CHEETAH高壓制備色譜操作手冊

1、cheetah高壓制備色譜操作手冊 cheetahtm高壓制備色譜操作手冊ver.1.7.2.14天津博納艾杰爾科技有限公司 目 錄1.cheetah高壓制備色譜11.1.cheetah介紹11.2.工作原理11.3.cheetah儀器布局21.4.電路連接22.cheetah高壓制備色譜性能指標(biāo)42.1.環(huán)境要求42.2.電氣要求42.3.性能指標(biāo)53.cheetah 高壓制備色譜儀的安裝63.1.管路連接63.2.電路連接93.3.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備104.cheetah 高壓制備色譜軟件介紹124.1.基本參數(shù)設(shè)置134.2.收集方式174.3.完成194.4.運(yùn)行界面195.cheetah 簡

2、易操作流程346.常見問題列表357.附錄36431. cheetah高壓制備色譜1.1. cheetah介紹cheetah高壓快速純化制備系統(tǒng)采用成熟的工業(yè)部件，全自動的軟件控制，符合化學(xué)操作者的日常習(xí)慣。它具備以下優(yōu)點(diǎn)：l 在200-400nm波長范圍內(nèi)，可以選擇任意波長進(jìn)行檢測。l 可變雙波長系統(tǒng)，選擇目標(biāo)化合物最大吸收波長的同時(shí)，可以再選擇另一波長對雜質(zhì)或第二目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行監(jiān)測。l 采用美國原裝進(jìn)口陶瓷無閥計(jì)量泵。具有壽命長，精度高，免維護(hù)等特點(diǎn)。l x/y軸二維自控定位裝置，可適應(yīng)多種容器收集。l 使用簡單：色譜柱和流動相的更換都非常方便和簡單。l 結(jié)構(gòu)合理：系統(tǒng)采用模塊化功能設(shè)計(jì)和一

3、體化結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，功能完備、工作效率高；重復(fù)投資少。l 全自動高效系統(tǒng)：系統(tǒng)采用了全自動工作方式，實(shí)驗(yàn)人員只需要輸入合適的方法，系統(tǒng)自動實(shí)現(xiàn)從溶劑注入到餾分收集。l 采用了嵌入式工控機(jī)、自主開發(fā)的色譜分析系統(tǒng)；操作直觀方便；數(shù)據(jù)傳輸準(zhǔn)確及時(shí)。l 梯度泵可實(shí)現(xiàn)采用線性、等度或其他用戶設(shè)定的方式來實(shí)現(xiàn)二元洗脫。1.2. 工作原理由泵輸送流動相，通過進(jìn)樣閥上樣，在色譜柱對樣品進(jìn)行分離后，利用檢測器檢測，電腦控制并記錄，收集器根據(jù)設(shè)置的收集方式自動收集各個餾分。圖 1.1 cheetah高壓快速純化制備1.3. cheetah儀器布局該儀器的工業(yè)設(shè)計(jì)結(jié)合了很多同類儀器的設(shè)計(jì)優(yōu)勢。將電路與管路有效隔離，該設(shè)

4、計(jì)的優(yōu)勢在于：l 有效的避免電路與管路交叉，便于組裝和查找問題。l 對電路與管路進(jìn)行隔離，避免因管路造成的電路的腐蝕與短路等，安全性高。圖 1.2 cheetah布局1.4. 電路連接電源插座可承受線路頻率為50到60hz，100-240伏ac±10%的線路電壓。最大耗電量450w。由于電源適用范圍寬，因此您可以不用電壓選擇器。由于電源內(nèi)部裝有自動電子保險(xiǎn)管，因而沒有外接保險(xiǎn)器。電源開可自己控制工控機(jī)及其各部件打開，工控機(jī)可自我控制關(guān)閉電源，但是不可控制總電源開關(guān)。工控機(jī)軟件內(nèi)，可以對檢測器進(jìn)行開關(guān)操作，有關(guān)詳細(xì)信息，請參閱軟件操作。工控機(jī)底端左側(cè)三個信號接口可實(shí)現(xiàn)鼠標(biāo)、鍵盤、usb

5、設(shè)備的連接操作和數(shù)據(jù)輸出。注意：為保證儀器的正常運(yùn)行，請勿在未得博納艾杰爾公司允許的情況下私自更換電源線。圖 1.3 cheetah后視圖-電路連接圖 1.4 cheetah左側(cè)面觀-電路連接客戶可通過ps2標(biāo)準(zhǔn)接口、usb接口與鼠標(biāo)、鍵盤及其usb設(shè)備連接，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)傳輸與操作。2. cheetah高壓制備色譜性能指標(biāo)一個合適的環(huán)境對于保證cheetah中低壓制備色譜的最佳性能非常重要。2.1. 環(huán)境要求l 推薦實(shí)驗(yàn)室溫度為2027，相對濕度80%，溫度變化不超過2。l 室內(nèi)溫度的驟變或氣流直接吹儀器都將影響儀器的穩(wěn)定性。l 工作臺要求：長2.0米、寬1.0米、承重100kg、離墻距離0.3米

6、。l 當(dāng)使用易燃或有毒的溶劑作為流動相時(shí)，房間應(yīng)充分通風(fēng)。l 當(dāng)使用易燃的溶劑時(shí)，嚴(yán)禁室內(nèi)使用明火或其它火源。l 避免將系統(tǒng)安裝在有大量灰塵和腐蝕性氣體的房間內(nèi)，否則將縮短使用壽命并且降低系統(tǒng)性能。l 系統(tǒng)安放在遠(yuǎn)離能產(chǎn)生強(qiáng)磁場的設(shè)備，如電源有電器噪聲，可購買帶有過濾器的電源接頭。2.2. 電氣要求cheetah電源適用范圍很寬，它可以承受這個范圍內(nèi)的任何線路電壓。因此，在儀器后面沒有電壓選擇器。并且由于電源內(nèi)部配備了自動電子保險(xiǎn)管，故沒有外接保險(xiǎn)器。l 單相交流100-240v，( 5%-10%)，50-60hz，有單獨(dú)的良好接地。l 若電壓不穩(wěn)，需配置穩(wěn)壓電源。l 總數(shù)不小于4個扁平三角接

7、線插座。警告 儀器在關(guān)閉時(shí)仍有部分供電l 即使面板上電源開關(guān)關(guān)閉，電源仍然帶電。l 要斷開儀器和線路的連接，請拔掉電源線。警告 請將儀器連接到指定的線路電壓l 如果將設(shè)備連接到比指定電壓高的線路，可能會導(dǎo)致儀器損壞。l 如果將設(shè)備連接到比指定電壓低的線路，可能會導(dǎo)致儀器無法正常運(yùn)行。小心 請確保電源插頭在能夠接觸到的地方l 請?jiān)趦x器電源插座后面要有足夠空間，確保儀器的電源接頭能方便地接觸到并拔出。l 遇到緊急情況時(shí)，請馬上斷開儀器與線路電源的連接。電源線針對cheetah高壓制備色譜，博納艾杰爾公司配備了專用的電源連接線。警告 請使用專用電源線l 沒有接地連接和使用非指定的電源線可能導(dǎo)致漏電或

8、短路。l 切勿操作電源出口未接地的儀器。l 未經(jīng)博納艾杰爾公司許可，不得私自更換電源線。2.3. 性能指標(biāo)泵性能指標(biāo)類型性能指標(biāo)流速范圍1-200 ml/min溶劑輸送方式雙元無閥往復(fù)柱塞泵流量精度< ±1%壓力上限200psi梯度精度 ±1%檢測器性能指標(biāo)類型性能指標(biāo)檢測器類型可變雙波長ccd陣列檢測器光源類型氘燈波長范圍200-400nm基線噪音3×10-3(最大值)基線漂移3×10-3(最大值)光譜帶寬8nm波長精度±1nm主控機(jī)機(jī)性能指標(biāo)類型性能指標(biāo)工控機(jī)類型觸摸屏式處理器1.6ghz內(nèi)存1024mb尺寸12.1英寸 硬盤 160

9、g3. cheetah 高壓制備色譜儀的安裝3.1. 管路連接表 3.1 cheetah右側(cè)面觀管路連接接column in連接柱子下端連接柱子上端column out3.1 檢測器連接管路接solvent a或b放入流動相內(nèi)圖 3.2 流動相a/b管路的連接圖 3.3 廢液管連接示意luer接頭管路的連接圖 3.4 luer接頭連接示意圖3.2. 電路連接將隨機(jī)配送電源插入檢測器后視圖中電源插槽內(nèi)，另一頭與電源連接。警告 儀器經(jīng)過運(yùn)輸搬動后，切勿直接連接電源后開機(jī)l 請確保儀器放置平穩(wěn)。l 請將收集器收集滴頭手動移動到下圖中所示位置，即收集器中間。圖 3.5 首次開機(jī)收集器初始位置 注意 儀

10、器開機(jī)l 電源開關(guān)打開，開關(guān)處電源指示燈（與開關(guān)合二為一）亮起，儀器各部件會自動全打開。注意 儀器關(guān)機(jī)l 儀器關(guān)機(jī)順序：儀器停機(jī)關(guān)閉使用中的軟件關(guān)閉工控機(jī)關(guān)閉電源開關(guān)。l 切勿直接關(guān)閉電源開關(guān)，以免文件數(shù)據(jù)丟失。3.3. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備3.3.1. 管路中氣泡的排除儀器安裝后，由于管路中存在大量空氣，影響儀器正常運(yùn)行，會導(dǎo)致流速不準(zhǔn)，因此儀器在正常使用與實(shí)驗(yàn)前，需要進(jìn)行氣泡的排除。流動相：純凈水流速：70ml/min收集方式：manual注意：其余參數(shù)不用修改luer接頭上下兩端對接，按照如下程序運(yùn)行系統(tǒng)。b%startendduration1100100120013.3.2. 管路內(nèi)原溶劑的排除

11、將a/b兩管路放入分析純（ar）異丙醇中，運(yùn)行泵，使得總流量大于400ml，即管路中a/b管路溶劑運(yùn)行之和大于400ml，每個管路最小運(yùn)行不低于200ml。3.3.3. 溶劑系統(tǒng)更替a/b兩管路均放入即將運(yùn)行的兩相溶劑中的b相，運(yùn)行泵，使得泵運(yùn)行總流量大于600ml，即a/b兩管路運(yùn)行溶劑之和大于600ml，a、b每個管路最低運(yùn)行體積不低于300ml。3.3.4. 系統(tǒng)中強(qiáng)系統(tǒng)性溶劑去除設(shè)置程序?yàn)樯V分離中的潤柱程序，儀器按照潤柱程序（未接色譜柱）運(yùn)行總?cè)軇?00ml，即可。由此完成溶劑系統(tǒng)的更換，可進(jìn)行分離。例：目前儀器剛采用反相c18柱對目標(biāo)化合物進(jìn)行分離，采用的溶劑是甲醇-水，接下來的實(shí)

12、驗(yàn)需要采用正相硅膠柱分離另一目標(biāo)化合物，徐采用的溶劑是石油醚-乙酸乙酯，請更換系統(tǒng)。1. 取下c18色譜柱，將luer接頭上下連接起來。把a(bǔ)、b管路分別放在500ml分析純的異丙醇溶劑中，設(shè)置流速為30ml，b%為5050運(yùn)行20min。2. 運(yùn)行上述結(jié)束后，將a、b管路均放入乙酸乙酯中，依照上述設(shè)置（流速30ml，流速為30ml，b%為5050運(yùn)行20min），運(yùn)行。步驟二運(yùn)行自動結(jié)束后，取出a管路放入石油醚中，設(shè)置流速30ml，b%為00運(yùn)行10min，即可。注意照上述例子更換完溶劑系統(tǒng)后，運(yùn)行cheetah標(biāo)準(zhǔn)品程序，待標(biāo)準(zhǔn)品運(yùn)行完畢，一切正常后，儀器方可驗(yàn)收，正常使用。4. cheet

13、ah 高壓制備色譜軟件介紹點(diǎn)擊桌面圖標(biāo)，運(yùn)行軟件。首先出現(xiàn)的是軟件啟動畫面：圖 4.1 軟件啟動畫面隨后進(jìn)入軟件，出現(xiàn)方法建立界面。圖 4.2 方法建立界面4.1. 基本參數(shù)設(shè)置可以設(shè)置樣品名（sample name）、用戶名（user name）、溶劑a（solvent a）、溶劑b（solvent b）、洗脫流速（flow rate）、壓力上限（max pressure）、運(yùn)行單位（run unit）、初始廢液體積（initial waste）、收集規(guī)格或試管架類型（rack type）、單個試管收集體積（fraction size）、初始試管（start tube）、柱體積（column

14、 volume）、收集波長（collection wavelength）和監(jiān)測波長（monitor wavelength）樣品名溶劑a洗脫流速壓力上限檢測波長監(jiān)測波長初始浪費(fèi)用戶名溶劑b運(yùn)行單位試管架規(guī)格收集體積初始試管柱體積圖 4.3 參數(shù)設(shè)置4.1.1. 樣品名（sample name）、用戶名（user name）單擊sample name、user name 彈出對話框。如圖4.4本儀器為觸摸屏操作，請使用觸摸筆，輸入用戶名及樣品名。 功能鍵說明：刪除鍵：<-取消鍵：cancel清除鍵：clear確認(rèn)鍵：ok圖 4.4 觸摸鍵盤注：用戶名及樣品名最多輸入12個字符，超出范圍系統(tǒng)會

15、給予提示。4.1.2. 溶劑a、溶劑b單擊solvent a、solvent b，出現(xiàn)下拉菜單。如圖4.5圖 4.5 溶劑選擇下拉菜單上圖中為流動相（solvent b）的內(nèi)容，為客戶提供了12種常用溶劑，用戶想更改為n-hexane只需要單擊n-hexane即可。其他幾行操作與該行相同。4.1.3. 洗脫流速本系統(tǒng)支持流速范圍為1100 ml/min。根據(jù)所選硅膠柱子的規(guī)格來確定選擇流速。常見flash色譜柱流速見附錄1.。例如40 g的柱子建議流速為40 ml/min。右圖為觸摸鍵盤，用戶可以設(shè)置實(shí)驗(yàn)所需要的流速。如圖4.6. 圖 4.6 觸摸數(shù)字鍵盤當(dāng)流速設(shè)置的范圍超出允許范圍時(shí)，系統(tǒng)會

16、給出提示。如果設(shè)置值高于最大流速，則會將流速設(shè)置為最大流速；如果設(shè)置值低于最小流速，則會將流速設(shè)置為最小流速。圖 4.7 流速超范圍提示4.1.4. 壓力上限設(shè)置（max pressure）單擊輸入框，彈出觸摸數(shù)字鍵盤，輸入限制的壓力。本儀器提供最大耐壓100psi，約0.7mpa。在使用過程高壓力超過上限值，系統(tǒng)會暫停工作，用戶檢查超壓原因，排除后，繼續(xù)運(yùn)行即可。圖 4.8 超壓警告4.1.5. 運(yùn)行單位（run unit）分鐘（min）、柱體積（cv）在gradient中duration值和windows窗口start、end的具體含義由運(yùn)行單位決定。例如：運(yùn)行單位為分鐘且duration

17、為10，則系統(tǒng)運(yùn)行10分鐘；若運(yùn)行單位為柱體積（cv）則系統(tǒng)運(yùn)行10個柱體積。單擊run unit 選擇運(yùn)行單位。4.1.6. 試管規(guī)格（rack type）提供四種類型的試管架和一種類型的燒瓶架。當(dāng)單擊該鈕的向下箭頭時(shí)可以彈出所有的試管架類型，用戶可單擊選擇。如下圖所示：其中f1-13 mm 12x4 的含義是：13 mm的試管架，12列4行。fs-100 ml 4x3為100 ml 圓底燒瓶架。4.1.7. 收集體積（fraction size）該值是每個試管收集的容量，因?yàn)槊糠N試管的容積是一定的所以每種試管的收集體積是由上限的。當(dāng)用戶輸入值超過試管收集體積上限值時(shí)，系統(tǒng)自動將其設(shè)置為試管

18、上限值。不同規(guī)格試管最大收集體積如表4.1。試管架規(guī)格收集體積（ml）試管數(shù)目試管高度（mm）備注f1-13mm 12*42-896200f2-15mm 12*42-2096200f3-18mm 11*42-3088200f4-25mm 10*32-6060200f5-100mm 4*32-10012燒瓶4.1.8. 柱體積（column volume）該項(xiàng)只有在運(yùn)行單位選擇為柱體積時(shí)才有效，如果不選為柱體積則該項(xiàng)不可使用。如果運(yùn)行單位選擇為柱體積則可以根據(jù)當(dāng)前flash柱的柱體積，在column volume可以輸入柱體積的具體值。常見flash cv值見附錄14.1.9. 起始收集試管位置

19、（start tube）該項(xiàng)功能可以設(shè)置試管的起始收集位置，默認(rèn)為第一個試管。方便用戶的使用，并根據(jù)試管架的具體情況來確定起始位置。不同規(guī)格試管架對應(yīng)試管數(shù)目不同，超出試管范圍系統(tǒng)會自動提示，以15mm試管架為例（如下圖）。圖 4.9 試管編號超限報(bào)警4.1.10. 初始廢液體積（initial waste）由電磁切換閥到試管有一段管路，其中存在上次試驗(yàn)的殘留。所以該體積會影響當(dāng)前試驗(yàn)的結(jié)果。系統(tǒng)會將該體積放入試管架的起始試管內(nèi)，作為廢液處理。所以起始試管為初始浪費(fèi)。該體積可設(shè)定范圍是0-10 ml。用戶可以通過觸摸鍵盤設(shè)置初始浪費(fèi)體積。設(shè)置超過范圍，系統(tǒng)會給提示。4.1.11. 檢測波長（d

20、etection）、監(jiān)測波長（monitor）可變波長（200-400 nm）可調(diào)。用戶點(diǎn)擊detection、monitor，彈出數(shù)字鍵盤（圖4.3），輸入波長。設(shè)置值超過波長范圍，系統(tǒng)會給提示。圖 4.10 超出波長設(shè)置范圍提示窗口4.2. 收集方式全收集（all）、峰收集（peak）、手動收集（manual）和窗口收集（windows）每一個試驗(yàn)只能選擇一種收集方式，當(dāng)該方式選定后不可以在試驗(yàn)中途切換收集方式。4.2.1. 全收集（all）從實(shí)驗(yàn)開始所有的淋出溶劑全部收集。4.2.2. 峰收集（peak）分為閾值收集（threshold）和斜率收集（slope）。注：threshold（

21、au）范圍是0.01-3au,超出范圍系統(tǒng)會給予提示。slope斜率收集為一種特定的閾值收集。系統(tǒng)軟件在采集數(shù)據(jù)時(shí)，即對檢測信號的采集，系統(tǒng)智能跟蹤檢測信號隨時(shí)間的變化。當(dāng)色譜峰出現(xiàn)時(shí)，信號隨時(shí)間的變化出現(xiàn)拐點(diǎn)或峰閾值。用戶通過設(shè)定斜率而判斷色譜峰的出現(xiàn)并進(jìn)行收集。此功能通常被用于對待分物質(zhì)的高純度收集。斜率越大，峰閾值越高，收集的組分純度越高。4.2.3. 手動收集（manual）用戶手動收集餾分。不再對液體的體積進(jìn)行計(jì)量?？梢酝ㄟ^system界面的強(qiáng)制收集按鈕（force collect）和強(qiáng)制浪費(fèi)按鈕（force waste）來手動操作。4.2.4. 窗口收集（windows）窗口收集可

22、以通過添加（add）、插入（insert）、刪除（del）編輯需要收集的時(shí)間段。start以及end表示的數(shù)值代表運(yùn)行單位數(shù)。例如：運(yùn)行單位為cv，step 2 就代表收集第二個cv-第240個cv。au代表這個這個階段需要收集峰吸收值，如果為0，則代表這個時(shí)間段全收集。4.3. 完成編輯完成后，可以點(diǎn)擊”ok”，退出界面，進(jìn)入梯度設(shè)置和運(yùn)行界面。4.4. 運(yùn)行界面編輯完參數(shù)后，進(jìn)入設(shè)置梯度和運(yùn)行界面。如下圖：圖 4.11 運(yùn)行界面運(yùn)行界面包括：菜單欄、譜圖顯示區(qū)域、譜圖處理區(qū)域、梯度修改區(qū)域、修改參數(shù)區(qū)域、操作區(qū)、狀態(tài)欄。4.4.1. 菜單欄包括：文件（file）、方法（method）、工具

23、（tools）、幫助（help）和關(guān)于（about）。4.4.1.1. 文件（file） 說明：open 打開儲存方法/數(shù)據(jù)auto save information 自動儲存save 手動儲存report 輸出報(bào)告圖 4.12 文件菜單auto save information：設(shè)置默認(rèn)保存目錄（如下圖），設(shè)置完成后，實(shí)驗(yàn)信息會自動儲存到目錄中，默認(rèn)保存的名字為：use name + sample name+日期圖 4.13 自動保存位置設(shè)置save 手動保存：可以保存電腦任意目錄下面。圖 4.14 手動保存report 輸出報(bào)告：本儀器輸出報(bào)告格式為pdf文檔，進(jìn)度條完成后，會自動打開報(bào)告

24、文檔。圖 4.15 輸出報(bào)告進(jìn)度條4.4.1.2. 方法（method）在運(yùn)行關(guān)閉的情況下，回到方法編輯界面。4.4.1.3. 工具（tools） 功能說明：lamp on-off 氘燈控制pump test 泵調(diào)試xy test 收集器坐標(biāo)調(diào)試add solvent 添加溶劑名圖 4.16 工具菜單lamp on-off:氘燈控制，軟件啟動前氘燈關(guān)閉，軟件打開后氘燈自動打開，軟件關(guān)閉后氘燈自動關(guān)閉，用戶也可以通過氘燈控制程序（下圖），在軟件開啟狀體關(guān)閉氘燈。軟件狀態(tài)欄會顯示氘燈關(guān)閉和開啟狀態(tài)。圖 4.17 氘燈控制界面pump test:可以單獨(dú)控制泵系統(tǒng)，用來沖洗色譜柱，調(diào)解泵流速。圖 4

25、.18 泵測試界面功能描述：flow rate： 設(shè)置流速start garads： 起始梯度end grads： 終止梯度run time： 運(yùn)行時(shí)間the max press： 最大壓力time： 當(dāng)前運(yùn)行時(shí)間current press： 當(dāng)前壓力start： 開始stop： 停止exit： 退出xy test：首先按附圖5-1所示，放置試管架位置。附圖5-1試管架俯視圖1、 點(diǎn)擊軟件界面上“tool”“xy test”2、 單擊“single step”如圖附圖5-2所示：分別點(diǎn)擊“l(fā)ine position”和“column position”下的輸入框，輸入“行位置”“列位置”數(shù)據(jù)，

26、點(diǎn)擊“run”，此時(shí)收集器會運(yùn)行到當(dāng)前設(shè)置的坐標(biāo)位置。反復(fù)修改“l(fā)ine position”和“column position”的值，直到確定運(yùn)行到第一根試管中心位置方可，記錄下此時(shí)“l(fā)ine position”和“column position”的值。注：可以先輸入如圖數(shù)值，再根據(jù)誤差調(diào)整。運(yùn)行過程中輸入數(shù)據(jù)后儀器停止運(yùn)行為正?，F(xiàn)象，此為數(shù)據(jù)超出坐標(biāo)范圍保護(hù)。附圖5-2 單步運(yùn)行3、 切換到continuous標(biāo)簽頁，在racktype右側(cè)下拉菜單選擇試管架型號，然后在line no.下輸入試管架行數(shù)，在column no.下輸入試管架列數(shù)，如圖5-3中，選擇試管架型號為“f3-18mm 1

27、1×4”，默認(rèn)兩副試管架為一組，所以在“l(fā)ine no.”下輸入“8”，在“column no.”下輸入“11”。然后將上一步中記錄的“l(fā)ine position”的值填入“l(fā)ine initial position”下的輸入框中，將“column position”的值填入“l(fā)ine initial position”。附圖5-3 連續(xù)運(yùn)行4、 重復(fù)第2步，確定與第一根試管對角的試管（在f3-18試管架中是34號試管）的坐標(biāo)位置，然后根據(jù)與第一根試管（1號）對應(yīng)x/y軸坐標(biāo)的距離以及相隔試管的數(shù)量，分別算出“l(fā)ine spacing”和“column spacing”的值。注：在f

28、3-18試管架中，應(yīng)該將1號試管的“l(fā)ine position”值減去34號試管的“l(fā)ine position”值5、 重復(fù)第2步，確定第二副試管架與第一副試管架之間的距離，填入“rack spacing of lines”。各數(shù)據(jù)含義如下如下：行數(shù)8列數(shù)11行初始行位置“單步運(yùn)行”時(shí)記錄的行位置數(shù)據(jù)列初始列位置“單步運(yùn)行”時(shí)記錄的列位置數(shù)據(jù)行間距每行之間的距離列間距每列之間的距離四到五行間距由于兩個試管架之間有空隙，故四五行間距需另外設(shè)置起始試管位置根據(jù)用戶使用試管位置設(shè)定六七行微調(diào)依實(shí)際情況進(jìn)行微調(diào)注：出廠前，均按照本公司試管架設(shè)置坐標(biāo)，且坐標(biāo)均為設(shè)置準(zhǔn)確，如果用戶自行更改試管架，請認(rèn)真理

29、解xy test軟件使用方法后再進(jìn)行調(diào)整。add solvent：溶劑名添加/刪除功能，點(diǎn)擊該功能后，出現(xiàn)如下窗口。圖 4.19溶劑名添加/刪除功能在name一欄中輸入要添加的溶劑名，然后點(diǎn)擊add按鈕，則可以將輸入的溶劑名添加入可選溶劑列表。點(diǎn)擊solvent后面的菜單，選擇已有的溶劑名，然后點(diǎn)擊del按鈕，則可將當(dāng)前選中的溶劑從列表中刪除。4.4.1.4. 幫助（help）點(diǎn)擊“help”，會彈出一個cheetah操作手冊。4.4.1.5. 關(guān)于（about）點(diǎn)擊“about”，會彈出軟件的版本信息。圖 4.20 軟件版本信息4.4.2. 譜圖顯示區(qū)域縱坐標(biāo)：吸收值（au）、b%橫坐標(biāo)：運(yùn)

30、行單位（min/cv）譜圖：紅色-檢測波長、收集波長藍(lán)色-監(jiān)測波長綠色-梯度圖 4.21 圖譜顯示區(qū)域在進(jìn)行收集的時(shí)候，會有4ml體積左右的延遲，減少從檢測器到收集器間的管路體積對收集結(jié)果的影響。4.4.3. 譜圖處理區(qū)域 處理譜圖-放大、縮小、拖動等查詢單一試管收集組分修改梯度確認(rèn)修改梯度圖 4.22圖譜處理4.4.3.1. 譜圖顯示操作按鈕單擊按鈕可以彈出該界面： 其中有六種功能，根據(jù)用戶的要求操作圖譜。分別是圖譜矩形放大、圖譜橫向放大、圖譜縱向放大、圖譜恢復(fù)原狀、圖譜整體放大和圖譜整體縮小。圖譜矩形放大 單擊按鈕，然后在圖譜顯示區(qū)上點(diǎn)擊拉劃一個矩形區(qū)域即可，該矩形區(qū)域可按比例放大。圖譜橫

31、向放大 單擊按鈕，然后在圖譜顯示區(qū)上左右拉劃其縱坐標(biāo)不變，該區(qū)域可按比例放大。圖譜縱向放大 單擊按鈕，然后在圖譜顯示區(qū)上上下拉劃其橫坐標(biāo)不變，該區(qū)域可按比例放大。圖譜恢復(fù)原狀 單擊按鈕可以使圖譜恢復(fù)到系統(tǒng)默認(rèn)狀態(tài)。圖譜整體放大單擊按鈕可以使圖譜按比例整體放大。圖譜整體縮小單擊按鈕可以使圖譜按比例整體縮小。圖譜拖動按鈕 單擊按鈕，用戶可以隨意拖動圖譜，便于用戶觀察和使用。狀態(tài)取消按鈕 由于用戶在對圖譜操作時(shí)，不同的操作使圖譜保留了相應(yīng)的狀態(tài)。此按鈕將清除該狀態(tài)，以免當(dāng)鼠標(biāo)移動到圖譜顯示區(qū)時(shí)產(chǎn)生誤操作。4.4.3.2. 圖譜組分與其試管位置的對應(yīng)顯示 在圖譜顯示區(qū)單擊峰的某個區(qū)域時(shí)，可以查看該區(qū)域

32、所對應(yīng)的試管是哪一只。此時(shí)在中可顯示該試管的具體位置。因?yàn)樵嚬芗艽蛴形恢脴?biāo)號，所以用戶可根據(jù)tube號直觀的找到試管架上對應(yīng)的試管。試管顯示區(qū)域也可以顯示對應(yīng)的試管位置，當(dāng)前顯示紅色，如下圖： 圖 4.23試管號 18；紅色試管位置；譜圖中粉紅色線區(qū)域一一對應(yīng)。4.4.3.3. 修改梯度 (change grads) 在暫停情況下，點(diǎn)change grads 按鈕，可以隨意修改梯度。修改完成后選擇ok。在運(yùn)行界面左下角grads可以顯示修改后的梯度具體值。也可以grads界面修改梯度。如圖：功能鍵說明：雙擊選中梯度；通過觸摸鍵盤修改梯度add： 添加梯度insert： 插入梯度del： 刪除選

33、中梯度圖 4.24 梯度修改 例如：梯度第二行代表：起始b%濃度為0, 結(jié)束濃度為100%；持續(xù)時(shí)間（duration）10min。注：如果方法界面運(yùn)行單位為cv，則表示持續(xù)10個cv。4.4.4. 操作區(qū)rack1 試管架parameter 參數(shù)設(shè)置grads 梯度tlc 自動生成梯度 uv zero 歸零鍵force collect 強(qiáng)制收集force waste 強(qiáng)制浪費(fèi)next tube 下一試管equilibrate 潤柱run gradient 運(yùn)行梯度pause 暫停start 開始圖 4.25 操作區(qū)4.4.4.1. rack本儀器提供4種規(guī)格試管架以及1種規(guī)格燒瓶，rack1

34、代表第一排列試管架，最多可以運(yùn)行2排列試管架。4.4.4.2. parameter運(yùn)行參數(shù)，包括流速、檢測波長、監(jiān)測波長。其中流速可以在線修改。本系統(tǒng)支持流速范圍為5100 ml/min。超出流速范圍，系統(tǒng)給予提示。如下圖：extend time ：延長梯度，延長時(shí)間為5min， 可多次點(diǎn)擊。flow rate（ml/min）：洗脫流速，可以在線修改。4.4.4.3. grads 梯度梯度顯示，在線修改梯度，詳情見4.3.3.3。4.4.4.4. tlc自動轉(zhuǎn)化梯度選擇柱子規(guī)格、流動相a與流動相b的比例后，點(diǎn)擊ok按鈕可在界面中自動生成洗脫梯度，用戶可以根據(jù)需要對梯度進(jìn)行添加和刪除。通過觸摸鍵

35、盤可以改變流動相的比例數(shù)值。注意：初始界面為a-0 ；b-0 。 輸出a、b值時(shí)，需要滿足a >=b.4.4.4.5. uv zero該按鈕為軟件基線回零按鈕，在潤柱過程中由于基線可能不平穩(wěn)。通過操作該按鈕使基線回到零，以保證試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。該按鈕在潤柱和運(yùn)行過程中都起作用，如果在運(yùn)行過程中，出現(xiàn)基線漂移，可以通過該功能回零，運(yùn)行過程回零需要確認(rèn)后回零。4.4.4.6. 強(qiáng)制收集（force collect）force collect 為強(qiáng)制收集按鈕。在特殊的情況下，用可能需要對組分進(jìn)行強(qiáng)制收集。此按鈕分為兩種狀態(tài)：按下和彈起。按下該按鈕則收集器開始強(qiáng)制收集，當(dāng)達(dá)到試管設(shè)定收集體積時(shí)，自動

36、切換到下一個試管收集。在按一下則按鈕恢復(fù)到彈起狀態(tài)，系統(tǒng)按原來收集方式進(jìn)行。該按鈕可以和force waste 按鈕協(xié)同工作，當(dāng)force collect 為按下狀態(tài)時(shí)force waste一定為彈起狀態(tài)。按鈕force collect和按鈕force waste可以同時(shí)為彈起狀態(tài)，但一定不能同時(shí)按下。即收集器不可能在同一時(shí)間內(nèi)又收集又浪費(fèi)。如果force collect如果在method界面設(shè)置收集方式為manual時(shí)只能通過該按鈕和force waste按鈕相互協(xié)調(diào)收集餾分。在潤柱程序運(yùn)行時(shí)該按鈕不可用。4.4.4.7. 強(qiáng)制浪費(fèi)（force waste ）強(qiáng)制浪費(fèi)按鈕，此按鈕分為兩種狀態(tài)

37、：按下和彈起。按下該按鈕則收集器開始強(qiáng)制浪費(fèi)，在按一下則按鈕恢復(fù)到彈起狀態(tài)，系統(tǒng)按原來收集方式進(jìn)行。該按鈕可以和force collect 按鈕協(xié)同工作，當(dāng)force waste 為按下狀態(tài)時(shí)force collect一定為彈起狀態(tài)。按鈕force collect和按鈕force waste可以同時(shí)為彈起狀態(tài)，但一定不能同時(shí)按下。即收集器不可能在同一時(shí)間內(nèi)又收集又浪費(fèi)。如果在method界面設(shè)置收集方式為manual時(shí)只能通過該按鈕和force collect按鈕相互協(xié)調(diào)收集餾分。在潤柱程序運(yùn)行時(shí)該按鈕不可用。4.4.4.8. next tube在實(shí)驗(yàn)過程中，用戶可以通過單擊該按鈕使收集器到當(dāng)

38、前試管的下一個試管開始收集4.4.4.9. 潤柱（equilibrate）潤柱按鈕，該按鈕為啟動潤柱程序的按鈕。純化方法的開始，通常先潤柱。點(diǎn)擊該按鈕便調(diào)用梯度表中的第一行梯度進(jìn)行潤柱。在此過程中用戶可以通檢測器和軟件的uv zero 功能使基線平穩(wěn)。用戶觀察基線已經(jīng)平穩(wěn)而潤柱還沒結(jié)束，可以單擊該按鈕停止?jié)欀?。潤柱結(jié)束后，若基線還不平穩(wěn)，可以重新點(diǎn)擊equilibrate按鈕重新潤柱。當(dāng)潤柱結(jié)束后run gradient按鈕被激活，可以進(jìn)行下一步操作。4.4.4.10. 運(yùn)行梯度（run gradient）運(yùn)行梯度，系統(tǒng)會提示add sample。4.4.4.11. 暫停（pause）點(diǎn)擊暫停

39、后，用戶可以修改梯度、流速等試驗(yàn)參數(shù)。然后點(diǎn)go 繼續(xù)運(yùn)行4.4.5. 狀態(tài)欄 b% ： 溶劑b百分比 detection（au）：吸收值lamp： 氘燈狀態(tài)pressure：當(dāng)前系統(tǒng)壓力，單位是psi，time：運(yùn)行時(shí)間5. cheetah 簡易操作流程6. 常見問題列表現(xiàn)象原因處理峰展寬保留時(shí)間過長使用更強(qiáng)流動相，提高流速上樣量過大減少上樣量樣品超載化合物流出太早使用大柱子，減少上樣體積，或稀釋樣品雙峰干擾峰進(jìn)樣前提高樣品純度，改變流動相前面運(yùn)行化合物的干擾延長運(yùn)行時(shí)間，結(jié)束運(yùn)行時(shí)提高b相比例，加長柱子平衡時(shí)間柱裝填不好更換柱子和降低流動相溶劑強(qiáng)度柱超載使用大容量柱子或減少樣品量上樣溶劑太

40、強(qiáng)使用較弱溶劑制備樣品，然后調(diào)整流動相溶劑強(qiáng)度樣品和流動相不相容使用易溶解的溶劑基線漂移柱污染使用強(qiáng)溶劑沖洗柱子，更換柱子系統(tǒng)泄漏停止和維修流動相有紫外吸收更換流動相7. 附錄 size 4g12g20g40g80g120g330gsample load cv=10.01-0.02g0.03-0.06g0.05-0.1g0.1-0.2g0.2-0.4g0.3-0.6g0.75-1.5gsample load cv=20.02-0.08g0.06-0.24g0.1-0.4g0.2-0.8g0.4-1.6g0.6-2.4g1.5-6.0gsample load cv=60.08-0.4g0.24-

41、1.2g0.4-2.0g0.8g-4.0g1.6-8.0g2.4-12.0g6.0-33.0gcolumn volume (ml)8244080160240600flow rate min(ml/min)581020253550flow rate max(ml/min)182025405080100pressure (psi)180 psi maximumlength (cm)7.09.011.014.021.023.523.5diameter 1.52.12.63.13.24.15.7l/d ratio4.74.34.24.56.65.74.1附錄一 flash柱參考附錄二 壓力換算psia

42、tmkgf/cm2kpabarmpa1psi=10.0680.076.90.070.0071atm=14.711.031011.010.1011kgf/cm2=14.20.9681980.980.0981kpa=0.1450.010.0110.010.0011bar=14.50.9871.0210010.11mpa=1459.86910.21000101附錄三 篩目-微米對照表篩目微米140106170902007523063270533254540038450325002860023700208001810001312501016708.520006.550002.580001.5附錄四 常

43、用溶劑性質(zhì)一覽表化合物名稱極性粘度cp20沸點(diǎn)uv截止波長（nm）i-pentane異戊烷0-30-n-pentane正戊烷00.2336210petroleum ether石油醚0.010.33060210hexane己烷0.060.3369210cyclohexane環(huán)己烷0.1181210isooctane異辛烷0.10.5399210trifluoroacetic acid三氟乙酸0.1-72-trimethylpentane三甲基戊烷0.10.4799215cyclopentane環(huán)戊烷0.20.4749210n-heptane庚烷0.20.4198200butyl chloride丁基氯; 丁酰氯10.4678220trichloroethylene三氯乙烯; 乙炔化三氯10.5787273carbon tetrachloride四氯化碳1.60.9777265trichlorotrifluoroethane三氯三氟代乙烷1.90.7148231i-propyl ether丙基醚; 丙醚2.40.3768220toluene甲苯2.40.59111285p-xy