(jì)算出的水樣量，然后引入稀釋水（或接種稀釋水）至剛好充滿，加塞，勿留氣泡于瓶?jī)?nèi)。其余操作與上述稀釋相同。 在BOD5測(cè)定中，一般采用疊氮化鈉改良法測(cè)定溶解氧。如遇干擾物質(zhì)，應(yīng)根據(jù)具體情況采用其他測(cè)定法，溶解氧的測(cè)定方法附后。5計(jì)算公式：（1）不經(jīng)稀釋直接培養(yǎng)的水樣BOD5(mg/L)=c1-c2式中：c1水樣在培養(yǎng)前的溶解氧濃度（mg/L）；c2水樣經(jīng)5d培養(yǎng)后，剩余溶解氧濃度（mg/L）。（2）經(jīng)稀釋后培養(yǎng)的水樣BOD5(mg/L)=式中：B1稀釋水（或接種稀釋水）在培養(yǎng)前的溶解氧濃度（mg/L）；B2稀釋水（或接種稀釋水）在培養(yǎng)后的溶解氧濃度（mg/L）；f1稀釋水（或接種稀釋水）在培養(yǎng)液中所占比例；f2水樣在培養(yǎng)液中所占比例。6注意事項(xiàng)：（1）測(cè)定一般水樣的BOD5時(shí)，硝化作用很不明顯或根本不發(fā)生。但對(duì)于生物處理池出水，則含有大量硝化細(xì)菌。因此，在測(cè)定BOD5時(shí)也包括了部分含氮化合物的需氧量。對(duì)于這種水樣，如只需測(cè)定有機(jī)物的需氧量，應(yīng)加入硝化抑制劑，如丙稀基硫脲（ATU，C4H8N2S）等。（2）在兩個(gè)或三個(gè)稀釋比的樣品中，凡消耗溶解氧大于2mg/L和剩余溶解氧大于1mg/L都有效，計(jì)算結(jié)果時(shí)，應(yīng)取平均值。（3）為檢查稀釋水和接種液的質(zhì)量，以及化驗(yàn)人員的操作技術(shù)，可將