醫(yī)院污水排放標準ＧＢＪ４８—８３試行(doc26)(1)

1、中華人民共和國國家標中華人民共和國國家標準醫(yī)院污水排放標準（試行）中華人民共和國國家標準醫(yī)院污水排放標準（試行）主編部門：中華人民共和國衛(wèi)生部批準部門：中華人民共和國國家經(jīng)濟委員會中華人民共和國衛(wèi)生部試行日期：年月日關(guān)于頒發(fā)醫(yī)院污水排放標準的通知經(jīng)基號根據(jù)原國家建委（）建發(fā)設(shè)字第號和衛(wèi)生部（）衛(wèi)科字第號通知的要求，由衛(wèi)生部會同有關(guān)單位共同編制的醫(yī)院污水排放標準，已經(jīng)有關(guān)部門會審。現(xiàn)批準醫(yī)院污水排放標準為國家標準，自一九八三年六月一日起試行。本標準由衛(wèi)生部負責管理，其具體解釋等工作由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生研究所負責。國家經(jīng)濟委員會衛(wèi)生部一九八三年一月十二日編制說明本標準是根據(jù)原國家建委（）建發(fā)設(shè)字號

2、和衛(wèi)生部（）衛(wèi)科字第號文下達的制訂醫(yī)院污水排放標準的任務(wù)，由我部委托中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生研究所主持，會同有關(guān)省、市衛(wèi)生防疫站、醫(yī)學(xué)院校、科研與建筑設(shè)計等有關(guān)單位編制而成。遵循我國“預(yù)防為主”的衛(wèi)生工作方針和中華人民共和國環(huán)境保護法（試行），為防止醫(yī)院排放帶有病原體的污水污染環(huán)境，危害人體健康，特制訂本標準。在編制過程中，曾對部分省、市、自治區(qū)醫(yī)院污水的情況進行重點調(diào)查，各課題組參照國內(nèi)外有關(guān)的標準、文獻，還進行了必要的科學(xué)試驗，并向全國有關(guān)單位廣泛征求意見，經(jīng)多次討論修改，由全國衛(wèi)生標準技術(shù)委員會環(huán)境衛(wèi)生分委員會會同有關(guān)部門審核定稿。本標準分總則、排放標準、設(shè)計要求與管理要求等四章和附錄一，檢驗

3、方法。在試行本標準的過程中，請各單位注意積累資料，總結(jié)經(jīng)驗，如發(fā)現(xiàn)有需要修改和補充之處，請將意見和有關(guān)資料寄送中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生研究所，并抄送我部，以便修訂時參考。衛(wèi)生部一九八三年一月目錄第一章總則第二章排放標準第三章設(shè)計要求第四章管理要求附錄一醫(yī)院污水、污泥檢驗方法附錄二本標準用詞說明第一章總則第條為貫徹“預(yù)防為主”的衛(wèi)生工作方針和中華人民共和國環(huán)境保護法（試行）。防止醫(yī)院排放帶有病原體的污水污染環(huán)境，危害人體健康，特制訂本標準。第條本標準適用于縣及縣以上綜合醫(yī)院，以及腸道傳染病和結(jié)核病的專科醫(yī)院、療養(yǎng)院、其它有關(guān)的醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)（以下簡稱醫(yī)院）。第條新建、擴建、改建的醫(yī)院，必須按照本標準的規(guī)

4、定，將污水的處理設(shè)施，與主體工程同時設(shè)計、同時施工、同時使用?，F(xiàn)有醫(yī)院應(yīng)積極采取行之有效的措施，限期達到本標準的要求。第二章排放標準第條醫(yī)院污水經(jīng)處理與消毒后，應(yīng)達到下列標準：一、連續(xù)三次各取樣毫升進行檢驗，不得檢出腸道致病菌和結(jié)核桿菌。二、總大腸菌群數(shù)每升不得大于個。第條當采用氯化法消毒時，接觸時間和接觸池出水中的余氯含量，應(yīng)符合表·的要求：第條污水處理構(gòu)筑物中的污泥，必須經(jīng)過無害化處理，污泥排放時應(yīng)達到下列標準：一、蛔蟲卵死亡率大于；二、糞大腸菌值不小于；三、每克污泥（原檢樣中），不得檢出腸道致病菌和結(jié)核桿菌。第條當污泥采用高溫堆肥法進行無害化處理時，堆肥的溫度必須大于，并應(yīng)持續(xù)

5、天以上。第條無上、下水道設(shè)備或集中式污水處理構(gòu)筑物的醫(yī)院，對有傳染性的糞便，必須進行單獨消毒或其它無害化處理。第條醫(yī)院污水經(jīng)處理和消毒后，其所含的污染物質(zhì)與有害物質(zhì)的含量應(yīng)符合現(xiàn)行的有關(guān)標準的要求。第三章設(shè)計要求第條醫(yī)院應(yīng)設(shè)置集中式污水處理構(gòu)筑物。嚴禁采用滲井、滲坑排放污水。第條醫(yī)院職工生活區(qū)和行政區(qū)的污水，應(yīng)與病區(qū)的污水分流。第條醫(yī)院污水處理構(gòu)筑物的位置，宜設(shè)在醫(yī)院建筑物當?shù)叵募咀钚☆l率風向的上風側(cè)，與周圍建筑物之間宜設(shè)綠化防護地帶。第條處理構(gòu)筑物的設(shè)計，應(yīng)滿足下列要求：一、采取防腐蝕、防滲漏措施；二、確保處理效果，安全耐用；三、操作方便，便于消毒和清掏，有利于操作人員的勞動保護。第條氯化法

6、消毒系統(tǒng)的設(shè)計，應(yīng)滿足下列要求：一、備有發(fā)生故障時的應(yīng)急設(shè)施；二、使用液態(tài)氯時，應(yīng)有安全設(shè)施，嚴禁直接以鋼瓶向污水中投加氯氣。第四章管理要求第條醫(yī)院必須對污水、污泥嚴加管理。未經(jīng)消毒或無害化處理，不準任意排放、清掏，用作農(nóng)肥。第條醫(yī)院污水處理設(shè)施應(yīng)定期維修，保證正常運轉(zhuǎn)，當處理設(shè)備發(fā)生故障時，必須采取適當措施，確保污水仍能按標準要求排放。第條醫(yī)院污水處理設(shè)施，應(yīng)配備管理人員和檢驗人員。第條醫(yī)院污水的監(jiān)測，應(yīng)符合下列要求：一、余氯：連續(xù)式消毒，每日至少監(jiān)測二次，間歇式消毒，每次排放之前監(jiān)測；二、總大腸菌群數(shù)：每兩周至少監(jiān)測一次；三、傳染病和結(jié)核病醫(yī)院，應(yīng)根據(jù)需要增測致病菌。第條各級衛(wèi)生防疫部門，

7、應(yīng)對轄區(qū)內(nèi)醫(yī)院的污水、污泥處理情況，進行經(jīng)常性衛(wèi)生監(jiān)督，每年抽查不得少于二次。第條污水、污泥的檢驗方法，應(yīng)符合附錄一的規(guī)定。附錄一醫(yī)院污水、污泥檢驗方法一污水總余氯的測定方法一、原理：采用碘滴定法。用碘標準溶液反滴定（與余氯反應(yīng)后）過量的硫代硫酸鈉標準溶液。二、試劑：、硫代硫酸鈉標準溶液。（）先配制約硫代硫酸鈉溶液稱取約克分析純硫代硫酸鈉（·）溶于煮沸放冷的蒸餾水中，稀釋至毫升，加入克氫氧化鈉或克無水碳酸鈉，儲存于棕色瓶內(nèi)，可保存數(shù)月。（）標定：稱取克干燥的分析純碘酸鉀（）放于毫升錐形瓶內(nèi)，加入毫升蒸餾水，加熱溶解后，加入克碘化鉀和毫升冰醋酸，靜置分鐘，自滴定管加約硫代硫酸鈉溶液，不

8、斷振蕩錐形瓶，直至顏色變?yōu)榈S色；加入毫升淀粉溶液，繼續(xù)用硫代硫酸鈉溶液滴至剛變?yōu)闊o色為止，記錄總用量（如滴定完畢，放置若干時間后，錐形瓶內(nèi)溶液因接觸空氣氧化又顯藍色。可不必再滴定）。（）計算：（）配制硫代硫酸鈉標準溶液：用除去二氧化碳的蒸餾水，將上面標定后的硫代硫酸鈉溶液稀釋。、碘化鉀溶液溶解克分析純碘化鉀于少量新煮沸放冷的蒸餾水中，再稀釋至毫升，盛于棕色帶玻璃塞瓶中，最好冷藏。如發(fā)現(xiàn)溶液顏色變黃，應(yīng)予重配。、醋酸鹽緩沖液稱取克無水醋酸鈉或克三水醋酸鈉于蒸餾水中，加克冰醋酸，用蒸餾水稀釋至毫升。、碘溶液溶解克分析純碘化鉀于毫升蒸餾水中，加入克分析純碘片，不斷攪拌到溶解為止。移入毫升容量瓶中，

9、加水至刻度，混勻，待標定。、亞砷酸鈉標準溶液稱取預(yù)先在干燥器內(nèi)經(jīng)濃硫酸干燥的分析純?nèi)趸椋ǎ┛擞诤辽裏?，加入毫升氫氧化鈉溶液，攪拌使溶解（注意劇毒?。＜欲}酸或硫酸中和過量的氫氧化鈉，直至溶液接近中性為止（采用試紙）。將配好的亞砷酸鈉溶液轉(zhuǎn)入毫升容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。、碘溶液的標定準確量取毫升亞砷酸鈉標準溶液于毫升錐形瓶內(nèi)。用待標定的碘溶液滴定，以淀粉作指示劑，滴至剛顯淡藍色為終點。如能在接近終點時向溶液中通入二氧化碳使之飽和，可得到很準確的滴定終點。、碘標準溶液將克分析純碘化鉀放入毫升容量瓶中，加入少量蒸餾水使之溶解。準確加入標定后的碘標準溶液，用蒸餾水稀釋至刻度。所需加入

10、標定后的碘標準溶液的體積，按下式計算：為了測定更準確，最好每天用亞砷酸鈉標準溶液按上述操作標定一次（預(yù)計用去毫升亞砷酸鈉溶液即可）。此溶液應(yīng)盛于棕色玻璃磨口瓶中，存放時避免陽光直射，不可接觸橡膠制品。、淀粉溶液稱取克可溶性淀粉于毫升燒杯內(nèi)，加少量蒸餾水調(diào)成糊狀，加入剛煮沸的蒸餾水毫升。冷卻后，加入克水楊酸作保存劑。三、步驟：污水水樣中余氯小于毫克燉升時，取毫升污水樣；余氯多時，應(yīng)按比例減少水樣體積。將毫升污水樣加入毫升錐形瓶中。加入毫升硫代硫酸鈉標準溶液，毫升碘化鉀溶液和毫升醋酸鹽緩沖液，使保持在之間。用碘標準溶液滴定，接近終點前，加入毫升淀粉溶液，滴至剛顯淡藍色為終點（混勻后藍色不應(yīng)消失）。

11、把最后滴碘液的體積（約為毫升）從讀數(shù)中減去。毫升污水樣消耗毫升硫代硫酸鈉溶液時，相當于存在毫克燉升余氯，故余氯在毫克/升時，需用毫升試劑；余氯在毫克/升時，應(yīng)加入毫升試劑。污水中余氯更高時，就按比例增加試劑。碘滴定法測得的余氯為總余氯，并按下式計算：二污水總大腸菌群的檢驗方法一、采樣方法用采水器或其他滅菌容器采取污水樣毫升，放入滅菌瓶內(nèi)，如果是經(jīng)加氯處理的污水，需加硫代硫酸鈉毫升中和余氯。二、檢驗方法總大腸菌群系指一群需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌在恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)小時，能使乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣?？偞竽c菌群數(shù)系指每升污水中，所含的總大腸菌群的數(shù)目。（一）初發(fā)酵試驗：以無菌操作將各盛有倍濃縮乳糖

12、蛋白胨培養(yǎng)液毫升的支發(fā)酵管內(nèi)，各接種污水樣毫升，將各盛有單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液約毫升支的發(fā)酵管內(nèi)，各接種污水樣毫升，再將各盛有單料乳糖蛋白臟培養(yǎng)液約毫升的支發(fā)酵管內(nèi)，各接種稀釋的污水樣毫升（相當于原污水樣毫升）。將此支管已接種的發(fā)酵管置于恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)小時。（二）平板分離：經(jīng)培養(yǎng)小時后，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的發(fā)酵管，分別接種于伊紅美蘭培養(yǎng)基或品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上，置恒溫箱培養(yǎng)小時，挑選符合下列特征的菌落，取菌落的一小部分，進行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。伊紅美蘭培養(yǎng)基上的菌落色澤：（）深紫黑色，具有金屬光澤的菌落；（）紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落；（）淡紫紅色、中心色較深的菌落。品紅亞硫酸鈉

13、培養(yǎng)基上的菌落色澤：（）紫紅色，具有金屬光澤的菌落；（）深紅色，不帶或略帶金屬光澤的菌落；（）淡紅色，中心色較深的菌落。（三）復(fù)發(fā)酵試驗：涂片、鏡檢的菌落，如為革蘭氏陰性無芽孢桿菌，則挑取上述典型菌落個接種于一支單料乳糖發(fā)酵管內(nèi)，然后置于恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)小時，產(chǎn)酸產(chǎn)氣者（包括小量產(chǎn)氣）即證實有大腸菌群存在。根據(jù)證實有大腸菌群存在的陽性管數(shù)，查對總大腸菌群近似數(shù)（）檢索表（附表·）即是每升污水中的大腸菌群數(shù)。此表中所列數(shù)值系指毫升水樣中的細菌數(shù)，因此需將表中的數(shù)值再乘、為每毫升水中的細菌數(shù)。舉例：某一污水樣接種毫升的支管中有管為陽性；接種毫升的支管中有管為陽性；接種稀釋水樣毫升（即原污水

14、樣毫升）的支管皆為陰性，即結(jié)果為、，查附表·得知毫升污水中總大腸菌群數(shù)為個，即毫升污水中總大腸菌群數(shù)為×個。三沙門氏菌屬和志賀氏菌屬的檢驗方法甲、污水一、樣品處理水樣毫升，加入滅菌的無水碳酸鈉溶液毫升，混合后，再加入滅菌的硫酸鐵溶液毫升，混合均勻。靜置小時，傾去上清液（沉淀物約為毫升左右）。進行沙門氏菌屬和志賀氏菌屬培養(yǎng)。二、增菌培養(yǎng)沙門氏菌屬：吸取樣品處理后的沉淀物毫升，加于毫升雙料亞硒酸鹽（）增菌液內(nèi)，也可加于亞硒酸鹽甘露醇（）或氯化鎂孔雀綠（）增菌液內(nèi)。置于或恒溫箱；培養(yǎng)小時。志賀氏菌屬：吸取樣品處理后的沉淀物毫升，加于毫升雙料革蘭氏陰性（）增菌液內(nèi)，置于恒溫箱，培養(yǎng)

15、小時。三、平板分離沙門氏菌屬：取上述經(jīng)培養(yǎng)的沙門氏菌用增菌培養(yǎng)液，接種沙門氏菌屬志賀氏菌屬（）平板或?？送幸颍ê喎Q）平板，置于恒溫箱培養(yǎng)小時。也可接種亞硫酸鉍（）平板，置于恒溫箱，培養(yǎng)小時。志賀氏菌屬：取上述經(jīng)培養(yǎng)的志賀氏菌用增菌培養(yǎng)液，接種平板或平板，置于恒溫箱，培養(yǎng)小時。四、挑選菌落沙門氏菌屬：挑取在平板上，呈無色透明或中間有黑心，直徑毫米的菌落；挑取在平板上，呈藍綠色，有或無黑心，直徑毫米的菌落；挑取在平板上，呈黑色，培養(yǎng)基周圍具有金屬光澤的菌落。志賀氏菌屬：挑取在平板上，呈無色透明，直徑毫米的菌落，挑取在平板上，呈綠色的菌落。每個平板最少挑取個以上可疑腸道病原菌菌落，轉(zhuǎn)種三糖鐵或其他鑒

16、別培養(yǎng)基中，置于恒溫箱；培養(yǎng)小時。五、生化試驗及血清學(xué)檢驗沙門氏菌屬：在三糖鐵培養(yǎng)基中，如不發(fā)酵乳糖，葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，一般產(chǎn)生硫化氫。有動力者，先與沙門氏菌群多價血清作玻璃片凝集，凡與多價血清凝集者，再與因子血清凝集，以確定其所屬群別，然后用因子血清，確定血清型。雙相菌株應(yīng)證實兩相的抗原，有抗原的菌型（傷寒和丙型副傷寒沙門氏菌）應(yīng)用因子血清檢查。生化試驗：應(yīng)進行葡萄糖、甘露醇、麥芽糖、乳糖、蔗糖、靛基質(zhì)、硫化氫、動力、尿素試驗。沙門氏菌屬中除傷寒沙門氏菌和雞沙門氏菌不產(chǎn)氣外，通常發(fā)酵葡萄糖、產(chǎn)氣、均發(fā)酵甘露醇和麥芽糖（但豬傷寒沙門氏菌、雛沙門氏菌不發(fā)酵麥芽糖），不分解乳糖、蔗糖，

17、尿素酶和靛基質(zhì)為陰性，通常產(chǎn)生硫代氫。除雞、雛沙門氏菌和傷寒沙門氏菌的型菌株無動力外，通常均有動力。如遇多價血清不凝集而一般生化反應(yīng)符合上述情況時，可加做側(cè)金盞花醇、水楊素和氰化鉀試驗，沙門氏菌均為陰性。志賀氏菌屬：在三糖鐵培養(yǎng)基上，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，無動力，不產(chǎn)生硫化氫，上層斜面乳糖不分解。生化試驗：應(yīng)進行葡萄糖、甘露醇、麥芽糖、乳糖，蔗糖、靛基質(zhì)、硫化氫、動力、尿素試驗。志賀氏菌屬能分解葡萄糖，但不產(chǎn)氣（福氏志賀氏菌型有時產(chǎn)生少量氣體），一般不能分解乳糖及蔗糖，宋內(nèi)氏志賀氏菌對乳糖及蔗糖遲緩發(fā)酵產(chǎn)酸。志賀氏菌屬均不產(chǎn)生硫化氫，不分解尿素，無動力。對甘露醇、麥芽糖的發(fā)酵及靛基質(zhì)的產(chǎn)生，則因菌

18、株不同而異。如遇多價血清玻璃片凝集試驗為陰性，而生化反應(yīng)符合上述情況時，可加做肌醇、水楊素、枸櫞酸鹽、氰化鉀等試驗。志賀氏菌屬均為陰性反應(yīng)。血清學(xué)檢查：志賀氏菌屬分為個群，先與多價血清作玻璃片凝集試驗，如為陽性，再分別與、群血清凝集，并進一步與分型血清做玻璃片凝集，最后確定其血清型。乙、污泥一、樣品處理用滅菌匙稱取污泥克，放入滅菌容器內(nèi)，加入毫升滅菌水，充分混勻制成混懸液。二、增菌培養(yǎng)沙門氏菌屬：吸取上述混懸液毫升，加于毫升雙料亞硒酸鹽（）增菌液內(nèi)，也可加于亞硒酸鹽甘露醇（）或氯化鎂孔雀綠（）增菌液內(nèi)。置于或恒溫箱，培養(yǎng)小時。志賀氏菌屬：吸取上述混懸液毫升，加于雙料革蘭氏陰性（）毫升增菌液內(nèi)。

19、置于恒溫箱，培養(yǎng)小時。三、平板分離、挑選菌落、生化試驗及血清學(xué)檢查均與污水樣品檢驗方法相同。四污泥糞大腸菌值的檢驗方法一、初發(fā)酵試驗：按圖所示將污泥稀釋，分別將污泥樣品接種于裝有毫升乳糖膽鹽培養(yǎng)液的內(nèi)有倒管的試管中。再將已接種的四支試管置于恒溫箱，培養(yǎng)小時。二、平板分離：經(jīng)培養(yǎng)小時后產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的發(fā)酵管，分別劃線接種于伊紅美蘭培養(yǎng)基或品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上。置于恒溫箱培養(yǎng)小時。挑選符合下列特征菌落的一小部分。進行涂片，革蘭氏染色，鏡檢。伊紅美蘭培養(yǎng)基上的菌落色澤；（）深紫黑色，具有金屬光澤的菌落；（）紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落；（）淡紫紅色，中心色較深的菌落；品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上

20、的菌落色澤；（）紫紅色，具有金屬光澤的菌落；（）深紅色，不帶或略帶金屬光澤菌落；（）淡紅色，中心色較深的菌落。三、復(fù)發(fā)酵試驗：上述涂片鏡檢的菌落如為革蘭氏陰性無芽孢桿菌，則挑取該菌落的另一部分再接種于內(nèi)有倒管的乳糖發(fā)酵管中每管可接種分離自同一初發(fā)酵管的最典型的菌落個。置于恒溫箱培養(yǎng)小時。有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者即證實有糞大腸菌群存在。按陽性管數(shù)查糞大腸菌值檢索表（附表）即得出每升（克）糞大腸菌值。例如接種污泥量克發(fā)酵管陽性（），毫升發(fā)酵管陰性（），毫升為陽性（），毫升為陰性（）查附表，當陽性，陰性管數(shù)為時，糞大腸菌值為。五污泥蛔蟲卵的檢驗方法一、污泥樣品的采集：先把泥堆盡量劃為四等份，而后在每份的中間，用

21、鐵鍬或小鏟各采污泥約克。同時，在堆泥的中間也采克，一并放在塑料桶或搪瓷桶中。攪拌均勻，并挑去固體夾雜物，再從中取出克置于塑料袋或其他容器中，帶回實驗室。二、污泥樣品的處理：將現(xiàn)場帶回的樣品，倒于燒杯中，如遇樣品稍干且有結(jié)塊時，可將其倒于搪瓷盤中，再行攪拌，同時用大鑷子，一面攪拌，一面將硬塊夾碎，去掉肉眼能看出的夾雜物，如腐爛的布條、草梗、小石塊等。然后，將樣品裝入廣口瓶中，貼上標簽，標明樣品號碼、醫(yī)院名稱、采樣日期和處理前或處理后的情況等。三、污泥樣品的檢驗上述樣品處理后，應(yīng)立即進行檢驗，不能立即進行檢驗時，可適當加入約毫升福爾馬林溶液或鹽酸溶液，瓶口上放置一個適宜大小的表面皿。然后放于冰箱內(nèi)

22、，以防微生物的繁殖和抑制蛔蟲卵的發(fā)育。水洗從已經(jīng)處理過的克污泥樣品中，稱取克置于毫升錐形量杯中，加水約毫升。用玻璃棒攪拌后靜置之。讓其自然沉淀，經(jīng)小時后，倒去污泥上面的水，另換清水攪拌后，再讓其自然沉淀，經(jīng)半小時后，再倒去上面的水，另加清水，如此反復(fù)進行次，直到污泥上面的水接近無色為止。過濾倒去沉淀上面的清水，用孔燉口寸金屬篩子過濾于另一毫升錐形量杯中，棄去阻留在篩上的泥渣。沉淀分鐘后，倒去沉淀上面的液體、另加清水，如此反復(fù)水洗次，最后倒去上清液，將沉淀物倒入毫升離心管中。經(jīng)轉(zhuǎn)/分離心分鐘后，倒去上清液。離心飄浮管內(nèi)注入飽和食鹽水，經(jīng)用玻璃棒攪勻后，離心分鐘，由于蛔蟲卵比飽和鹽水的比重小，所以

23、管中絕大多數(shù)的蛔蟲卵均浮聚在液面。（注意：加入食鹽水量不得少于沉淀物的倍）。離心沉淀用毛細吸管反復(fù)吸取管中斜面上的浮膜于另一離心管中。加入清水，經(jīng)攪勻后，再行離心，蟲卵比水的比重大，因而下沉于管底。然后小心倒去上清液。培養(yǎng)注入毫升清水于管中，加幾滴福爾馬林溶液，置于恒溫箱中，培養(yǎng)天。在培養(yǎng)過程中，清水不得少于毫升。鏡檢樣品經(jīng)培養(yǎng)天后取出。用毛細吸管吸去上面的清水，余下含蟲卵的沉淀物。在一張干凈的載玻片的中央滴一滴清水。用毛細吸管吸一小滴沉淀物于水中。涂勻后蓋以蓋玻片，在低倍鏡下檢查，必要時，再換以高倍鏡。記錄個以上死、活蟲卵數(shù)。查完一張片子而卵數(shù)不及個時，依同法作第二張涂片檢查。涂片不宜太厚。

24、否則視野模糊不清，影響觀察。一般涂片厚度能以透過涂片尚能辯認報紙上的字跡為宜。而后在適宜的溫度和濕度下。經(jīng)過天的培育。活蛔蟲卵就會逐漸發(fā)育到幼蟲期。而死卵則在同一條件下仍然保持單細胞期或停留于某一發(fā)育階段。故易于區(qū)別。鏡檢時為達到較為快速而明顯地辨認幼蟲起見，可在載玻片上的滴一滴預(yù)先配好避光保存的次氯酸鈉溶液商品名為安替福明（以代替清水作成涂片，置于顯微鏡下觀察，可以看見被包在卵的最外層的蛋白質(zhì)殼逐漸溶解，使卵內(nèi)的幼蟲一目了然。因此亦稱此液為脫殼液。如遇沉淀物中渣子較多卵數(shù)較少時，可以直接注入幾滴此脫殼液于離心管中，與沉淀物混合并攪勻之，而后吸一滴混合液于載玻片上，蓋以蓋玻片，直接鏡檢即可。此

25、時視野格外清晰。在培養(yǎng)第天未查見幼蟲時，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)到天（注意：加過脫殼液的樣品，不能再繼續(xù)培養(yǎng)）。最后，就個以上的死、活蛔蟲卵數(shù)，求出死卵的百分率。如此檢驗的全過程已告結(jié)束，可從冰箱中取出剩余的樣品，處理之。六結(jié)核桿菌的檢驗方法甲、污水一、集菌：根據(jù)檢驗室條件，可以選用濾膜集菌法或離心集菌法。濾膜集菌法：采用經(jīng)煮沸消毒的醋酸纖維膜（孔徑微米）和特制的金屬濾器，安裝嚴密后抽濾，污水樣毫升，根據(jù)懸浮物的多少：一份水樣需更換數(shù)張濾膜，將同一份水樣濾膜集中于小燒杯內(nèi)，用硫酸溶液反復(fù)沖洗，處置分鐘后，收集洗液于離心管中，轉(zhuǎn)分鐘離心，棄去上清液，沉淀物中加毫升滅菌生理鹽水混合均勻后，供接種用。離心集菌法：

26、水樣毫升，分裝于毫升或毫升滅菌離心管中，轉(zhuǎn)分鐘離心，同一份水樣的沉淀物集中于試管內(nèi)，加等量硫酸處理分鐘，供接種用，如體積過大再次離心濃縮后接種。二、接種：上述集菌液全部接種于改良羅氏培養(yǎng)基或接種于小川氏培基上，每支培養(yǎng)管接種毫升。三、培養(yǎng)：置恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)周，周后開始觀察結(jié)果，每周觀察次。分離菌株羅氏培養(yǎng)基上呈淡黃色或無色，粗糙型菌落；作抗酸染色，陽性者作分離傳代。菌型鑒別分離傳代菌株如生長速度在二周以上，則需作菌型鑒別；應(yīng)用耐熱觸酶試驗和傳代培養(yǎng)于培養(yǎng)箱周觀察是否生長，用此兩種方法即可進行初步鑒別。四、致病力試驗?zāi)蜔嵊|酶反應(yīng)陰性，不生長之菌落為可疑結(jié)核桿菌。于小白鼠尾靜脈接種毫克菌量（毫克

27、燉升菌液，每只動物接種毫升）死亡時觀察病變或周后解剖臟器發(fā)現(xiàn)典型結(jié)核病變者可確認為檢出結(jié)核桿菌。其耐熱觸酶試驗方法如下：（一）材料磷酸緩沖液（/）吐溫（）水溶液加等量。（二）方法取菌落毫克分散于毫升磷酸鹽緩沖液中。置水浴中分鐘。冷卻后加吐溫和混合液毫升。（三）結(jié)果發(fā)生氣泡為陽性，分鐘不產(chǎn)生氣泡者為陰性。人型、牛型結(jié)核桿菌，胃分枝桿菌和海魚分枝桿菌為陰性，其它非典型抗酸菌和非致病抗酸菌為陽性。人型、牛型結(jié)核桿菌在培養(yǎng)不生長，胃分枝桿菌和海魚分枝桿菌在培養(yǎng)能生長。乙、污泥一、樣品處理：取污泥克加毫升蒸餾水沖洗、過濾（濾紙漏斗）再經(jīng)玻璃漏斗，孔徑微米和，孔徑微米）抽濾，最后再經(jīng)濾膜（孔徑微米）抽濾。

28、取下濾膜，用硫酸毫升，充分振搖沖洗分鐘。然后，將此酸性菌液以毫升分別接種于改良羅氏培養(yǎng)基或小川式培養(yǎng)基，置于恒溫箱培養(yǎng)周，周后開始觀察結(jié)果，每周觀察二次。二、集菌：濾膜集菌法：取污泥克，加毫升蒸餾水，混搖均勻，成為混懸液。其后的操作步驟同污水。離心集菌法：取上述混懸液，分裝于滅菌離心管中，轉(zhuǎn)燉分，分鐘離心，操作步驟同污水。關(guān)于培養(yǎng)基的制備，接種，培養(yǎng)以及致病力試驗等均與污水的檢驗方法相同。七培養(yǎng)基的制備、乳糖蛋白胨培養(yǎng)液成分：蛋白胨克牛肉膏克乳糖克氯化鈉克溴甲酚紫乙醇溶液毫升蒸餾水毫升制法：（）將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化鈉加熱溶解于毫升蒸餾水中，調(diào)整為。（）加入溴甲酚紫乙醇溶液毫升，充分混勻

29、，分裝于有倒管的試管中。（）置于高壓蒸氣滅菌器中，以滅菌分鐘。（）貯存于冷暗處備用。二、三倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)液按上述“乳糖蛋白胨培養(yǎng)液”濃縮倍配制三、品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基成分：蛋白胨克乳糖克磷酸氫二鉀（）克瓊脂克蒸餾水毫升無水亞硫酸鈉克左右堿性品紅乙醇溶液毫升儲備培養(yǎng)基的制備：（）先將瓊脂加到毫升蒸餾水中，加熱溶解，然后加入磷酸氫二鉀及蛋白胨，混勻使溶解，再以蒸餾水補足至毫升，調(diào)整為。（）趁熱用脫脂棉或絨布過濾，再加入乳糖，混勻后，定量分裝于燒瓶內(nèi)，置于高壓蒸氣滅菌器中，以滅菌分鐘。（）貯存于冷暗處備用。平皿培養(yǎng)基的制備：（）將上法制備的儲備培養(yǎng)基，加熱溶化。（）根據(jù)燒瓶內(nèi)培養(yǎng)基的容量，用滅菌

30、吸管按比例吸取一定量的堿性品紅乙醇溶液，置于滅菌空試管中。（）根據(jù)燒瓶內(nèi)培養(yǎng)基的容量。按比例稱取所需要的無水亞硫酸鈉，置于滅菌空試管內(nèi)，加滅菌水少許，使溶解，再置于水浴中煮沸分鐘。（）用滅菌吸管吸取已滅菌的亞硫酸鈉溶液，滴加于堿性品紅乙醇溶液內(nèi)由深紅色褪成淡粉色為止。（）將此亞硫酸鈉與堿性品紅的混合液全部加于已融化的儲備培養(yǎng)基內(nèi)，并充分混勻（防止產(chǎn)生氣泡）。（）立即將此種培養(yǎng)基適量傾入于已滅菌的空平皿內(nèi)，待其冷卻凝固后置冰箱內(nèi)備用。此種已制成的培養(yǎng)基于冰箱內(nèi)保存亦不宜超過二周。如培養(yǎng)基已由淡紅色變成深紅色，則不能再用。四、伊紅美蘭培養(yǎng)基成分：蛋白胨克乳糖克磷酸氫二鉀克瓊脂克蒸餾水毫升伊紅水溶液

31、毫升美蘭水溶液毫升儲備培養(yǎng)基的制備（）先將瓊脂加至毫升蒸餾水中，加熱溶解，然后加入磷酸氫二鉀及蛋白胨，混勻使溶解，再以蒸餾水補足至毫升，調(diào)正為。（）趁熱用脫脂棉或絨布過濾，再加入乳糖，混勻后定量分裝于燒瓶內(nèi)，置于高壓蒸氣滅菌器內(nèi)，以滅菌分鐘。（）貯存于冷暗處備用。平皿培養(yǎng)基的配制：（）將已制備的培養(yǎng)基加熱融化。（）根據(jù)燒瓶內(nèi)培養(yǎng)基的容量，用滅菌吸管按比例分別取一定量已滅菌的伊紅水溶液及一定量已滅菌的美蘭水溶液加入已融化的儲備瓊脂內(nèi)，并充分混勻（防止產(chǎn)生氣泡）。（）立即將此種培養(yǎng)基適量傾入于已滅菌的空平皿內(nèi)，待其冷卻凝固后，置冰箱內(nèi)備用。五、亞硒酸鹽（）增菌液成分：胰蛋白胨（或多價胨）克磷酸氫二

32、鈉（）克磷酸二氫鈉（）克乳糖克亞硒酸氫鈉克蒸餾水毫升制法：（）除亞硒酸氫鈉外，將以上各成分放于蒸餾水中，加熱溶化。（）再加入亞硒酸氫鈉，待完全溶解后，調(diào)整為。（）分裝于阿諾氏器中滅菌分鐘備用。六、亞硒酸鹽甘露醇（）增菌液成分：亞硒酸氫鈉克磷酸氫二鈉（）克磷酸二氫鈉（）克甘露醇克胰蛋白胨（或多價胨）克蒸餾水毫升制法：與亞硒酸鹽（）增菌液配制方法相同。七、氯化鎂孔雀綠（）增菌液成分：甲液：胰蛋白胨（或多價胨）克氯化鈉克磷酸二氫鉀（）克蒸餾水毫升乙液：氯化鎂（·）克蒸餾水毫升丙液：孔雀綠水溶液制法：用上述配制的甲液毫升，乙液毫升，丙液毫升，混合分裝，分鐘高壓滅菌分鐘。八、革蘭氏陰性（）增菌液成分：胰蛋白陳（或多價胨）克葡萄糖克甘露醇克枸櫞酸鈉克去氧膽酸鈉克磷酸氫二鉀（）克磷酸二氫鉀（）克氯化鈉克蒸餾水毫升制法：（）將以上各成分加入蒸餾水中溶化，用磷酸氫二鉀調(diào)整至，煮沸過濾，高壓滅菌分鐘。（）貯存于冷暗處備用。雙料增菌液配制：除蒸餾水改為毫升外，其他成分不變。九、沙門氏志賀氏菌屬（）瓊脂培養(yǎng)基：十、?？送幸颍ǎ┠c道（簡稱）瓊脂培養(yǎng)基：成分：乳糖克蔗糖克水楊素克膽鹽克氯化鈉克蛋白胨克牛肉膏克瓊脂克蒸餾水毫升溶液制備（）溶液甲：枸櫞酸鐵銨克硫代硫酸鈉克蒸餾水毫升（）溶液