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1、不同產(chǎn)地柴胡多糖含量分析張麗娜何奇(吉林敖東洮南藥業(yè)股份有限公司13 7 10 0)【摘要】目的:為柴胡的質(zhì)量評價提供一個指標,從而為以多指標質(zhì)量 評價體系提供依據(jù)。方法:采用蒽酮一硫酸比色法,分別測定可溶性多糖和粗多 糖的含量。結(jié)果:葡萄糖數(shù)與吸光度線性良好,r 2 = 09 9 9 3;平均回收率為1 0 15 5 4 %, r s d = 17 8 %不同產(chǎn)地柴胡多糖河北含量最高,依次是陜丙、吉林、安徽。結(jié)論:蒽酮一硫酸比色法簡便、易行,適合柴胡多糖 的含量測定,以控制其質(zhì)量?!娟P(guān)鍵詞】:柴胡;不同產(chǎn)地;多糖【中圖分類號】r 2【文獻標號】a【文章編號】2 0 9 5 7 1 65 (2
2、015) 07-0422-02多糖是柴胡有效化學(xué)成分之一,是一種良好的免疫調(diào)節(jié)劑1 ,柴 胡多搪2 ii c顯示很強的抗?jié)兓钚? 。不同產(chǎn)地,相同成分含量也不等。 下面通過實驗測定不同產(chǎn)地多糖含量的差異。1材料與儀器1 1樣品來源(1 )吉林(2 )安徽(3 )河北(4 )陜丙注:均由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)李 偉老師鑒定為柴胡。1 2儀器(1 ) u v 2 4 0 1型可見分光光度計;(2 ) s b- 3 2 0 0型超聲 波清洗器;(3 x s 2 0 5型電子天平;(4 ) hh-6數(shù)顯恒溫水浴鍋;(5 ) ybia真空干燥箱13試劑蔥酮、葡萄糖、濃硫酸、鹽酸、無水乙醇等,均為分析純2實驗方法
3、3與結(jié)果2 1多糖類物質(zhì)提取可溶性多糖的提取精密稱取柴胡粉末10 0 0 g,每個樣品都稱取三份,分別置1 0 0 ml三角瓶中,加8 0 % e t o h 4 5 ml,浸泡3 0 m i n, 超聲3 om i n,靜置過濾,重復(fù)提取1次,過濾(保存濾渣),兩次濾液置1 ooml容量瓶中,以8 0 °%e t o h定容至刻度。粗多糖的提取將21中的濾渣晾干,加2 %的鹽酸4 5 ml,置水浴中提取4 5 m i n,放冷,濾過到1 0 0 ml容量瓶中,再提取1次,過濾,洗 滌濾紙,以2 %鹽酸定容至刻度。2 2顯色劑(蔥酮一硫酸)的制備取9 8 %的濃硫酸7 6 ml,稀釋
4、成1 0 0 m l溶液;精密稱取蔥酮0 1 0 0 0 g,置1 0 0 ml容量瓶中,加入上述配制的硫酸溶液至刻度并搖勻,冷卻至室溫,備用。23標準曲線的制備231試液的制備葡萄糖標準液:將葡萄糖于6 0°c烘1 h,逐漸升溫至1 0 5 °c至恒重。精密稱取1 05 5 mg,置1 0 oml容量瓶中,用水溶解并至刻度,取6支試管,分別加葡萄糖標準液00 m l、02 m l、04ml、06ml、0 8ml、l 0 m l ,再分次加入水 10 m l、08 ml, 06 ml, 04ml、02 ml, 00 ml,各管分別再加入50 ml的顯色劑,于6 2 0 n
5、m處測定吸光度。232標準曲線的繪制各管的吸收度依據(jù)濃度順序分別為00000、01498、03023、04563、06108、073 8 7。以葡萄糖數(shù)為橫坐標,吸光度值為縱坐標,繪制標準曲線。得到冋歸方 程為y = 07 4 7 2 x + 00 0 2 7,線性r 2 = 09 9 9 3。24樣品液的制備與測定241可溶性多糖的測定取提取液2 5ml,置25ml容量瓶中,用8 0 %乙醇定至刻度。取1 oml提取液加入試管中,再加顯色劑5 0 ml。另取一支試管加8 0 % e t o h,再加顯色劑50 ml,作為空白。置水浴中1 0 m i n,放至室溫。于6 2 0 nm處測定數(shù)據(jù)
6、,各地柴胡中可溶性 多糖平均含量如下:吉林31 2 %;安徽38 3 %;河北96 4 %;陜西3 1 4 %。242粗多糖的測定取提取液2 5ml,置2 5ml容量瓶中,用2 °%鹽酸定至刻度,取10 m l提取液加入試管中,再加顯色劑50 ml,另取一支試管加2 °%鹽酸1 oml,再加入顯色劑50 ml,作空白實驗,置水浴中加熱1 om i n,放至室溫,于6 2 0 nm處測定數(shù)據(jù),各地柴胡中粗 多糖平均含量如下:吉林82 4 °%;安徽652%;河北1018%;陜西86 7 %。243總多糖含量根據(jù)可溶性多糖含量和粗多糖含量,計算總多糖的含量,各地柴胡中
7、總多糖含量如下:吉林1 13 6 %;安徽1 03 5 %;河北 1 98 2 %;陜西 1 18 1 °%。25冋收率實驗精密稱取己知可溶性多糖含量的柴胡(吉林)05 g, 5份,置錐形瓶中,分別加入27 53mg/ml的葡萄糖對照品溶液2 m l ,按前面樣品 處理法提取,并按樣品測定項操作,計算可溶性多糖含量和冋收率。第一份冋收 率1 0 39 8 %;第二份冋收率10 15 7 %;第三份冋收率10 096 %;第四份回收率1 0 22 4 %;第五份回收率9 90 2 %。平均回收率1 0 1554 % rsd=1 7 8 %。精密稱取已知粗多糖含量的柴胡(吉林)05 g
8、, 5份,置錐形瓶中,分別加入27 53mg/ml的葡萄糖對照品溶液2 m l,按前面樣品處理法提取,并按樣品測定項操作,計算粗多糖含 量和冋收率。第一份冋收率1 0 49 2 %;第二份冋收率1 013 2 %;第三份冋收率1 0 09 9 %;第四份回收率10 249 %;第五份冋收率9 89 6 °%。平均冋收率101736 % rsd=21 5 %。3結(jié)論(1 )不同產(chǎn)地柴胡的總多糖含量不同,河北的含量最高,依次是陜西、 吉林、安徽,含量依次為:1 98 2 %, 1181%, 113 6%, 1 03 5 % o(2) 多糖含量的多少是評價其質(zhì)量的一個指標,冋吋應(yīng)通過多糖含量 結(jié)合黃酮類化合物含量來評價藥材質(zhì)量,以多指標綜合評價其質(zhì)量。(3) 從冋收率和相對標準偏差可看出,采用蔥酮一硫酸比色法測柴胡 中的多糖含量,方法簡便、易行,適合柴胡多糖的含量測定,以控制其質(zhì)量。參考文獻1 張亮,胡海寶南柴胡多搪分離與組成的初步研宄j 中
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