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1、第九章第九章 種子健康檢驗(yàn)種子健康檢驗(yàn)張園莉 鄭軍麗 張瑞珍 姚天蘢 莊澤龍主講:張 麗第九章第九章 種子健康檢驗(yàn)種子健康檢驗(yàn)第九章第九章 種子健康檢驗(yàn)種子健康檢驗(yàn)第九章第九章 種子健康檢驗(yàn)種子健康檢驗(yàn)第九章第九章 種子健康檢驗(yàn)種子健康檢驗(yàn)由于種子帶病的類(lèi)型和病原物的不同,其病害檢驗(yàn)的方由于種子帶病的類(lèi)型和病原物的不同,其病害檢驗(yàn)的方法也不相同主要有以下幾種:法也不相同主要有以下幾種:第三節(jié)第三節(jié) 種子病原物的檢驗(yàn)方法種子病原物的檢驗(yàn)方法 一、一、肉眼檢驗(yàn)肉眼檢驗(yàn) 1. 1. 適用范圍適用范圍 二二、過(guò)篩檢驗(yàn)過(guò)篩檢驗(yàn) 1. 1.適用范圍適用范圍 三、洗滌檢驗(yàn)三、洗滌檢驗(yàn) 四、漏斗分離檢驗(yàn)四、漏
2、斗分離檢驗(yàn) 1. 1.適用范圍適用范圍 檢驗(yàn)種子外部所攜帶的檢驗(yàn)種子外部所攜帶的線(xiàn)蟲(chóng)線(xiàn)蟲(chóng)。 檢驗(yàn)原理檢驗(yàn)原理: 種傳線(xiàn)蟲(chóng)在水中和有空種傳線(xiàn)蟲(chóng)在水中和有空氣的條件下會(huì)活化,具有氣的條件下會(huì)活化,具有趨趨水性和向地性水性和向地性,鉆出種子游,鉆出種子游進(jìn)水中,用顯微鏡檢查水中進(jìn)水中,用顯微鏡檢查水中的線(xiàn)蟲(chóng)。的線(xiàn)蟲(chóng)。 2. 2.檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)方法u將種子用將種子用2 2層紗布包好,放入備層紗布包好,放入備好的漏斗內(nèi),漏斗需好的漏斗內(nèi),漏斗需10 10 15cm15cm口徑,下口接約口徑,下口接約10 cm10 cm長(zhǎng)的橡皮長(zhǎng)的橡皮管一根,用彈簧夾夾??;管一根,用彈簧夾夾??;u加水使種子浸沒(méi),放在加水使
3、種子浸沒(méi),放在20 20 2525的環(huán)境中浸的環(huán)境中浸101024h24h;u用離心管接取浸出液,再放在用離心管接取浸出液,再放在2000r/min2000r/min的離心機(jī)中離心的離心機(jī)中離心5min,5min,取下部沉淀液置于載玻片上檢取下部沉淀液置于載玻片上檢查線(xiàn)蟲(chóng)。查線(xiàn)蟲(chóng)。 五五、萌芽實(shí)驗(yàn)萌芽實(shí)驗(yàn) 1. 1.適用范圍適用范圍 種子攜帶的病菌,無(wú)論是在種子表面,種子攜帶的病菌,無(wú)論是在種子表面,還是潛伏在種子內(nèi)部,還是潛伏在種子內(nèi)部,只要在種子萌發(fā)階段只要在種子萌發(fā)階段開(kāi)始為害或長(zhǎng)出病菌的,都可用此種方法進(jìn)開(kāi)始為害或長(zhǎng)出病菌的,都可用此種方法進(jìn)行檢驗(yàn)行檢驗(yàn) 。 2. 2.檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)方法
4、 1)吸水紙法)吸水紙法 2)砂床法)砂床法 六、分離培養(yǎng)檢驗(yàn)六、分離培養(yǎng)檢驗(yàn)1. 1.適用范圍適用范圍 主要用于主要用于發(fā)育較慢發(fā)育較慢的致病真菌、潛伏的致病真菌、潛伏在種子內(nèi)部的、表面的病原菌,也可用來(lái)在種子內(nèi)部的、表面的病原菌,也可用來(lái)確定病菌潛伏的部位。確定病菌潛伏的部位。2. 2.檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)方法1 1)數(shù)取試樣)數(shù)取試樣400400粒;粒;2 2)預(yù)處理預(yù)處理: : 檢驗(yàn)種子內(nèi)部的病原菌時(shí),可用檢驗(yàn)種子內(nèi)部的病原菌時(shí),可用乙醇、乙醇、0.1%0.1%的升汞,或的升汞,或0.1%0.1%的次氯酸鈉作的次氯酸鈉作表面消毒后,用無(wú)菌水洗滌;表面消毒后,用無(wú)菌水洗滌;3 3)培養(yǎng)培養(yǎng): :
5、 每個(gè)培養(yǎng)皿播每個(gè)培養(yǎng)皿播1010粒種子于培養(yǎng)皿表粒種子于培養(yǎng)皿表面,面,20 20 22 22 黑暗條件下培養(yǎng)黑暗條件下培養(yǎng)5 5 7d7d檢檢查;查; 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)真馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)真菌,牛肉汁培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)細(xì)菌。菌,牛肉汁培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)細(xì)菌。 七、噬菌體檢驗(yàn)七、噬菌體檢驗(yàn) 1. 1.適用范圍適用范圍 所以所以 2. 2.檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)方法稱(chēng)一定重量的種子,根據(jù)稱(chēng)一定重量的種子,根據(jù)其傳播方式,取其帶病的部位進(jìn)行,加入其傳播方式,取其帶病的部位進(jìn)行,加入一定量的滅菌水,浸泡一定量的滅菌水,浸泡 0.5 0.5 1h1h,并不斷,并不斷攪拌,濾紙過(guò)濾,取
6、濾液攪拌,濾紙過(guò)濾,取濾液 1ml 31ml 3個(gè)重復(fù),個(gè)重復(fù),分別放入分別放入3 3個(gè)培養(yǎng)皿中個(gè)培養(yǎng)皿中;加入加入1ml指示菌液(大于指示菌液(大于9億個(gè)菌億個(gè)菌/ml)混勻,混勻,3 5min后加入后加入10ml溶化并冷溶化并冷卻至卻至45 50 的固體平板培養(yǎng)基,放入的固體平板培養(yǎng)基,放入25 28 的恒溫箱中培養(yǎng)的恒溫箱中培養(yǎng)10 12h,觀察觀察噬菌斑數(shù)。噬菌斑數(shù)。 八、接種指示植物法八、接種指示植物法 利用噴霧接種、針刺接種,汁液摩擦接利用噴霧接種、針刺接種,汁液摩擦接種等適宜的方法接種到指示植物(寄主)。種等適宜的方法接種到指示植物(寄主)。九、血清學(xué)檢驗(yàn)九、血清學(xué)檢驗(yàn) 采用特制的抗血清,利用血清學(xué)反應(yīng)采用特制的抗血清,利用血清學(xué)反應(yīng)檢查細(xì)菌、病毒、類(lèi)菌原體的一類(lèi)方法。檢查細(xì)菌、病毒、類(lèi)菌原體的一類(lèi)方法。十、隔十、隔離種植檢離種植檢驗(yàn)驗(yàn)u有些有些種子所種子所帶的帶的病病害或害或雜草,雜草,有時(shí)有時(shí)不易發(fā)不易發(fā)現(xiàn)癥狀或病原物,需要在生長(zhǎng)發(fā)育階段進(jìn)行現(xiàn)癥狀或病原物,
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