病原微生物實驗室生物安全相關法律法規(guī)簡介PPT課件

1、實驗室生物安全（Laboratory biosafety） 是指以實驗室為科研和工作場所時，避免危險生物因子造成實驗室人員暴露、向實驗室外擴散并導致危害的綜合措施。 即當實驗室工作人員所處理的實驗對象含有致病的微 生物及其毒素時，通過 實驗室的設計建造（二級屏障）、 使用個體防護裝置（一級屏障）、 嚴格遵從標準化的工作及操作程序等綜合措施: （1 1）確保實驗室工作人員不受實驗對象侵染。 （2 2）確保周圍環(huán)境不受其污染。第1頁/共38頁 1966年，美國Dow 化工公司工作，為國立健康研究中心（NIH）的腫瘤研究所開發(fā)一種遏制系統(tǒng)，查爾斯鮑德溫（Charles Baldwin） 等人發(fā)現(xiàn)，各

2、種各樣的實驗室有很多不同的警告標志，但卻沒有標準化。該公司開發(fā)了這個標志。 標志的要求是：獨特、印象深刻。 Science雜志文章介紹，CDC、NIH、 職業(yè)安全健康管理局采用后，被廣泛接受。 在處理生物危險度級別在2級以上的微生物時，在實驗室門上應標有國際通用的生物危險警告標志。另外在感染性物質運輸時也要張貼生物危害警告標志。 第2頁/共38頁與致病微生物接觸就存在安全問題 1974年丹麥某醫(yī)院臨床生化實驗室的工作人員體檢時發(fā)現(xiàn)肝炎發(fā)病率比普通人群高出7倍。 1976年英國某醫(yī)學實驗室的工作人員體檢時發(fā)現(xiàn)結核菌感染者比其他人群高5倍。 1978年英國報告一個商業(yè)洗衣房因清洗來自一Q熱實驗室的

3、衣褲時發(fā)生6例雇員和1例參觀者感染。第3頁/共38頁 據統(tǒng)計，從事病原微生物研究的工作人員發(fā)生實驗室感染的概率較普通人群高57倍。實驗室感染事件將不僅損害實驗室工作人員的健康，給所在單位和部門帶來不利影響，甚至可造成疾病的流行，危及廣大群眾的健康和生命安全，乃至妨礙社會經濟的發(fā)展以及和諧社會的建設，造成嚴重的后果。 為此，防止實驗室生物危害，保障公眾健康和安全，實驗室生物安全必須引起高度重視。第4頁/共38頁歷史上的實驗室感染事件1886年年 Koch報告第一例霍亂病的實驗室感染：德國柏林報告第一例霍亂病的實驗室感染：德國柏林的一名學生在處理霍亂弧菌培養(yǎng)物時被感染并發(fā)病的一名學生在處理霍亂弧菌

4、培養(yǎng)物時被感染并發(fā)病1893年年 Reincke報告第一例實驗室傷寒感染報告第一例實驗室傷寒感染1899年年 Birt和和Lamb報告第一例布氏桿菌引起的實驗室獲報告第一例布氏桿菌引起的實驗室獲得性感染得性感染1905年年 Johnston報告第二例布氏菌實驗室感染并作了評報告第二例布氏菌實驗室感染并作了評價價1931年年 Findlay報告第一例實驗室感染肝炎的病例報告第一例實驗室感染肝炎的病例1932年年 有報告實驗室工作人員被恒河猴咬傷后患猿猴皰有報告實驗室工作人員被恒河猴咬傷后患猿猴皰疹病毒性腦炎，這是該病毒感染人類的第一例疹病毒性腦炎，這是該病毒感染人類的第一例1943年年 在巴西的

5、黃熱病實驗室，兩周內在巴西的黃熱病實驗室，兩周內8名實驗室人員名實驗室人員發(fā)生了委內瑞拉馬腦炎發(fā)生了委內瑞拉馬腦炎第5頁/共38頁1967年年 在德國有在德國有26名實驗室人員因接觸黑尾長猴的血液名實驗室人員因接觸黑尾長猴的血液和組織而感染一種病毒和組織而感染一種病毒 (馬堡病毒馬堡病毒)，最終有，最終有9人死亡人死亡1969年年 尼日利亞北部一家醫(yī)院尼日利亞北部一家醫(yī)院3名護士感染砂粒病毒，其名護士感染砂粒病毒，其中中2人死亡。這是該病毒感染人的首次報告人死亡。這是該病毒感染人的首次報告（1951、1965、1976）美國實驗室相關感染調查美國實驗室相關感染調查 5000個實驗室，累計感染總

6、數：3921例，與已知事故相關的80%（氣溶膠？） 最常報告的感染：乙型肝炎、肺結核、傷寒、委內瑞拉馬腦炎、布魯氏菌病2003年、年、2004年年 SARS冠狀病毒引起的實驗室感染事件：冠狀病毒引起的實驗室感染事件：2003年臺灣一研究人員在年臺灣一研究人員在BSL-4實驗室被感染；實驗室被感染；2003年新年新加坡一名博士后研究生在實驗室被感染；加坡一名博士后研究生在實驗室被感染；2004年北京一個年北京一個國家級病毒病研究機構，一名安徽醫(yī)科大學研究生被感染。國家級病毒病研究機構，一名安徽醫(yī)科大學研究生被感染。 2010年年12月月 東北農業(yè)大學東北農業(yè)大學28名師生因動物實驗感染嚴重名師生

7、因動物實驗感染嚴重傳染病：傳染?。?010年年12月期間，東北農業(yè)大學動物醫(yī)學學院由月期間，東北農業(yè)大學動物醫(yī)學學院由于相關教師在實驗中使用了未經檢疫的山羊，導致自于相關教師在實驗中使用了未經檢疫的山羊，導致自2011年月至月，學校年月至月，學校27名學生和名教師陸續(xù)確診感染布名學生和名教師陸續(xù)確診感染布魯氏菌病。魯氏菌病。歷史上的實驗室感染事件第6頁/共38頁國際組織和國外病原微生物實室生物安全相關法規(guī)和指南1.實驗室生物安全手冊（WHO） 1988年第一版，1993第二版，2004年第三版2.微生物危險等級的分類（歐洲經濟共同體 EEC） 指令93/883.微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全手

8、冊 （美國） 1983年第一版，1993年第三版，1999年第四版；4.生物危害主要防護：生物安全柜的選擇、安裝和使用 （美國）2000年第二版；5.實驗室生物安全指南（加拿大） 1990年第一版，1996年第二版，2004年第三版第7頁/共38頁WHO對于傳染性物質的危險度分級 危險度1 級（無或極低的個體和群體危險） 不太可能引起人或動物致病的微生物。 危險度2 級（個體危險中等，群體危險低） 病原體能夠對人或動物致病，但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導致嚴重危害。 實驗室暴露也許會引起嚴重感染，但對感染有有效的預防和治療措施，并且疾病傳播的危險有限。 危險度3 級（個體危險高，群

9、體危險低） 病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病，但一般不會發(fā)生感染個體向其他個體的傳播，并且 對感染有有效的預防和治療措施。 危險度4 級（個體和群體的危險均高） 病原體通常能引起人或動物的嚴重疾病，并且很容易發(fā)生個體之間的直接或間接傳播，對感染一般沒有有效的預防和治療措施。第8頁/共38頁我國實驗室生物安全法規(guī)、標準 基礎：國家法律 柱石：配套規(guī)章 墻壁：相關標準 屋頂：執(zhí)行與監(jiān)督構 建 生 物 安 全 堡 壘第9頁/共38頁我國實驗室生物安全法規(guī)、標準（1）1. 1. 中華人民共和國傳染病防治法（2004年8月28日通過修訂版, 2004年12月1日起施行 ）2. 2. 病原微生物實驗室生

10、物安全管理條例 國務院424號令（2004年11月5日通過，2004年11月12日實施）3. 3. 醫(yī)療廢物管理條例 （2003年6月4日國務院第十次常務會議通過，2003年6月16日公布實行）第10頁/共38頁我國實驗室生物安全法規(guī)、標準（2）1.1.可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定 衛(wèi)生部45號令（2005年12月28日發(fā)布, 2006年2月1日起施行 ）2 2. .人間傳染的病原微生物名錄 （ 2006年1月11日發(fā)布）3. .人間傳染的高致病性病原微生物實驗室和實驗活動生物安全審批管理辦法 衛(wèi)生部50號令（2006年7月10日發(fā)布,自發(fā)布之日起施行 ）4 4.

11、 .人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機構管理辦法 衛(wèi)生部68號令（2009年5月26日發(fā)布, 2009年10月1日起施行 ）第11頁/共38頁我國實驗室生物安全法規(guī)、標準（3）1. WS 233-20021. WS 233-2002微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則 2002年12月03日發(fā)布 2003年08月01日實施 2. GB 19489GB 1948920082008實驗室生物安全通用要求 2008年12月26日改版，2009年7月1日起實施3. GB19781-2005 ISO15190GB19781-2005 ISO15190 醫(yī)學實驗室安全要求 2005年6月6日發(fā)布，20

12、05年12月1日起實施4. GB 50346GB 5034620042004生物安全實驗室建設技術規(guī)范 2004年08月03日發(fā)布 2004年09月01日起實施第12頁/共38頁我國實驗室生物安全法規(guī)、標準（4）北京市衛(wèi)生局制定下發(fā)的病原微生物實驗室生物安全相關文件：1 1. .北京市病原微生物實驗室及實驗活動備案管理辦法（試行） 京衛(wèi)科教字20082號（ 2008年2月28日發(fā)布，自發(fā)布之日起施行 ） 2.2.北京市與人體健康有關的實驗室生物安全事件應急處置工作方案 京衛(wèi)科教字200949號（ 2009年8月11日發(fā)布，自發(fā)布之日起施行） 3.3.北京市衛(wèi)生局關于加強實驗室生物安全管理工作的

13、通知 京衛(wèi)科教字201012號（2010年04月29日發(fā)布）4.4. 北京市衛(wèi)生局關于加強病原微生物實驗室生物安全監(jiān)督檢查管理的通知 京衛(wèi)科教字201115號 （ 2011年7月4日發(fā)布，自發(fā)布之日起施行）5.5. 北京市醫(yī)療衛(wèi)生機構醫(yī)療廢物管理規(guī)定 京衛(wèi)計字200981號 （ 2009年11月12日發(fā)布）第13頁/共38頁國務院生物安全管理條例條例共7章，依次為：1、總則；2、病原微生物的分類和管理；3、實驗室的設立與管理；4、實驗室感染控制；5、監(jiān)督管理；6、法律責任；7、附則。共72條。 目的：加強實驗室生物安全管理，保護實驗室工作人員和公眾的健康。適用范圍：境內的實驗室及其從事的實驗活

14、動的生物安全。實驗活動：指實驗室從事與病原微生物菌（毒）種、樣本有關的研究、教學、檢測、診斷等活動。 第14頁/共38頁 條例規(guī)定：國家對病原微生物實行分類管理。根據其傳染性、感染后對個體或群體的危害程度，將病原微生物分為一四類，其中一、二類統(tǒng)稱為高致病病原微生物。 條例規(guī)定：對實驗室實施分級管理，按防護水平和國家標準的規(guī)定，將實驗室分為一至四級。對三級、四級實驗室實行強制認可。第15頁/共38頁 條例第六條：實驗室的設立單位及其主管部門負責實驗室日?；顒拥墓芾恚袚⒔∪踩芾碇贫?，檢查、維護實驗設施、設備，控制實驗室感染的職責。 條例第三十一條 ：實驗室的設立單位負責實驗室的生物安全管

15、理。 實驗室的設立單位應當依照本條例的規(guī)定制定科學、嚴格的管理制度，并定期對有關生物安全規(guī)定的落實情況進行檢查，定期對實驗室設施、設備、材料等進行檢查、維護和更新，以確保其符合國家標準。 實驗室的設立單位及其主管部門應當加強對實驗室日?；顒拥墓芾怼?條例第三十二條 ：實驗室負責人為實驗室生物安全的第一責任人。 實驗室從事實驗活動應當嚴格遵守有關國家標準和實驗室技術規(guī)范、操作規(guī)程。實驗室負責人應當指定專人監(jiān)督檢查實驗室技術規(guī)范和操作規(guī)程的落實情況。 第16頁/共38頁l條例第四十九條：縣級以上地方人民政府衛(wèi)生主管部門、獸醫(yī)主管部門依照各自分工，履行下列職責。 （一）對病原微生物菌（毒）種、樣本的

16、采集、運輸、儲存進行監(jiān)督檢查； （二） 對從事高致病性病原微生物相關實驗活動的實驗室是否符合本條例規(guī)定的條件進行監(jiān)督檢查； （三）對實驗室或者實驗室的設立單位培訓、考核其工作人員以及上崗人員的情況進行監(jiān)督檢查； （四）對實驗室是否按照有關國家標準、技術規(guī)范和操作規(guī)程從事病原微生物相關實驗活動進行監(jiān)督檢查。 l縣級以上地方人民政府衛(wèi)生主管部門、獸醫(yī)主管部門，應當主要通過檢查反映實驗室執(zhí)行國家有關法律、行政法規(guī)以及國家標準和要求的記錄、檔案、報告，切實履行監(jiān)督管理職責。 第17頁/共38頁l條例第十一條： 運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或者樣本，應當經省級以上人民政府衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門

17、批準。在省、自治區(qū)、直轄市行政區(qū)域內運輸的，由省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門批準；需要跨省、自治區(qū)、直轄市運輸或者運往國外的，由出發(fā)地的省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門進行初審后，分別報國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門批準。 第18頁/共38頁 人間傳染的病原微生物名錄中第三類病原微生物運輸包裝分類為A類的病原微生物菌（毒）種或樣本，以及疑似高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，按照本規(guī)定進行運輸管理。 第四條 運輸第三條規(guī)定的菌（毒）種或樣本（以下統(tǒng)稱高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本），應當經省級以上衛(wèi)生行政部門批準。未經批準，不得運輸。第19

18、頁/共38頁 第九條 申請在省、自治區(qū)、直轄市行政區(qū)域內運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，由省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部門審批。 第十條 申請跨省、自治區(qū)、直轄市運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，應當將申請材料提交運輸出發(fā)地省級衛(wèi)生行政部門進行初審；對符合要求的，省級衛(wèi)生行政部門應當在3個工作日內出具初審意見，并將初審意見和申報材料上報衛(wèi)生部審批。第20頁/共38頁 第十二條 運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的容器或包裝材料應當達到國際民航組織危險物品航空安全運輸技術細則（Doc9284包裝說明PI602）規(guī)定的A類包裝標準，符合防水、防破損、防外泄、耐高溫、耐高壓的要求

19、，并應當印有衛(wèi)生部規(guī)定的生物危險標簽、標識、運輸登記表、警告用語和提示用語。 第十三條 運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，應當有專人護送，護送人員不得少于兩人。申請單位應當對護送人員進行相關的生物安全知識培訓，并在護送過程中采取相應的防護措施。 第十六條 在運輸結束后，申請單位應當將運輸情況向原批準部門書面報告。 第21頁/共38頁第22頁/共38頁 第六條 申請運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的單位（以下簡稱申請單位），在運輸前應當向省級衛(wèi)生行政部門提出申請，并提交以下申請材料（原件一份，復印件三份）： （一）可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸申請表； （二）法人

20、資格證明材料（復印件）； （三）接收高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的單位(以下簡稱接收單位)同意接收的證明文件； （四）本規(guī)定第七條第（二）、（三）項所要求的證明文件（復印件）； （五）容器或包裝材料的批準文號、合格證書（復印件）或者高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸容器或包裝材料承諾書； （六）其它有關資料。 第七條 接收單位應當符合以下條件： （一）具有法人資格； （二）具備從事高致病性病原微生物實驗活動資格的實驗室； （三）取得有關政府主管部門核發(fā)的從事高致病性病原微生物實驗活動、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產等的批準文件。第23頁/共38頁 第八條 在固定的申請單位和接收單

21、位之間多次運輸相同品種高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，可以申請多次運輸。多次運輸的有效期為6個月；期滿后需要繼續(xù)運輸的，應當重新提出申請。第24頁/共38頁 條例第八條 ： 人間傳染的病原微生物名錄由國務院衛(wèi)生主管部門商國務院有關部門后制定、調整并予以公布； 第25頁/共38頁 2006年1月11日 ，衛(wèi)生部制定發(fā)布人間傳染的病原微生物名錄 166種 病毒（含阮病毒，Prion ） 155種 細菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體 59種 真菌共 380 種 病原微生物 第26頁/共38頁 一類病原微生物 29種 全部為病毒 二類病原微生物 70種 其中 56種 病毒或阮病毒 1

22、0種 屬于二菌四體 4種 真菌共99種高致病性病原微生物第27頁/共38頁第28頁/共38頁第29頁/共38頁 表1. 病毒分類名錄 序號病毒名稱危害程度分類實驗活動所需生物安全實驗室級別運輸包裝分類f備注病毒培養(yǎng)a動物感染實驗b未經培養(yǎng)的感染材料的操作c滅活材料的操作d無感染性材料的操作eA/BUN編號英文名中文名分類學地位1Alastrim virus類天花病毒痘病毒科第一類BSL-4ABSL-4BSL-3BSL-2BSL-1AUN28143Eastern equine encephalitis virus 東方馬腦炎病毒披膜病毒科第一類BSL-3ABSL-3BSL-3BSL-2BSL-1

23、AUN2814僅培養(yǎng)物A類4Ebola virus埃博拉病毒絲狀病毒科第一類BSL-4ABSL-4BSL-3BSL-2BSL-1AUN281442Hantaviruses cause hemorrhagic fever with renal syndrome引起腎綜合征出血熱的漢坦病毒布尼亞病毒科第二類BSL-2ABSL-3BSL-2BSL-1BSL-1AUN2814有疫苗。僅病毒培養(yǎng)物為A類第30頁/共38頁注：BSL-n/ABSL-n：不同生物安全級別的實驗室/動物實驗室。病毒培養(yǎng)：指病毒的分離、培養(yǎng)、滴定、中和試驗、活病毒及其蛋白純化、病毒凍干以及產生活病毒的重組試驗等操作。利用活病毒或

24、其感染細胞（或細胞提取物），不經滅活進行的生化分析、血清學檢測、免疫學檢測等操作視同病毒培養(yǎng)。使用病毒培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑的加入必須在與病毒培養(yǎng)等同級別的實驗室和防護條件下進行，裂解劑或滅活劑加入后可比照未經培養(yǎng)的感染性材料的防護等級進行操作。動物感染實驗：指以活病毒感染動物的實驗。未經培養(yǎng)的感染性材料的操作：指未經培養(yǎng)的感染性材料在采用可靠的方法滅活前進行的病毒抗原檢測、血清學檢測、核酸檢測、生化分析等操作。未經可靠滅活或固定的人和動物組織標本因含病毒量較高，其操作的防護級別應比照病毒培養(yǎng)。滅活材料的操作：指感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后進行的病毒抗原檢測、血清學檢測、核

25、酸檢測、生化分析、分子生物學實驗等不含致病性活病毒的操作。無感染性材料的操作：指針對確認無感染性的材料的各種操作，包括但不限于無感染性的病毒DNA或cDNA操作。運輸包裝分類：按國際民航組織文件Doc9284危險品航空安全運輸技術細則的分類包裝要求，將相關病原和標本分為A、B兩類，對應的聯(lián)合國編號分別為UN2814（動物病毒為UN2900）和UN3373。對于A類感染性物質，若表中未注明“僅限于病毒培養(yǎng)物”，則包括涉及該病毒的所有材料；對于注明“僅限于病毒培養(yǎng)物”的A類感染性物質，則病毒培養(yǎng)物按UN2814包裝，其它標本按UN3373要求進行包裝。凡標明B類的病毒和相關樣本均按UN3373的要

26、求包裝和空運。通過其他交通工具運輸的可參照以上標準進行包裝。第31頁/共38頁 說明： 在保證安全的前提下，對臨床和現(xiàn)場的未知樣本檢測操作可在生物安全二級或以上防護級別的實驗室進行，涉及病毒分離培養(yǎng)的操作，應加強個體防護和環(huán)境保護。要密切注意流行病學動態(tài)和臨床表現(xiàn)，判斷是否存在高致病性病原體，若判定為疑似高致病性病原體，應在相應生物安全級別的實驗室開展工作。 本表未列出之病毒和實驗活動，由各單位的生物安全委員會負責危害程度評估，確定相應的生物安全防護級別。如涉及高致病性病毒及其相關實驗的應經國家病原微生物實驗室生物安全專家委員會論證。 Prion為特殊病原體，其危害程度分類及相應實驗活動的生物

27、安全防護水平單獨列出。 關于使用人類病毒的重組體：在衛(wèi)生部發(fā)布有關的管理規(guī)定之前，對于人類病毒的重組體（包括對病毒的基因缺失、插入、突變等修飾以及將病毒作為外源基因的表達載體）暫時遵循以下原則：（1）嚴禁兩個不同病原體之間進行完整基因組的重組；（2）對于對人類致病的病毒，如存在疫苗株，只允許用疫苗株為外源基因表達載體，如脊髓灰質炎病毒、麻疹病毒、乙型腦炎病毒等；（3）對于一般情況下即具有復制能力的重組活病毒（復制型重組病毒），其操作時的防護條件應不低于其母本病毒；對于條件復制型或復制缺陷型病毒可降低防護條件，但不得低于BSL-2的防護條件，例如來源于HIV的慢病毒載體，為雙基因缺失載體，可在B

28、SL-2實驗室操作；（4）對于病毒作為表達載體，其防護水平總體上應根據其母本病毒的危害等級及防護要求進行操作，但是將高致病性病毒的基因重組入具有復制能力的同科低致病性病毒載體時，原則上應根據高致病性病原體的危害等級和防護條件進行操作，在證明重組體無危害后，可視情降低防護等級；（5）對于復制型重組病毒的制作事先要進行危險性評估，并得到所在單位生物安全委員會的批準。對于高致病性病原體重組體或有可能制造出高致病性病原體的操作應經國家病原微生物實驗室生物安全專家委員會論證。 國家正式批準的生物制品疫苗生產用減毒、弱毒毒種的分類地位另行規(guī)定。l在保證安全的前提下，對臨床和現(xiàn)場的未知樣本檢測操作可在生物安全二級或以上防護級別的實驗室進行，涉及病毒分離培養(yǎng)的操作，應加強個體防護和環(huán)境保護。要密切注意流行病學動態(tài)和臨床表現(xiàn)，判斷是否存在高致病性病原體，若判定為疑似高致病性病原體，應在相應生物安全級別的實驗室開展工作。第32頁/共38頁 條例第十四條： 國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門指定的菌（毒）種保藏中心或者專業(yè)實驗室（以下稱保藏機構），承擔集中儲存病原微生物菌（毒）種和樣本的任務。 保藏機構應當依照國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門的規(guī)定，儲存實驗室送交的病原微生物菌（毒）種和樣本，并向實驗室提供病原微生物菌（