優(yōu)《血紅蛋白的提取和分離》ppt課件

1、 體驗從復(fù)雜體系中提取生物大分子的根本過程和方法，并體驗從復(fù)雜體系中提取生物大分子的根本過程和方法，并了解色譜法、電泳法等分別生物大分子的根本原理。了解色譜法、電泳法等分別生物大分子的根本原理。1 1、主要概念：凝膠色譜法、主要概念：凝膠色譜法 電泳法電泳法 緩沖溶液緩沖溶液 它們在血它們在血紅蛋白的提取中分別起到什么作用。紅蛋白的提取中分別起到什么作用。 主要原理：主要原理： 凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的原理凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的原理 電泳法分別樣品的原理電泳法分別樣品的原理 緩沖溶液的組成和作用機理緩沖溶液的組成和作用機理1. 1.分別生物大分子的根本思緒：分別生物大分子的根本思緒： 選用一定的

2、物理或化學(xué)的方法分別具有不同物選用一定的物理或化學(xué)的方法分別具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。2. 2.蛋白質(zhì)分別和提取的原理：蛋白質(zhì)分別和提取的原理： 根據(jù)蛋白質(zhì)各種特性的差別，如分子的外形和根據(jù)蛋白質(zhì)各種特性的差別，如分子的外形和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力等等，可以用來分別不同種和對其他分子的親和力等等，可以用來分別不同種類的蛋白質(zhì)。類的蛋白質(zhì)。 一、血紅蛋白的提取和分別一、血紅蛋白的提取和分別3 3、提取分別方法、提取分別方法凝膠色譜法凝膠色譜法 凝膠電泳法凝膠電泳法 一一 凝膠

3、色譜法分配色譜法凝膠色譜法分配色譜法2. 2.凝膠：凝膠： 大多數(shù)凝膠是由多糖類化合物如葡聚糖或瓊大多數(shù)凝膠是由多糖類化合物如葡聚糖或瓊脂糖構(gòu)成的多孔小球體，內(nèi)部有許多貫穿的通道。脂糖構(gòu)成的多孔小球體，內(nèi)部有許多貫穿的通道。 根據(jù)被分別物質(zhì)的蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量根據(jù)被分別物質(zhì)的蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小，利器具有網(wǎng)狀構(gòu)造的凝膠，來進展的大小，利器具有網(wǎng)狀構(gòu)造的凝膠，來進展分別。分別。1. 1.概念：概念：3.3.凝膠色譜法的原理凝膠色譜法的原理當(dāng)相對分子量不同的蛋白質(zhì)經(jīng)過凝膠時，相對當(dāng)相對分子量不同的蛋白質(zhì)經(jīng)過凝膠時，相對分子量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，分子量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部

4、的通道，路程較長，挪動速度較慢路程較長，挪動速度較慢; ;相對分子量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的相對分子量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部挪動，路程較短，挪動速通道，只能在凝膠外部挪動，路程較短，挪動速度較快。度較快。根據(jù)的特性是：蛋白質(zhì)分子量的大小。根據(jù)的特性是：蛋白質(zhì)分子量的大小。二緩沖溶液二緩沖溶液 1. 1.概念概念: : 在一定的范圍內(nèi)，凡是可以抵抗外加少量強在一定的范圍內(nèi)，凡是可以抵抗外加少量強酸或強堿的影響使原來溶液酸或強堿的影響使原來溶液PHPH值根本堅持不變的混值根本堅持不變的混合溶液。合溶液。 可以抵抗外界的酸和堿對溶液可以抵抗外界的酸和堿對溶液PHPH

5、值的影響，值的影響，維持維持PHPH根本不變。根本不變。2.2.作用作用: : 思索：說出人體血液中緩沖對。思索：說出人體血液中緩沖對。 NaH2PO4/Na2HPO4 NaH2PO4/Na2HPO4H2CO3/NaHCO3H2CO3/NaHCO3 通常由通常由1 12 2 種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)理種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)理緩沖劑的運用比例就可以制得在不同緩沖劑的運用比例就可以制得在不同PHPH范圍內(nèi)運用的范圍內(nèi)運用的緩沖液。緩沖液。 4. 4.提問：在本課題中運用的緩沖液是提問：在本課題中運用的緩沖液是:_ ,:_ , 利用緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的利用緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的PHPH環(huán)境，

6、保證環(huán)境，保證 血紅蛋白的正常構(gòu)造和功能，便于察看血紅蛋白的正常構(gòu)造和功能，便于察看( (紅色紅色) )和科和科 學(xué)研討學(xué)研討( (活性活性) )磷酸緩沖液磷酸緩沖液3.3.緩沖溶液的配制緩沖溶液的配制: :其目的是其目的是:帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團，在一定的有可解離的基團，在一定的PHPH下，這些基團會帶下，這些基團會帶上正上正 電或負(fù)電。電或負(fù)電。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極挪動。帶

7、電荷相反的電極挪動。分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差別以及分子分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差別以及分子本身的大小，外形的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同本身的大小，外形的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分別。的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分別。影響蛋白質(zhì)分子運動速度的要素影響蛋白質(zhì)分子運動速度的要素決議決議運動方向運動方向構(gòu)成構(gòu)成庫侖力庫侖力構(gòu)成構(gòu)成阻力阻力決議決議運動速率運動速率電荷性質(zhì)電荷性質(zhì)電荷量電荷量分子外形分子外形分子大小分子大小瓊脂糖凝膠電泳、聚丙稀酰胺凝膠電泳。瓊脂糖凝膠電泳、聚丙稀酰胺凝膠電泳。 在在電場電場的作用下，的作用下，這這些些帶電帶電分子分子會

8、會向著向著與與其所其所帶電帶電荷荷相反的相反的電極電極挪挪動動 1 1、測定蛋白質(zhì)分子量、測定蛋白質(zhì)分子量: :常用十二烷基硫酸鈉常用十二烷基硫酸鈉SDSSDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳。 聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑N,NN,N- -亞甲基雙丙烯酰胺在引發(fā)劑和催化劑的作用下聚合交聯(lián)亞甲基雙丙烯酰胺在引發(fā)劑和催化劑的作用下聚合交聯(lián)成的具有三維網(wǎng)狀構(gòu)造的凝膠。成的具有三維網(wǎng)狀構(gòu)造的凝膠。N,N-亞甲基雙丙烯酰胺構(gòu)成交聯(lián)亞甲基雙丙烯酰胺構(gòu)成交聯(lián)丙烯酰胺和交聯(lián)劑丙烯酰胺和交聯(lián)劑N,N-亞甲基雙丙烯酰胺的交聯(lián)共聚反響亞甲基雙丙烯酰胺的交聯(lián)共聚

9、反響 蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等要素。于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等要素。2. 2.原理：原理： SDS SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。解聚成單條能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。解聚成單條肽鏈，因此測定的結(jié)果只是單條肽鏈的分子量。肽鏈，因此測定的結(jié)果只是單條肽鏈的分子量。SDSSDS能與各種蛋白質(zhì)構(gòu)成蛋白質(zhì)能與各種蛋白質(zhì)構(gòu)成蛋白質(zhì)SDSSDS復(fù)合物，復(fù)合物，SDSSDS所帶負(fù)電荷的量大大超越了蛋白質(zhì)分子原有所帶負(fù)電荷的量大大超越了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量。因此掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差的電荷量。因此掩蓋了不同種蛋白

10、質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。別，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。3. SDS3. SDS作用機理作用機理: :用用SDSSDS測定蛋白質(zhì)分子量的方法測定蛋白質(zhì)分子量的方法 運用運用SDSSDS聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的分子量時，可選用一組知分子量的規(guī)范蛋白的分子量時，可選用一組知分子量的規(guī)范蛋白同時進展電泳，根據(jù)知分子量的規(guī)范蛋白的電同時進展電泳，根據(jù)知分子量的規(guī)范蛋白的電泳區(qū)帶位置，可以測定未知蛋白質(zhì)的分子量。泳區(qū)帶位置，可以測定未知蛋白質(zhì)的分子量。市場上有高分子量、次高分子量及低分子量的市場上有高分子量、次高分子量及低分子量的規(guī)范蛋白

11、試劑出賣。規(guī)范蛋白試劑出賣。 二、實驗操作二、實驗操作樣品處置樣品處置粗分別粗分別純化純化純度鑒定純度鑒定1.1.樣品處置：樣品處置：一蛋白質(zhì)提取和分別步驟一蛋白質(zhì)提取和分別步驟二操作過程二操作過程 可選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液來可選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液來分別血紅蛋白。分別血紅蛋白。血血液液血漿血漿水水 分分固體物質(zhì)：固體物質(zhì)：血漿蛋白、無機鹽、磷脂、葡萄糖等血漿蛋白、無機鹽、磷脂、葡萄糖等血細(xì)胞血細(xì)胞白細(xì)胞白細(xì)胞血小板血小板紅細(xì)胞紅細(xì)胞最多最多血紅蛋白血紅蛋白9090兩個兩個肽鏈肽鏈兩個兩個一肽鏈一肽鏈四個亞鐵血紅素基團四個亞鐵血紅素基團2.提問：血液有哪些成分？提問：血

12、液有哪些成分？ 1. 1.提問：用雞的紅細(xì)胞提取提問：用雞的紅細(xì)胞提取DNADNA，用豬、牛、羊，用豬、牛、羊的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的緣由是什么？的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的緣由是什么？ 雞的紅細(xì)胞具有細(xì)胞核，含有DNA，便于進展DNA的提??；人的紅細(xì)胞無細(xì)胞核，構(gòu)造簡單，血紅蛋白含量豐富，便于提取血紅蛋白。血紅蛋白血紅蛋白兩個兩個肽鏈肽鏈兩個兩個一肽鏈一肽鏈四個亞鐵血紅素基團四個亞鐵血紅素基團每個肽鏈環(huán)繞一個亞鐵血紅素基團，每個肽鏈環(huán)繞一個亞鐵血紅素基團，此基團可攜帶一分子此基團可攜帶一分子O2或一分子或一分子CO2，血紅蛋白因含有血紅素而血紅蛋白因含有血紅素而呈紅色。呈紅色。血紅蛋白的特點：血紅蛋

13、白的特點：(1)(1)紅細(xì)胞的洗滌紅細(xì)胞的洗滌: :去除雜質(zhì)蛋白，利于后續(xù)血紅蛋白的分別純化去除雜質(zhì)蛋白，利于后續(xù)血紅蛋白的分別純化. .1 1、采集血樣、采集血樣2 2、低速短時間離心速度越高和時間越長，會使白細(xì)、低速短時間離心速度越高和時間越長，會使白細(xì) 胞等一同沉淀，達不到分別的效果胞等一同沉淀，達不到分別的效果3 3、汲取血漿：上層透明的黃色血漿。、汲取血漿：上層透明的黃色血漿。4 4、鹽水洗滌：下層暗紅色的紅細(xì)胞、鹽水洗滌：下層暗紅色的紅細(xì)胞+ +五倍體積的五倍體積的0.90.9 的的NaClNaCl溶液洗滌，攪拌溶液洗滌，攪拌10min10min5 5、低速短時間離心：、低速短時間

14、離心：6 6、反復(fù)、反復(fù)3 3、4 4、5 5步驟三次步驟三次 上清液中已沒有黃色：紅細(xì)胞洗滌干凈。上清液中已沒有黃色：紅細(xì)胞洗滌干凈。目的目的: :操作：操作：洗滌次數(shù)過少洗滌次數(shù)過少,無法除去血漿蛋白。無法除去血漿蛋白。加蒸餾水到原血液體積，加蒸餾水到原血液體積，加加40體積的甲苯體積的甲苯 溶解細(xì)胞膜溶解細(xì)胞膜置于磁力攪拌器攪拌置于磁力攪拌器攪拌10min加速細(xì)胞破裂加速細(xì)胞破裂紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白(3)(3)分別血紅蛋白溶液：分別血紅蛋白溶液：過程：將攪拌好混合液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，以過程：將攪拌好混合液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，以2000r/min2000r/min

15、的速的速度離心度離心10 min10 min。試管中溶液層次：試管中溶液層次：第第1層最上層：甲苯層無色透明；層最上層：甲苯層無色透明；第第2層中上層：脂溶性物質(zhì)沉淀層白色薄層固體；層中上層：脂溶性物質(zhì)沉淀層白色薄層固體；第第3層中下層：血紅蛋白的水溶液層紅色透明液體；層中下層：血紅蛋白的水溶液層紅色透明液體；第第4層最下層：雜質(zhì)沉淀層暗紅色。層最下層：雜質(zhì)沉淀層暗紅色。分別：分別：濾紙過濾：除去脂溶性沉淀層，濾紙過濾：除去脂溶性沉淀層，分液漏斗中靜置：分出下層的紅色透明液分液漏斗中靜置：分出下層的紅色透明液體。體。甲苯層無色透明甲苯層無色透明 白色薄層固體白色薄層固體 紅色透明液體紅色透明液

16、體雜質(zhì)沉淀層暗紅色雜質(zhì)沉淀層暗紅色 試管中溶液層次試管中溶液層次(4)(4)透透 析：析：過程：過程：取取1ml1ml的血紅蛋白溶液裝入透的血紅蛋白溶液裝入透析袋中，將透析袋放入盛有析袋中，將透析袋放入盛有300ml300ml的的20mmol/l20mmol/l的磷酸緩沖的磷酸緩沖液中液中pHpH為為7.07.0，透析，透析12h12h目的：目的：除去樣品中分子量較小的雜質(zhì)和離子。除去樣品中分子量較小的雜質(zhì)和離子?；蛴糜诟膿Q樣品的緩沖液?；蛴糜诟膿Q樣品的緩沖液。20mmol/L磷酸緩沖液磷酸緩沖液1mL2.2.凝膠色譜操作凝膠色譜操作: :1 1凝膠色譜柱的制造：凝膠色譜柱的制造：取長取長40

17、40厘米，內(nèi)徑厘米，內(nèi)徑1.61.6厘米的玻璃管，兩端磨平。厘米的玻璃管，兩端磨平。底塞的制造：底塞的制造： 打孔打孔挖出凹穴挖出凹穴安裝移液管頭部安裝移液管頭部覆蓋尼龍網(wǎng)，再用覆蓋尼龍網(wǎng)，再用100100目尼龍紗包好，插到玻璃管的一端。本卷須知：玻璃管的目尼龍紗包好，插到玻璃管的一端。本卷須知：玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面，否那么難以鋪實尼龍網(wǎng)，上部不得超出橡皮塞的凹穴底面，否那么難以鋪實尼龍網(wǎng)，還會導(dǎo)致液體殘留，蛋白質(zhì)分別不徹底。還會導(dǎo)致液體殘留，蛋白質(zhì)分別不徹底。頂塞的制造：打孔頂塞的制造：打孔安裝玻璃管。安裝玻璃管。組裝：將上述三者按相應(yīng)位置組裝成一個整體。組裝：將上述三者按相

18、應(yīng)位置組裝成一個整體。安裝其他附屬構(gòu)造。安裝其他附屬構(gòu)造。2 2凝膠色譜柱的裝填凝膠色譜柱的裝填凝膠的選擇：凝膠的選擇：A A、資料：交聯(lián)葡聚糖凝膠、資料：交聯(lián)葡聚糖凝膠G-75G-75。B B、代表意義：、代表意義：“G“G表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度 及分別范圍。及分別范圍。 75 75表示凝膠的得水值，即每克凝膠膨表示凝膠的得水值，即每克凝膠膨 脹時吸水脹時吸水7.57.5克?？恕Ｄz的前處置：凝膠的前處置： 配置凝膠懸浮液：配置凝膠懸浮液： 計算并稱取一定量的凝膠浸泡于蒸餾水或洗脫液中計算并稱取一定量的凝膠浸泡于蒸餾水或洗脫液中 充分溶脹后，配成凝膠懸浮液。

19、充分溶脹后，配成凝膠懸浮液。 凝膠色譜柱的裝填方法：凝膠色譜柱的裝填方法：A、固定：將色譜柱安裝固定在支架上。、固定：將色譜柱安裝固定在支架上。B、裝填：將凝膠懸浮液一次性緩慢倒入色譜柱、裝填：將凝膠懸浮液一次性緩慢倒入色譜柱 內(nèi)，裝填時悄然敲動色譜柱，使凝膠填裝均勻內(nèi)，裝填時悄然敲動色譜柱，使凝膠填裝均勻留意：留意：1、裝填時盡量嚴(yán)密：降低凝膠顆粒之間的空隙。、裝填時盡量嚴(yán)密：降低凝膠顆粒之間的空隙。 2、裝填凝膠柱時不得有氣泡存在：由于氣泡會攪、裝填凝膠柱時不得有氣泡存在：由于氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分別效果。亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分別效果。洗滌平衡：洗滌平衡：銜

20、接緩沖液洗脫瓶，在銜接緩沖液洗脫瓶，在50cm50cm高的高的操作壓下，用操作壓下，用300ml300ml的的20mmol/L20mmol/L的的磷酸緩沖液磷酸緩沖液pHpH為為7.07.0充分洗滌充分洗滌平衡平衡12h12h。留意：留意：1 1、液面不要低于凝膠外表，否那、液面不要低于凝膠外表，否那么能夠有氣泡混入，影響分別效么能夠有氣泡混入，影響分別效果果2 2、不能發(fā)生洗脫液流干，顯露凝、不能發(fā)生洗脫液流干，顯露凝膠顆粒的景象。膠顆粒的景象。3 3樣品參與與洗脫樣品參與與洗脫調(diào)理緩沖液面：調(diào)理緩沖液面： 翻開下端出口，使緩沖液下降到與凝膠面平齊，封鎖出口翻開下端出口，使緩沖液下降到與凝膠

21、面平齊，封鎖出口滴加透析樣品：吸管吸滴加透析樣品：吸管吸1ml1ml樣品加到色譜柱的頂端，樣品加到色譜柱的頂端， 留意：留意： 1 1、不要觸及并破壞凝膠面。、不要觸及并破壞凝膠面。 2 2、貼壁加樣、貼壁加樣 3 3、吸管管口貼著管壁環(huán)繞挪動加樣、吸管管口貼著管壁環(huán)繞挪動加樣樣品滲入凝膠床：翻開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)，樣品滲入凝膠床：翻開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)， 樣品完全進入凝膠層后，封鎖下端出口樣品完全進入凝膠層后，封鎖下端出口洗脫：參與洗脫：參與pH=7.0 pH=7.0 的的20mmol/l20mmol/l的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度，的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度， 銜接緩沖液洗脫瓶，

22、翻開下端出口進展洗脫。銜接緩沖液洗脫瓶，翻開下端出口進展洗脫。搜集：待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管搜集流出搜集：待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管搜集流出 液，每液，每5ml5ml搜集一試管，延續(xù)搜集。搜集一試管，延續(xù)搜集。假設(shè)紅色區(qū)帶均勻一致的挪動，闡明色譜柱制造勝利假設(shè)紅色區(qū)帶均勻一致的挪動，闡明色譜柱制造勝利留意：正確的加樣操作是：留意：正確的加樣操作是：1 1、不要觸及并破壞凝膠面。、不要觸及并破壞凝膠面。2 2、貼壁加樣。、貼壁加樣。3 3、使吸管管口沿管壁環(huán)繞挪動。、使吸管管口沿管壁環(huán)繞挪動。思索下面的問題：思索下面的問題：讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pHp

23、H范圍內(nèi)，維持構(gòu)造和范圍內(nèi)，維持構(gòu)造和功能正常。功能正常。 1 1、在血紅蛋白純化的整個過程中不斷用磷酸緩、在血紅蛋白純化的整個過程中不斷用磷酸緩沖液處置的目的是什么？沖液處置的目的是什么？ 2 2、與其他蛋白質(zhì)相比，血紅蛋白有什么特點？、與其他蛋白質(zhì)相比，血紅蛋白有什么特點？這一特點對他進展血紅蛋白的分別有什么啟示？這一特點對他進展血紅蛋白的分別有什么啟示？血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分別時可以經(jīng)過血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分別時可以經(jīng)過察看顏色來判別什么時候應(yīng)該搜集洗脫液。這使血紅蛋察看顏色來判別什么時候應(yīng)該搜集洗脫液。這使血紅蛋白的分別過程非常直觀，大大簡化了實驗操作。白的

24、分別過程非常直觀，大大簡化了實驗操作。 血紅蛋白提取和分別的程序包括：血紅蛋白提取和分別的程序包括：樣品處置、粗分別、純化和純度鑒定。樣品處置、粗分別、純化和純度鑒定。樣品的處置：經(jīng)過洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、樣品的處置：經(jīng)過洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、 離心等操作搜集到血紅蛋白溶液，離心等操作搜集到血紅蛋白溶液，樣品的粗分別樣品的粗分別: :透析透析去除分子量較小的雜質(zhì)去除分子量較小的雜質(zhì)樣品的純化：凝膠色譜法樣品的純化：凝膠色譜法除去相對分子質(zhì)量較大除去相對分子質(zhì)量較大 的雜質(zhì)蛋白的雜質(zhì)蛋白純度鑒定純度鑒定: :聚丙烯酰胺凝膠電泳進展純度鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳進展純度鑒定。3 3、他能描畫血紅蛋白分別的完好過程嗎？、他能描畫血紅蛋白分別的完好過程嗎？鑒定血紅蛋白純度。鑒定血紅蛋白純度。3.方法步驟：略方法步驟：略 察看處置的血液樣品離心后能否分層，假設(shè)分層不明顯，察看處置的血液樣品離心后能否分層，假設(shè)分層不明顯，能夠是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的緣由。能夠是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的緣由。 此外，離心速度過高和時間過長，會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞此外，離心速度過高和時間過長，會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到純真的紅細(xì)胞