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1、細(xì)菌室常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目:一 形態(tài)學(xué)檢查(morphological examination)(%1) 各種染色1革蘭染色(gramstain):將細(xì)菌分為蘋蘭陽性菌如葡萄球菌屬,鏈球菌屬等;范蘭陰性菌如人腸埃 希菌沙門菌,志賀菌等。2抗酸染色(acid-fast stain):通過染色將細(xì)菌分為兩大類:抗酸性細(xì)菌利非抗酸性細(xì)菌,抗酸性細(xì)菌種 類較少,如結(jié)核分枝桿菌,麻風(fēng)分枝桿菌等。正常:未見??顾崛旧?,找到紅色分枝桿菌,及報(bào)告“找 見抗酸分枝桿菌”,量可以用加號(hào)表示:+每個(gè)視野10根+ 每個(gè)視野發(fā)現(xiàn)110根+100個(gè)視野發(fā)現(xiàn)1099根+300個(gè)視野發(fā)現(xiàn)39根± 300個(gè)視野發(fā)現(xiàn)1-2根3

2、異染顆粒染色(metachromatic granula stain):用于檢杳棒狀桿菌。4墨汁染色(indian ink negative staining):用背景著色,而細(xì)菌本身不著色的染色方法,用于腦脊 液中查找新生隱球菌。正常:未見。5鞭毛染色(flagella stain):鞭毛的數(shù)目和位置隨細(xì)菌種類而不同,可分為周毛菌、單毛菌、雙毛菌 和從毛菌,是細(xì)菌分類和鑒定的重要依據(jù)。如霍亂弧菌是單鞭毛菌。6莢膜染色(capsules stain):莢膜是細(xì)菌壁外一層粘液性多聚物,賦予致病菌的侵襲力。染色將莢 膜染成與菌體不同顏色,可作為細(xì)菌鑒定的依據(jù)。如肺炎鏈球菌。(%1) 涂片檢測(cè)(sm

3、ear)1便球桿比檢査(stool cocus/bacillus):即革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌之比。正常值:便球桿比:1:3臨床意義:健康人腸道內(nèi)寄居著人量厭氧菌和小部分需氧菌。除人乳喂養(yǎng)的嬰兒腸道內(nèi)以革蘭陽性球 菌為主外,其余人均以革蘭陰性桿菌占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。在腸道發(fā)牛致病菌如沙門、志賀、弧菌感染時(shí)往往 由于使用抗生索而是革蘭陰性桿菌受到抑制,此時(shí)球菌/桿菌比值有可能變大。若比值顯著增大,常提 示腸道菌群紊亂或發(fā)生二重感染。2標(biāo)本真菌涂片(fungi):經(jīng)革蘭染色如發(fā)現(xiàn)革蘭陽性卵惻形芽生抱子或假菌絲,可初步報(bào)告為:找 到真菌淪子和菌絲。正常值:未見真菌。3痰涂片檢查(sputum smear)

4、:臨床意義:目的確定標(biāo)木是否適合做細(xì)菌培養(yǎng),初步判定是否有致病菌存在。首先應(yīng)確定標(biāo)木是否為 來自下呼吸道的痰,其標(biāo)準(zhǔn)為革蘭染色wbo25/lpf(低倍視野),上皮細(xì)胞10/lpfo冇些細(xì)菌對(duì)做初 步判斷:1) 肺炎鏈球菌:革蘭染色為陽性球菌,成雙或短鏈狀排列2) 結(jié)核分枝桿菌:抗酸染色,找到紅色分枝桿菌,及報(bào)告“找見抗酸分枝桿菌”,量可以用加號(hào)表示:+毎個(gè)視野10根+ 每個(gè)視野發(fā)現(xiàn)110根+100個(gè)視野發(fā)現(xiàn)1099根+300個(gè)視野發(fā)現(xiàn)39根±300個(gè)視野發(fā)現(xiàn)12根3) 真菌:經(jīng)革蘭染色如發(fā)現(xiàn)革蘭陽性卵闘形芽生抱子或假菌絲,可初步報(bào)告為:找到真菌抱子和菌 絲。4) 放線菌及奴卡菌:革蘭

5、染色后,插件中央部分菌絲為革蘭陽性,而四周放射的末梢菌絲為革蘭陰 性,切部分菌株有抗酸性。可報(bào)告:找見疑似放線菌或奴卡菌。4 淋球菌涂片檢查(neisseria gonorrhoeae)臨床意義:標(biāo)木:男性以滅菌鹽水清洗床道ii,収床道膿性分泌物涂片;女性床道炎患者清洗床道口 后從陰道后壁從后向前方壓迫丿求道使分泌物排出,涂片。子宮頸炎患者先用滅菌鹽水淸洗宮頸口和陰 道壁,再用陰道窺鏡壓迫子宮陰道部使分泌物排出。涂片范蘭染色后鏡檢,屮性粒細(xì)胞內(nèi)冇范蘭氏陰 性雙球菌貝有診斷價(jià)值。報(bào)告結(jié)果:“中性粒細(xì)胞內(nèi)(或/和)外見到革蘭陰性雙球菌”。正常:未見。二 細(xì)菌分離培養(yǎng)(isolation and c

6、ulture of bacteria)1血培養(yǎng)(blood culture):臨床意義:正常人體的血液是無菌的,當(dāng)人體局部感染向全身播散和出現(xiàn)全 身感染時(shí),血液中可出現(xiàn)細(xì)菌,依據(jù)程度不同稱為菌血癥或敗血癥.菌血癥往往需要以多次血培養(yǎng)證實(shí),如 農(nóng)皮葡萄球菌,即可是致病菌,也是較常見的污染菌.正常:無菌生長(zhǎng)。繪終陰性報(bào)告時(shí)間為7天。亞急性心內(nèi)膜炎患者標(biāo)本如56天無菌牛長(zhǎng),應(yīng)繼續(xù) 培養(yǎng)至2周方可報(bào)告陰性結(jié)果。布魯氏菌培養(yǎng)第3周做出最終陰性報(bào)告。厭氧菌培養(yǎng)應(yīng)在第2周做出 最終陰性報(bào)告。真菌血癥應(yīng)在第3周做出最終陰性報(bào)告。結(jié)核血培養(yǎng)應(yīng)在第6周做出最終陰性報(bào) 告。2尿液培養(yǎng)(urine culture):

7、臨床意義:正常人體膀胱小的尿液是無菌的,用膀胱穿刺取出的尿液應(yīng) 是無菌的。當(dāng)尿液經(jīng)尿道排出體外,受到尿道中細(xì)菌的污染而混有細(xì)菌。取經(jīng)尿道排岀的中斷尿,細(xì) 菌數(shù)不會(huì)超過10必口1,因而,以此界限作為診斷泌尿道系感染的依據(jù)。尿液培養(yǎng)反映腎臟、球道、前列腺等的炎癥變化,幫助臨床選擇有效抗菌藥物。正常48小時(shí)仍無菌生 長(zhǎng)可做最終陰性報(bào)告。24小時(shí)如有細(xì)菌生長(zhǎng)即做細(xì)菌鑒定及藥敏。3痰培養(yǎng):(sputum culture):臨床意義:痰中的病原菌不少屬于機(jī)會(huì)致病菌,與正常菌群同在,在 報(bào)告時(shí)應(yīng)做說明。對(duì)丁機(jī)會(huì)致病菌,一般僅當(dāng)其數(shù)量超過正常菌群時(shí)才可報(bào)告鑒定結(jié)果及藥敏試驗(yàn)結(jié) 果。檢出致病菌時(shí),除報(bào)告該菌的鑒

8、定名稱外,還需同時(shí)報(bào)告正簾菌群情況。通簾以報(bào)告甲烈鏈球菌和奈 瑟氏菌作為正常菌群存在的指標(biāo)。如:甲型鏈球菌+奈瑟氏菌+肺炎克雷們氏菌2+此報(bào)告表明肺炎克宙?zhèn)兪暇跀?shù)最上多于正簾菌群,診斷為病原菌。未檢出致病菌時(shí),應(yīng)報(bào)告“正常菌 群”。4咽拭子培養(yǎng)(pharynx swab culture):臨床意義:鼻、咽部的細(xì)菌感染病原菌源于口腔,口腔屮既 有需氧菌,也有厭氧菌。同痰培養(yǎng)一樣,病原菌不少屈丁機(jī)會(huì)致病菌,與正常菌群同在,耍止確區(qū)分。 未檢出致病菌時(shí),應(yīng)報(bào)告“正常菌樣”。5穿刺液標(biāo)本(包括胸腹水、關(guān)節(jié)液、心包液)的培養(yǎng)(serous cavity effusion culture):臨床意義:

9、正常的穿刺液是無菌的,有感染的情況下,只要檢出細(xì)菌,通常都可視為是病原菌。正常:無菌生長(zhǎng)。 6糞便培養(yǎng)(stool culture):臨床意義:一方而從腸道人量細(xì)菌屮找出致病菌,對(duì)腸道疾病進(jìn)行病原 學(xué)診斷并通過藥敏試驗(yàn)為臨床提供合適的用藥;另一方而可對(duì)腸道菌群進(jìn)行監(jiān)測(cè),在疾病治療中預(yù)防 菌搟紊亂。正常:未檢出致病菌。7腦脊液培養(yǎng)(csf culture):臨床意義:正常人體腦脊液是無菌的。當(dāng)人體患冇腦脊髓膜炎時(shí),在腦脊髓液小可以出現(xiàn)病原菌。常見的病原菌冇細(xì)菌、真菌和結(jié)核菌等。正 常:無菌生長(zhǎng)。8化膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本的培養(yǎng)(purulent secretion culture):臨床意義組織或器官

10、的化膿性感染,其病原菌的來源可以分為兩類內(nèi)源性:感染源是炎癥局部周圍的器官屮的正常菌群(簾在菌群),山于損傷等因素造成常在菌群進(jìn)入無菌 狀態(tài)的組織內(nèi),發(fā)牛感染.外源性:感染源是存在于人體外部口然界的微生物,由于外傷和接接觸,外界微生物通過人體表面進(jìn)入 人體,造成感染.常見細(xì)菌冇金黃色葡萄球菌、鏈球菌、消化鏈球菌;陽性桿菌冇炭疽芽抱桿菌、破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢 膜梭菌、潰瘍棒狀桿菌;陰性桿菌冇腸桿菌、嗜血桿菌、產(chǎn)堿桿菌、假單胞菌、無色桿菌、擬桿菌、 弧菌、氣單胞菌;其他有放線菌、奴卡氏菌、念珠菌、結(jié)核分枝桿菌。三手工試驗(yàn)1觸悔試驗(yàn)(catalase test):具有觸陋(過氧化氫解)的細(xì)菌,能催化過

11、氧化氫,放出新生態(tài)氧,繼而 生成分子氧出現(xiàn)氣泡。2凝固酚試驗(yàn)(coagulase test):金黃色匍萄球菌產(chǎn)生的結(jié)合凝固砒 結(jié)合在細(xì)胞壁上,使血漿中的 纖維蛋白原變成纖維蛋白附著于細(xì)菌表而,發(fā)生凝集反應(yīng)。3 camp試驗(yàn):b群鏈球菌具有“camp”因子,能促進(jìn)匍萄球菌0溶血素的活性,使兩種細(xì)菌在劃線處 呈現(xiàn)箭頭形透明溶血區(qū)。4 optochin敬感試驗(yàn):optochin (ethylhydrocupreine,乙基氫化去1t1奎寧的商占占名)町干擾帥炎鏈球 菌葉酸的生物合成,抑制該菌的生長(zhǎng),故帥炎鏈球菌對(duì)其敏感,其他鏈球菌對(duì)其耐藥。5氧化酚試驗(yàn)(oxidase test):該試紙條適用丁 g

12、桿菌的氧化酶實(shí)驗(yàn)。具有氧化酶的細(xì)菌,首先使細(xì)胞 色素c氧化,再由氧化型細(xì)胞色索c使鹽酸對(duì)二甲氨基苯胺氧化,并與a蔡酚結(jié)合,生成靛酚藍(lán)而成 藍(lán)色。用于初步判斷奈瑟氏菌屬及腸桿菌科的非發(fā)酵菌。6超廣譜卜內(nèi)酰胺悔的測(cè)定(esbls檢測(cè)):有些大腸和肺克能產(chǎn)生超廣譜0內(nèi)酰胺臨 他不僅能水 解第一代和第二代頭抱菌素,還能水解第三代頭抱菌素類抗生素,如頭抱他陀、頭抱曝胯等和單酰胺 酶,使其失去抗菌作用,但對(duì)碳青霉烯類無明顯作用。7 mrsa和mrs檢測(cè):用30ug紙片的頭池西的藥敏結(jié)果及新的折點(diǎn)能預(yù)測(cè)meca介導(dǎo)的耐藥。8d-試驗(yàn):大環(huán)內(nèi)脂類耐藥的匍萄球菌可以改變、誘導(dǎo)克林零索耐藥。由erm基因?qū)е?3s

13、 rrna甲 基化耐藥,與大環(huán)內(nèi)脂類,林可霉素,和 鏈零素b烈有交叉,又叫mlsb耐藥,或只耐大環(huán)內(nèi)脂類 (msra基因編碼的泵出機(jī)制)四血清學(xué)檢測(cè)1肥達(dá)氏反應(yīng)(widal):正常值:h: b: 80; o: 1<: 80; 甲:b: 80; 乙:b: 80:丙:v: 80臨床意義:用標(biāo)準(zhǔn)傷寒、副傷寒菌液與稀釋的待檢測(cè)血淸反應(yīng),根據(jù)凝集效價(jià)判定血淸中冇無抗傷寒或 抗副傷寒桿菌的抗體。在病程的不同時(shí)期相隔57天,連續(xù)進(jìn)行血淸學(xué)檢査,如果血淸滴度隨z増高4 倍或4倍以上就更冇診斷價(jià)值。2外斐氏反應(yīng)(weil-felix):正常值:0x9: <1: 80 ; 0xk: <1: 80

14、臨床意義:用與立克次氏體冇共同的抗原成分的變形桿菌冶9、x2、xk菌株的o抗原與被檢血淸作交叉凝集反應(yīng), 借以診斷斑疹傷寒、恙蟲病等立克次氏體病。-般認(rèn)為凝集價(jià)>1: 80即冇診斷意義.更為重要的是此種 試驗(yàn)的凝集滴度隨病程發(fā)展而很快上升(在發(fā)病兩周末可升高數(shù)倍),到恢復(fù)后期乂明顯下降。3結(jié)核抗體的檢測(cè)仃b-check-1)正常值:陰性臨床意義:快速、定性的過篩試驗(yàn),能特異性地檢測(cè)出活動(dòng)性結(jié)核病人血淸、血漿或全血中的抗結(jié)核桿菌抗體。 主要檢測(cè)igg和iga,高濃度的igm亦可被檢出。接種過疫苗的人體試驗(yàn)不起反應(yīng)。4支原體培養(yǎng)(解脈支原體uu或人型支原體mh)正常值:陰性臨床意義:現(xiàn)已從人

15、類泌尿牛殖道分離出來7種支原體,其中分離率較高而與泌尿生殖道疾病有關(guān), 是解服支原體,其次是人型支原體。人型支原體(m.humenis, mh) 解腺支原體(ureaplasma urealyticum, uu)和生殖器支el體(m.genitalium, mg)都會(huì)引起泌球生殖道感染。uu與新生兒疾 病與成人泌球生殖道系統(tǒng)炎癥疾病冇關(guān),傳播途徑為性接觸和母嬰接觸,因此uu感染列為性傳播疾 病常引起非淋菌性尿道炎,慢性前列腺炎和附睪炎,不育不孕,妊娠期感染等。mh主要引起泌尿生 殖系統(tǒng)感染包括盆腔炎,急性腎盂腎炎,陰道炎及宮頸炎等。在健康人群中,可能有u.u或m.h寄生, 但103ccu/ml

16、,故本試劑盒檢測(cè)結(jié)果為陰性。檢測(cè)到104ccu/ml的u.u或m.h有較明確臨床意義, 一般需用藥治療。io?104ccu/ml的u.u或m.h,提示支原體輕度感染,供醫(yī)生診斷治療時(shí)參考。 7革蘭陰性菌脂多糖(lps)檢測(cè):體液內(nèi)毒素測(cè)定(卷試驗(yàn))正常范圍:copg/ml臨床意義:細(xì)菌內(nèi)毒素作為革蘭陰性菌細(xì)胞壁最外層結(jié)構(gòu)具冇多種生物效應(yīng), 微量?jī)?nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體后,將會(huì)產(chǎn)生發(fā)燒、休克及內(nèi)毒素血癥等臨床癥狀。以蛍實(shí)騎來檢測(cè)內(nèi)毒素,能對(duì) 內(nèi)毒素血癥、革蘭氏陰性細(xì)菌敗血癥和革蘭氏陰性細(xì)菌感染的病人做岀早期診斷和治療。8真菌(1-3)葡聚糖檢測(cè)(g試驗(yàn))正常范環(huán)1opg/ml臨床意義:所彳j真菌的細(xì)胞壁上

17、都含冇(1-3)-p-d-w聚糖,而其他微生物、動(dòng)物及人的細(xì)胞成分和細(xì)胞外液都不含這種成分,因此在機(jī)體的 體液屮檢測(cè)到(13)0d葡聚糖時(shí)診斷侵襲性真菌感染的冇效依據(jù)。9嗜杲性凝集檢試驗(yàn):正常值:陰性或凝集價(jià)c: 8臨床意義:傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體是eb病毒,病人血清中可測(cè)到嗜異性凝集和抗eb病毒的 抗體,此試驗(yàn)可診斷此病。凝集價(jià)冇較大增高見于:血淸病、何杰金氏病和ii木血吸蟲感染的急性期。 當(dāng)凝集價(jià)達(dá)到1: 224以上時(shí)可結(jié)合病人臨床癥狀確診為傳染性單核細(xì)胞增多癥。約10%的病人試驗(yàn) 為陰性,以兒童和嬰兒為主。10布氏桿菌凝集試驗(yàn)(bacterium burgeri agglutination test):正常值:陰性臨床意義:是應(yīng)用已知菌株檢測(cè)血清中特異性抗體,目前仍是國際標(biāo)準(zhǔn)診斷布氏病的血清學(xué)方法。感 染2周后陽性率可達(dá)90%, 35周時(shí),效價(jià)最高,1: 160以上冇診斷意義,動(dòng)態(tài)觀察升高4倍以上 更冇意義。其對(duì)人體感染的陽性檢出率為:急性期為94.85%;業(yè)急性期為87.50%;慢性期為61.11%0 隨著病程的延長(zhǎng)和康復(fù),血淸中特異性抗體效價(jià)逐漸降低,們亦有持續(xù)高效價(jià)達(dá)數(shù)年z久。影響該實(shí)驗(yàn) 的因索除影響抗原抗體反應(yīng)常見因素外,嚴(yán)格學(xué)握診斷菌的濃度十分重要診斷菌液的濃度越大,敏感性 越低,反之敬感性提高。

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