血站血液檢測技術(shù)操作規(guī)程

1、血站血液檢測技術(shù)操作規(guī)程1.1 輸血相關(guān)傳染病的檢測項(xiàng)目及檢測方法1.1.1 檢測項(xiàng)目1.1.1.1人類免疫缺陷病毒（HIV）感染標(biāo)志物，包括：（1 ）人類免疫缺陷病毒核酸（HIV RNA）；（2）人類免疫缺陷病毒 1 型抗體 （ 抗 HIV-1） 和人類免 疫缺陷病毒 2 型抗體（抗 HIV-2 ），或者抗 HIV-1 、抗 HIV-2 和 p24 抗原（HIV Ag/Ab）。1.1.1.2 乙型肝炎病毒（HBV感染標(biāo)志物，包括：（1 ）乙型肝炎病毒核酸（ HBV DNA）；（2）乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）。1.1.1.3 丙型肝炎病毒（HCV）感染標(biāo)志物，包括：（1 ）丙型肝炎病毒

2、核酸（ HCV RNA）；（2）丙型肝炎病毒抗體（抗 HCV，或者HCV抗原和 抗體 （HCV Ag/Ab） 。1.1.1.4 梅毒螺旋體感染標(biāo)志物：梅毒螺旋體特異性抗體（抗 TP）。1.1.1.5 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ ALT ）。1.1.1.6 國家和省級衛(wèi)生計(jì)生行政部門規(guī)定的地方性、 時限性 輸血相關(guān)傳染病標(biāo)志物。1.1.2 檢測方法1.1.2.1 檢測方法包括：（ 1）核酸擴(kuò)增檢測技術(shù)，包括轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的核酸擴(kuò)增檢 測技術(shù)（ TMA ）、實(shí)時熒光聚合酶鏈反應(yīng)（ PCR）；（2）血清學(xué)檢測技術(shù)， 包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （ ELISA ）、 化學(xué)發(fā)光免疫分析試驗(yàn)（ CLIA ）。（ 3）速率法（

3、濕化學(xué)法） 。1.1.2.2 檢測策略（ 1）實(shí)施核酸檢測試劑批簽發(fā)之前， HIV、 HBV 和 HCV 感染標(biāo)志物應(yīng)采用 2 遍血清學(xué)檢測和 1 遍核酸檢測，血清學(xué) 檢測應(yīng)采用 2 個不同生產(chǎn)廠家的試劑；實(shí)施核酸檢測試劑批 簽發(fā)之后，HIV、HBV和HCV感染標(biāo)志物應(yīng)采用核酸和血清學(xué) 檢測 2種方法各進(jìn)行 1 次檢測。對于酶免檢測陽性的標(biāo)本可 不再進(jìn)行核酸檢測，直接視為該項(xiàng)目檢測結(jié)果不合格。（2）梅毒螺旋體感染標(biāo)志物采用 2 個不同生產(chǎn)廠家的 血清學(xué)檢測試劑進(jìn)行檢測。（3）ALT 采用速率法（濕化學(xué)法）進(jìn)行 1 次檢測。1.2 血液檢測試劑1.2.1 試劑選擇1.2.1.1 必須選擇經(jīng)國家食

4、品藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)用于血 源篩查的體外診斷試劑。1.2.1.2 血站實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立血液檢測試劑的評價、選擇和確認(rèn)程序，可自行開展試劑評價 （見附錄B），也可充分利用國家或省級專業(yè)機(jī)構(gòu)的評價數(shù)據(jù)。1.2.2 證照要求1.2.2.1 應(yīng)建立血液檢測試劑證照審核程序，在采購前和驗(yàn) 收時核實(shí)應(yīng)具備的有效證照文件。1.2.2.2 采購藥品類檢測試劑應(yīng)索取以下加蓋供貨單位印章 的資料存檔：（1）藥品生產(chǎn)許可證或者藥品經(jīng)營許可證和營業(yè)執(zhí) 照復(fù)印件；（2）藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范或者藥品經(jīng)營質(zhì)量管理規(guī) 范認(rèn)證證書復(fù)印件；（3）藥品的批準(zhǔn)證明文件復(fù)印件；（4）供貨單位藥品銷售委托書；（5）銷售人員有效身份證明復(fù)印

5、件；（6）血源篩查體外診斷試劑的批簽發(fā)文件；（7）出廠質(zhì)量檢驗(yàn)報告等。1.2.2.3 采購醫(yī)療器械類檢測試劑應(yīng)索取以下加蓋供貨單位 印章的資料存檔： （1）醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證 、醫(yī)療器械 經(jīng)營許可證 、第二類醫(yī)療器械經(jīng)營備案憑證、第一類醫(yī)療 器械生產(chǎn)備案憑證、營業(yè)執(zhí)照復(fù)印件； （2）醫(yī)療器械注冊證或者第一類醫(yī)療器械備案憑證復(fù)印件；（3）供貨單位醫(yī)療器械銷售委托書；（4）銷售人員有效身份證明復(fù)印件；（5）出廠質(zhì)量檢驗(yàn)報告等。1.2.3 進(jìn)貨檢查驗(yàn)收 應(yīng)建立并執(zhí)行進(jìn)貨檢查驗(yàn)收制度，檢 查驗(yàn)收內(nèi)容主要有：（1）驗(yàn)明藥品合格證明和其他標(biāo)識； （2）外觀檢查（運(yùn)輸包裝箱完整無損，運(yùn)輸冷鏈符合要求， 試劑

6、包裝盒完整無損，無液體泄漏） ； （3）到貨數(shù)量和銷售憑證（購貨單位、試劑、供貨商等名 稱，規(guī)格、批號、數(shù)量、價格） ；（4）醫(yī)療器械采購、驗(yàn)收、存儲、使用管理應(yīng)符合醫(yī)療 器械管理?xiàng)l例有關(guān)規(guī)定。4.2.4 隔離存放 應(yīng)將通過進(jìn)貨檢查驗(yàn)收的試劑進(jìn)行隔離存 放，防止誤用。1.2.5 質(zhì)量抽檢1.2.5.1 應(yīng)建立并執(zhí)行試劑的質(zhì)量抽檢制度，應(yīng)對每次購進(jìn) 的試劑進(jìn)行質(zhì)量抽檢。1.2.5.2 應(yīng)將試劑說明書列入文件控制范圍。應(yīng)對試劑說明 書版本和內(nèi)容進(jìn)行檢查。其操作要求如已變更，實(shí)驗(yàn)室的試 驗(yàn)操作在試劑啟用時應(yīng)同時變更，嚴(yán)格控制未按試劑說明書 進(jìn)行試驗(yàn)操作的情形發(fā)生。1.2.5.3 試劑盒組成、組分性狀

7、與說明書一致，無泄漏，足 量，標(biāo)識正確。1.2.5.4 用于質(zhì)量抽檢的標(biāo)本有： 1）試劑盒對照； 2）室內(nèi)質(zhì)控品； 3）實(shí)驗(yàn)室自制或商品化的血清盤。前2 種為必須， 后 1 種為可選。1.2.5.5 質(zhì)量抽檢結(jié)果要求： 1）試劑盒對照品檢測結(jié)果符合 試劑說明書要求； 2）室內(nèi)質(zhì)控品檢測結(jié)果符合既定要求； 3） 如果適用，實(shí)驗(yàn)室自制或商品化的血清盤檢測結(jié)果符合既定 要求。1.2.5.6 實(shí)驗(yàn)室核酸檢測用標(biāo)本匯集管、核酸提取純化和擴(kuò) 增檢測使用的消耗品原則上應(yīng)由核酸檢測試劑廠商配套提 供。1.2.6 審核批準(zhǔn)1.2.6.1 應(yīng)由授權(quán)人對采購驗(yàn)收和質(zhì)量抽檢的過程和結(jié)果進(jìn) 行審核，批準(zhǔn)其用于血液檢測。

8、1.2.6.2 應(yīng)建立和保存試劑采購驗(yàn)收、質(zhì)量抽檢和審核批準(zhǔn) 的記錄（見附錄 C）。1.2.7 試劑保存和質(zhì)量監(jiān)控1.2.7.1 應(yīng)對經(jīng)批準(zhǔn)使用的試劑進(jìn)行標(biāo)識和放行。1.2.7.2 應(yīng)按試劑說明書要求的保存條件進(jìn)行保存，應(yīng)在有 效期內(nèi)使用。1.2.7.3 應(yīng)對試劑的庫存（批號、失效期、庫存量等）進(jìn)行 管理，防止試劑過期或者中斷。1.2.7.4 核酸檢測試劑和耗材應(yīng)保存在試劑耗材儲存和準(zhǔn)備 區(qū)。經(jīng)過質(zhì)檢后的試劑，應(yīng)將試劑盒內(nèi)的陽性對照和質(zhì)控品 放置于標(biāo)本處理區(qū)的冰箱內(nèi)。1.2.7.5 在試劑保存和使用過程中應(yīng)注意試劑性能出現(xiàn)衰 減，如果試劑盒對照品和室內(nèi)質(zhì)控品的檢測值呈現(xiàn)連續(xù)走低 趨勢且無法使其

9、回升糾正，應(yīng)考慮終止使用。1.3 儀器設(shè)備使用要求1.3.1 新的或者經(jīng)過維修后可能影響檢測結(jié)果的檢測設(shè)備 在正式投入正常使用之前應(yīng)經(jīng)過確認(rèn)。新設(shè)備的確認(rèn)應(yīng)包括 安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)。經(jīng)過大修的設(shè)備根據(jù)需要 進(jìn)行適當(dāng)確認(rèn)，必要時應(yīng)進(jìn)行計(jì)量檢定或校準(zhǔn)。核酸檢測系統(tǒng)正式投入使用之前，還應(yīng)進(jìn)行分析靈敏度 驗(yàn)證。1.3.2 按照檢測設(shè)備用戶手冊要求進(jìn)行操作， 包括使用、校準(zhǔn)、 維護(hù)等工作。1.3.3 如果使用多臺設(shè)備檢測同一個項(xiàng)目，應(yīng)對設(shè)備之間的 性能和差異進(jìn)行比較。1.3.4 應(yīng)定期檢查自動化檢測設(shè)備試驗(yàn)參數(shù)的設(shè)置，應(yīng)保存 檢查記錄。1.3.5 在試驗(yàn)過程中自動化檢測設(shè)備出現(xiàn)故障需要進(jìn)行手

10、工操作時，應(yīng)注意自動化設(shè)備操作和手工操作的銜接及其對 結(jié)果的影響。應(yīng)記錄手工操作步驟和操作者。1.4 實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)1.1.1 應(yīng)使用實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)對整個檢測過程（從標(biāo)本接收、試驗(yàn)、結(jié)果和結(jié)論判定）進(jìn)行信息化管理。1.1.2 實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)的功能應(yīng)包括： 1）標(biāo)本接收； 2） 試驗(yàn)項(xiàng)目選擇； 3）試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與匯總； 4）試驗(yàn)數(shù)據(jù)的計(jì) 算； 5）試驗(yàn)結(jié)果的判定； 6）血液檢測結(jié)論的判定； 7）血 液檢測結(jié)論傳輸至 BMIS 并為其所利用。1.1.3 實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)運(yùn)行參數(shù)的設(shè)置應(yīng)建立權(quán)限控 制。應(yīng)保存設(shè)置參數(shù)的書面記錄，并定期將其與實(shí)際設(shè)置參 數(shù)對照，確保設(shè)置無誤，應(yīng)保存核實(shí)記

11、錄。1.1.4 集中化檢測實(shí)驗(yàn)室和委托其開展核酸檢測實(shí)驗(yàn)室的信 息管理系統(tǒng)宜具備實(shí)驗(yàn)室間標(biāo)本信息傳遞、檢測結(jié)果反饋和 結(jié)果利用的功能。1.5 核酸檢測實(shí)驗(yàn)室防污染控制1.5.1 核酸檢測實(shí)驗(yàn)室分區(qū)及功能要求。原則上可以設(shè)置 3 個獨(dú)立的工作區(qū)域 : 試劑耗材儲存與準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本處理和標(biāo) 本制備區(qū)（核酸純化） 、擴(kuò)增檢測區(qū)，各區(qū)域空間完全相互 獨(dú)立，不能直接相通。其中試劑耗材儲存與準(zhǔn)備區(qū)必須獨(dú)立 設(shè)置；如果單機(jī)檢測設(shè)備可以實(shí)現(xiàn)混樣、核酸純化、擴(kuò)增檢 測中的兩項(xiàng)或多項(xiàng)功能，相關(guān)區(qū)域可以根據(jù)設(shè)備功能進(jìn)行相 應(yīng)合并。1.5.2 核酸檢測實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)。 實(shí)驗(yàn)室實(shí)施空氣流向控制， 擴(kuò)增前和擴(kuò)增后區(qū)域應(yīng)具有

12、獨(dú)立通風(fēng)系統(tǒng)，擴(kuò)增后區(qū)域保持負(fù)壓狀態(tài)，其它區(qū)域保持正壓或常壓狀態(tài)，防止擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn) 入擴(kuò)增前的區(qū)域。1.5.3 核酸檢測實(shí)驗(yàn)室的清潔、消毒及環(huán)境監(jiān)控。核酸檢測 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有清潔、 消毒設(shè)施， 在試驗(yàn)結(jié)束后對實(shí)驗(yàn)室地面、 實(shí)驗(yàn)臺面和空氣實(shí)施清潔和消毒。消毒時應(yīng)使用各區(qū)域?qū)Ｓ?的清潔用具，遵循從清潔區(qū)域向污染區(qū)域?qū)嵤┫镜脑瓌t， 防止交叉污染。1.5.4 核酸檢測實(shí)驗(yàn)室污染的控制。1.5.1.1 單向工作流向制度。 標(biāo)本接收區(qū)域應(yīng)與核酸實(shí)驗(yàn)室區(qū) 域分開，防止過多人員進(jìn)入標(biāo)本處理區(qū)域造成污染。實(shí)驗(yàn)室 人員和物品的工作流向應(yīng)為試劑耗材儲存與準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本處 理和標(biāo)本制備區(qū)（核酸純化） 、擴(kuò)增檢測區(qū)，不得逆

13、向流動。1.5.1.2 防止實(shí)驗(yàn)室核酸擴(kuò)增產(chǎn)物污染和交叉污染的措施。 嚴(yán) 格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室分區(qū)制度；各區(qū)域只用于特定的操作，不得從 事其它工作；各區(qū)域的試劑、儀器、設(shè)備及各種物品包括試 驗(yàn)記錄、標(biāo)記筆等均為該區(qū)專用，不得交叉使用。1.6 血液檢測標(biāo)本1.6.1 血液標(biāo)本的一般要求1）標(biāo)本與血液、獻(xiàn)血者一一對應(yīng)； 2）標(biāo)本質(zhì)量符合檢測項(xiàng)目技術(shù)要求； 3）標(biāo)本信息具 有可追溯性。1.6.2 血液標(biāo)本采集與送檢程序的制定1.6.2.1 血站實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與血液標(biāo)本采集和送檢部門進(jìn)行充分 溝通與協(xié)商，共同制定標(biāo)本采集和送檢程序，質(zhì)量管理部門 應(yīng)予以審核。1.6.2.2 血液集中化檢測的委托方和受托方應(yīng)進(jìn)行充分溝

14、通 與協(xié)商，共同制定標(biāo)本采集和送檢程序，雙方質(zhì)量管理部門 應(yīng)予以審核，并經(jīng)雙方法定代表人批準(zhǔn)。1.6.2.3 標(biāo)本采集和送檢程序的要點(diǎn)有：（ 1 ）標(biāo)本類型及檢測項(xiàng)目、標(biāo)本量、標(biāo)本管、標(biāo)本運(yùn)輸及 包裝要求；（ 2）標(biāo)本的唯一性標(biāo)識（條形碼） ；（ 3 ）標(biāo)本的質(zhì)量要求；（ 4 ）標(biāo)本采集、送檢和接收；（ 5）標(biāo)本信息和檢測報告信息的傳輸與接收，檢測報告時 限；（ 6）如為集中化檢測，檢測的委托方和受托方的標(biāo)識與聯(lián) 系方式。1.6.3 血液標(biāo)本管的選擇1.6.3.1 應(yīng)根據(jù)每項(xiàng)試驗(yàn)的技術(shù)要求，采用相應(yīng)類型的真空 采血管留取檢測標(biāo)本。試管應(yīng)無裂痕、無滲漏，容量應(yīng)滿足 檢測項(xiàng)目要求。核酸檢測標(biāo)本管應(yīng)

15、使用無菌、無 DNA 酶、 無 RNA 酶的真空采血管，宜采用含惰性分離膠的乙二胺四 乙酸二鉀（ EDTA-K 2）抗凝真空采血管。采血管的保存溫度應(yīng)不高于25 C。標(biāo)本因運(yùn)輸或檢測頻次等原因不能在72小時內(nèi)完成檢測時，標(biāo)本需要進(jìn)行冷凍保存，冷凍保存的采血 管應(yīng)經(jīng)過性能驗(yàn)證，包括采血管材質(zhì)耐低溫性能、惰性分離 膠耐低溫性能。1.6.4 血液標(biāo)本的采集與標(biāo)識1.6.1.1 應(yīng)對血液標(biāo)本采集前的準(zhǔn)備、標(biāo)本的采集、標(biāo)識、 登記和保存過程實(shí)施有效控制，一次只對一袋血液和同源血 液標(biāo)本管貼簽，確保標(biāo)本與血液、獻(xiàn)血者一一對應(yīng)，貼簽無 誤。標(biāo)本質(zhì)量符合檢測項(xiàng)目技術(shù)要求。1.6.1.2 檢測結(jié)果用于血液放行的

16、血液標(biāo)本，應(yīng)在采集血袋 血液的同時或者從血袋血液中留取。1.6.1.3 血液標(biāo)本的采集與標(biāo)識的具體操作見本規(guī)程第 2 章 全血采集。1.6.5 血液標(biāo)本采集后的處理1.6.5.1 可以電子或書面方式登記標(biāo)本信息，應(yīng)進(jìn)行核對， 防止信息錄入錯誤?？赏ㄟ^網(wǎng)絡(luò)、傳真或其它形式傳輸標(biāo)本 信息。1.6.5.2 核酸檢測標(biāo)本采集后，應(yīng)在 4 小時內(nèi)離心，分離細(xì) 胞和血漿。如不能按上述要求處理采集的標(biāo)本，應(yīng)對所采集 標(biāo)本的處理方式進(jìn)行確認(rèn)，應(yīng)定期進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控。標(biāo)本需要 冰凍運(yùn)輸或保存的，宜采用水平離心機(jī)，以防止二次離心時膠面不平整發(fā)生斷裂；離心后 24小時內(nèi)在-40 C -18 C凍存。165.3 血液標(biāo)本

17、在采血現(xiàn)場的臨時保存溫度為 28C。1.6.6 血液標(biāo)本包裝與運(yùn)輸1.6.6.1 標(biāo)本應(yīng)隔離密封包裝，包裝材料應(yīng)滿足防水、防破 損、防外泄、保持溫度、易于消毒處理。裝箱時應(yīng)保持標(biāo)本 管口向上。1.6.6.2 對于送交集中化檢測實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本的包裝要求主要有：1）可使標(biāo)本在運(yùn)輸在過程中保持210C； 2）外包裝有明確標(biāo)識（放置朝向、易碎、生物危險）和交付接收雙方 的聯(lián)系方式。1.6.6.3 標(biāo)本應(yīng)保持在 210C運(yùn)輸，應(yīng)對運(yùn)輸過程的冷鏈 效果進(jìn)行確認(rèn)并定期監(jiān)測。冰凍的樣本運(yùn)輸溫度應(yīng)在 -40 C -10 G如果運(yùn)輸時間不超過 8小時的，可采用 2 C 10 C運(yùn) 輸，標(biāo)本到達(dá)接收實(shí)驗(yàn)室后，應(yīng)在 7

18、2 小時內(nèi)完成檢測，不 可再次凍融。運(yùn)輸包裝應(yīng)有標(biāo)本固定的裝置，保證標(biāo)本管在 運(yùn)輸過程中不破損。1.6.6.4 應(yīng)對標(biāo)本運(yùn)輸過程進(jìn)行記錄，其要點(diǎn)有：（1）啟運(yùn)時間、地點(diǎn)；（2）運(yùn)抵時間、地點(diǎn)；（ 3）標(biāo)本箱編號、標(biāo)本類型、數(shù)量；（ 4）運(yùn)輸包裝有無受損、有無泄漏；（5）運(yùn)輸時間 2小時以上的應(yīng)記錄箱內(nèi)溫度；（ 6 ）標(biāo)本交運(yùn)人、承運(yùn)人；（ 7）運(yùn)輸過程中發(fā)生的可能影響標(biāo)本質(zhì)量的意外事件及處 理措施。1.6.7 血液標(biāo)本的交接1.6.7.1 接收時標(biāo)本應(yīng)核查：（ 1 ）標(biāo)本來源、數(shù)量、采集時間；（ 2）標(biāo)本采集管使用正確與否；（ 3）標(biāo)本是否滿足既定的質(zhì)量要求；（ 4 ）標(biāo)本與送檢單信息對應(yīng)性和

19、完整性。1.6.7.2 如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的標(biāo)本移出，對溢出標(biāo) 本管和原包裝箱進(jìn)行消毒并記錄，必要時報告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人 和送檢單位。1.6.7.3 應(yīng)拒收標(biāo)本的情形有：（ 1）檢測申請關(guān)鍵信息缺失或不符；（ 2）標(biāo)本管上無標(biāo)識或標(biāo)識不清、不正確；（ 3）標(biāo)本管選用錯誤；（ 4 ）標(biāo)本量不足或被稀釋；（ 5）不符合試劑說明書要求的情形。1.6.7.4 標(biāo)本交接雙方應(yīng)在標(biāo)本交接記錄簽名。1.6.8 標(biāo)本接收后的處理及保存1.6.8. 1 核酸檢測標(biāo)本的開蓋應(yīng)在生物安全柜或正壓環(huán)境中， 或者全自動開蓋系統(tǒng)中進(jìn)行，自動開蓋和手工開蓋均應(yīng)有防 止標(biāo)本交叉污染的措施。1.6.8. 2 核酸檢測標(biāo)本加樣

20、（匯集）前和加樣（匯集）后 轉(zhuǎn)移在2-8 C中保存。用于血清學(xué)檢測的標(biāo)本，應(yīng)于米樣后1 周內(nèi)完成檢測； 用于核酸檢測的標(biāo)本應(yīng)于采樣后 72 小時內(nèi) 完成檢測，因特殊情況不能在上述時限內(nèi)完成檢測的標(biāo)本應(yīng)在-20 C以下凍存。凍存的標(biāo)本應(yīng)在 2-8 C或18-25 C條件下 復(fù)融。完全復(fù)融后標(biāo)本輕輕顛倒混勻 3-5 次，如有纖原析出， 應(yīng)在標(biāo)本采集時的離心條件下進(jìn)行再次離心，同時檢查標(biāo)本 條碼是否破損。1.7 試驗(yàn)操作1.7.1 按照試劑生產(chǎn)方提供的試劑使用說明書進(jìn)行操作。1.7.2 如需對個別試驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行修改，應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)。1.7.3 宜采用自動化檢測設(shè)備進(jìn)行標(biāo)本和試劑加樣以及試 驗(yàn)過程。1.7.

21、4 自動化設(shè)備運(yùn)行參數(shù)的設(shè)置應(yīng)建立權(quán)限控制。應(yīng)保 存設(shè)置參數(shù)的書面記錄，并定期將其與實(shí)際設(shè)置參數(shù)對 照，確保設(shè)置無誤，應(yīng)保存核實(shí)記錄。1.7.5 應(yīng)保存自動化檢測設(shè)備運(yùn)行記錄，并定期對運(yùn)行狀態(tài) 進(jìn)行審核。1.7.6 自動化檢測設(shè)備運(yùn)行時，如果需要人工輔助或干預(yù)， 應(yīng)對實(shí)施人工輔助或干預(yù)的人員、人工輔助或干預(yù)的時間和 內(nèi)容、與自動化檢測設(shè)備運(yùn)行的銜接等進(jìn)行記錄。1.7.7 如果是采用手工操作進(jìn)行標(biāo)本和試劑加樣，應(yīng)完整記 錄每一加樣和操作步驟。1.8 試驗(yàn)性能監(jiān)控1.8.1 一般要求1.8.1.1 在血液檢測過程中，應(yīng)對試驗(yàn)性能持續(xù)進(jìn)行監(jiān)控， 以發(fā)現(xiàn)正在發(fā)生的任何性能變化，這些變化如果沒有得到及

22、時糾正，最終可能導(dǎo)致試驗(yàn)批次的失敗，或者弱陽性標(biāo)本的 漏檢。1.8.1.2 選擇能夠?qū)崟r反映試驗(yàn)性能變化的參數(shù)進(jìn)行試驗(yàn)性 能監(jiān)控。這些參數(shù)包括：（ 1）試驗(yàn)對照的檢測值；（ 2）質(zhì)控品的檢測值。1.8.1.3 選擇能夠反映試驗(yàn)系統(tǒng)變化的參數(shù)進(jìn)行試驗(yàn)系統(tǒng)監(jiān) 控。包括：（ 1）血清學(xué)檢測系統(tǒng)初、復(fù)試反應(yīng)率及兩者的比例（復(fù)試 有反應(yīng)性標(biāo)本數(shù) /初次試驗(yàn)有反應(yīng)性標(biāo)本數(shù)） 。（ 2 ） 核酸檢測系統(tǒng)初篩陽性率（混檢或聯(lián)檢陽性率）、鑒別陽性率、拆分陽性率等。1.8.1.4 用于實(shí)時監(jiān)控試驗(yàn)性能的試驗(yàn)對照和質(zhì)控品若由試 劑廠商提供，其檢測值應(yīng)滿足試劑說明書的有效性判定標(biāo) 準(zhǔn)。在此基礎(chǔ)上， 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)增加使用第

23、三方提供的質(zhì)控品 （外 部質(zhì)控品）實(shí)時監(jiān)控試驗(yàn)性能。1.8.1.5 外部質(zhì)控品可用于監(jiān)控試驗(yàn)的有效性和穩(wěn)定性。 其使 用應(yīng)滿足以下要求：（ 1 ） 質(zhì)控品以合適的基質(zhì)進(jìn)行稀釋；（ 2） 日常使用前應(yīng)對質(zhì)控品的種類、規(guī)格、外觀、批號和 效期進(jìn)行檢查；（ 3） 應(yīng)與血液檢測標(biāo)本在相同的檢測條件下進(jìn)行檢測。每 個檢測系統(tǒng)的每批次至少應(yīng)包括 1 份（套）外部質(zhì)控品；（ 4）外部質(zhì)控品應(yīng)為第三方提供的質(zhì)控品，與試驗(yàn)對照 （試劑盒提供）不可相互替代；（ 5） 質(zhì)控品所含目標(biāo)檢測物的濃度應(yīng)滿足試驗(yàn)要求。血清學(xué)檢測標(biāo)志物含量接近檢測限（S/CO值為25）;核酸檢測標(biāo)志物（弱陽性質(zhì)控品）濃度建議為核酸檢測系統(tǒng)最

24、低檢測 限的 2-5 倍（最低檢測限是指標(biāo)本中可能被檢出的病毒，通 常指在常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室條件下>95% 的標(biāo)本可被檢出，一般以IU/ml 表示）；6） 用量值表示樣品性質(zhì)的質(zhì)控品，其量值應(yīng)具有溯源性。1.8.2 實(shí)驗(yàn)室可利用質(zhì)控品的檢測數(shù)據(jù)開展室內(nèi)質(zhì)控，監(jiān)控 試驗(yàn)有效性和穩(wěn)定性，監(jiān)測系統(tǒng)的趨勢變化。血清學(xué)檢測和 ALT 檢測室內(nèi)質(zhì)控方法參見附錄 D 。核酸檢測質(zhì)控品的檢測 結(jié)果應(yīng)與預(yù)期檢測結(jié)果相一致。1.8.3 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)選擇參加國家衛(wèi)生計(jì)生委指定的血站參比實(shí)驗(yàn)室組織的實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評價活動，頻率每年不少于21.9 試驗(yàn)結(jié)果的判定1.9.1 試驗(yàn)結(jié)果判定規(guī)則 應(yīng)制定明確的試驗(yàn)有效性和標(biāo) 本

25、試驗(yàn)結(jié)果判定規(guī)則，將其編寫或設(shè)置成為計(jì)算機(jī)程序，對 其編寫、設(shè)置、修改和啟用應(yīng)進(jìn)行控制，所有修改均應(yīng)保存 原版本，確保其具有可追溯性。1.9.2 試驗(yàn)有效的判定1.9.2.1 應(yīng)核查每批試驗(yàn)所使用的試劑、設(shè)備、試驗(yàn)過程、 有無人工干預(yù)或其他非正常工作步驟出現(xiàn)等關(guān)鍵控制點(diǎn)，正 確無誤后方可對試驗(yàn)有效性進(jìn)行判定。1.9.2.2 試劑盒各種試驗(yàn)對照的檢測值符合試劑說明書的要 求，是判定試驗(yàn)有效的最低要求。1.9.2.3 外部質(zhì)控品的檢測值作為試驗(yàn)有效性的判定依據(jù) 時，其檢測值應(yīng)符合既定要求。1.9.2.4 外部質(zhì)控品的檢測值作為試驗(yàn)穩(wěn)定性的監(jiān)控指標(biāo) 時，其檢測值應(yīng)符合既定范圍。如果超出既定范圍，按既

26、定 程序決定試驗(yàn)是否有效。1.9.2.5 如果采用人工判定，應(yīng)詳細(xì)記錄每一判定依據(jù)，應(yīng) 雙人核查。1.9.2.6 如果判定一批試驗(yàn)無效，則該批試驗(yàn)所有標(biāo)本的 檢測結(jié)果均為無效。1.9.3 標(biāo)本試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算和判定 判定試驗(yàn)有效后，按照試 劑說明書的要求計(jì)算臨界值和 /或灰區(qū)。 根據(jù)標(biāo)本檢測值與臨 界值的比較結(jié)果，判定為標(biāo)本檢測結(jié)論為無反應(yīng)性、有反應(yīng) 性或不確定。1.9.4 對基于 PCR 檢測原理的核酸檢測系統(tǒng)，應(yīng)觀察整體 擴(kuò)增曲線， 對結(jié)果的有效性進(jìn)行判定。 對非特異擴(kuò)增曲線， 應(yīng)分析原因，必要時對該標(biāo)本重新進(jìn)行檢測。1.10 檢測流程及結(jié)果判定1.10.1 血清學(xué)檢測結(jié)果判定。初次試驗(yàn)為有反

27、應(yīng)性的檢測 標(biāo)本的后續(xù)處理有 2 種選擇。方案 1： 以同一試驗(yàn)對原血樣（或從血袋導(dǎo)管重新取樣）做雙孔 復(fù)試，如果雙孔復(fù)試結(jié)果均為無反應(yīng)性， 其初試有反應(yīng)性 可能由于假反應(yīng)性或技術(shù)誤差導(dǎo)致，檢測結(jié)論為無反應(yīng)性， 血液可放行供臨床使用；如果雙孔復(fù)試結(jié)果中任何 1 孔為有 反應(yīng)性， 則檢測結(jié)論為有反應(yīng)性，對應(yīng)的血液及由其制備 的所有成分應(yīng)隔離并報廢，將血液標(biāo)本轉(zhuǎn)送相關(guān)實(shí)驗(yàn)室做進(jìn) 一步確證或補(bǔ)充試驗(yàn) （圖 4-1） 。方案 2：不做重復(fù)試驗(yàn)，初次試驗(yàn)結(jié)論即為檢測最終結(jié)論 （ 圖 4-1）。圖4 1血沽學(xué)試楡初次試驗(yàn)有反應(yīng)性的處理力案1.10.2核酸檢測結(jié)果判定（圖 4-2）1.10.2.1采用單人份

28、標(biāo)本進(jìn)行 HBV/HCV/HIV核酸聯(lián)合檢測。檢測結(jié)果為無反應(yīng)性的，判定為核酸檢測合格；檢測結(jié)果為有反應(yīng)性的，判定為核酸檢測不合格。對核酸檢測不合格的標(biāo)本，應(yīng)進(jìn)行 HBV 、HCV 、HIV 鑒別試驗(yàn)。1.10.2.2 采用混合標(biāo)本進(jìn)行 HBV/HCV/HIV 核酸分項(xiàng)檢測。 檢測結(jié)果為無反應(yīng)性的，判定為核酸檢測合格；檢測結(jié)果為 有反應(yīng)性的， 應(yīng)進(jìn)行拆分檢測。 拆分檢測結(jié)果為無反應(yīng)性的， 判定為核酸檢測合格；拆分檢測結(jié)果為有反應(yīng)性的，判定為 核酸檢測不合格。對核酸檢測不合格的標(biāo)本，應(yīng)明確給出具 體陽性反應(yīng)的項(xiàng)目。1.10.2.3 采用單人份標(biāo)本進(jìn)行 HBV/HCV/HIV 核酸分項(xiàng)檢 測。檢測結(jié)果為無反應(yīng)性的，判定為核酸檢測合格；檢測結(jié) 果為有反應(yīng)性的，判定為核酸檢測不合格。對核酸檢測不合 格的標(biāo)本