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1、微生物作業(yè)及答案第1章 緒論1、 什么是微生物?它包括哪些類群?答:微生物:一切肉眼看不見或看不清的微小生物的總稱。類群:原核類:細菌(真細菌、古細菌),放線菌,藍細菌,支原體,立克氏體,衣原體等;真核類:真菌(酵母菌,霉菌,蕈菌),原生動物,顯微藻類;非細胞類:病毒,亞病毒(類病毒,擬病毒,朊病毒)。2、 微生物有哪五大共性?其中最基本的是哪一個?為什么?答:五大共性:體積小,面積大;吸收多,轉(zhuǎn)化快;適應(yīng)強,易變異;分布廣,種類多;生長旺,繁殖快。最基本的是體積小,面積大;原因:微生物是一個突出的小體積大面積系統(tǒng),從而賦予它們具有不同于一切大生物的五大共性,因為一個小體積大面積系統(tǒng),必然有一
2、個巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面,故而產(chǎn)生了其余四個共性。巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面和代謝廢物的排泄面使微生物具有了吸收多,轉(zhuǎn)化快,生長旺,繁殖快的特點。環(huán)境信息的交換面使微生物具有適應(yīng)強,易變異的特點。而正是因為微生物具有適應(yīng)強,易變異的特點,才能使其分布廣,種類多。3、 為什么說巴斯德和柯赫是微生物學(xué)的奠基人?答:巴斯德的功績:徹底否定了自然發(fā)生說;證實發(fā)酵由微生物引起;免疫學(xué)預(yù)防接種;發(fā)明巴氏消毒法;科赫的功績:發(fā)明培養(yǎng)基并用其純化微生物等一系列研究方法的創(chuàng)立;證實炭疽病因炭疽桿菌,發(fā)現(xiàn)結(jié)核病原菌結(jié)核桿菌;科赫法則;巴斯德和柯赫的杰出工作,使微生物學(xué)作為一門獨立的學(xué)科
3、開始形成,并出現(xiàn)以他們?yōu)榇矶⒌母鞣种W(xué)科。使微生物學(xué)的研究內(nèi)容日趨豐富。4、 用具體事例說明人類與微生物的關(guān)系。答:生產(chǎn)方面,它們在土壤物質(zhì)轉(zhuǎn)化和促進植物生長有著極為重要的作用,例如根瘤菌,圓褐固氮菌都是將氮元素活化,讓植物來利用的微生物。微生物還可在應(yīng)用在生物工程方面。用酵母菌釀酒,用乳酸菌制酸奶,用毛霉制腐乳。還可以制造生物殺蟲劑,如蘇方金桿菌,日本金龜子芽胞桿菌,這些細菌對人畜無害,而對昆蟲有害,是一種比較綠色的殺蟲劑。然而,有一些微生物屬于動植物細菌和病毒,給農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)帶來危害,如煙草花葉病毒,禽流感病毒。生活方面,微生物也常影響人類的健康。雙歧桿菌和乳酸桿菌都對人的健康有益,當(dāng)
4、雙歧桿菌、乳酸桿菌等有益菌在腸道內(nèi)生長、繁殖,將阻止外面的病原體入侵腸道,構(gòu)筑成一個生物屏障。而且腸道是人體最大的一個免疫器官,有益菌可以分泌一些抗原物質(zhì),激活并強化腸道的免疫系統(tǒng)。 也有一些我們經(jīng)常聽說的微生物對人的健康有害,如結(jié)核桿菌會引發(fā)結(jié)核病,流行感冒病毒會引發(fā)感冒,等等。所以說,微生物即是人類的朋友,也是人類的敵人。第2章 微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)1、 名詞解釋:無菌技術(shù)、培養(yǎng)物、純培養(yǎng)物、菌落、菌苔、分辨率答:無菌技術(shù):在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純培養(yǎng)物時防止其他微生物污染,其自身也不污染操作環(huán)境的技術(shù)。培養(yǎng)物:在一定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體。純培養(yǎng)物:只有一種微生物的培養(yǎng)物。菌
5、落:單個微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞生長群體,稱為菌落。菌苔:固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時,便成為菌苔。分辨率:是指顯微鏡(或人的眼睛距目標(biāo)25cm處)能分辨物體最小間隔的能力。2、 實驗設(shè)計:設(shè)計實驗分離一種具有應(yīng)用潛力的(如產(chǎn)胞外蛋白酶)微生物。答:采樣:在生活垃圾堆放處附近的土壤取樣;富集培養(yǎng):在含脫脂奶粉的液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)至渾濁;篩選純化:用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板,梯度稀釋樣品,將稀釋好的樣品涂布于培養(yǎng)基平板上,在培養(yǎng)箱中培養(yǎng);鑒定保存:培養(yǎng)后的平板上的菌落邊緣有透明帶的即為產(chǎn)胞外蛋白酶的菌株,取出保存。3、
6、簡述微生物的保藏技術(shù)的基本原理及常用方法。答:基本原理:根據(jù)菌種特性及保藏目的的不同,給微生物菌株以特定的條件,使其存活而得以延續(xù)。常用方法:傳代培養(yǎng)保藏、冷凍保藏、干燥保藏。第3章 微生物細胞的結(jié)構(gòu)與功能1、 簡述細菌細胞壁的功能。答:(1)固定細胞外形;協(xié)助鞭毛運動;(2)保護細胞免受外力的損傷;(3)為正常細胞分裂所必需;阻攔有害物質(zhì)進入細胞;(4)與細菌的抗原性、致病性和對噬菌體的敏感性密切相關(guān)。2、 試述革蘭氏染色的方法和機制。答:方法:結(jié)晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脫色、番紅或沙黃復(fù)染;機制:革蘭氏染色結(jié)果的差異主要是基于細菌細胞壁的構(gòu)造和化學(xué)組分的不同,通過結(jié)晶紫液初染和碘液媒
7、染后,在細菌的細胞壁以內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+細菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密,故遇脫色劑乙醇處理時,因失水而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇的處理不會溶出縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色。反之,G-細菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差,遇脫色劑乙醇后,以類脂為主的外膜迅速溶解,這時薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,因此細胞退成無色。這時,再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染,就使G-細菌呈現(xiàn)紅色,而G+細菌則仍保留最初的紫色了。3、 何謂“拴菌”實驗?它如何證明原核生物的鞭毛是做旋轉(zhuǎn)運動的?答:設(shè)法把單毛菌鞭
8、毛的游離端用相應(yīng)抗體牢牢“拴”在載玻片上,然后在光學(xué)顯微鏡下觀察細胞的行為。結(jié)果發(fā)現(xiàn),該菌在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)(而非伸縮揮動),從而確認細菌鞭毛的運動機制是旋轉(zhuǎn)式的。4、 滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說是如何解釋芽孢耐熱機制的?答:芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差,皮層的離子強度很高,產(chǎn)生極高的滲透壓奪取芽孢核心的水分,造成皮層的充分膨脹,核心部分的細胞質(zhì)卻變得高度失水,最終導(dǎo)致核心具有極強的耐熱性。第四章 微生物的營養(yǎng)1、以能源為主、碳源為輔對微生物的營養(yǎng)類型分類,可分成哪幾類?答:光能自養(yǎng)型: 以光為能源,以CO2 為唯一或主要碳源,不依賴任何有機物即可正常生長。光能異養(yǎng)型: 以光為能源,但生長需要
9、一定的有機營養(yǎng)。 化能自養(yǎng)型:從無機物的氧化獲得能量,生長不依賴有機營養(yǎng)物?;墚愷B(yǎng)型:從有機物的氧化獲得能量,生長依賴于有機營養(yǎng)物質(zhì)。2、 以EMB培養(yǎng)基為例,分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。答:鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入能與某菌的某種代謝產(chǎn)物發(fā)生特定化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征性變化的特殊化學(xué)物質(zhì),從而與其他菌落相區(qū)別。EMB培養(yǎng)基中大腸埃希氏菌因其強烈分解乳糖而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H,故可染上酸性染料伊紅,又因伊紅與美藍結(jié)合,使菌落呈深紫色,從菌落表面反光還可看到綠色金屬閃光,而產(chǎn)弱酸的菌落呈棕色,不發(fā)酵乳酸的菌落無色透明。3、 與促進擴散相比,微生物通過主動運輸吸收營養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點是什么?答:
10、主動運輸與促進擴散相比的優(yōu)點在于可以逆濃度運輸營養(yǎng)物質(zhì)。通過促進擴散將營養(yǎng)物質(zhì)運輸進入細胞,需要環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)濃度高于胞內(nèi),而在自然界中生長的微生物所處的環(huán)境中的營養(yǎng)物質(zhì)含量往往很低,在這種情況下促進擴散難以發(fā)揮作用。主動運輸則可以逆濃度運輸,將環(huán)境中較低濃度營養(yǎng)物質(zhì)運輸進入胞內(nèi),保證微生物正常生長繁殖。第5章 微生物的代謝1、 試比較發(fā)酵、有氧呼吸和無氧呼吸。答:發(fā)酵過程中電子載體是將電子傳遞給底物降解的中間產(chǎn)物,而呼吸作用中電子載體是將電子交給電子傳遞體系,逐步釋放出能量后再交給電子最終受體。有氧呼吸和無氧呼吸之間的最大區(qū)別在于最終電子受體的不同,有氧呼吸是以分子氧作為最終電子受體,無氧呼
11、吸則是以氧化型化合物作為最終電子受體。2、微生物細胞的代謝調(diào)節(jié)主要有哪兩種類型?答:酶活性調(diào)節(jié):是指一定數(shù)量的酶,通過其分子構(gòu)象或分子結(jié)構(gòu)的改變來調(diào)節(jié)其催化反應(yīng)的速率。分為變構(gòu)調(diào)節(jié)和修飾調(diào)節(jié)。酶合成調(diào)節(jié):是指微生物對自身酶合成量的調(diào)節(jié),主要有誘導(dǎo)和阻遏兩種方式。3、試說明幾種常見的分支合成途徑調(diào)節(jié)方式的調(diào)節(jié)機制。答:同工酶反饋抑制:在分支途徑中的第一個酶有幾種結(jié)構(gòu)不同的一組同工酶,每一種代謝終產(chǎn)物只對一種同工酶具有反饋抑制作用,只有當(dāng)幾種終產(chǎn)物同時過量時,才能完全阻止反應(yīng)的進行。協(xié)同反饋抑制:在分支代謝途徑中,幾種末端產(chǎn)物同時都過量,才對途徑中的第一個酶具有抑制作用。若某一末端產(chǎn)物單獨過量則對
12、途徑中的第一個酶無抑制作用。累積反饋抑制:在分支代謝途徑中,任何一種末端產(chǎn)物過量時都能對共同途徑中的第一個酶起抑制作用,而且各種末端產(chǎn)物的抑制作用互不干擾。當(dāng)各種末端產(chǎn)物同時過量時,它的抑制作用累加。順序反饋抑制:分支代謝途徑中的兩個末端產(chǎn)物,不能直接抑制代謝途徑中的第一個酶,而是分別抑制分支點后的反應(yīng)步驟,造成分支點上中間產(chǎn)物的積累,這種高濃度的中間產(chǎn)物再反饋抑制第一個酶的活性。因此,只有當(dāng)兩個末端產(chǎn)物都過量時,才能對途徑中的第一個酶起到抑制作用。4、一酵母突變株的糖酵解途徑中,從乙醛到乙醇的路徑被阻斷,它不能在無氧條件下的葡萄糖平板上生長,但可在有氧條件下的葡萄糖平板上存活。試解釋這一現(xiàn)象
13、?答:從乙醛到乙醇的路徑被阻斷,僅僅阻斷的是無氧呼吸的最后一步,即糖酵解過程中產(chǎn)生的NADPH中的氫將乙醛還原為乙醇。但是在有氧的情況下,糖酵解過程中產(chǎn)生的氫將不再用于把乙醛還原為乙醇,而是直接運送到線粒體中進行氧化產(chǎn)生水,即不經(jīng)過從乙醛到乙醇的這一階段,因此可以在有氧條件下的葡萄糖平板上存活。5、名詞解釋:發(fā)酵、呼吸作用、有氧呼吸、無氧呼吸、底物水平磷酸化、氧化磷酸化、光合磷酸化、初級代謝、次級代謝答:發(fā)酵:是指微生物細胞將有機物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物,同時釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物的過程,無需電子傳遞鏈。呼吸作用:微生物在降解底物的過程中,將釋放出的電
14、子交給NAD(P)+ 、FAD 、FMN 等電子載體,再經(jīng)過電子傳遞系統(tǒng)傳給外源電子受體,從而生成水或其他還原性產(chǎn)物并釋放出能量的過程。有氧呼吸:以分子氧為最終電子受體的呼吸作用。無氧呼吸:以氧化型化合物為最終電子受體的呼吸作用。底物水平磷酸化:物質(zhì)在生物氧化過程中,常生成一些含有高能鍵的化合物而這些化合物可直接偶聯(lián)ATP或GTP的合成。這種產(chǎn)生ATP等高能分子的方式稱為底物水平磷酸化。氧化磷酸化:呼吸鏈的遞氫(或電子)和受氫過程與磷酸化反應(yīng)相耦聯(lián)并產(chǎn)生ATP的作用。光和磷酸化:光合磷酸化是指由光照引起的電子傳遞與磷酸化作用相偶聯(lián)而生成ATP的過程。有環(huán)式和非環(huán)式兩種。初級代謝:一般將微生物通
15、過代謝活動所產(chǎn)生的自身繁殖所必需的物質(zhì)和能量的過程,稱為初級代謝。次級代謝:是指微生物在一定的生長時期,以初級代謝產(chǎn)物為前體,合成一些對于該微生物沒有明顯的生理功能且非其生長和繁殖所必需的物質(zhì)的過程。第六章 微生物的生長繁殖及其控制1、細菌生長曲線分哪幾個時期?說明其出現(xiàn)原因和特點。答:延滯期:原因:把細菌接種到新鮮的培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,并不立即進行分裂繁殖,細菌增殖數(shù)為0,這時需要合成多種酶,輔酶和某些中間代謝產(chǎn)物,要經(jīng)過一個調(diào)整和適應(yīng)過程 。特點:生長速率常數(shù)等于零,細胞形態(tài)變大或增長,RNA、蛋白質(zhì)等含量增加,合成代謝活躍,對不良條件抵抗能力降低。對數(shù)期:原因:營養(yǎng)物質(zhì)豐富,細菌代謝旺盛,不
16、存在種內(nèi)斗爭。特點:活菌數(shù)和總菌數(shù)接近;酶系活躍,代謝旺盛;生長速率最大;細胞的化學(xué)組成及形態(tài),生理特性比較一致。穩(wěn)定期:原因:營養(yǎng)的消耗;營養(yǎng)物比例失調(diào);有害代謝產(chǎn)物積累;pH值Eh值等理化條件不適。特點:活菌數(shù)保持相對穩(wěn)定,總菌數(shù)達最高水平;細菌代謝物積累達到最高峰;芽孢桿菌這時開始形成芽孢;這是生產(chǎn)收獲時期。衰亡期:原因:營養(yǎng)耗盡,細菌無法繼續(xù)生長。特點:細菌死亡數(shù)大于增殖數(shù),活菌數(shù)明顯減少,群體衰落;細胞出現(xiàn)多形態(tài),大小不等的畸形,變成衰退型;細胞死亡,出現(xiàn)自溶現(xiàn)象。2、試分析影響微生物生長的主要因素及它們影響微生物生長繁殖的機制。答:營養(yǎng)物質(zhì):營養(yǎng)物質(zhì)不足導(dǎo)致微生物生長所需的能量、碳
17、源、氮源、無機鹽等成分不足,導(dǎo)致生長停止。水活度:通過影響培養(yǎng)基的滲透壓而影響微生物的生長速率。溫度:影響酶活性,影響細胞質(zhì)膜的流動性,影響物質(zhì)的溶解度來影響微生物的生長繁殖。pH:影響細胞質(zhì)膜的電荷、物質(zhì)的溶解度、代謝過程中酶的活性從而影響微生物的生命活動。氧:可分為好氧菌、微好氧菌、耐氧厭氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌。3、說明測定微生物生長的意義,微生物測定方法的原理,并比較各種測定方法的優(yōu)缺點。答:意義:評價培養(yǎng)條件、營養(yǎng)物質(zhì)等對微生物生長的影響;評價抗菌物質(zhì)對微生物產(chǎn)生抑制(或殺死)作用的效果;客觀地反映微生物生長的規(guī)律。計數(shù)法:(1)培養(yǎng)平板法:取一定體積的稀釋菌液涂布在合適的固體培
18、養(yǎng)基上,經(jīng)培養(yǎng)后計算原菌液的含菌數(shù)。優(yōu)點:可以獲得活菌的信息。缺點:操作繁瑣且時間長,測定結(jié)果受多種因素的影響。(2)膜過濾培養(yǎng)法:當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時,可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過膜過濾器,然后將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),對形成的菌落進行統(tǒng)計。優(yōu)點:適用于樣品中菌數(shù)很低時。缺點:價格昂貴。(3)顯微鏡直接計數(shù)法:采用細菌計數(shù)板或血球計數(shù)板,在顯微鏡下對微生物數(shù)量進行直接計數(shù)。優(yōu)點:簡便、快速、直觀。缺點:不能區(qū)分死菌與活菌;適于對運動細菌的計數(shù);需要相對高的細菌濃度;個體小的細菌在顯微鏡下難以觀察。(4)比濁法:在一定范圍內(nèi),菌的懸液中細胞濃度與濁度成正比,可用分光光度計測
19、定。優(yōu)點:比較準(zhǔn)確。缺點:不能區(qū)分死菌與活菌。重量法:以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量;通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測定間接推算微生物群體的生物量。優(yōu)點:測定多細胞及絲狀真菌生長情況的有效方法。缺點:不太準(zhǔn)確。生理指標(biāo)法:微生物的生理指標(biāo):如呼吸強度,耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。優(yōu)點:常用于對微生物的快速鑒定與檢測。4、控制微生物生物繁殖的主要方法及原理有哪些?答:化學(xué)因素:(1)消毒防腐劑:能迅速殺滅病原微生物的藥物,稱為消毒劑。能抑制或阻止微生物生長繁殖的藥物,稱為防腐劑。(2)抗代謝物:是指一些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體內(nèi)的代謝物相類似,能與特定的酶結(jié)合,阻礙酶的正
20、常功能,干擾代謝進行的物質(zhì)。(3)抗生素:是由某些生物合成或半合成的一類次級代謝產(chǎn)物或衍生物,能抑制微生物生長或殺死微生物。物理因素:(1)溫度:當(dāng)溫度超過微生物生長的最高溫度或低于生長的最低溫度都會對微生物產(chǎn)生殺死或抑制作用。(2)輻射:利用電磁輻射產(chǎn)生的電磁波殺死絕大多數(shù)生物體上的微生物。(3)過濾:用物理阻留的方法,除去液體和氣體中的懸浮灰塵、雜質(zhì)和細菌。(4)超聲波:空穴作用裂解細胞;熱效應(yīng)使細胞產(chǎn)生熱變性從而抑制或殺死細胞。5、細菌的耐藥性機制是哪些?如何避免抗藥性的產(chǎn)生?答:耐藥性機制:(1)菌體內(nèi)產(chǎn)生了能使藥物失去活性的酶;(2)細胞內(nèi)被藥物作用的部位發(fā)生了改變;(3)使藥物不能
21、透過細胞膜;(4)形成救護途徑;(5)通過主動外排系統(tǒng)把進入細胞的藥物泵出細胞外。方法:(1)只有在必要時才使用抗生素;(2)第一次使用的藥物劑量要足;(3)避免在一個時期或長期多次使用同種抗生素;(4)不同的抗生素(或與其他藥物)混合使用;(5)對現(xiàn)有抗生素進行改造;(6)篩選新的更有效的抗生素。6、名詞解釋:分批培養(yǎng),連續(xù)培養(yǎng),滅菌,消毒,防腐,化療答:分批培養(yǎng):在封閉系統(tǒng)中對微生物進行的培養(yǎng),即培養(yǎng)過程中既不補充營養(yǎng)物質(zhì)也不移去培養(yǎng)物質(zhì),保持整個培養(yǎng)液體積不變的培養(yǎng)方式。連續(xù)培養(yǎng):在微生物培養(yǎng)過程中采用開放系統(tǒng),通過不斷補充營養(yǎng)物質(zhì)和移出代謝廢物,可以是微生物處于穩(wěn)定的環(huán)境條件,實現(xiàn)持續(xù)
22、生長的培養(yǎng)方式。滅菌:滅菌是指采用強烈的理化因素使任何物體內(nèi)外的一切微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施。殺死物體上的所有微生物,包括病原和非病原微生物。消毒:用物理、化學(xué)或生物學(xué)等方法殺死病原微生物。具消毒作用的藥劑稱消毒劑。消毒是不完全的滅菌。防腐:利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖,即通過制菌作用防止食品、生物制品等對象發(fā)生霉腐的措施。可采用低溫、缺氧、干燥、高滲、高酸度、高醇度和加防腐劑等方法?;煟豪镁哂懈叨冗x擇毒力的化學(xué)物質(zhì)來抑制宿主體內(nèi)的病原微生物的生長繁殖,以治療傳染病的措施。第七章 病毒1、什么是病毒?它有何特點?答:病毒:一個或數(shù)個RNA或DNA分子構(gòu)成的感染性因
23、子,通常(非必須)覆蓋有由一或數(shù)種蛋白質(zhì)構(gòu)成的外殼,有的外殼外還有膜結(jié)構(gòu);這些因子能將其核酸從一個宿主細胞傳遞給另一個宿主細胞;能利用宿主的酶系進行細胞內(nèi)復(fù)制;有些病毒還能將其基因組整合入宿主細胞DNA。特點:(1)不具有細胞結(jié)構(gòu),具有一般化學(xué)大分子特征。(2)一種病毒的毒粒內(nèi)只含有一種核酸,DNA或者RNA。朊病毒甚至僅由蛋白質(zhì)構(gòu)成。(3)大部分病毒沒有酶或酶系極不完全,不含催化能量代謝的酶,不能進行獨立的代謝作用。(4)嚴(yán)格的活細胞內(nèi)寄生,沒有自身的核糖體,沒有個體生長,也不進行二均分裂,必須依賴宿主細胞進行自身的核酸復(fù)制,形成子代。(5)個體微小,在電子顯微鏡下才能看見。(6)對大多數(shù)抗
24、生素不敏感,對干擾素敏感。(7)病毒是一類既具有化學(xué)大分子屬性,又具有生物體基本特征;既具有細胞外的感染性顆粒形式,又具有細胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨特生物類群。2、病毒殼體結(jié)構(gòu)有哪幾種對稱形式?毒粒的主要結(jié)構(gòu)類型有哪些?答:對稱形式:螺旋對稱殼體、二十四面體對稱殼體、雙對稱結(jié)構(gòu);主要結(jié)構(gòu)類型:裸露的二十四面體毒粒、裸露的螺旋毒粒、有包膜的二十四面體毒粒、有包膜的螺旋毒粒。3、什么是一步生長曲線?答:定量描述毒性噬菌體的生長規(guī)律,以感染時間為橫坐標(biāo),病毒的效價為縱坐標(biāo),繪制出的病毒特征曲線,即為一步生長曲線。分為潛伏期、裂解期和平穩(wěn)期。第八章 微生物遺傳1、為什么說微生物是遺傳學(xué)研究的最佳材料。
25、答:(1)微生物細胞結(jié)構(gòu)簡單,營養(yǎng)體一般為單倍體,方便建立純系。(2)繁殖速度快,很多微生物易于人工培養(yǎng),快速、大量生長繁殖。(3)對環(huán)境因素的作用敏感,環(huán)境條件對微生物作用直接均勻,易于獲得各類突變株,變異易被識別,操作性強。(4)易積累不同的中間及最終代謝產(chǎn)物。(5)存在多種方式的繁殖類型。(6)參與基因工程的載體供體受體三角色。2、歷史上證明核酸是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的經(jīng)典實驗有哪幾個?試舉其中之一加以說明。答:轉(zhuǎn)化實驗、噬菌體感染實驗、植物病毒的重建實驗。植物病毒的重建實驗:甲病毒的RNA與乙病毒的蛋白質(zhì)外殼混合得到煙草花葉的感染癥狀同甲病毒,并分離得到甲病毒;乙病毒的RNA與甲病毒的蛋白質(zhì)外
26、殼混合得到煙草花葉的感染癥狀同乙病毒,并分離得到乙病毒。說明雜種病毒的感染特征和蛋白質(zhì)的特性是由它的RNA所決定的,證明了遺傳物質(zhì)是RNA。3、簡述真細菌基因組的結(jié)構(gòu)特征。答:(1)遺傳信息的連續(xù)性;(2)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu);(3)結(jié)構(gòu)基因是單拷貝,rRNA基因是多拷貝;(4)基因組的重復(fù)序列少而短。4、簡述基因突變的主要特點。答:(1)非對應(yīng)性:突變的性狀與突變原因之間無直接的對應(yīng)關(guān)系。 (2)自發(fā)性:突變可以在沒有人為誘變因素處理下自發(fā)地產(chǎn)生。 (3)稀有性:突變率低且穩(wěn)定。 (4)規(guī)律性:某一特定性狀的突變率有一定的規(guī)律。 (5)獨立性:各種突變獨立發(fā)生,不會互相影響。 (
27、6)遺傳和回復(fù)性:變異性狀穩(wěn)定可遺傳。從原始的野生型基因到變異株的突變稱為正向突變,從突變株回到野生型的過程則稱為回復(fù)突變。 (7)可誘變性:誘變劑可提高突變率。5、簡述Ames試驗的原理。答:“生物化學(xué)統(tǒng)一性”法則:人和細菌在DNA的結(jié)構(gòu)及特性方面是一致的,能使微生物發(fā)生突變的誘變劑必然也會作用于人的DNA,使其發(fā)生突變,最后造成癌變或其他不良的后果。誘變劑的共性原則:化學(xué)藥劑對細菌的誘變率與其對動物的致癌性成正比。超過95%的致癌物質(zhì)對微生物有誘變作用;90%以上的非致癌物質(zhì)對微生物沒有誘變作用。6、簡述局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)與普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要區(qū)別。答:(1)被轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因共價地與噬菌體DNA連接,與噬
28、菌體DNA一起進行復(fù)制、包裝以及被導(dǎo)入受體細胞中;而普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)包裝的可能全部是宿主菌的基因。(2)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒攜帶特定的染色體片段并將固定的個別基因?qū)胧荏w,故稱為局限性轉(zhuǎn)導(dǎo);而普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)攜帶的宿主基因具有隨機性。7、簡述誘變育種的幾個工作原則。答:(1)選擇簡便有效的誘變劑;(2)挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株;(3)處理單細胞或單孢子懸液(避免菌落不純、表型延遲);(4)選用最適的誘變劑量;(5)充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng);(6)利用和創(chuàng)造形態(tài)、生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo);(7)設(shè)計采用高效篩選方案;(8)創(chuàng)造新型篩選方法。8、名詞解釋:同義突變,錯義突變,無義突變,移碼突變,營養(yǎng)缺陷型,條件致死突變型
29、,細菌的轉(zhuǎn)導(dǎo),細菌的遺傳轉(zhuǎn)化,普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo),局限性轉(zhuǎn)導(dǎo),感受態(tài)細胞,突變率答:同義突變:是指某個堿基的變化沒有改變產(chǎn)物氨基酸序列的密碼子的變化。錯義突變:是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的改變。無義突變:是指某個堿基的改變,使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)合成的終止密碼子(UAA,UAG,UGA)。移碼突變:是由于DNA序列中發(fā)生1-2個核苷酸的缺失或插入,是翻譯的可讀框發(fā)生改變,從而導(dǎo)致改變位置以后的氨基酸序列的完全變化。營養(yǎng)缺陷型:一種缺乏合成其生存所必須的營養(yǎng)物(包括氨基酸、維生素、堿基等)的突變型,只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營養(yǎng)或其前體物才能生長。條件致死突變型:在某一條件下具
30、有致死效應(yīng),而在另一條件下沒有致死效應(yīng)的突變型。細菌的轉(zhuǎn)導(dǎo):由噬菌體介導(dǎo)的細菌細胞間進行遺傳交換的一種方式:一個細胞的DNA通過病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個細胞中。細菌的遺傳轉(zhuǎn)化:同源或異源的游離DNA分子(質(zhì)粒和染色體DNA)被自然或人工感受態(tài)細胞攝取,并得到表達的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過程。普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo):噬菌體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)給供體染色體的任何部分到受體細胞中的轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。局限性轉(zhuǎn)導(dǎo):噬菌體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)給供體染色體上的特定部分到受體細胞中的轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。感受態(tài)細胞:具有攝取外源DNA能力的細胞。突變率:每一細胞在每一世代中發(fā)生某一性狀突變的概率。第九章 微生物基因表達的調(diào)控1、簡述負控誘導(dǎo)和正控誘導(dǎo)兩種操縱子轉(zhuǎn)錄調(diào)
31、控的差異。答:(1)調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物在負控誘導(dǎo)中是阻遏蛋白;在正控誘導(dǎo)中是激活蛋白。(2)阻遏蛋白的結(jié)合位點是操縱區(qū);激活蛋白的結(jié)合位點是激活蛋白結(jié)合位點。2、在負控系統(tǒng)中,如果操縱區(qū)缺失,將會發(fā)生什么情況?在正控系統(tǒng)中,如果激活結(jié)合位點缺失,又將怎樣?答:在負控系統(tǒng)中,如果操縱區(qū)缺失,則阻遏蛋白的結(jié)合位點缺失,就不能阻止結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。在正控系統(tǒng)中,如果激活結(jié)合位點缺失,則激活蛋白的結(jié)合位點缺失,就不能促使RNA聚合酶開始轉(zhuǎn)錄。第十章 微生物與基因工程1、名詞解釋:基因工程、克?。~)克?。▌釉~)答:基因工程:通過基因操作來定向改變或修飾生物體或人類自身,并具有明確應(yīng)用目的的活動稱為基因工程
32、。克?。~):指從一個共同祖先無性繁殖下來的一群遺傳上同一的DNA分子、細胞或個體所組成的特殊生命群體??寺。▌釉~):指從同一祖先產(chǎn)生同一的DNA分子群體、細胞群體或個體群體的過程。2、試舉一例說明基因工程包括哪幾個主要內(nèi)容或步驟?答:(1)從生物基因組中,經(jīng)酶切消化或PCR擴增,分離出帶有目的基因的DNA片段。(2)在體外將帶有目的基因的外源DNA片段連接到載體分子上,形成重組DNA分子。(3)轉(zhuǎn)化受體細胞(寄主細胞)。(4)篩選獲得了重組DNA分子的受體細胞克隆。(5)從篩選到的受體細胞提取已經(jīng)得到擴增的目的基因,供進一步分析。(6)將目的基因克隆到表達載體上,導(dǎo)入寄主細胞,使之在新的遺
33、傳背景下實現(xiàn)功能表達,產(chǎn)生人類所要的物質(zhì)。第十一章 微生物的生態(tài)1、名詞解釋:微生物生態(tài)學(xué),共生,競爭,寄生,捕食答:微生物生態(tài)學(xué):研究微生物與其周圍生物和非生物環(huán)境之間相互關(guān)系。共生:相互作用的兩種種群相互有利,二者之間是一種專性的、緊密的結(jié)合,是協(xié)同作用的進一步延伸。聯(lián)合的種群發(fā)展成一個共生體,有利于占據(jù)限制單個種群存在的生境。競爭:兩個種群因需要相同的生長基質(zhì)或其他環(huán)境因子,致使增長率和種群密度受到限制時發(fā)生的相互作用,其結(jié)果對兩個種群都是不利的。寄生:一種種群對另一種群的直接侵入,寄生者從宿主生活細胞或生活組織中獲得營養(yǎng),而對宿主產(chǎn)生不利影響。捕食:一種種群被另一種種群完全吞食,捕食種
34、群從被食種群得到營養(yǎng),而對被食種群產(chǎn)生不利影響。2、我國相關(guān)法規(guī)對飲用水微生物指標(biāo)的規(guī)定是細菌總數(shù)、大腸菌群指數(shù)分別不得超過多少?答:細菌總數(shù)不得超過 100個/毫升;大腸菌群指數(shù)不得超過 3個/升。 3、極端環(huán)境下的微生物主要有哪些類型? 答:嗜熱微生物、嗜冷微生物、嗜酸微生物、嗜堿微生物、嗜鹽微生物、嗜壓微生物、抗輻射的微生物。4、為什么說土壤是微生物生長發(fā)育的良好環(huán)境? 答:(1)為微生物提供了良好的 碳源、氮源和能源;(2)為微生物提供有機物、無機鹽、微量元素;(3)滿足了微生物對水分的要求;(4)pH適合,土壤pH值范圍在5.58.5之間;(5)溫度適合,季節(jié)與晝夜溫差不大;(6)土壤顆??障堕g充滿著空氣和水分;(7)適宜的滲透壓。5、簡述微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的作用。 答:(1)微生物是有機物的主要分解者;(2)微生物是物質(zhì)循環(huán)中的重要成員;(3)微生物是生態(tài)系統(tǒng)
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