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1、實(shí)驗(yàn)八實(shí)驗(yàn)八 血型鑒定及交叉配血血型鑒定及交叉配血實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一ABO血型鑒定 1 1實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理紅細(xì)胞膜上具有血型糖蛋白,作為抗原,也稱為凝集原;紅細(xì)胞膜上具有血型糖蛋白,作為抗原,也稱為凝集原;ABOABO血型就是根據(jù)紅細(xì)胞外表抗原來確定的,根據(jù)紅細(xì)血型就是根據(jù)紅細(xì)胞外表抗原來確定的,根據(jù)紅細(xì)胞上有或無胞上有或無A A抗原或抗原或/ /和和B B抗原,將血型分為抗原,將血型分為A A型、型、B B型、型、ABAB型及型及O O型四種。型四種。血清中含有相應(yīng)的特異性抗體稱為凝集素。血清中含有相應(yīng)的特異性抗體稱為凝集素。凝集原和相應(yīng)的凝集素特異性結(jié)合,使紅細(xì)胞凝集成團(tuán),凝集原和相應(yīng)的凝集素特異
2、性結(jié)合,使紅細(xì)胞凝集成團(tuán),進(jìn)而引起紅細(xì)胞破裂,產(chǎn)生溶血。進(jìn)而引起紅細(xì)胞破裂,產(chǎn)生溶血。ABOABO血型鑒定的原理是利用紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn),將待測血液血型鑒定的原理是利用紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn),將待測血液分別與知含分別與知含A A抗體和抗體和B B抗體的規(guī)范血清混合,察看能否抗體的規(guī)范血清混合,察看能否發(fā)生凝集景象,判別待測血液紅細(xì)胞上有何種抗原,由發(fā)生凝集景象,判別待測血液紅細(xì)胞上有何種抗原,由此確定待測血液的血型。此確定待測血液的血型。ABO血型分類ABO血型正反定型結(jié)果 一ABO血型鑒定2 2血型鑒定方法血型鑒定方法標(biāo)志凹載玻片:左上角寫標(biāo)志凹載玻片:左上角寫A A,右上角寫,右上角寫B(tài) B。分別汲取
3、規(guī)范分別汲取規(guī)范A A血清和規(guī)范血清和規(guī)范B B血清各血清各1 1滴滴于雙凹載玻片左端和右端。滴滴于雙凹載玻片左端和右端。采血針刺破左手無名指尖,待血液出來后,用采血針刺破左手無名指尖,待血液出來后,用2 2支毛細(xì)滴管汲取血液,支毛細(xì)滴管汲取血液,分別參與到玻片左、右兩側(cè)的血清內(nèi),并用牙簽攪拌,使規(guī)范血分別參與到玻片左、右兩側(cè)的血清內(nèi),并用牙簽攪拌,使規(guī)范血清與血液混勻。切勿混用毛細(xì)滴管和牙簽!清與血液混勻。切勿混用毛細(xì)滴管和牙簽!手持玻片轉(zhuǎn)動(dòng)數(shù)次,轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)玻片應(yīng)堅(jiān)持在一個(gè)程度面上,然后置室溫手持玻片轉(zhuǎn)動(dòng)數(shù)次,轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)玻片應(yīng)堅(jiān)持在一個(gè)程度面上,然后置室溫下下5min5min后察看結(jié)果。后察看結(jié)果。
4、肉眼察看:假設(shè)外觀略呈花邊狀或鋸齒狀,看上去有沉淀,那么多為肉眼察看:假設(shè)外觀略呈花邊狀或鋸齒狀,看上去有沉淀,那么多為凝集;假設(shè)血滴呈均勻形狀,邊緣整齊,那么多為不凝集。凝集;假設(shè)血滴呈均勻形狀,邊緣整齊,那么多為不凝集。進(jìn)一步在低倍鏡下察看:在低倍鏡下,假設(shè)察看到紅細(xì)胞凝集成團(tuán),進(jìn)一步在低倍鏡下察看:在低倍鏡下,假設(shè)察看到紅細(xì)胞凝集成團(tuán),或尚有少數(shù)游離細(xì)胞,那么為凝集景象;假設(shè)紅細(xì)胞均為游離形或尚有少數(shù)游離細(xì)胞,那么為凝集景象;假設(shè)紅細(xì)胞均為游離形狀,那么為不凝集。根據(jù)鏡下所見有無凝集景象斷定血型。狀,那么為不凝集。根據(jù)鏡下所見有無凝集景象斷定血型。取干凈載玻片取干凈載玻片滴加定型劑滴加定
5、型劑消毒消毒取血取血消毒消毒取血取血消毒消毒察看察看記錄結(jié)果記錄結(jié)果用針扎一下消毒部位,使血冒出,立刻滴一滴血液在抗A或B上。 再用7075的酒精擦洗消毒剛用針扎的部位,然后再取一滴血液于抗B或A上。 察看有無凝集,并按下表斷定結(jié)果。 血型抗A試劑抗B試劑ABOAB+-+-+-+呈現(xiàn)均勻的淡紅色時(shí),闡明不凝集,用呈現(xiàn)均勻的淡紅色時(shí),闡明不凝集,用“一號表示。一號表示。 在試劑里凝結(jié)成絮團(tuán)狀,構(gòu)成鮮明的對比,闡明凝集,用在試劑里凝結(jié)成絮團(tuán)狀,構(gòu)成鮮明的對比,闡明凝集,用“十號表示。十號表示。 交叉配血的要求交叉配血的要求 交叉配血的目的交叉配血的目的交叉配血實(shí)驗(yàn)方法交叉配血實(shí)驗(yàn)方法 鹽水介質(zhì)配血方法鹽水介質(zhì)配血方法患者獻(xiàn)血者主側(cè)次側(cè) 抗球蛋白配血方法抗球蛋白配血方法 抗球蛋白方法配血方法
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