蛋白質(zhì)和氨基酸的測定_第1頁
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1、儀器:凱氏消儀器:凱氏消化裝置?;b置。100頁頁 要防止要防止爆沸。爆沸?;脽羝?21吸收吸收滴定滴定10-25-9北京福德泰和科技有限公司北京福德泰和科技有限公司產(chǎn)品名稱:產(chǎn)品名稱: 全自動凱氏定氮儀全自動凱氏定氮儀 雙縮脲能和硫酸銅的堿性溶液生成紫紅色絡(luò)和雙縮脲能和硫酸銅的堿性溶液生成紫紅色絡(luò)和物,此反應叫雙縮脲反應。(縮二脲反應)物,此反應叫雙縮脲反應。(縮二脲反應) 蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵(蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵( CONH),與雙縮),與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似。在同樣條件下也有呈色反應,在一定脲結(jié)構(gòu)相似。在同樣條件下也有呈色反應,在一定條件下,其顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比,可用分條件下,其顏色

2、深淺與蛋白質(zhì)含量成正比,可用分光光度計來測其吸光度,確定含量。(光光度計來測其吸光度,確定含量。(560nm)NH2CONHCONH2 + NH3NH2CONH2 + NH2CONH2R R( NH NHCHCHCO-CO-)在紫外區(qū)內(nèi)對某一波長具有一定的光選擇吸收,在紫外區(qū)內(nèi)對某一波長具有一定的光選擇吸收,在在280nm下,光吸收與蛋白質(zhì)濃度(下,光吸收與蛋白質(zhì)濃度(38mg/ml)成直線關(guān)系,因此,通過測定蛋白質(zhì)溶液的吸光成直線關(guān)系,因此,通過測定蛋白質(zhì)溶液的吸光度,并參照事先用凱氏定氮法分析的標準樣品,度,并參照事先用凱氏定氮法分析的標準樣品,從標準曲線查出蛋白質(zhì)的含量。從標準曲線查出蛋白質(zhì)的含量。ab樣點樣點溶劑前沿溶劑前沿點樣原點點樣原點a.a.展開劑的有關(guān)情況:主要是低沸點的展開劑的有關(guān)情況:主要是低沸點的2 23 3種有種有機溶劑組成的溶劑系統(tǒng),分離效果主要決定于展機溶劑組成的溶劑系統(tǒng),分離效果主要決定于展開劑的選擇,因為吸附劑在一定情況下是恒定的,開劑的選擇,因為吸附劑在一定情況下是恒定

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