微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則

1、微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則（NY 1109-2006）1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了微生物肥料使用菌種安全性分級(jí)目錄、不同菌種及產(chǎn)品選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則、程序、試驗(yàn)方法和結(jié)果評(píng)價(jià)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于中華人民共和國(guó)境內(nèi)生產(chǎn)、銷售的微生物肥料。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB 15193.3-2003    急性毒性試驗(yàn)GB/T 4789.

2、28-2003  食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1 半數(shù)致死量  median lethal dose,LD50是經(jīng)口給予受試物后，預(yù)期能夠引起動(dòng)物死亡率為50%的單一受試物劑量，該劑量為經(jīng)過統(tǒng)計(jì)得出的估計(jì)值。其單位是每千克體重所攝入受試物質(zhì)的毫克數(shù)、克數(shù)或毫升數(shù)，即mg/kg體重、g/kg體重或mL/kg體重。4選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則4.1生產(chǎn)用菌種微生物肥料生產(chǎn)用菌種分為四級(jí)管理，其安全分級(jí)目錄見附錄A。未列入附錄A中的菌種，除根瘤菌和乳桿菌(Lactobacillus）外，其余均需做毒理學(xué)試驗(yàn)。4

3、.1.1  第一級(jí)（A.1）為免作毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種。4.1.2  第二級(jí)（A.2）為需做急性毒性試驗(yàn)的菌種。4.1.3  第三級(jí)（A.3）為需做致病性試驗(yàn)的菌種。4.1.4  第四級(jí)（A.4）為禁用菌種。4.2  產(chǎn)品4.2.1  除有機(jī)物料腐熟劑以外的固體微生物接種劑類產(chǎn)品均免做毒理學(xué)試驗(yàn)。4.2.2  復(fù)合微生物肥料、生物有機(jī)肥和液體劑型微生物接種劑等需做急性毒性試驗(yàn)。5毒理學(xué)試驗(yàn)程序5.1  菌種毒理學(xué)試驗(yàn)程序5.1.1  應(yīng)提供微生物肥料

4、生產(chǎn)用菌種的鑒定資料，包括屬及種的拉丁文學(xué)名和中文譯名、形態(tài)、生理生化特性及鑒定依據(jù)、功能評(píng)價(jià)等資料。5.1.2  根據(jù)產(chǎn)品所含菌種的鑒定資料，依據(jù)附錄A之規(guī)定，確定菌種安全級(jí)別、是否做毒理學(xué)試驗(yàn)及毒理學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目。5.1.3  對(duì)于需要做毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種，生產(chǎn)者需提供試驗(yàn)用純菌種斜面，經(jīng)復(fù)核確認(rèn)與該菌種鑒定資料相符且無雜菌污染后，進(jìn)行毒理學(xué)試驗(yàn)。5.2  產(chǎn)品毒理學(xué)程序需對(duì)送檢產(chǎn)品進(jìn)行菌種和載體物料的真實(shí)性確認(rèn)后，進(jìn)行毒理學(xué)試驗(yàn)。6試驗(yàn)方法6.1 受試物的準(zhǔn)備6.1.1  菌種受試物將試驗(yàn)菌種接種于適宜的

5、培養(yǎng)基中，在適宜的條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，用生理鹽水調(diào)整菌液濃度至2.0×1082.0×109cfu/mL，該溶液為菌種受試物。6.1.2  產(chǎn)品受試物固體產(chǎn)品根據(jù)試驗(yàn)要求，配制所需濃度，溶劑首選去離子水，也可選用羧甲基纖維素、明膠、淀粉等。液體產(chǎn)品不可稀釋，直接使用。6.2  急性毒性試驗(yàn)按GB 15193.3-2003執(zhí)行。6.3  致病性試驗(yàn)致病性試驗(yàn)包括以下項(xiàng)目。6.3.1  急性毒性試驗(yàn)方法同5.2。6.3.2  一次破損皮膚刺激試驗(yàn)6.3.2.1  目的檢測(cè)

6、受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚的刺激/腐蝕作用和強(qiáng)度。6.3.2.2  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物每次實(shí)驗(yàn)至少需要3只皮膚完好的白色健康家兔或豚鼠。6.3.2.3  操作程序a)涂受試物前，將家兔或豚鼠背部脊柱兩側(cè)的毛去掉，去毛范圍約2.5cm×2.5cm，用75%酒精清潔、消毒暴露皮膚，待酒精揮發(fā)后，用滅菌刀片或注射針頭分別在兩塊皮區(qū)內(nèi)劃一個(gè)“”形的破損傷口。注意皮膚破損僅達(dá)表皮，不要傷及真皮。b)將受試物0.5mL直接滴于破損皮膚上，或滴于同樣大小的2層4層紗布上并敷貼于破損皮膚表面，然后用一層無刺激塑料膜或油紙覆蓋，再用無刺激膠布固定。另一側(cè)去毛破損皮膚作為空白對(duì)照

7、（或溶劑對(duì)照），敷貼時(shí)間為4h。試驗(yàn)結(jié)束后，用溫水或無刺激性溶劑除去殘留受試物。c)分別于去除受試物后1h、24h和48h觀察皮膚局部反應(yīng)，并按表1進(jìn)行刺激反應(yīng)評(píng)分。注意鑒別感染和原發(fā)性刺激反應(yīng)的區(qū)別，若有感染可疑，應(yīng)進(jìn)行重復(fù)測(cè)試。6.3.2.4  評(píng)價(jià)規(guī)定在各個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)，按照表1對(duì)動(dòng)物的皮膚紅斑與水腫形成情況進(jìn)行評(píng)分，并按時(shí)間點(diǎn)將3只動(dòng)物的評(píng)分相加，除以動(dòng)物數(shù)，獲得不同時(shí)間點(diǎn)的皮膚刺激反應(yīng)積分均值（刺激指數(shù)）。取其中最高皮膚刺激指數(shù)，按表2評(píng)定該受試物對(duì)動(dòng)物皮膚刺激強(qiáng)度的級(jí)別。表1  皮膚刺激反應(yīng)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)皮膚刺激反應(yīng)皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分紅斑形成：

8、60;無0勉強(qiáng)可見1明顯紅斑2中等嚴(yán)重紅斑3紫紅色紅斑并有焦痂形成4水腫形成： 無0勉強(qiáng)可見1皮膚隆起，輪廓清楚2水腫隆起約1mm3水腫隆起超過1mm4表2  皮膚刺激強(qiáng)度分級(jí)皮膚刺激指數(shù)刺激強(qiáng)度級(jí)別00.5無刺激性0.52.0輕刺激性2.06.0  中等刺激性6.08.0強(qiáng)刺激性6.3.3  溶血試驗(yàn)6.3.3.1  目的檢測(cè)受試物是否具有溶血特性。6.3.3.2  操作程序用無菌棉拭子蘸取菌種受試物, 以蛇形線接種于血瓊脂平板(按GB/T4789.28-2003中4.6規(guī)

9、定),置36±1培養(yǎng)箱中培養(yǎng), 24h后觀察有無溶血環(huán)產(chǎn)生。同時(shí)用已知陽(yáng)性菌株金黃色葡萄球菌等作為對(duì)照。6.3.3.3  試驗(yàn)結(jié)果    菌落周圍有溶血環(huán)的，則溶血試驗(yàn)陽(yáng)性；否則為陰性。6.3.4  抗菌藥物敏感試驗(yàn)質(zhì)控菌株可選用大腸桿菌ATCC25922等標(biāo)準(zhǔn)菌株。6.3.4.1  目的檢測(cè)受試物對(duì)抗生素的敏感性強(qiáng)度。6.3.4.2  試驗(yàn)用抗生素可選用頭孢哌酮（CFP）、四環(huán)素（TE）、頭孢唑啉（CZ）、鏈霉素（S）、俐特靈（FR）、環(huán)丙沙星（CIP）、復(fù)方新諾

10、明（SXT）、氯霉素（C）、氨芐青霉素（AM）、慶大霉素（GM）、強(qiáng)力霉素（DO）、丁胺卡那霉素（AN）、甲氟哌酸（PEF）、氟啶酸（ENO）、多西環(huán)素(DO)、依諾沙星(ENO)、阿米卡星(AN)等中的幾種。6.3.4.3  操作程序a) 用無菌棉拭子將受試物均勻涂抹于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板表面，共涂抹3次。每涂抹1次，平板應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)60º，最后將棉拭子繞平板邊緣涂抹一周。蓋好平皿,置室溫干燥5min。b）用無菌棉拭子蘸取濃度為2.0×1082.0×109cfu/mL質(zhì)控菌株菌懸液，均勻涂抹于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板表面，具體方法同上，作為對(duì)照試驗(yàn)。c)以無

11、菌操作取出抗生素紙片分別貼在涂有受試物和質(zhì)控菌株菌懸液的平板培養(yǎng)基表面，每個(gè)平板放4個(gè)紙片。然后將平板置于36±1恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18h后觀察抗生素紙片周圍有無抑菌環(huán)，量取并記錄其直徑（包括紙片直徑）大小，單位mm。試驗(yàn)應(yīng)做3個(gè)平行，取其均值。d)質(zhì)控菌抑菌環(huán)應(yīng)均在質(zhì)控范圍內(nèi)，說明試驗(yàn)方法準(zhǔn)確可靠，否則試驗(yàn)無效。6.3.5  急性腹腔注射致病性試驗(yàn)6.3.5.1  目的檢測(cè)受試物的急性致病性。6.3.5.2  試驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)健康成年小鼠，體重1820g。6.3.5.3  操作程序a）選健康成年小鼠40只,

12、體重1820g，雌、雄各半，劑量為500mg/kgBW，按0.1mL/10gBW經(jīng)腹腔注射受試物。b）于腹腔注射后第3d、7d分別取存活的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雌、雄各5只解剖，并做大體病理學(xué)觀察。c)腹腔注射后第14d將剩余實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死、解剖并做大體病理學(xué)觀察。6.3.5.4  結(jié)果觀察、評(píng)價(jià)根據(jù)試驗(yàn)周期內(nèi)動(dòng)物有無死亡及出現(xiàn)的中毒體癥、大體病理學(xué)觀察及病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)病變的程度進(jìn)行分級(jí)判定（見表3）。表3 急性致病性判定標(biāo)準(zhǔn)級(jí)  別判定依據(jù)強(qiáng)致病性動(dòng)物出現(xiàn)死亡，死亡動(dòng)物及24h以上存活動(dòng)物在第3d、7d經(jīng)解剖肉眼檢查或病理組織學(xué)檢查即可發(fā)現(xiàn)臟器的明顯病變

13、。弱致病性動(dòng)物有中毒體癥無死亡，動(dòng)物第14d經(jīng)解剖肉眼檢查或病理組織學(xué)檢查可發(fā)現(xiàn)臟器的明顯病變。無致病性動(dòng)物無中毒體癥無死亡，動(dòng)物第14d解剖肉眼檢查或病理組織學(xué)檢查均未發(fā)現(xiàn)臟器的明顯病變。6.3.6   急性眼刺激試驗(yàn)6.3.6 .1  目的檢測(cè)受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物眼睛的急性刺激和腐蝕作用。6.3.6.2  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3只家兔，試驗(yàn)前檢查家兔雙眼，有異常者不能用于試驗(yàn)。6.3.6.3  操作程序a）吸取受試物0.1mL,滴入家兔一側(cè)眼結(jié)膜囊內(nèi)，另一側(cè)眼以生理鹽水作為正常對(duì)照。b）滴受試物后，將眼被動(dòng)閉合4s,

14、30s后用生理鹽水沖洗。于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d，肉眼觀察家兔眼結(jié)膜、虹膜和角膜的損傷與恢復(fù)情況。如果72h內(nèi)未出現(xiàn)刺激反應(yīng)，或第7d或第14d，眼睛刺激反應(yīng)完全恢復(fù)，即可提前終止試驗(yàn)。必要時(shí)，用2%熒光素鈉溶液或裂隙燈、放大鏡檢查角膜及虹膜變化。6.3.6.4  評(píng)價(jià)規(guī)定按表4對(duì)家兔眼角膜、虹膜和結(jié)膜的急性刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分，并分別計(jì)算每只動(dòng)物在三個(gè)不同觀察時(shí)間（24h、48h和72h）角膜損害、虹膜損害、結(jié)膜充血和結(jié)膜水腫四方面的“平均評(píng)分”（即每只動(dòng)物的24h、48h和72h評(píng)分之和除以觀察數(shù)3）。分別以動(dòng)物眼角膜、虹膜和結(jié)膜充血、水腫

15、的平均評(píng)分和恢復(fù)時(shí)間進(jìn)行評(píng)分，按表5或表6眼刺激反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)判定受試物對(duì)眼睛的刺激強(qiáng)度。表4  急性眼刺激反應(yīng)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)眼損害表現(xiàn)評(píng)分角膜損害：無潰瘍形成或混濁散在或彌漫性混濁，虹膜清晰可見半透明區(qū)易分辨，虹膜模糊不清出現(xiàn)灰白色半透明區(qū)，虹膜細(xì)節(jié)不清，瞳孔大小勉強(qiáng)可見角膜不透明，混濁，虹膜無法辨認(rèn) 01234虹膜損害：正常皺褶明顯加深，充血，腫脹，角膜周圍有中度充血，瞳孔對(duì)光仍有反應(yīng)出血、肉眼可見破壞，或瞳孔對(duì)光無反應(yīng) 012結(jié)膜（瞼結(jié)膜、球結(jié)膜）充血：血管正常血管充血呈鮮紅色血管充血呈深紅色，血管不易分辨彌漫性充血呈紫紅色 0123結(jié)膜（瞼結(jié)

16、膜、球結(jié)膜）水腫：無水腫輕微水腫（包括瞬膜）明顯水腫，伴有部分眼瞼外翻水腫至眼瞼近半閉合水腫至眼瞼大半閉合 01234表5  眼刺激反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)級(jí)  別判定依據(jù)可逆性損傷無刺激性3只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害<1、虹膜損害<1、結(jié)膜充血<2和結(jié)膜水腫<2；或3只動(dòng)物中至少有2只動(dòng)物的平均評(píng)分符合上述標(biāo)準(zhǔn)，另外1只動(dòng)物的刺激反應(yīng)在21d內(nèi)完全恢復(fù)。輕刺激性3只動(dòng)物中有2只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害1；虹膜損害1；結(jié)膜充血2；結(jié)膜水腫2，且7d內(nèi)全部動(dòng)物的刺激反應(yīng)完全恢復(fù)。刺激性a3只動(dòng)物中有2只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害1；虹膜

17、損害1；結(jié)膜充血2；結(jié)膜水腫2，且21d內(nèi)全部動(dòng)物的刺激反應(yīng)完全恢復(fù)。不可逆性損傷腐蝕性b至少有1只動(dòng)物的角膜、虹膜或結(jié)膜的刺激反應(yīng)在21d的觀察期內(nèi)未完全恢復(fù)或/和在3只動(dòng)物中有2只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害3；虹膜損害1.5。注：完全恢復(fù)是指動(dòng)物的眼刺激反應(yīng)評(píng)分：角膜損害=0，虹膜損害=0，結(jié)膜充血=0或1，結(jié)膜水腫=0或1。a  接觸受試物后所產(chǎn)生的可逆性炎性反應(yīng)。b  接觸受試物后所產(chǎn)生的不可逆性組織損傷。 表6   眼刺激性反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)平均評(píng)分動(dòng)物數(shù)（只）恢復(fù)時(shí)間（d）a損傷類型角膜損害<1和虹膜損害

18、<1和結(jié)膜充血<2和結(jié)膜水腫<2221無刺激性角膜損害1或虹膜損害1或結(jié)膜充血2或結(jié)膜水腫227輕刺激性21刺激性角膜損害3或虹膜損害1.52 腐蝕性b角膜損害1或虹膜損害1或結(jié)膜充血1或結(jié)膜水腫11>21a  為動(dòng)物刺激反應(yīng)評(píng)分恢復(fù)至角膜損害=0，虹膜損害=0，結(jié)膜充血=0或1，結(jié)膜水腫=0或1的時(shí)間。b  至少有1只動(dòng)物于21d尚存在角膜粘連或血管翳，也可判為腐蝕性。7結(jié)果評(píng)價(jià)凡毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)為有毒的產(chǎn)品，不得生產(chǎn)和銷售；有毒或致病性試驗(yàn)結(jié)果不符合的菌種,均不得作為微生物肥料生產(chǎn)用菌種。7.1 

19、0;急性毒性試驗(yàn)根據(jù)半數(shù)致死量（LD50）數(shù)值,判定受試物的毒性分級(jí), 半數(shù)致死量(LD50)劑量分級(jí)按GB 15193.3-2003附錄D執(zhí)行，凡LD50>5000mg/kgBW的，可通過，即該菌種可作為生產(chǎn)用菌種或該產(chǎn)品可進(jìn)行生產(chǎn)、銷售。7.2  致病性試驗(yàn)7.2.1 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果判定同6.1。7.2.2 一次破損皮膚刺激試驗(yàn)如結(jié)果為無刺激或僅具輕度刺激作用，可通過；否則，應(yīng)放棄使用。7.2.3 溶血試驗(yàn)溶血試驗(yàn)結(jié)果為陰性的，可通過；否則，應(yīng)放棄使用。7.2.4 抗菌藥物敏感試驗(yàn)受試菌株必須對(duì)兩種以上的抗生素敏

20、感；否則，應(yīng)放棄使用。7.2.5 急性腹腔注射致病性試驗(yàn)結(jié)果為無急性致病性可通過；否則，應(yīng)放棄使用。7.2.6 急性眼刺激試驗(yàn)結(jié)果對(duì)眼無刺激性或具有輕刺激性的，可通過；否則，應(yīng)放棄使用。附錄A（規(guī)范性附錄）菌種安全分級(jí)目錄A.1  第一級(jí)：免作毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種A.1.1  根瘤菌類                      &#

21、160;Azorhizobium caulinodans                           莖瘤固氮根瘤菌（田菁（莖瘤）根瘤菌）Bradyrhizobium elkanii          

22、                     埃氏慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobium japonicum                     

23、60;    日本慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobium liaoningense                       遼寧慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Mesorhizobium huakuii        &#

24、160;                         華癸中生根瘤菌（紫云英）Mesorhizobium loti                   &#

25、160;                    百脈根中生根瘤菌Rhizobium etli                         

26、0;                    埃特里根瘤菌（菜豆）Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli       豌豆根瘤菌（菜豆生物型）Rhizobium leguminosarum biovar trifolii  

27、0;      豌豆根瘤菌（三葉草生物型）Rhizobium leguminosarum biovar viceae          豌豆根瘤菌（蠶豆生物型）Sinorhizobium fredii                 

28、60;                 費(fèi)氏中華根瘤菌（快生大豆根瘤菌）Sinorhizobium meliloti                         &#

29、160;      苜蓿中華根瘤菌還包括尚未確定種名的，從一些豆科植物根瘤內(nèi)分離、純化、鑒定、回接、篩選后在原宿主植物結(jié)瘤、固氮良好的根瘤菌，如花生、綠豆、沙打旺根瘤菌等。A.1.2  自生及聯(lián)合固氮微生物類         Azospirillum lipoferum             &#

30、160;                    生脂固氮螺菌Azospirillum brasilense                        

31、60;         巴西固氮螺菌Azotobacter beijgerinckii                                拜氏固氮菌Azotobacter chr

32、oococcum                               褐球（圓褐）固氮菌Azotobacter vinelandii            

33、60;                      棕色固氮菌Azotobacter paspali                       

34、60;               雀稗固氮菌Beijerinckia indica                              

35、60;         印度貝氏固氮菌A.1.3  光合細(xì)菌類                     Rhodobacter capsulatus           

36、                       莢膜紅細(xì)菌Rhodobacter sphaeroides                      &#

37、160;         類球紅細(xì)菌(球形紅桿菌)Rhodopseudomonas acidophila                        嗜酸紅假單胞菌Rhodopseudomonas gelatinosa    &

38、#160;                   膠質(zhì)紅假單胞菌Rhodopseudomonas globiformis                      球形紅假單胞菌Rhodops

39、eudomonas palustris                           沼澤紅假單胞菌Rhodopseudomonas rutila               

40、;               血色紅假單胞菌Rhodopseudomonas sulfidophila                     嗜硫紅假單胞菌Rhodopseudomonas viridis  

41、0;                          綠色紅假單胞菌Rhodospirillum fulvum                   

42、               黃褐紅螺菌Rhodospirillum rubrum                              

43、0;   深紅紅螺菌Rhodospirillum salinarium                             鹽場(chǎng)紅螺菌Rubrivivax gelatinosus        &

44、#160;                         膠狀紅環(huán)菌（膠狀紅長(zhǎng)命菌）A.1.4  分解磷鉀化合物細(xì)菌類           Bacillus amyloliquefaciens  &

45、#160;                           液化淀粉芽孢桿菌Bacillus laterosporus                 &#

46、160;                    側(cè)孢芽孢桿菌Bacillus licheniformis                        

47、0;           地衣芽孢桿菌Bacillus megaterium                                  

48、60;   巨大芽孢桿菌Bacillus mucilaginosus                                  膠胨樣芽孢桿菌Bacillus subtilis    

49、;                                        枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis     &

50、#160;                               蘇云金芽孢桿菌Thiobacillus thiooxidans             

51、                   氧化硫硫桿菌A.1.5  促生細(xì)菌類                     Paenibacillus azotofixans &

52、#160;                             固氮類芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa               &#

53、160;                 多粘類芽孢桿菌A.1.6  酵母菌類                       Candida guillermondii &

54、#160;                                  季也蒙假絲酵母Candida membranaefaciens          

55、                  膜醭假絲酵母Candida tropicalis                            

56、             熱帶假絲酵母Candida utilis                                 

57、0;             產(chǎn)朊假絲酵母Endomycopsis fibuliger                                

58、  扣囊擬內(nèi)孢霉Pichia farinosa                                     粉狀畢赤酵母Pichia membranaefaciens   

59、60;                           膜醭畢赤酵母Saccharomyces cerevisiae                 

60、60;             釀酒酵母Rhodotorula rubra                                 

61、       深紅酵母A.1.7  放線菌類                       Frankia sp.             &

62、#160;                                    弗蘭氏克菌（固氮放線菌）Streptomyces chingyangensis      

63、0;                   涇陽(yáng)鏈霉菌Streptomyces microflavus                          

64、;      細(xì)黃鏈霉菌A.1.8  AM真菌類                      Glomus mosseae                

65、;                            摩西球囊霉A.1.9  其它                  

66、;         Lactobacillus parabuchner                              類布氏乳桿菌Lactobacillus acidophilus

67、0;                              嗜酸乳桿菌Lactobacillus bulgaricus               

68、;                  保加利亞乳桿菌Lactobacillus casei                           

69、60;             干酪乳桿菌Lactobacillus delbruecki                               

70、0; 德氏乳桿菌Lactobacillus lactis                                        乳酸乳桿菌Lactobacillus plantaru

71、m                                 植物乳桿菌Pediococcus pentosaceus            &

72、#160;                   戊糖片球菌Streptococcus lactis                          

73、          乳酸鏈球菌Streptococcus thermophilus                       嗜熱鏈球菌A.2  第二級(jí)：需做急性毒性（LD50）試驗(yàn)的菌種Arthrobacter aurescens  &

74、#160;                                金黃節(jié)桿菌Aspergillus candidus Link           &#

75、160;                   亮白曲霉Aspergillus niger                           

76、;                 黑曲霉Aspergillus oryzae                             &#

77、160;            米曲霉Aspergillus penicillioides Speg                        帚狀曲霉Aspergillus wentii Wehmer &

78、#160;                           溫特曲霉Eurotium chevalieri Mangin                &#

79、160;           謝瓦散囊菌Bacillus brevis(Brevibacillus brevis)                短芽孢桿菌Bacillus circulans           

80、60;                              環(huán)狀芽孢桿菌Bacillus coagulans               

81、60;                        凝結(jié)芽孢桿菌Bacillus pumilu                      

82、                       短小芽孢桿菌Bacillus sphaericus                       

83、;                 球形芽孢桿菌Brevibacterium sp.                            

84、             短桿菌Burkholderia fungorum                                 

85、 真菌伯克霍爾德氏菌Chaetomium  cochliodes                                 螺卷毛殼Chaetomium trilaterale       &#

86、160;                     三側(cè)毛殼Clostridium pasteurianum                         &#

87、160;巴斯德梭菌Geobacillus stearothermophilus                        嗜熱脂肪地芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)            &#

88、160;            Geotrichum candidum                                  &

89、#160; 白地霉Nocardia sp.                                             

90、;    諾卡氏菌Nocardiopsis sp.                                         

91、0;  擬諾卡氏菌Paenibacillus macerans                                  浸麻類芽孢桿菌  Penicillium citreonigrum  

92、                              黃暗青霉Penicillium citrinum                

93、                       桔青霉Penicillium frenguentans                      

94、60;         ?，F(xiàn)青霉Penicillium glabcum                                    

95、0; 光孢青霉Pseudomonas fluorescens                                熒光假單胞菌Promicromonospora citrea       &

96、#160;                      檸檬原小單胞菌Pseudomonas putida                       

97、               惡臭假單胞菌Pseudomonas stutzeri                              

98、0;      施氏假單胞菌Pseudomonas vesicularis                                泡囊假單胞菌Rhizopus oryzae   &#

99、160;                                         米根霉Sphingobacterium multivorum   &#

100、160;                     多食鞘氨醇桿菌Sporotrichum thermophile                       &

101、#160;       嗜熱側(cè)孢霉Streptomyces albidoflavus                               微白黃鏈霉菌Streptomyces fradiae  

102、;                                    弗氏鏈霉菌streptomyces griseospiralis        

103、60;                     灰旋鏈霉菌Trichoderma harzianum                         

104、  哈茨木霉Trichoderma koningii                                     康寧木霉Trichoderma viride    &

105、#160;                                   綠色木霉A.3  第三級(jí)：需做致病性試驗(yàn)的菌種Acinetobacter calcoaceticus    &

106、#160;                       乙酸鈣不動(dòng)桿菌Acinetobacter baumannii                               &