蘆薈組織培養(yǎng)快速繁殖課件

1、蘆薈組織培養(yǎng)快速繁殖蘆薈組織培養(yǎng)快速繁殖09生物制藥生物制藥 范敏范敏婷婷 蘆薈為百合科多年生肉質(zhì)常綠草本植物，葉片含有大量天然蛋白質(zhì)、維生素、蘆薈素、活性酶等以及人體所需的各種微量元素，具有健胃、通便、消炎、抗菌、抗腫瘤等藥理作用。為了實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工廠化生產(chǎn)和快速繁殖的目的，除采取生產(chǎn)上常用的的扦插和依靠接芽與側(cè)株進(jìn)行分株繁殖外，采取組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速繁殖大量?jī)?yōu)良品種的蘆薈苗。愈傷組織培養(yǎng)愈傷組織培養(yǎng) 繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)分化培養(yǎng)分化培養(yǎng)生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)煉苗煉苗移栽移栽 一、取材與消毒。 取盆栽蘆薈植株或大田植株的上端或吸芽，將材料中心部分（生長(zhǎng)點(diǎn)及附近組織）切成小拇指大小，置于自來(lái)水 下沖洗干

2、凈，然后用2%洗潔精或飽和洗衣粉搖動(dòng)5min，倒去洗滌劑后，用自來(lái)水沖洗干凈，然后用90%酒精消毒1min；再用無(wú)菌水沖洗45次，瀝干水。 二、初代培養(yǎng) 在蘆薈的初代培養(yǎng)及誘導(dǎo)側(cè)芽分化的過(guò)程中，以采用成分為MS+BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖3.0%+瓊脂0.7%的培養(yǎng)基效果最為理想。接種后40d，統(tǒng)計(jì)在該培養(yǎng)基上平均每個(gè)外植體誘導(dǎo)側(cè)芽數(shù)為4個(gè)，且側(cè)芽粗壯濃綠。蘆薈快繁的整個(gè)過(guò)程中溫度均可控制在26左右，白天日光燈照明11h左右，光照強(qiáng)度為10001500lx，晚間黑暗。 三、繼代培養(yǎng) 當(dāng)在初代培養(yǎng)基上培養(yǎng)了40d左右時(shí)，側(cè)芽轉(zhuǎn)接 到成分為MS+BA3.0mg/L+NAA0.2

3、mg/L+蔗糖3.0%+瓊脂0.7%的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，25d后，每個(gè)芽周圍又可長(zhǎng)出46個(gè)側(cè)芽。形成芽叢，此時(shí)即可切下來(lái)再進(jìn)行幾代培養(yǎng)。以后每25d可繼代增殖1次。在第一次至第5次繼代增殖過(guò)程中，隨著繼代數(shù)的增加，每個(gè)芽叢平均新增芽數(shù)亦明顯增多。 四、生根培養(yǎng) 蘆薈增殖芽長(zhǎng)到一定高度即可轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，生根培養(yǎng)基采用：KC+IBA2.5mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.7%+活性炭0.3%較適宜。 五、壯苗培養(yǎng) 為了使植株健壯，使之能 在移栽后保證較高的成活率，當(dāng)在生根培養(yǎng)基上形成了完整植株后，即可轉(zhuǎn)接到1/2MS+IBA2.0mg/L+Ac0.3%+蔗糖3%+瓊脂0.7%的壯苗培養(yǎng)基上進(jìn)行壯苗培養(yǎng)。此階段可將光照強(qiáng)度增至2000lx，經(jīng)20d左右培養(yǎng)，平均每個(gè)試管植株長(zhǎng)出45條粗壯的側(cè)根，葉色濃綠。即可煉苗轉(zhuǎn)移。 六、移栽與管理 蘆薈試管苗移栽前應(yīng)將培養(yǎng)瓶搬出培養(yǎng)室，并敞開(kāi)瓶口于普通房間內(nèi)煉苗34d。移栽時(shí)，可先往瓶中加入少量水并搖動(dòng)培養(yǎng)基，然后用鑷子將試管苗輕輕取出，洗凈基部粘附的培養(yǎng)基，然后移栽到沙河中。同時(shí)要注意及時(shí)噴水保濕。移栽初期幼苗有轉(zhuǎn)黃現(xiàn)象，這是因?yàn)槌跗谶m應(yīng)反