l阿司匹林總體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1、 阿司匹林的合成、制劑的制備、藥理作用及鑒別、含量測(cè)定 第一部分 阿司匹林的合成【目的】1.熟悉酚羥基?；磻?yīng)的原理，掌握阿司匹林的制備方法。 2.掌握抽濾裝置的安裝和操作，并學(xué)會(huì)利用重結(jié)晶純化固體有機(jī)物?！驹怼恳阴Ｋ畻钏嵋宜狒麧饬蛩?水楊酸 80-85【儀器和藥品】?jī)x器：電磁攪拌器，溫度計(jì),攪拌子，三口燒瓶，單口圓底燒瓶，錐形瓶，球形冷凝管，直形冷凝管，酒精燈，石棉網(wǎng)，橡皮管，電子天平，膠頭滴管，鐵架臺(tái)，量筒，玻璃棒，移液管，燒杯，布氏漏斗，真空泵，濾紙，吸慮瓶，烘箱，熔點(diǎn)儀，T形連接管等。藥品：水楊酸，乙酸酐，98%濃硫酸，飽和碳酸氫鈉溶液，濃鹽酸，乙醚，石油醚，蒸餾水，冰塊，1%FeC

2、l3等。【內(nèi)容】1.新蒸乙酸酐：量取乙酸酐60mL放入100mL的圓底燒瓶中進(jìn)行普通蒸餾，收取 137140的餾分備用。2.加料：在250mL三口瓶中加入34.4g(0.249mol)水楊酸、48mL（0.508mol)新蒸乙酸酐和56滴濃硫酸（約2.8ml）。3.酰化反應(yīng)：振搖三口瓶使水楊酸全部溶解（如不溶解則需補(bǔ)加乙酸酐和濃硫酸）。安裝回流裝置，在磁力攪拌器中加熱控制溫度在8085，同時(shí)保持低速勻速攪拌，反應(yīng)20min后用1%FeCl3檢查，當(dāng)反應(yīng)液不再呈現(xiàn)紫色時(shí)停止反應(yīng)。反應(yīng)液稍冷卻（50以下）后均分成幾份倒入各燒杯中，先用100ml冰水水解過(guò)量的乙酸酐，冷卻至室溫后，即有乙酰水楊酸結(jié)晶

3、析出(若不結(jié)晶，可用玻璃棒摩擦瓶壁)。然后再加入400mL冰水，將混合物繼續(xù)在冰水浴中冷卻使結(jié)晶完全。抽濾，結(jié)晶用少量冷蒸餾水洗滌3次，抽干后將粗產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至表面皿上，自然晾干得粗產(chǎn)品，稱量。4.重結(jié)晶：將粗產(chǎn)品轉(zhuǎn)移至500mL燒杯中，攪拌下加入400mL飽和碳酸氫鈉溶液，直至無(wú)二氧化碳?xì)馀莓a(chǎn)生，抽濾，用少量水沖洗漏斗，合并濾液（棄去濾渣）并倒入預(yù)先盛有將80mL濃鹽酸和160mL水配成的溶液的燒杯中，攪拌均勻，使溶液PH呈弱酸性，即有乙酰水楊酸沉淀析出。將燒杯置于冰水浴中冷卻，使結(jié)晶完全。抽濾，用冷蒸餾水洗滌23次，抽干后，將結(jié)晶移至表面皿上，自然風(fēng)干，稱重。5.粗品精制：將阿司匹林粗品轉(zhuǎn)入2

4、50ml三口瓶中按1g粗品加入5ml乙醚,在25 磁力攪拌器中溶解，抽濾去除不溶雜質(zhì)。然后在濾液中加入等量的石油醚并過(guò)量10ml。（利用乙醚、石油醚能互溶，乙醚不僅溶解石油醚而且能溶解水楊酸和阿司匹林但石油醚只溶解乙醚和水楊酸不溶解阿司匹林的原理將阿司匹林晶體析出）。乙酰水楊酸晶體開(kāi)始析出后立即將錐形瓶放入冰水浴中，直至阿司匹林晶體全部析出。抽濾得到的濾渣放入烘箱中于60下干燥2小時(shí)得阿司匹林原料藥純產(chǎn)品，白色針狀結(jié)晶，并稱重計(jì)算收率?！咀⒁馐马?xiàng)】反應(yīng)物冷卻后，固體產(chǎn)物立即析出，黏在瓶壁不易處理，故需趁熱在攪動(dòng)下倒入冷水中過(guò)量的醋酐及未作用的對(duì)氨基酚?！舅伎碱}】（1） 加入亞硫酸氫鈉的目的？（

5、2） 對(duì)氨基酚的特殊雜質(zhì)是何物，是如何產(chǎn)生的？有水楊酸與氨基酚自身縮合物。水楊酸是一個(gè)官能團(tuán)化合物（酚?；c羧基），會(huì)發(fā)生兩種酯化反應(yīng)，其中一種就是自身縮合反應(yīng)，形成聚合物，另外一種是酰化反應(yīng)不完全而存在的水楊酸。（3） 為什么在加料的過(guò)程中要加入濃硫酸？是為了催化反應(yīng)。水楊酸分子內(nèi)存在氫鍵，阻礙酚羥基的酰化反應(yīng)加入反應(yīng)至150至 160才能進(jìn)行，加入少量硫酸后，破壞氫鍵的作用，反應(yīng)溫度降低至80左右。從而減少副產(chǎn)物水楊酸。且溫度過(guò)高，乙酰水楊酸易分解。（4） 酰化反應(yīng)中儀器為什么要干燥？不干燥有何影響？沒(méi)有干燥時(shí)，會(huì)導(dǎo)致醋酐水解成醋酸，從而影響得率。 第二部分：藥物制劑 小劑量阿司匹林可以防

6、止腦血栓形成。但是阿司匹林口服能刺激胃粘膜，引起上腹不適，惡心，嘔吐等不良反應(yīng)的發(fā)生。制成腸溶衣片，可減少對(duì)胃刺激性，降低不良反應(yīng)。（1）.阿司匹林腸溶片芯的制備1.【處方】 名稱 （500片）投料量（g） 處方分析 阿司匹林 12.5 主藥 淀粉 18.0 稀釋劑、崩解劑 微晶纖維素 15.0 粘合劑、黏合劑 羧甲基纖維素鈉 2.5 黏合劑 酒石酸（枸櫞酸） 0.4 穩(wěn)定劑 2%HPMC醇水溶液 QS 溶劑、黏合劑 4%滑石粉 QS 潤(rùn)滑劑2. 制法 將阿司匹林（80目）與淀粉、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉用40目不銹鋼篩混合均勻。加入預(yù)先配好的2%HPMC醇水溶液 （內(nèi)含酒石酸或枸櫞酸）制成

7、軟材，通過(guò)18目不銹鋼篩或尼龍篩制粒，濕顆粒于5060烘箱干燥12小時(shí)，干顆粒過(guò)18目篩整粒，加入滑石粉充分混勻后壓片（用5.5mm淺凹沖模壓片）。（2） .包衣片的制備1. 【處方】 名稱 投料量 處方分析 丙烯酸樹(shù)脂II號(hào) 10g 主藥 領(lǐng)苯二甲酸二乙酯 2g 增塑劑 蓖麻油 4g 增塑劑 吐溫-80 2g 表面活性劑、水溶性致孔劑 滑石粉（120目） 3g 抗黏劑 鈦白粉（120目） QS 增光劑 檸檬黃 QS 色素 85%乙醇 加至 100ml2. 制法 將包衣材料用85%乙醇溶液浸泡過(guò)夜溶解。加入領(lǐng)苯二甲酸二乙酯 、蓖麻油和吐溫-80研磨均勻，另將其它成分加入上述包衣液研磨均勻，即得

8、。（3）單沖壓片機(jī)的安裝與調(diào)試 TDP單沖壓片機(jī)基本結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖-1，安裝與調(diào)試過(guò)程如下：先裝好下沖頭，旋緊下沖固定螺絲，旋動(dòng)片重調(diào)節(jié)器，使下沖在較低的部位。再將模圈裝進(jìn)模板，旋緊模圈固定螺絲，然后將模板固定在機(jī)座上（整個(gè)裝拆過(guò)程切勿碰撞而損壞沖頭）。調(diào)節(jié)出片調(diào)節(jié)器，使下沖頭上升到恰與模圈相齊平，再裝上沖并旋緊上沖固定螺絲，轉(zhuǎn)動(dòng)壓力調(diào)節(jié)器，使上沖處在壓力較低的部位，緩慢地用手搖轉(zhuǎn)壓片機(jī)的轉(zhuǎn)輪使上沖逐漸下降，觀察其是否正好在沖模的中心位置。如不在中心位置，應(yīng)緩慢上升上沖頭（不得將上沖頭強(qiáng)制地沖入?？?，更不應(yīng)使上下沖相撞），稍微松動(dòng)一點(diǎn)模板固定螺絲，裝好飼料靴和加料斗，并加入顆粒。用手轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)

9、輪，如感到不易轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，不得用力硬轉(zhuǎn)，應(yīng)調(diào)節(jié)壓力調(diào)節(jié)器使之適當(dāng)增加或減小壓力。稱其平均片重，調(diào)節(jié)片重調(diào)節(jié)器，使壓出的片重符合要求，同時(shí)調(diào)節(jié)壓力調(diào)節(jié)器，使壓出的片劑有一定的硬度。開(kāi)動(dòng)電動(dòng)機(jī)進(jìn)行試壓，檢查片重和崩解時(shí)間，達(dá)到要求后方可正式電動(dòng)壓片。（4）包衣操作 將（1）制得的乙酰水楊酸片芯置包衣鍋內(nèi)，片床溫度控制在 4050，轉(zhuǎn)速為3040轉(zhuǎn)/分，將配制好的包衣溶液用噴槍連續(xù)噴霧于轉(zhuǎn)動(dòng)的片子表面，隨時(shí)根據(jù)片子表面干濕情況，調(diào)控片子溫度和噴霧速度，控制包衣溶液的噴霧速度和溶媒揮發(fā)速度相平衡，即以片面不太干也不太潮濕為度。一旦發(fā)現(xiàn)片子較濕（滾動(dòng)遲緩），即停止噴霧以防粘連，待片子干燥

10、后再繼續(xù)噴霧，使包衣片增重為45%。將包好的腸溶衣片，置3040烘箱干燥34小時(shí)。 （5）操作要點(diǎn)和注意事項(xiàng)1小劑量乙酰水楊酸應(yīng)先粉碎過(guò)80目不銹鋼篩，然后與輔料混合時(shí)，常采用逐級(jí)稀釋法（等容量遞增法），并反復(fù)過(guò)篩、混合以確保混合均勻。 2粘合劑用量要恰當(dāng)，使軟材達(dá)到以手握之可成團(tuán)塊、手指輕壓時(shí)又能散裂而不成粉狀為度。再將軟材擠壓過(guò)篩，制成所需大小的顆粒，顆粒應(yīng)以無(wú)長(zhǎng)條、塊狀和過(guò)多的細(xì)粉為宜。 3乙酰水楊酸在濕、熱下不穩(wěn)定，尤其遇鐵質(zhì)易變色并水解成水楊酸和醋酸，前者對(duì)胃有刺激性。用含有少量酒石酸或枸櫞酸（約為乙酰水楊酸量的1%）淀粉漿混勻后制粒，也可采用乙醇或25

11、%HPMC的醇水溶液作為粘合劑，以增加主藥的穩(wěn)定性。硬脂酸鎂和硬脂酸鈣能促進(jìn)乙酰水楊酸的水解，故用滑石粉作潤(rùn)滑劑；此片劑干燥溫度宜控制在5060，以防高溫藥物不穩(wěn)定。 4在包衣前，可先將乙酰水楊酸片芯在50干燥30分鐘，吹去片劑表面的細(xì)粉。由于片劑較少，在包衣鍋內(nèi)縱向粘貼若干12cm寬的長(zhǎng)硬紙條或膠布，以增加片子與包衣鍋的摩檫，改善滾動(dòng)性。  5必須選用不銹鋼包衣鍋，因乙酰水楊酸等藥物遇金屬不穩(wěn)定，可先在包衣鍋內(nèi)噴霧覆蓋一層包衣膜。 6噴霧較快時(shí)片子表面若開(kāi)始潮濕后，在包衣鍋內(nèi)的滾動(dòng)將減慢，翻滾困難，應(yīng)立即停止噴霧并開(kāi)始吹熱風(fēng)干燥。 7包衣溫度

12、應(yīng)控制在50左右，以避免溫度過(guò)高易使藥物分解或使片劑表面產(chǎn)生氣泡，衣膜與片芯分離。 第三部分：阿司匹林解熱鎮(zhèn)痛藥理實(shí)驗(yàn)阿司匹林的解熱作用實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?. 掌握藥理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法及基本原理、知識(shí)； 2. 研究常用阿司匹林解熱鎮(zhèn)痛藥對(duì)發(fā)熱家兔的影響 【相關(guān)知識(shí)】 發(fā)熱體溫調(diào)節(jié)中樞右兩部分組成，一個(gè)是正調(diào)節(jié)中樞，主要包括POAH等，另一個(gè)是負(fù)調(diào)節(jié)中樞，主要包括VSA,MAN等。當(dāng)外周致熱信號(hào)通過(guò)這些途徑傳入中樞后，啟動(dòng)體溫正負(fù)調(diào)節(jié)機(jī)制，一方面通過(guò)正調(diào)節(jié)介質(zhì)使體溫上升，另一方面通過(guò)負(fù)調(diào)節(jié)介質(zhì)限制體溫升高。發(fā)熱過(guò)程可分為三個(gè)時(shí)相：1.體溫上升期   在發(fā)熱的開(kāi)始階段，由于正調(diào)節(jié)占

13、優(yōu)勢(shì)，故調(diào)定點(diǎn)上移，此時(shí)，原來(lái)的正常體溫變成了“冷刺激”，中樞對(duì)“冷”信息起反應(yīng)，發(fā)出指令經(jīng)交感神經(jīng)到達(dá)散熱中樞，引起皮膚血管收縮和血流減少，導(dǎo)致皮膚溫度降低，散熱隨之減少，同時(shí)指令到達(dá)產(chǎn)熱器官，引起寒戰(zhàn)和物質(zhì)代謝加強(qiáng)，產(chǎn)熱隨而增加，體溫升高。2.高溫持續(xù)期   當(dāng)體溫升高到調(diào)定點(diǎn)的新水平時(shí)，便不再上升，而是在這個(gè)與新調(diào)定點(diǎn)相適應(yīng)的高水平上波動(dòng)，此期寒戰(zhàn)停止并開(kāi)始出現(xiàn)散熱反應(yīng)，產(chǎn)熱和散熱基本平衡。  3.體溫下降期   經(jīng)歷高溫持續(xù)期后，由于激活物，EP及發(fā)熱介質(zhì)的消除，體溫調(diào)節(jié)中樞的調(diào)定點(diǎn)返回到正常水平。這時(shí)由于血溫高于調(diào)定點(diǎn)，PO

14、AH的溫敏神經(jīng)元發(fā)放頻率增加，通過(guò)調(diào)節(jié)作用使交感神經(jīng)的緊張性活動(dòng)降低，皮膚血管進(jìn)一步擴(kuò)張，散熱增強(qiáng)，產(chǎn)熱減少，體溫開(kāi)始下降，逐漸恢復(fù)到正常調(diào)定點(diǎn)相適應(yīng)的水平。前列腺素E ：給動(dòng)物注射能引起明顯的發(fā)熱反應(yīng)，同時(shí)伴有代謝率的改變，其致熱敏感點(diǎn)在POAH。阿司匹林為一種具有顯著解熱鎮(zhèn)痛作的藥，能使發(fā)熱體體溫迅速降低到正常，而對(duì)體溫正常體一般無(wú)影響。其解熱作用機(jī)理主要通過(guò)抑制環(huán)氧酶（COX-2）從而抑制前列腺素（PGE）的合成，阿司匹林為PGE的合成抑制劑。家兔體溫測(cè)定一般采取肛門測(cè)溫法，兔正常體溫為38.539.5，而且幼兔體溫高于成年兔，成年兔高于老兔。如果體溫升高到41，則是患急性、烈性傳染病的

15、表現(xiàn)。【藥品與器材】  注射用PGE，注射用精氨酸阿司匹林，1普魯卡因溶液，0.9生理鹽水，0.4%肝素。兔手術(shù)臺(tái)，電子稱，手術(shù)器械, 連有三通的動(dòng)脈插管,輸液架，輸液裝置一套，10 ml、5m1注射器各2支，壓力換能器，心電記錄電極MEDLAB生物信號(hào)處理系統(tǒng)，肛溫計(jì)或體溫計(jì)算?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1.將體溫計(jì)插入家兔肛門，深度為3.5 5 厘米（保持35 分鐘）。 2. 然后用PGE（6g/kg）從耳緣靜脈注射入家兔體內(nèi)，30分鐘后記錄體溫。3. 待體溫上升到持續(xù)高溫階段，耳緣靜脈注射入阿司匹林（20mg/kg），30分鐘后，測(cè)量體溫。 4. 比較正常，發(fā)熱中和解熱后三組數(shù)據(jù)的

16、關(guān)系。 表1解熱鎮(zhèn)痛藥對(duì)家兔的影響結(jié)果           體溫溫                正常PGE阿司匹林【注意事項(xiàng)】1.本實(shí)驗(yàn)也可用小鼠進(jìn)行，但小鼠個(gè)體較小，不方便體溫的測(cè)定。2.PGE和阿司匹林靜脈注射是要慢。3.PGE和阿司匹林半衰期為半個(gè)小時(shí)，但各個(gè)家兔機(jī)體反正應(yīng)各異，應(yīng)注意觀察其變化。   乙酰水楊酸的鎮(zhèn)痛作用 【目的

17、】 了解熱板法的實(shí)驗(yàn)原理，觀察阿斯匹林的鎮(zhèn)痛作用?！驹怼?小鼠的足底無(wú)毛，皮膚裸露，在溫度55±0.5的金屬板上產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，表現(xiàn)為舔后足，踢后腿等現(xiàn)象。阿斯匹林可提高痛閾，推遲小鼠疼痛出現(xiàn)時(shí)間?！酒鞑摹?恒溫水浴箱、熱板槽、大燒杯（250-500ml）2 個(gè)、天平、鼠籠，注射器（1ml）、秒表1 個(gè)?！舅幬铩?.4%阿司匹林懸液、生理鹽水、30mg/ml 苦味酸溶液?！緞?dòng)物】 雌性小鼠。 【方法】1、將恒溫水浴箱內(nèi)加水至沒(méi)過(guò)燒杯底部1cm，調(diào)節(jié)水溫至55±0.5。2、篩選并測(cè)定正常痛閾 將小鼠放入燒杯內(nèi)立即用秒表記錄時(shí)間，密切觀察小鼠反應(yīng)，以舔后足為痛覺(jué)指標(biāo)。記錄痛閾時(shí)

18、間值（從小鼠放入熱板燒杯內(nèi)到出現(xiàn)舔后足）。每只小鼠測(cè)痛閾2 次（間隔3min），取其平均值為正常痛閾（藥前痛閾s）。凡在30s內(nèi)不舔后足或痛閾小于10s者棄去。3、分組給藥，并記錄給藥時(shí)間。甲組用0.4%阿司匹林懸液灌胃0.15ml/10g；乙組用同等劑量的生理鹽水。4、測(cè)痛閾變化值 給藥后15、30、60min各測(cè)痛閾1 次，對(duì)60s內(nèi)不舔足的小鼠應(yīng)立即取出來(lái)，痛閾按60s計(jì)算?！窘Y(jié)果】1、 綜合全實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)，計(jì)算出各組痛閾的平均值（X）填入下表組別 動(dòng)物數(shù) 痛閾值（s）藥前 藥后15min 藥后30min 藥后60min乙酰水楊酸生理鹽水2、計(jì)算各組動(dòng)物用藥后15、30、60min時(shí)的痛閾

19、提高百分率（P）P= 藥后痛閾值均數(shù)-藥前痛閾值均數(shù)×100藥前痛閾值均數(shù)3、 以時(shí)間（min）為橫坐標(biāo)，痛閾提高百分率為縱坐標(biāo)，繪制各組的時(shí)-效曲線?！咀⒁馐马?xiàng)】1、本實(shí)驗(yàn)應(yīng)選用雌性小鼠，雄性小鼠遇熱時(shí)陰囊松弛下垂，與熱板接觸影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2、室溫應(yīng)控制在13±18，此溫度小鼠對(duì)痛反應(yīng)較穩(wěn)定。3、正常痛閾30s、10s以及喜跳躍的小鼠均應(yīng)棄用。4、測(cè)痛閾時(shí)若60s仍無(wú)反應(yīng)，應(yīng)立即取出小鼠，以免燙傷足趾，且痛閾按60s計(jì)。4、藥物分析部分 根據(jù)對(duì)阿司匹林合成過(guò)程，制劑工藝和藥物的性質(zhì)，制定該藥物原料藥和制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（包括鑒別，含量測(cè)定和雜質(zhì)檢查等） 阿司匹林對(duì)小鼠抗炎作用

20、研究【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】 動(dòng)物：雄性小鼠，體重20g左右，40只【實(shí)驗(yàn)藥品與器材】受試藥品： 阿司匹林（配成50mg/ml）試劑： 二甲苯 苦味酸 生理鹽水。儀器：電子天平 直徑9mm 打孔器 剪刀 注射器 針頭5號(hào)【方法與步驟】1 雄性小鼠40只，隨機(jī)按下表分組，A: 生理鹽水對(duì)照組，給藥方式灌胃 0.1ml/10gB: 阿司匹林組 給藥方式灌胃 0.1ml/10g1. 給藥2小時(shí)后，取二甲苯0.02ml/只，右耳面前后均勻涂抹二甲苯，0.5h后處死小鼠，剪下雙耳，用直徑9mm 打孔器打下雙耳同一部位耳片，分別于電子天平(感量01mg)稱重，求出各組動(dòng)物耳廓的腫脹度(腫脹度=右耳片重量一左耳片重量。

21、2. 【實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析】將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表后，處理并分析?；撬犷w粒對(duì)小鼠耳腫脹的影響，見(jiàn)下表：組別N耳腫脹度（均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)差）標(biāo)準(zhǔn)誤生理鹽水80.0164375±0.01007750.003562951阿司匹林組80.0076125±0.00733960.002594943注：與空白對(duì)照組比較，*P<0.05P=0.089 方差齊，經(jīng)LSD分析組與有顯著性差異【結(jié)果分析】：阿司匹林組有抗炎作用，誤差原因：1）涂二甲苯時(shí)不同的操作者涂的量不同，耳朵的腫脹程度不同 2）打孔器打耳朵是不同人操作、同一人打左右兩耳位置不同也存在誤差 3）小數(shù)的個(gè)體差異對(duì)藥物的吸收

22、不同也會(huì)出現(xiàn)誤差。 第四部分：阿司匹林原料藥的質(zhì)量檢查 本品為2-(乙酰氧基）苯甲酸。按干燥品計(jì)箅，含C9H8O4不得少于99.5%105.0% ?！拘誀睢?本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無(wú)臭或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕氣即緩緩水解。本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或無(wú)水乙醚中微溶；在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時(shí)分解。 【鑒別】 （1)取本品約0.1g加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。 (2)取本品約0.5g加碳酸鈉試液10ml,煮沸2分鐘后，放冷，加過(guò)量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。（不懂）【檢查】 1、溶液的澄清度 取本品 0.50

23、g, 加溫?zé)嶂?約45°C的碳酸鈉試液10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清。 （不規(guī)范）2、游離水楊酸 取本品約0.1g精密稱定，置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（臨用新制）；取水楊酸對(duì)照品約10mg,精密稱定，置100ml量瓶中，加冰醋酸甲醇溶液適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml,置50ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。照高效液相色譜法（附錄V D)試驗(yàn)。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20 ： 5 ：5： 70)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為303nm。理論板數(shù)按水楊酸峰

24、計(jì)算不低于5000，阿司匹林峰與水楊酸峰的分離度應(yīng)符合要求。立即精密量取供試品溶液、對(duì)照品溶液各10l ,分別注人液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有與水楊酸峰保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)箅，不得過(guò)0. 1% 。3、易炭化物 取本品 0 . 5g,依法檢査（附錄O，與對(duì)照液（取比色用氯化鈷液0. 25ml、比色用重鉻酸鉀液0. 25ml,比色用硫酸銅液0 . 40ml，加水使成5ml)比較，不得更深。4、有關(guān)物質(zhì) 取本品約 0 .1g,置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取1ml置200ml量瓶中，用1%冰醋酸甲

25、醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液；精密量取對(duì)照溶液1ml,置10ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為靈敏度試驗(yàn)溶液。照高效液相色譜法（附錄V D)試驗(yàn)。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸水（20 ：5 ： 5： 70)為流動(dòng)相A,乙腈為流動(dòng)相B,按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm。阿司匹林峰的保留時(shí)間約為8分鐘，理論板數(shù)按阿司匹林峰計(jì)算不低于5000，阿司匹林峰與水楊酸峰的分離度應(yīng)符合要求。分別精密量取供試品溶液、對(duì)照溶液、靈敏度試驗(yàn)溶液及水楊酸檢査項(xiàng)下的水楊酸對(duì)照品溶液各10l,注人液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，除水楊

26、酸峰外，其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積（0.5%)。供試品溶液色譜圖中任何小于靈敏度試驗(yàn)溶液主峰面積的峰可忽略不計(jì)。5、干燥失重 取本品，置五氧化二磷為干燥劑的干燥器中，在60°C減壓干燥至恒重，減失重量不得過(guò)0.5%(附錄L)。 6、熾灼殘?jiān)?不得過(guò)0.1%(附錄N)。 7、重金屬 取本品l.0g,加乙醇23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3. 5 )2ml,依法檢査（附錄 H第一法），含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之十。 【含量測(cè)定】 取本品約0. 4g,精密稱定，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0 . 1mol/L）滴定。

27、每 1ml氫氧化鈉滴定液 (0. 1mol/L)相當(dāng)于 18. 02mg 的 C9 H 8 04阿司匹林腸溶片的質(zhì)量檢查 本品含阿司匹林（C9H8O4)應(yīng)為標(biāo)示量的93 . 0% 107. 0% 。 【性狀】 本品為腸溶包衣片，除去包衣后顯白色。 【鑒別】 （1)取本品的細(xì)粉適量（約相當(dāng)于阿司匹林0.lg),加水10ml,煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。(2)在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。 【檢查】 游離水楊酸 取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于阿司匹林0 .1g),精密稱定，置100ml量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液振搖使阿司匹林溶

28、解，并稀釋至刻度，搖勻，濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液（臨用新制）；取水楊酸對(duì)照品約15mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml,置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。照阿司匹林游離水楊酸項(xiàng)下的方法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)標(biāo)示量的1.5% 。 釋放度 酸中釋放量 取本品，照釋放度測(cè)定法（附錄X D第二法方法1 )，采用溶出度測(cè)定法第一法裝置，以0.1mol/L的鹽酸溶液 600ml (25mg、40mg、50mg 規(guī)格）或750ml(100mg、300mg規(guī)格）為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)2小時(shí)時(shí)，取溶液10ml,濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；取阿司匹林對(duì)照品，精密稱定，加冰醋酸甲醇溶液溶解并稀釋制成每1ml中含4 . 25g(25mg規(guī)格）、7g (40mg 規(guī)格）、8. 25g(50mg 規(guī)格）、13g（100mg 規(guī)格）、40g (300m g規(guī)格）的溶液，作為對(duì)照品溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)