專家解讀,一文讀懂肺真菌病的診斷進展!

1、專家解讀，一文讀懂肺真菌病的診斷進展！真菌檢測，一文讀懂！講者丨李華茵上海市復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院整理丨LL來源丨醫(yī)學(xué)界呼吸頻道 侵襲性真菌感染已經(jīng)變得越來越常見，第一時間確診是整個 肺真菌病診療過程中的重點，那么如何才能快速診斷呢？ 今日，由上海市復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院主辦的 2018 上海呼 吸論壇暨肺部感染診斷和治療新技術(shù)學(xué)習(xí)班中，來自上海市 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院的李華茵教授為我們解讀了肺真菌 病的實驗室診斷進展，干貨滿滿，不容錯過！目前，肺真菌 病患病率不斷上升，李華茵教授推斷，可能與易感染群的增 加、檢測或診斷技術(shù)提高、接觸真菌機會增加等因素相關(guān)， 因此，肺真菌病的診斷尤為重要。1 肺真

2、菌病的診斷方法 首先，李華茵教授回顧了主要致病性下呼吸道真菌種類：而 目前，肺部真菌感染的診斷項目包括宿主、影像學(xué)、組織病 理學(xué)和微生物學(xué)等，涂片與培養(yǎng)、抗原檢測、分子生物學(xué)方 法、側(cè)向?qū)游龇?（LFD ）、吹氣實驗是目前主要的微生物學(xué)檢 測方法，李華茵教授對各個診斷項目做了舉例與解釋。宿主肺部感染危險因素不同，易感病原體也不同。影像學(xué)肺真菌病在 CT 上的表現(xiàn)如下：氣腔小結(jié)節(jié)：指 6-10mm 的小結(jié)節(jié)，通常反映細(xì)支氣管周圍實變，因此呈氣腔小結(jié)節(jié)： 指直徑 6-10mm 的小結(jié)節(jié)， 通常反映細(xì)支氣管周圍 實變， 因 此呈現(xiàn)小葉中央性分布。有時其周圍伴隨暈影(hallo )，呈毛玻璃樣密度減低

3、，常是血管侵襲性肺曲霉比較特征的表 現(xiàn)，但亦可見于非結(jié)核分枝桿菌肺病，毛霉菌、念珠菌、單 純皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒感染，韋格納肉芽腫，kaposi 肉瘤和出血性轉(zhuǎn)移。毛玻璃樣陰影：指原有肺血管結(jié)構(gòu)變得模糊不清的云霧狀陰 影，見于各種間質(zhì)和氣腔病變。以肺孢子菌病和巨細(xì)胞病毒 肺炎最具代表性，亦見于非感染性疾病。樹芽征( tree-in-bud pattern )：一種僅在 HRCT 才能顯示的感 染性細(xì)支氣管炎的征象，由小葉中央性分枝的小管和小結(jié)節(jié) 組成，反映細(xì)支氣管炎癥和管腔被炎癥分泌物或粘液填塞。 見于細(xì)菌、分枝桿菌、真菌和病毒感染。 氣腔實變：指局部性肺衰減增加而原有肺血管結(jié)構(gòu)變得模糊 不清

4、。見于細(xì)菌、真菌和病毒感染。分枝桿菌的肺實質(zhì)感染 也可以表現(xiàn)斑片狀小結(jié)節(jié)樣的氣腔實變，伴或不伴空洞形 成。2 真菌診斷在微生物實驗室的應(yīng)用 真菌感染的實驗室診斷主要包括真菌涂片、培養(yǎng)、鑒定、藥 敏試驗、血清學(xué)鑒定等，李華茵教授選擇臨床重點實驗室方 法進行了詳細(xì)講解。 涂片革蘭染色： 所有真菌、放線菌均為革蘭陽性，被染 成藍黑色。 適用于酵母菌、 孢子絲菌、 組織胞漿菌及諾卡菌、 放線菌。墨汁染色：印度墨汁或中國墨汁不能使隱球菌莢膜多糖著 色，但可提供黑色背景從而使莢膜更亮而易于觀察。 CSF 墨 汁染色發(fā)現(xiàn)圓形厚壁孢子， 有出芽、 莢膜， 提示隱球菌感染。 同時李華茵教授強調(diào)，不主張用墨汁染色

5、作為腦脊液中隱球 菌的常規(guī)檢測方法。 培養(yǎng) 李華茵教授介紹，分生孢子頭與足細(xì)胞是曲霉的特征性結(jié) 構(gòu)，因此培養(yǎng)鏡檢后可有效診斷。不同顏色培養(yǎng)基也具有診 斷意義，例如咖啡酸瓊脂培養(yǎng)基中新生隱球菌 3 天內(nèi)產(chǎn)生棕 色，而其他酵母及酵母樣菌不產(chǎn)生棕色。對于馬爾尼菲藍狀 菌來說，不同溫度培養(yǎng)下形態(tài)不同是它的主要特點。它是藍 狀菌屬中唯一的溫度依賴性雙相真菌：即37C培養(yǎng)時為酵母（組織相），25C培養(yǎng)時為霉菌（菌絲相），自然界中以菌絲 形式存在，在組織中可形成小的圓形的或橢圓形細(xì)胞。 血清學(xué)檢測G 試驗是臨床上較為常見的檢測方法，根據(jù)相關(guān)試驗結(jié)果證 實，連續(xù) 2 次或 2次以上的 G 試驗陽性， 可提高特異性與陽 性預(yù)測值，在確診與擬診真菌感染方面，平均比出現(xiàn)臨床癥 狀和體征早 10 天，陽性患者中 70% 比臨床表現(xiàn)早 3 天。同 時，G試驗對于診斷卡氏肺孢子蟲肺炎準(zhǔn)確性高于真菌感染， 敏感性很高，可作為卡氏肺孢子蟲肺炎的篩查工具。 而另一位關(guān)鍵先生則是 “ GM 試驗”，它作為診斷侵襲性曲霉 感染的重要檢測手段，具有早期、快速、高特異性的特點， GM 水平可反應(yīng)曲霉負(fù)荷量，血清檢測推薦用于惡性血液腫 瘤、造血干細(xì)胞移植患者， IPA 推薦同時檢測 BAL 和血清樣 本，其動態(tài)變化能夠指導(dǎo)抗真菌藥