環(huán)境毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1環(huán)境環(huán)境(hunjng)毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)第一頁，共24頁。第1頁/共23頁第二頁，共24頁。簡簡單單易易行，行，可可對對受受試試物物毒毒性性( (d d x x n n)進(jìn)進(jìn)行行初初篩。篩。將將蚯蚯蚓蚓與與濕濕潤潤的的濾濾紙紙上上的的受受試試物物接接觸，觸，測測定定土土壤壤中中受受試試物物對對蚯蚯蚓蚓的的潛潛在在影影響。響。人人工工土土壤壤實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)系系統(tǒng)統(tǒng)將將蚯蚯蚓蚓置置于于含含不不同同濃濃度度受受試試物物的的人人工工土土壤壤中，中，飼飼養(yǎng)養(yǎng)7 7d d和和1 14 4d d，評評價價其其死死亡亡率，率，評評價價受受試試物物對對蚯蚯蚓蚓的的急急性性毒毒性性( (d d x x n

2、n)作作用。用。第2頁/共23頁第三頁，共24頁。第3頁/共23頁第四頁，共24頁。3 30 00 0- -5 50 00 0m mg g左左右右的的健健康康赤赤子子愛愛勝勝蚓。蚓。實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)前前應(yīng)應(yīng)在在實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室條條件件下下馴馴養(yǎng)養(yǎng)2 2周周以以上。上。第4頁/共23頁第五頁，共24頁。第5頁/共23頁第六頁，共24頁。g gx x)蚯蚯蚓，蚓，然然后后置置于于鋪鋪有有濾濾紙紙的的磁磁盤盤上上清清腸腸2 24 4h h，用用去去離離子子水水沖沖洗洗后，后，濾濾紙紙吸吸干干稱稱重，重，供供試。試。注：注：清清腸腸過過程程用用薄薄膜膜包包緊緊磁磁盤，盤，防防止止蚯蚯蚓蚓爬爬出出磁磁盤盤死死亡。亡

3、。第6頁/共23頁第七頁，共24頁。襯襯濾濾紙，紙，鋪鋪滿滿不不重重疊；疊；設(shè)設(shè)5 5個個濃濃度度梯梯度度（見見附附表）表）及及對對照照共共6 6組組試試管，管，每每組組1 10 0個個重重復(fù)，復(fù)，每每個個試試管管內(nèi)內(nèi)首首先先移移取取1 1m ml l對對應(yīng)應(yīng)濃濃度度的的受受試試物物溶溶液，液，用用潔潔凈凈空空氣氣吹吹干，干，然然后后每每個個試試管管加加入入1 1m ml l去去離離子子水，水，然然后后加加入入1 1條條蚯蚯蚓，蚓，用用薄薄膜膜封封口，口，在在黑黑暗、暗、2 20 02 2環(huán)環(huán)境境培培養(yǎng)養(yǎng)4 48 8h h，每每2 24 4h h觀觀察察一一次，次，記記錄錄死死亡亡情情況，況，

4、同同時時還還有有蚯蚯蚓蚓的的病病理理癥癥狀狀和和行行為。為。第7頁/共23頁第八頁，共24頁。受試物在濾紙的沉積量受試物在濾紙的沉積量（mg/cmmg/cm2 2）受試物濃度受試物濃度（g/mlg/ml）1.0710-20.1710-30.01710-40.001710-50.0001710-6注：受試物溶于水（1000mg/l）或丙酮等助溶劑(rngj)，配成系列濃度第8頁/共23頁第九頁，共24頁。實(shí)實(shí)驗(yàn)。驗(yàn)。最最終終設(shè)設(shè)定定至至少少5 5個個濃濃度度梯梯度度級級及及空空白白組，組，濃濃度度范范圍圍應(yīng)應(yīng)包包括括最最大大耐耐受受( (n na ai i s sh h u)u)濃濃度度和和致致

5、死死濃濃度度兩兩組組濃濃度，度，每每組組至至少少有有4 4個個平平行行樣。樣。受受試試蚯蚯蚓蚓需需在在人人工工土土壤壤中中先先馴馴養(yǎng)養(yǎng)2 24 4h h，實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)前前沖沖洗洗干干凈。凈。實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)進(jìn)進(jìn)行行1 14 4d d，每每7 7d d觀觀察察蚯蚯蚓蚓的的病病理理癥癥狀狀及及行行為、為、死死亡。亡。測測定定介介質(zhì)質(zhì)中中的的含含水水量。量。第9頁/共23頁第十頁，共24頁。第10頁/共23頁第十一頁，共24頁。第11頁/共23頁第十二頁，共24頁。第12頁/共23頁第十三頁，共24頁。氣，氣，防防止止蚯蚯蚓蚓( (q qi i y y n)n)鉆鉆出；出；4 4、根根據(jù)據(jù)L LC C5 50

6、0值值可可將將農(nóng)農(nóng)藥藥對對蚯蚯蚓蚓( (q qi i y y n)n)的的毒毒性性劃劃分分三三個個等等級：級： 1 10 0p pp pm m的的為為低低毒毒農(nóng)農(nóng)藥藥第13頁/共23頁第十四頁，共24頁。對對昆昆蟲蟲或或高高等等動動物物體體內(nèi)內(nèi)膽膽堿堿酯酯酶酶的的活活性性能能起起抑抑制制作作用，用，而而引引起起動動物物中中毒毒死死亡。亡。2 2、利利用用這這一一原原理理測測定定各各種種有有機(jī)機(jī)磷磷殺殺蟲蟲劑劑在在動、動、植植物物體體內(nèi)內(nèi)的的殘殘留留毒毒性，性，為為安安全全( ( n nq qu u n)n)使使用用農(nóng)農(nóng)藥藥提提供供依依據(jù)。據(jù)。第14頁/共23頁第十五頁，共24頁。第15頁/共2

7、3頁第十六頁，共24頁。第16頁/共23頁第十七頁，共24頁。( (j j n nx x n ng)g)編編號號1 1- -9 9（其其中中6 6號號管管為為空空白白管，管，9 9號號管管為為對對照照管）管），另另有有一一支支2 2m ml l有有蓋蓋管；管；2 2、每每一一排排所所有有組組將將芽芽蟲蟲放放在在一一起，起，加加入入5 5倍倍左左右右的的冷冷凍凍蒸蒸餾餾水，水，進(jìn)進(jìn)行行( (j j n nx x n ng)g)研研磨，磨，然然后后將將漿漿液液全全部部倒倒入入離離心心管管中，中，在在2 25 50 00 0r rp pm m離離心心1 15 5m mi in n，取取離離心心管管中

8、中上上清清液液作作為為正正常常蟲蟲漿，漿，共共用；用；第17頁/共23頁第十八頁，共24頁。第18頁/共23頁第十九頁，共24頁。第19頁/共23頁第二十頁，共24頁。第20頁/共23頁第二十一頁，共24頁。第21頁/共23頁第二十二頁，共24頁。3 3頭，頭，實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)時時需需去去除除雄雄性性的的睪睪丸，丸，剪剪去去翅翅膀、膀、附附肢、肢、觸觸角角等，等，研研磨磨后后需需用用玻玻璃璃絲絲過過濾；濾；2 2、手手工工( (s sh h u ug g n ng)g)研研磨磨時時可可先先加加少少量量冷冷凍凍蒸蒸餾餾水，水，快快速速研研磨磨后后再再加加適適量量冷冷凍凍蒸蒸餾餾水水磨磨拌拌均均勻。勻。第22頁/共23頁第二十三頁，共24頁。NoImage內(nèi)容(nirng)總結(jié)會計(jì)學(xué)。（2）初步了解評價環(huán)境中化學(xué)物質(zhì)對土壤中動物急生傷害的標(biāo)準(zhǔn)和基本步驟。濾紙接觸法毒性實(shí)驗(yàn)簡單易行，可對受試物毒性進(jìn)行初篩。注：清腸過